Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)軟骨發(fā)育分化的影響

陸曉娜　綜述　范飛　審校

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Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)軟骨發(fā)育分化的影響

陸曉娜綜述范飛審校

【提要】Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路廣泛存在于多種動(dòng)物細(xì)胞中，對(duì)調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、存活、分化和凋亡等過(guò)程有重要意義，其受體和配體都是跨膜蛋白，因此是介導(dǎo)細(xì)胞間通訊的一種重要方式。軟骨的分化發(fā)育起始自間充質(zhì)細(xì)胞的凝集，Notch家族在軟骨形成過(guò)程中的表達(dá)呈多樣性，并對(duì)軟骨的發(fā)育分化呈現(xiàn)時(shí)間和空間的調(diào)控。在此就Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的組成、分布、轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制及其對(duì)軟骨分化發(fā)育的影響進(jìn)行綜述。

【關(guān)鍵詞】Notch信號(hào)軟骨發(fā)育分化

作者單位：100144北京市中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院，北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院整形外科醫(yī)院。

Notch Signaling in Chondrogenic Development and Differentiation

LU Xiaona,FAN Fei.Plastic Surgery Hospital,

Chinese Academy of Medical Sciences,Peking Union Medical College,Beijing 100144,China.Corresponding author:FAN Fei(E-mail:fanfei1962@gmail.com).

【Summary】Notch signaling widely exists in many kinds of animal cells,and it is important to regulate cell proliferation, survival,differentiation and apoptosis.As both its receptor and ligand are trans-membrane proteins,Notch signaling is significant in mediating communication between cells.The chondrogenic development and differentiation start from the agglutination of ectomesenchymal cells.Notch family expresses diversely in the formation of cartilages,regulating them depending on time and space.In this paper,the composition,distribution and transduction mechanisms of Notch signaling and its effects on chondrogenic development and differentiation were reviewed.

【Key words】Notch signaling;Cartilage;Development;Differentiation

Notch通道是生物進(jìn)化過(guò)程中一組高度保守的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，通過(guò)細(xì)胞間的相互作用在胚胎時(shí)期即可決定細(xì)胞的命運(yùn)，因而在多種組織和器官的發(fā)育分化中起重要作用。Notch最早以一個(gè)突變基因在黑腹菌屬果蠅中被發(fā)現(xiàn)。1914年，Dexter[1]發(fā)現(xiàn)了第一次Notch突變，表現(xiàn)為性別相關(guān)，主要在雌性果蠅中出現(xiàn)，但會(huì)對(duì)雄性果蠅產(chǎn)生致死效應(yīng)。1917年，Bridges[2]發(fā)現(xiàn)了這個(gè)基因的第二個(gè)突變體。該基因功能的部分缺失可導(dǎo)致果蠅翅緣出現(xiàn)缺口[3-4]。Artavanis-Tsakonas等[5]在1983年首次成功克隆了Notch基因。自從發(fā)現(xiàn)Notch信號(hào)后，一直試圖了解其多效性潛能及決定細(xì)胞增殖、凋亡和分化的作用。

1　Notch通道的組成

Notch通道由Notch受體、配體、CSL蛋白、信號(hào)效應(yīng)分子及相關(guān)的酶組成。目前，已知4個(gè)Notch受體和12個(gè)配體，所有的受體、配體都是跨膜蛋白，其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用依賴相鄰細(xì)胞間受配體的結(jié)合。

1.1Notch受體

Notch受體由胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)組成。胞外區(qū)參與配體的結(jié)合及Notch的活化，胞內(nèi)區(qū)是高度保守的區(qū)域，參與蛋白-蛋白相互作用。哺乳動(dòng)物的Notch受體包括4個(gè)（Notch 1-4）[6]，每個(gè)受體包含1個(gè)胞外域，此區(qū)域包含對(duì)配體-受體相互作用有重要影響的表皮生長(zhǎng)因子重復(fù)序列、半胱氨酸富集區(qū)，以及3個(gè)Notch/LIN-12重復(fù)結(jié)構(gòu)。胞內(nèi)區(qū)有6個(gè)串聯(lián)錨定蛋白重復(fù)區(qū)，谷氨酸富集區(qū)，PEST區(qū)（脯氨酸、谷氨酸、絲氨酸、蘇氨酸）及1個(gè)Ram區(qū)。

