CD14的研究進(jìn)展及臨床意義

郁秀娟

（安徽合肥市第二人民醫(yī)院，安徽 合肥 230000）

CD14的研究進(jìn)展及臨床意義

郁秀娟

（安徽合肥市第二人民醫(yī)院，安徽 合肥 230000）

CD14在脂多糖（lipopolysacharide，LPS）介導(dǎo)的全身炎癥反應(yīng)綜合征中起著重要的作用，抑制CD14成為治療膿毒血癥的潛在有效方法。此外CD14在調(diào)節(jié)樹突細(xì)胞凋亡、預(yù)測心血管事件及評估慢性腎臟疾病預(yù)后中起著重要作用。sCD14同時也是檢測感染預(yù)測膿毒血癥預(yù)后的一個良好指標(biāo)。用某些生物制品治療膿毒血癥時，CD14在這一過程中也發(fā)揮著至關(guān)重要的角色。因此，深入了解CD14對于臨床治療有關(guān)疾病有著深遠(yuǎn)意義。

CD14；膿毒血癥；LPS；樹突細(xì)胞

1 對CD14的認(rèn)識

CD14分為mCD14和sCD14。在1982年的第一次白細(xì)胞分型會議上根據(jù)與單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞上結(jié)合的單克隆抗體的不同，CD14（mCD14）作為辨別單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞血統(tǒng)的一個有用標(biāo)志。CD14也會表達(dá)于其它細(xì)胞的表面，它包括中性粒細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、B細(xì)胞、樹突細(xì)胞、齒齦成纖維細(xì)胞、人腸上皮細(xì)胞。LPS是革蘭染色陰性菌細(xì)胞膜的主要組成成分。他包含一個O糖鏈，由核心低聚糖和脂質(zhì)組成[1]。人類CD14基因包含兩個外顯子，其編碼多個富含亮氨酸重復(fù)單位的356個氨基酸，成熟的蛋白表達(dá)為糖基磷脂酰肌醇固定在細(xì)胞表面的分子，他缺少跨膜區(qū)域。1990年55 kDa糖蛋白CD14被確定為內(nèi)毒素脂多糖的識別受體。CD14在檢測和清除病原微生物感染中起著決定性的作用[2]。mCD14位于免疫效應(yīng)細(xì)胞表面，其作為脂多糖（lps）、肽多糖、磷酸壁酸、脂肽和多種其他微生物信號轉(zhuǎn)導(dǎo)受體。該分子也能識別熱休克蛋白60、神經(jīng)酰胺、磷脂類、脂蛋白、和受條理作用的微粒等內(nèi)源性配體[3]。

2 CD14與感染

在中性粒細(xì)胞減少的患者，尤其是化療的腫瘤患者，如何及時有效的監(jiān)測嚴(yán)重的細(xì)菌感染或者預(yù)測膿毒血癥以及由其引起的死亡是個重要的問題，有學(xué)者在研究癌癥兒童伴有中性粒細(xì)胞減少時怎樣快速安全預(yù)測膿毒血癥時發(fā)現(xiàn)當(dāng)這些患者伴有嚴(yán)重感染或膿毒血癥時，他們的SCD14水平明顯增高，那些即將在15天之內(nèi)死去患有癌癥伴有中性粒細(xì)胞減少的患者sCD14也很高，sCD14水平與白細(xì)胞水平?jīng)]有相關(guān)性。盡管sCD14不是檢測菌血癥的敏感指標(biāo)，在臨床上不能確定感染源時，檢測sCD14顯得很有意義。有調(diào)查者發(fā)現(xiàn)高濃度的sCD14與艾滋病患者逐漸增加的死亡率有關(guān)；高濃度的sCD14也與由革蘭染色陰性菌引起的膿毒血癥的死亡率增加有關(guān)[4]。

2.1 膿毒血癥

過去通常認(rèn)為是在組織損傷或機體遭受嚴(yán)重病原微生物感染引起的自身免疫系統(tǒng)的過分激活緊接著的級聯(lián)炎癥反應(yīng)，目前膿毒血癥更多被看作是一個動態(tài)綜合征，其特點是存在很多拮抗現(xiàn)象，膿毒血癥應(yīng)該被看作從高炎癥反應(yīng)到免疫麻痹的跨越過程[5]。是由各種原因引起的是在重癥監(jiān)護(hù)室非冠脈疾病中引起死亡的常見原因，它是有著高死亡率的嚴(yán)重疾病，給衛(wèi)生保健系統(tǒng)帶來了沉重負(fù)擔(dān)。不僅是在發(fā)展中國家，而且在美國以及歐洲國家，在過去20年膿毒癥的發(fā)病率一直在上升。Martin從2009年起研究了11000多嚴(yán)重膿毒血癥患者發(fā)現(xiàn)57%的病人有革蘭染氏陰性細(xì)菌的感染。革蘭染色陰性菌細(xì)胞壁成分LPS會引起全身炎癥反應(yīng)，由此可見研究由CD14介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)對于治療由格蘭染色陰性菌膿毒血癥有重要的意義。人們對CD14在LPS引起的炎癥反應(yīng)中的作用經(jīng)歷了很長的時間[6]。

