桉樹組培廠季節(jié)性污染及防控

謝穎苑,廖飛揚,李天卓,杜翔鷹,吳婷婷,容衛(wèi)冰

(廣東省湛江市林業(yè)科學(xué)研究所,廣東 湛江 524000)

桉樹組培廠季節(jié)性污染及防控

謝穎苑,廖飛揚,李天卓,杜翔鷹,吳婷婷,容衛(wèi)冰

(廣東省湛江市林業(yè)科學(xué)研究所,廣東 湛江 524000)

摘要:總結(jié)了多年組培苗生產(chǎn)經(jīng)驗,根據(jù)不同月份的溫度、濕度及接種手操作等數(shù)據(jù),提出了組培桉樹污染隨溫度、濕度和操作人員的不同而產(chǎn)生變化,防控污染的措施應(yīng)該隨實際情況而調(diào)整。

關(guān)鍵詞:桉樹組培廠;污染率;溫度;濕度;接種手;防控

1引言

桉樹是世界四大速生栽培樹種,具有速生豐產(chǎn)、適應(yīng)性強、生產(chǎn)周期短和用途廣泛等特點。桉樹組培培養(yǎng)技術(shù)的日益成熟推動了我國南方地區(qū)桉樹林業(yè)的快速發(fā)展。但是桉樹組織培養(yǎng)中的污染是影響組培生產(chǎn)的最大障礙之一,直接影響生產(chǎn)成本和珍貴科研材料的保全。有研究表明:污染率每升高5%,試管苗繁殖速度遞減40%,室內(nèi)直接生產(chǎn)成本遞增10%,污染率越高,成本遞增越大,當(dāng)污染率達(dá)30%時,成本將增至106.5%[1]。本研究以廣東省湛江林業(yè)科學(xué)研究所桉樹組織培廠培養(yǎng)車間的桉樹組織污染物為對象,明確溫度、濕度對污染影響及接種手不規(guī)范操作導(dǎo)致污染等規(guī)律,為桉樹組織培養(yǎng)工作控制污染發(fā)生提供一定的理論和實踐依據(jù)。

2材料與方法

(1)供試材料。對湛江市林業(yè)科學(xué)研究桉樹組培廠培養(yǎng)室2009~2014年污染情況進行收集記錄。

(2)桉樹組培廠污染隨室內(nèi)溫度和濕度的變化。每月定時、定點在培養(yǎng)室中放置溫度計和濕度計收集記錄數(shù)據(jù)。

(3)桉樹組培廠污染季節(jié)性變化。每月定期統(tǒng)計組培廠生產(chǎn)情況,通過組培污染瓶苗數(shù)據(jù)反映出污染隨月份而產(chǎn)生變化。

(4)桉樹組培廠細(xì)菌污染受不同接種手操作產(chǎn)生的影響。通過接種手A和B使用同一臺無菌工作臺和同一套接種工具,定期定點對接種手細(xì)菌污染率數(shù)據(jù)統(tǒng)計,得出接種手的不規(guī)范操作導(dǎo)致污染增加,規(guī)范操作是保證質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)之一。

3結(jié)果與分析

3.1　桉樹組培中溫度和濕度對污染的影響。

從圖1看到,組培培養(yǎng)車間內(nèi)污染率是隨室內(nèi)溫度升高而增高,最低值為1月份6.54%,7月份達(dá)到最高值21.49%,其中6、7、8月份為污染高峰期:1、2、3、4月份為低峰期。

圖1　溫度對污染率的影響

從圖2看出,濕度對污染影響并不直接,3月份濕度達(dá)到最高值66.05%rh,但污染率僅為6.6%,2月份濕度66.0%rh,污染率也只是6.45%,兩者低污染率。但在7月溫度27.56℃、濕度53.01%rh,時污染率達(dá)到最高峰21.49%,6月溫度27.3℃、濕度49.7%rh,污染率也達(dá)到比較高的17.94%。

圖2　濕度對污染率的影響

從圖1和圖2比較看出,污染率隨溫度升高明顯增大,但隨濕度升高污染率變化并不很明顯,兩個最高污染數(shù)值都是在高溫且較高的濕度時產(chǎn)生。說明要控制污染主要是降低溫度,控制一定的濕度。

3.2　桉樹組培廠污染季節(jié)性變化

組培瓶苗的污染率月份間相差也很大,一年中6、7、8月份真菌污染率較高,與當(dāng)時的高溫和相對較高的濕度有關(guān)。其它月份污染以細(xì)菌為主,而1、2、3、4月份組培污染相對較輕,總菌量較少(圖3)。