1.2Notch配體

Notch配體胞外區(qū)有數(shù)量不等的EGF樣重復(fù)序列和1個(gè)保守的富含半胱氨酸位點(diǎn)，即DSL結(jié)構(gòu)域，可通過(guò)該區(qū)域與受體相互作用。Notch配體根據(jù)結(jié)構(gòu)基元分4組[7-8]：①DSL （Delta/Serrate/LAG-2）/DOS（Delta和OSM-11-like proteins）-含配體DLL1（Delta-like1），JAG1和JAG2；②DSL單一配體DLL3和DLL4；③DOS共同配體DLK1和DLK2；④非經(jīng)典配體DNER，MAGP1，MAGP2，F(xiàn)3/Contactin1和NB-3/Contactin6。

1.3Notch信號(hào)效應(yīng)分子及相關(guān)酶類

Jag1介導(dǎo)的Notch信號(hào)對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨形成起關(guān)鍵作用[9]。PS1在軟骨形成初期起調(diào)控作用[10]?；罨霓D(zhuǎn)錄復(fù)合物誘導(dǎo)bHLH家族基因[11]，如HES家族基因及HES相關(guān)的YRPF家族基因HEY的表達(dá)。HES和HEY家族基因作為轉(zhuǎn)錄阻遏物調(diào)控始祖肌肉、神經(jīng)和造血系統(tǒng)細(xì)胞的命運(yùn)[12]。HES家族6個(gè)成員中發(fā)揮最大作用的是Hes1和Hes5[13]。Hes1是與軟骨形成相關(guān)的一個(gè)靶基因，其表達(dá)水平代表Notch1的信號(hào)強(qiáng)度。其機(jī)制是結(jié)合分化效應(yīng)啟動(dòng)子，募集Groucho/TLE等轉(zhuǎn)錄共抑制因子，阻礙分化效應(yīng)基因的表達(dá)，及抑制Cyclin依賴性激酶抑制因子p27Kip1的轉(zhuǎn)錄。Hes5廣泛分布于胎兒和成人組織中，與軟骨分化相關(guān)并有顯著促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用[14]。γ-分泌酶復(fù)合體由presenilin1（PS1）和presenilin2（PS2）以及調(diào)節(jié)組件PEN2、Aph1和NCT組成[15]。

2　Notch通道的分布

Notch信號(hào)家族受配體的分布不同，在軟骨形成過(guò)程中的表達(dá)也不同。Notch1，Delta1，Jagged1和Jagged2表達(dá)于軟骨間質(zhì)發(fā)育的早期階段，隨后Notch2，Notch3和Notch4的表達(dá)增加，但在軟骨形成的最后階段不表達(dá)[16]。Notch2、Notch4、Delta 和Jagged2廣泛分布于軟骨原生細(xì)胞中，于正發(fā)育的軟骨細(xì)胞中表達(dá)。在軟骨形成早期，Notch1明顯定位于凝集的間充質(zhì)中。

免疫定位研究表明，Notch受體和配體存在于小鼠和牛的關(guān)節(jié)軟骨中[17]。Notch2受體廣泛分布于整個(gè)關(guān)節(jié)軟骨和骨骺生長(zhǎng)板，在增殖、前肥厚性和肥厚性軟骨中表達(dá)。如此廣泛分布的確切原因尚不清楚，但推測(cè)Notch2可能調(diào)節(jié)Notch1 和Notch3，從而影響軟骨的發(fā)育和生長(zhǎng)及體內(nèi)成熟組織的平衡狀態(tài)。Notch1定位于關(guān)節(jié)軟骨表面區(qū)，此處有可分化為結(jié)締組織細(xì)胞系的軟骨祖細(xì)胞池。Notch3定位于關(guān)節(jié)軟骨深層和骨骺生長(zhǎng)板的肥厚性軟骨，可在A7r5-N3IC細(xì)胞（一種穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的血管平滑肌細(xì)胞）尚未融合時(shí)即阻止細(xì)胞增殖，同時(shí)促進(jìn)細(xì)胞融合的進(jìn)程[18]。這表明Notch3與阻止終末分化的軟骨細(xì)胞增殖有關(guān)。