2.1.1 CD14在革蘭染色陰性菌介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)中的作用機制

脂多糖（LPS）是革蘭染色陰性菌細(xì)胞膜的主要成分，其介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)主要是在LPS的參與下進(jìn)行的，在血漿中LPS與LBP蛋白結(jié)合，LBP能夠促進(jìn)LPS單體與CD14結(jié)合很可能是改變了LPS聚集物的排布[7]。CD14是一個馬蹄形的二聚體，涉及結(jié)合LPS結(jié)構(gòu)位于CD14單體氨基末端的疏水口袋[8]。當(dāng)LPS穿越水環(huán)境時，白蛋白能夠遮蔽疏水的脂質(zhì)A，故白蛋白能夠促進(jìn)LPS向CD14的轉(zhuǎn)移[9]。隨后在白蛋白的幫助下，當(dāng)TLR4/MD-2（髓樣分化蛋白-2）復(fù)合體形成時，CD14將LPS傳遞給MD-2。隨后TLR4二聚作用促進(jìn)募集TIRAP/MyD88和TRAM/TRIF兩對銜接蛋白，通過同型TIR–TIR結(jié)構(gòu)域相互作用，MyD88然后募集IRAK4和IRAK2（或IRAK1）激酶形成一個復(fù)合體[10]。這種多分子的復(fù)合體觸發(fā)級聯(lián)放大信號早期引起NF-κB和MAP激酶的活化，導(dǎo)致TNF-a、IL-6等細(xì)胞因子的釋放；另一方面TRIF引起的轉(zhuǎn)導(dǎo)信號激活I(lǐng)RF3轉(zhuǎn)錄因子，導(dǎo)致Ⅰ型干擾素（IFN）的表達(dá)，IFN也會誘導(dǎo)炎癥趨化因子IL-10和RANTES的表達(dá)；晚期也會有NF-κB和MAP激酶的活化[11]?？梢奀D14在LPS介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)過程中起著重要的作用。sCD14的功能與mCD14相似，在沒有LBP存在時，LPS與sCD14結(jié)合，LPS-sCD14絡(luò)合物刺激內(nèi)皮細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞活化[12]。LPS也可以通過LBP轉(zhuǎn)移給sCD14[13]。Scd14有與病原微生物配體有效結(jié)合的受體。

2.1.2 有學(xué)者發(fā)現(xiàn)在用凋亡細(xì)胞治療膿毒血癥時

CD14在這一過程中起著重要作用[14]。體外實驗已經(jīng)顯示膿毒血癥的BALB/c小鼠，經(jīng)尾靜脈注射凋亡的嗜中性粒細(xì)胞（PMN）能夠抑制由巨噬細(xì)胞激活的促炎因子的分泌，比如會抑制TNF-α的分泌，同時也會曾加抗炎因子TGF-β（轉(zhuǎn)化生長因子）的分泌，他們發(fā)現(xiàn)LPS能夠很快的與凋亡細(xì)胞結(jié)合，這些LPS包被的凋亡細(xì)胞以CD14/凝血酶/玻連蛋白受體的形式被巨噬細(xì)胞識別，然后被清除，這一過程會抑制TNF-α的表達(dá)，也會增加IL-10的表達(dá)。

3 所有成熟的樹突細(xì)胞的終末階段是凋亡

這個過程對于調(diào)節(jié)外周耐受具有重要作用，由于樹突細(xì)胞凋亡不足將會引起樹突細(xì)胞的蓄積，繼而引起淋巴細(xì)胞的過度活化，引起系統(tǒng)性自身免疫疾病[15]。小鼠樹突細(xì)胞受到LPS刺激時引起Src激酶家族和磷脂酶C-γ2活化，引起細(xì)胞外的Ca2+和鈣神經(jīng)素依賴的核NFAT（激活T細(xì)胞核因子）異位，引發(fā)這一過程不依靠TLR4的參與，而唯一需要的就是CD14，他們也展示LPS誘導(dǎo)的NFAT（激活T細(xì)胞核因子）活化是通過CD14途徑，會引起終末分化型樹突細(xì)胞凋亡，這對于保持自身耐受和預(yù)防自身免疫疾病有重要作用。封閉這條途徑會延長樹突細(xì)胞生存時間增加T細(xì)胞的引導(dǎo)能力。該研究展示了CD14在LPS觸發(fā)的樹突細(xì)胞分子信號通路中的新作用，CD14通過缺乏活化t細(xì)胞的核因子活化起到調(diào)節(jié)樹突細(xì)胞周期的作用[16]。