圖3　月份對污染率的影響

3.3　桉樹組培廠細(xì)菌污染受不同接種手操作的影響

組織培養(yǎng)中的細(xì)菌污染主要是由于組培苗污染或者是人工操作污染引起,表現(xiàn)為培養(yǎng)材料周圍出現(xiàn)白色暈圈、膿狀物癥狀。

從表1可以看到,接種手A平均污染率為6.2%,最高時為9.77%;接種手B平均污染率為9.13%,最高時為16.96%,說明了A的污染率較穩(wěn)定,B的穩(wěn)定性較差。

表1　不同接種手對污染率的影響

從圖4可以看到雖然有2個月份接種手A污染率比接種手B稍高,說明了接種手操作也有一定隨機性,但總體來說接種手A污染率是較低,說明了細(xì)菌污染主要是通過接觸污染和操作不當(dāng)造成。接種過程中有瓶苗細(xì)菌鑒別環(huán)節(jié),帶細(xì)菌繼代分化苗無論是再分化,或者是做生根苗,都會引起細(xì)菌再次交叉污染,所以在接種手操作培訓(xùn)中,如何鑒別細(xì)菌是較重要的一個環(huán)節(jié),因此加強人員操作培訓(xùn)、規(guī)范操作流程是有效減少污染發(fā)生的重要途徑。

圖4　接種手A和接種手B污染率對比

4結(jié)語

在桉樹組培廠生產(chǎn)中,6、7、8月份是是污染最高的季節(jié),污染物多為真菌,因真菌傳播、快繁殖快,主要是空氣傳播,難控制,用酒精和新潔爾消毒效果差,甲醛熏蒸可使組培環(huán)境空氣中真菌減少87%~100%[2],因此要用高錳酸鉀1月空氣熏蒸滅菌一次,甲醛用量4~6mL/m3,高錳酸鉀3~66mL/m3[3],并且此季節(jié)為需求淡季,應(yīng)減少生產(chǎn)。在11、12、1、2月份產(chǎn)苗高峰期,培養(yǎng)室內(nèi)盡量少用甲醛+高錳酸鉀消毒,因為甲醛在滅菌過程中也會對瓶苗造成一定傷害,造成繼代苗生長緩慢甚至少部份苗干枯,這期間污染源主要為細(xì)菌,要經(jīng)常用70%酒精噴霧和2%新潔爾溶液擦洗培養(yǎng)室地面、門窗、培養(yǎng)架和培養(yǎng)瓶表面。其他月份消毒方式可以酌情處理。

防控細(xì)菌污染是另一重要環(huán)節(jié),加強接種手操作培訓(xùn),制定嚴(yán)格的操作流程,嚴(yán)格執(zhí)行操作程序也是有效減少污染發(fā)生的有效途徑。污染物發(fā)生存在應(yīng)溫度及濕度變化而變化,根據(jù)其發(fā)生規(guī)律,制定各月份不同的消毒流程和消毒時間,即可以減少消毒藥劑對人員、組培環(huán)境的毒害[4],同時又能有效地預(yù)防和降低污染的發(fā)生。因此在植物組織培養(yǎng)過程中,注重溫度和濕度的調(diào)節(jié),減少接種操作環(huán)節(jié)污染,可以有效減少培養(yǎng)物的污染率。

參考文獻(xiàn):

[1] 田郎,謝發(fā)成,鄭炎誠,等.香蕉試管苗生產(chǎn)的成本分析及其控制對策[J].熱帶作物科技,1998,23(2):4446.

[2] 汪一婷,王連平.工廠化生產(chǎn)組培苗的污染及其控制研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2005,33(12):2357~2358.

[3] 杜雪玲,張振霞.植物組織培養(yǎng)中的污染成因及其預(yù)防[J].草業(yè)科學(xué),2005,2(1):24~27.

[4] 方麗,王連平,茹水江,等.植物組培過程中污染微生物種類及其季節(jié)性的變化[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報,2013,25(2):284~287.

中圖分類號:S723.1

文獻(xiàn)標(biāo)識碼:B

文章編號:1674-9944(2015)01-0034-02

作者簡介:謝穎苑(1985—),女,廣東湛江人,助理工程師,主要從事林木組培繁育方面的工作。

收稿日期:2014-12-12