Oldershaw等[19]通過(guò)PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，Jaggedl在軟骨形成早期表達(dá)量增高，之后降低。Jaggedl過(guò)表達(dá)的Notch下游靶基因Hey1表達(dá)明顯激活，說(shuō)明Jaggedl啟動(dòng)了Notch信號(hào)通路。將轉(zhuǎn)染Jaggedl的hMSC在三維細(xì)胞聚團(tuán)培養(yǎng)中誘導(dǎo)成軟骨時(shí)，軟骨的形成受到了抑制。說(shuō)明在hMSC中，由Jaggedl介導(dǎo)的Notch信號(hào)通路為啟動(dòng)成軟骨所必需，但是它必須被關(guān)閉才能使軟骨的生成得以繼續(xù)。

Hilton等[20]完成了最早的，有關(guān)Notch信號(hào)通路對(duì)軟骨和骨分化作用的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，Notch信號(hào)通路的上游部分（PSEN1 和PSEN2或NOTCH1和NOTCH2），通過(guò)Prx1Cre轉(zhuǎn)基因條件性脫離小鼠肢體間充質(zhì)干細(xì)胞（MPCs），提示Notch信號(hào)通路在MPCs的缺失時(shí)，可導(dǎo)致胚胎時(shí)期軟骨成熟的起始及終末成熟的延遲。研究表明，在雙向分化潛能的COP細(xì)胞中，使用Col2Cre轉(zhuǎn)基因使經(jīng)典N(xiāo)otch受體缺失，早期可加速軟骨成熟，但最終導(dǎo)致軟骨終末成熟和細(xì)胞凋亡的延遲。

3　Notch通道的作用機(jī)理

3.1Notch通道的激活

Notch信號(hào)通路的激活需要經(jīng)過(guò)連續(xù)的酶解過(guò)程，使受體胞內(nèi)區(qū)釋放，與胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子CSL相互作用，調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá)。研究表明，CSL依賴的Notch信號(hào)通路沒(méi)有調(diào)節(jié)Notch的全部功能[8，21]。因此，Notch可能以兩種不同的過(guò)程產(chǎn)生作用，CSL依賴的信號(hào)途徑（經(jīng)典途徑）和CSL非依賴的途徑（非經(jīng)典途徑）。

3.1.1經(jīng)典途徑

未活化的Notch受體被高爾基體中成對(duì)堿性氨基酸蛋白酶樣轉(zhuǎn)化酶（Furin-like convertase）在S1位點(diǎn)剪切后，轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜形成異二聚體，鄰近細(xì)胞表面的Notch配體與受體胞外區(qū)結(jié)合后產(chǎn)生構(gòu)象改變。金屬蛋白酶腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶（Tumor necrosis factor alpha converting enzyme，TACE）剪切S2位點(diǎn)，Notch胞外區(qū)形成，但仍與胞內(nèi)區(qū)保持連接。γ分泌酶剪切Notch胞外區(qū)S3位點(diǎn)使受體的胞內(nèi)區(qū)與胞外區(qū)分離，釋放活性胞內(nèi)段，后者轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核，與轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子RNPj 和MAML綁定，形成轉(zhuǎn)錄激活復(fù)合物。NICD-RBPj-MAML三重復(fù)合物誘導(dǎo)Notch下游靶基因表達(dá)[22]，此即經(jīng)典途徑。