4 CD14與腎病

劉芝[17]等人在發(fā)現(xiàn)CD14與慢性腎?。–KD）有密切關(guān)系，其通過對不同分期慢性腎病病人及正常人（對照組）進(jìn)行循環(huán)血液中（TLR4）+CD14+單核細(xì)胞檢查，結(jié)果顯示：慢性腎病患者CD14+，（TLR4）+CD14+單核細(xì)胞數(shù)量比正常人明顯減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），TNF-α和IL-6水平也很低下；CD14+，（TLR4）+CD14+單核細(xì)胞數(shù)量與慢性腎病的嚴(yán)重程度成負(fù)相關(guān)。CD14+TLR4+單核細(xì)胞數(shù)量與腎小球路過濾和血細(xì)胞壓積正相關(guān)，但是與血尿氮水平﹑血清肌酐﹑C反應(yīng)蛋白呈負(fù)相關(guān)，在慢性腎病患者中TLR4+單核細(xì)胞明顯減少和對LPS應(yīng)答減弱也許與中國慢性腎病患者的進(jìn)展有關(guān)。Ruben Poesen[18]等學(xué)者通過對495名輕到中度慢性腎病患者血漿sCD14濃度進(jìn)行測量發(fā)現(xiàn)血漿sCD14水平與eGFR負(fù)相關(guān)，即使后來這些患者的腎功能有所改變。血漿sCD14水平能夠預(yù)測CKD患者的死亡率，血漿Scd14水平與CKD患者腎功能的進(jìn)展密切相關(guān)。在一項常染色體顯性遺傳多囊腎病的研究中發(fā)現(xiàn)腎臟中的CD14表達(dá)、尿sCD14、血漿Scd14與該病的進(jìn)展相關(guān)[43]。

5 CD14與心血管事件之間存在著關(guān)聯(lián)

Scd14水平升高與主動脈硬化、頸動脈斑塊形成、不穩(wěn)定型心絞痛密切相關(guān)[19]。在一個心血管健康研究中發(fā)現(xiàn)sCD14水平與亞臨床的心血管疾病和未來的臨床心血管疾病風(fēng)險密切相關(guān)。賈雪芹[20]等冠狀動脈疾病患者進(jìn)行SCD14檢測時發(fā)現(xiàn)AMI（急性心肌梗死）組和UAP（不穩(wěn)型心絞痛）組血清SCD14水平明顯高于SAP（穩(wěn)定型心絞痛）組與對照組，提示SCD14的水平與CHD（冠心?。┎∏閲?yán)重性密切相關(guān)，在在對照組和SAP組間SCD14的含量，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），提示SCD14可能更多參與了CHD急性事件的發(fā)生發(fā)展。隨著Gensini評分在對照組SAP組UAP組AMI組逐漸增高，血清CRP、SCD14濃度亦相應(yīng)增高，此兩項指標(biāo)與Gensini評分均呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；提示血清SCD14濃度與Gensini評分一樣可以評價冠脈病變嚴(yán)重程度，血清CRP、SCD14濃度在單支 雙支三支病變組逐漸增高，且組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），提示血清SCD14濃度可以作為冠脈病變血管支數(shù)的預(yù)測因子。

6 CD14與消化系統(tǒng)疾病

對腸道細(xì)菌的先天性和適應(yīng)性免疫反應(yīng)異常被認(rèn)為與炎癥性腸病的發(fā)病機制有關(guān)。Lenka Frolova等人研究了在炎癥性腸病和正常對照組的腸粘膜活檢標(biāo)本TLR4、CD14的表達(dá)情況，與正常對照組相比TLR4的表達(dá)在潰瘍性結(jié)腸炎患者緩解期末端回場和直腸明顯上調(diào)，與對照組相比TLR4在克羅恩病患者急性期時末端回腸的表達(dá)也明顯上調(diào)。與對照組相比CD14在克羅恩病的緩解期或急性期時以及在潰瘍性結(jié)腸炎的緩解期或急性期時末端回腸的表達(dá)明顯上調(diào)。因此TLR4、CD14在不同部位腸粘膜調(diào)節(jié)異?；蛟S對炎癥性腸病的發(fā)病起著決定性的作用。

綜上所述，CD14在心血管、腎臟、消化系統(tǒng)疾病以及感染性疾病中都發(fā)揮著重要作用，具有很大的臨床診斷與治療參考價值，CD14作為LPS的主要受體，在機體免疫反應(yīng)尤其是革蘭染色陰性菌介導(dǎo)的全身反應(yīng)發(fā)揮著重要的作用。因此更深入的研究CD14顯得尤為重要。

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本文編輯：趙小龍

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ISSN.2095-6681.2016.29.032.03