Notch調(diào)節(jié)軟骨細(xì)胞成熟、增殖、存活、分化只通過(guò)經(jīng)典途徑[22]。Dong等[23]的研究表明，在MPCs細(xì)胞中Notch激活，可以RBPj依賴的方式抑制所有的軟骨和骨細(xì)胞的分化。在Notch激活時(shí)敲除Rbpj，可證明Notch功能獲得性突變表型是Rbpj依賴型。他們還發(fā)現(xiàn)，敲除Prx1-Cre、RosaNotch1ICD小鼠的Rbpj，可逆轉(zhuǎn)小鼠四肢軟骨發(fā)育異常表型，恢復(fù)的軟骨與Prx1-Cre、Rbpjflox/flox小鼠的軟骨是無(wú)法區(qū)別的。這印證了在四肢軟骨的分化中，Rbpj是Notch信號(hào)通路唯一的調(diào)節(jié)物[24]。Kohn等[25]敲除了Col2a1-CreERT2小鼠的Rbpj，并沒(méi)有逆轉(zhuǎn)對(duì)四肢軟骨細(xì)胞增殖的抑制，卻逆轉(zhuǎn)了Notch激活導(dǎo)致的軟骨細(xì)胞增殖和終末分化。

3.1.2非經(jīng)典途徑

非經(jīng)典途徑是軟骨膜成骨和軟骨激活信號(hào)重要的遠(yuǎn)程細(xì)胞非自主調(diào)節(jié)機(jī)制，可能通過(guò)調(diào)節(jié)Ihh的反應(yīng)性調(diào)節(jié)軟骨的分化。Shawberd等[26-27]的研究表明，CSL非依賴信號(hào)可以抑制C2C12肌原細(xì)胞系分化，表現(xiàn)在細(xì)胞表達(dá)截短形式的Notch胞內(nèi)區(qū)，抑制CSL依賴的啟動(dòng)子的激活。CSL非依賴的Notch信號(hào)可能通過(guò)酪氨酸激酶（Abl）途徑。突變影響Abl信號(hào)導(dǎo)致Notch的輕微下調(diào)可影響細(xì)胞的識(shí)別。Maillard等[28]抑制小鼠造血干細(xì)胞的經(jīng)典N(xiāo)otch通路，發(fā)現(xiàn)受抑制的細(xì)胞并沒(méi)有表現(xiàn)出缺陷。Notch受體可能有不同的方式來(lái)激活經(jīng)典和非經(jīng)典途徑，最終導(dǎo)致兩條通路以交互或者協(xié)同的方式相互作用，來(lái)提供必要的調(diào)節(jié)。

3.2Notch通道的抑制

Notch信號(hào)通路抑制軟骨細(xì)胞的增殖，但也有研究用DAPT阻斷Notch通路后會(huì)阻斷細(xì)胞增殖[29]。Hilton等[20]研究發(fā)現(xiàn)，敲除PS1并且伴隨PS2失活，導(dǎo)致Notch蛋白不能被酶切，從而使信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受到阻礙，肥厚軟骨細(xì)胞發(fā)生聚集，導(dǎo)致嚴(yán)重的骨骼畸形；同時(shí)，敲除Notch1和Notch2的小鼠也表現(xiàn)出了同樣的表型，證明了PS1和PS2失活而出現(xiàn)的表型也是由于Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)缺失造成的。僅敲除Notch2后也出現(xiàn)了與同時(shí)敲除Notch1和Notch2后一樣的表型，說(shuō)明Notch2蛋白在軟骨內(nèi)骨形成的調(diào)節(jié)中起主導(dǎo)作用。

3.3功能獲得性與缺失性突變

為了研究間充質(zhì)干細(xì)胞或軟骨祖細(xì)胞Notch功能獲得型突變，分別檢測(cè)Prx1-Cre、RosaNotch1ICD和Col2a1-Cre、RosaNotch1ICD突變體。兩種突變的小鼠具有相似的表型，如軟骨形成的抑制和Sox9，Col2a1和Aggrecan（Acan）的表達(dá)抑制，表明了Notch對(duì)軟骨分化產(chǎn)生的一種抑制效應(yīng)。在Col2a1-Cre、RosaNotch1ICD小鼠中，軟骨的增殖受抑制，然而間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖卻在Prx1-Cre、RosaNotch1ICD小鼠中增強(qiáng)[25，30]。

軟骨特異性Notch功能獲得性突變的體內(nèi)和體外模型都表現(xiàn)出軟骨成熟的明顯加速和進(jìn)展，與Notch功能獲得性突變小鼠的Notch信號(hào)通路在祖細(xì)胞中被激活的情況相反[23]。由于Rbpjflox/flox等位基因的敲除，RBPj依賴性Notch信號(hào)通路受損，且沒(méi)有提高RBPj非依賴性Notch信號(hào)。在Rbpjflox/flox等位基因缺失時(shí)提高Notch信號(hào)，并沒(méi)有加劇軟骨成熟的表型，表明這個(gè)過(guò)程僅由RPBj依賴機(jī)制調(diào)控。事實(shí)上，Notch功能獲得性突變對(duì)加速軟骨成熟的影響，在去除Rbpjflox/flox等位基因后即消除了[20]。

Notch功能缺失性突變小鼠的研究由Hilton等完成[20]，MPC缺失上游Notch信號(hào)組分（Psen1和Psen2或Notch1和Notch2）會(huì)導(dǎo)致軟骨細(xì)胞增殖下降和軟骨成熟起始延遲。Notch功能獲得性突變等位基因激活早期肢體祖細(xì)胞，導(dǎo)致分化和增殖細(xì)胞的維持，然而祖細(xì)胞Notch信號(hào)通路的確可以促進(jìn)軟骨和骨的形成。這表明RBPj依賴和非依賴性Notch信號(hào)通路在軟骨的增生和分化過(guò)程中可能導(dǎo)致不同的結(jié)果，或是不同時(shí)間的Notch信號(hào)的抑制或激活影響軟骨的發(fā)育。

4　Notch通道對(duì)軟骨發(fā)育的影響

在發(fā)育早期，軟骨由間充質(zhì)細(xì)胞凝集而成。Notch家族在鼠和禽類間充質(zhì)細(xì)胞凝聚早期表達(dá)，并在肢體發(fā)育過(guò)程中與軟骨細(xì)胞的成熟有關(guān)。Crowe等[31]在雞胚胎發(fā)育中期于假定肢體區(qū)誘導(dǎo)Delta 1的錯(cuò)誤表達(dá)，阻止了前肥厚性軟骨細(xì)胞分化為肥厚軟骨細(xì)胞，導(dǎo)致軟骨明顯縮短，肥厚性軟骨細(xì)胞最終被成骨細(xì)胞所取代形成骨骼。此外，Hayes等[16]研究表明，Notch1在鼠出生之前的關(guān)節(jié)軟骨表面表達(dá)，出生后在更深的層次表達(dá)。在發(fā)育的后期和出生之后Notch受體的表達(dá)允許終末分化和軟骨細(xì)胞的成熟。因此，推測(cè)Notch表現(xiàn)為開(kāi)關(guān)效應(yīng)，不是促進(jìn)細(xì)胞的增殖，就是表現(xiàn)為終末分化，導(dǎo)致骨形成和出生后的骨延長(zhǎng)。

也有報(bào)道Notch信號(hào)在發(fā)育過(guò)程中的激活是時(shí)間相關(guān)性的。Oldershaw等[32]的研究表明，在人間充質(zhì)干細(xì)胞團(tuán)培養(yǎng)中抑制Notch活化14 d的效果，與在最初的5 d阻斷通路的效果相同。在人類骨髓干細(xì)胞分化為成熟軟骨細(xì)胞的過(guò)程中，Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)軟骨的形成有抑制作用，因此Notch信號(hào)的去表達(dá)是必要的。Grogan等[33]的研究表明，Notch通路下游產(chǎn)物HES1/HEY1可與DNA序列中SOX9增強(qiáng)子識(shí)別位點(diǎn)相結(jié)合，抑制SOX9介導(dǎo)的COL2A1的轉(zhuǎn)錄激活，從而抑制軟骨細(xì)胞特異性膠原蛋白IIα1啟動(dòng)子的活性。Jarriault等[34]發(fā)現(xiàn)，Notchl受體在最初軟骨分化中短暫的表達(dá)升高，不伴有相應(yīng)配體表達(dá)升高，但下游目的基因HESl表達(dá)上調(diào)。Oldershaw等[32]發(fā)現(xiàn)，軟骨分化過(guò)程中Notchl無(wú)明顯表達(dá)，說(shuō)明Notch信號(hào)可能參與了軟骨分化的早期激活。Noteh2受體表達(dá)水平大幅下降，但Notch3下降較緩慢而持久，從而Notch3成為高表達(dá)受體，這可能與Notch3在抑制骨髓充質(zhì)干細(xì)胞的增殖和其向軟骨方向分化有關(guān)。JAGl基因介導(dǎo)的Notch信號(hào)抑制Mscs向軟骨細(xì)胞分化，從而保持未分化狀態(tài)，進(jìn)一步證明Notch通路的激活是啟動(dòng)軟骨細(xì)胞分化的關(guān)鍵。短暫的Notch信號(hào)被啟動(dòng)，出現(xiàn)向軟骨細(xì)胞分化的觸發(fā)信號(hào)，從而出現(xiàn)類似瀑布效應(yīng)，激活下游的信號(hào)并上調(diào)關(guān)鍵基因，但在分化過(guò)程中該通道必須關(guān)閉，以保證分化的正常進(jìn)行。因MSCs的多潛能分化特性，可能還存在未被探究的更加精確的誘導(dǎo)和調(diào)控軟骨發(fā)育分化的機(jī)制。

Notch家族成員可在出生后的關(guān)節(jié)軟骨亞種中表達(dá)，關(guān)節(jié)軟骨的持續(xù)發(fā)育及軟骨祖細(xì)胞亞單位的命運(yùn)都可能被Notch信號(hào)通路調(diào)節(jié)。Dowthwaite等[35]的研究表明，7日齡小牛中，Notch信號(hào)受體在關(guān)節(jié)軟骨的表面表達(dá)，這與之前發(fā)育中小鼠的關(guān)節(jié)軟骨表現(xiàn)相符合。這些細(xì)胞與不表達(dá)Notch受體的軟骨相比，表現(xiàn)為克隆效率的增加。這表明Notch受體最初的作用是調(diào)控軟骨克隆性。成人關(guān)節(jié)軟骨表面區(qū)域超過(guò)70%的軟骨細(xì)胞表達(dá)Notch1受體[36]。Karlsson等[14]培養(yǎng)人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞，證明阻斷Notch信號(hào)通路激活可降低軟骨細(xì)胞的增殖。雖然以上結(jié)果支持Notch信號(hào)主要維持克隆性而不是分化，但也不排除可促進(jìn)軟骨細(xì)胞的終末分化。因此，Notch在出生后促進(jìn)增殖或者分化方面的確切作用仍不清楚。

5　小結(jié)

在軟骨發(fā)育初期，Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)節(jié)作用已有表現(xiàn)，在隨后的發(fā)育分化全過(guò)程中，通過(guò)經(jīng)典途徑和非經(jīng)典途徑的協(xié)調(diào)作用，不同的受體、配體的差異表達(dá)，從而影響軟骨的分化發(fā)育和增殖成熟，維持體內(nèi)軟骨和骨的平衡狀態(tài)，且這種調(diào)節(jié)表現(xiàn)為時(shí)間和空間的相關(guān)性?？紤]到受體、配體之間的相互影響，Notch通道受配體共表達(dá)可能是另一種Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)軟骨分化發(fā)育的調(diào)節(jié)機(jī)制。此外，Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與其他信號(hào)途徑及細(xì)胞因子的相互影響仍需進(jìn)一步研究。深入探究調(diào)控Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的有效方式，通過(guò)Notch通道的調(diào)控來(lái)精確控制和預(yù)測(cè)軟骨細(xì)胞的增殖、發(fā)育與定向分化，對(duì)臨床和相關(guān)研究都具有重要意義。

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收稿日期：（2015年9月25日；修回日期：2015年11月30日）

通訊作者：范飛（E-mail：fanfei1962@gmail.com）。

基金項(xiàng)目：中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院整形外科醫(yī)院院所基金重大項(xiàng)目。

doi:10.3969/j.issn.1673-0364.2016.01.012

【中圖分類號(hào)】R318.1

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B

【文章編號(hào)】1673－0364（2016）01－0044－04