脂肪酶對(duì)斷奶仔豬生長性能、養(yǎng)分利用率及血清生化指標(biāo)的影響

■鄭榮輝 左建軍 龔俊勇

（1.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，廣東廣州 510642；2.深圳綠微康動(dòng)物營養(yǎng)有限公司，廣東深圳 518055）

脂類是畜禽動(dòng)物和水產(chǎn)魚類必需的一類營養(yǎng)物質(zhì)，飼料中添加脂類具有營養(yǎng)性和非營養(yǎng)性作用，能夠提高飼料能量濃度、提供必需脂肪酸，發(fā)揮營養(yǎng)效應(yīng)（張克英，2011）。研究表明，在生理?xiàng)l件下脂類含能是碳水化合物的2.25倍，是動(dòng)物體內(nèi)重要的功能貯能物質(zhì)；同時(shí)，脂類參與動(dòng)物多種重要體組織的構(gòu)成，在動(dòng)物營養(yǎng)生理中發(fā)揮重要作用?，F(xiàn)代飼料生產(chǎn)中，為了滿足動(dòng)物快速生長對(duì)高能量的需求，往往通過額外添加油脂提高飼料能值。然而實(shí)踐表明，幼齡畜禽利用脂肪的效果并不明顯，成年畜禽飼糧中添加大量的脂肪也達(dá)不到預(yù)期效果，分析可能的原因在于幼齡動(dòng)物本身消化機(jī)能還未完善，體內(nèi)脂肪酶分泌量不足；而成年動(dòng)物，其正常分泌的脂肪酶已經(jīng)不能滿足需求，不能有效分解吸收飼料中過量添加的能量營養(yǎng)脂肪，造成養(yǎng)分消化率下降；同時(shí)動(dòng)物還可能因?yàn)橹具^剩而導(dǎo)致腹瀉、生長緩慢等現(xiàn)象的發(fā)生（劉桂武等，2011）。因此可考慮在飼糧中添加外源脂肪酶，以補(bǔ)充幼齡動(dòng)物內(nèi)源脂肪酶分泌的不足，提高動(dòng)物對(duì)高能量飼糧的需求，提高飼料轉(zhuǎn)化率，增加和改進(jìn)飼料的香味和風(fēng)味，使原料的能量利用率最大化，滿足動(dòng)物對(duì)高能飼糧的需求，提高飼料轉(zhuǎn)化率，減少動(dòng)物因脂肪消化不良而造成的營養(yǎng)性腹瀉，促進(jìn)動(dòng)物生長。在養(yǎng)豬生產(chǎn)中，有研究顯示適量添加的脂肪酶，能夠調(diào)節(jié)腸道微生物，減少仔豬的腹瀉發(fā)生；但另有研究表明，除改善養(yǎng)分消化率之外，對(duì)仔豬腹瀉率沒有影響（時(shí)本利等，2010；周詳?shù)龋?012；Dierick等,2002）。蘇繼影（2006）研究添加0.02%脂肪酶和0.4%卵磷脂到脂肪源為豆油、椰子油、棕櫚油的基礎(chǔ)飼糧中，結(jié)果顯示：添加脂肪酶組與對(duì)照組和0.4%卵磷脂組相比，日增重分別提高47.27%和30.08%，采食量分別提高36.35%和24.77%。目前，針對(duì)脂肪酶在乳豬中的應(yīng)用研究相對(duì)較少，而結(jié)論也有所不一致。本試驗(yàn)通過在乳豬基礎(chǔ)飼糧中添加脂肪酶，探討其對(duì)乳豬生長性能、飼料養(yǎng)分利用率及血清生化指標(biāo)的影響，為脂肪酶在乳豬上的合理應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

酶活定義：在一定條件下（溫度36℃和pH值9.4），水解甘油三酯每分鐘生成1 μmol脂肪酸的酶量，即為一個(gè)活力單位，以U/g或者U/ml表示。

脂肪酶由深圳綠微康動(dòng)物營養(yǎng)有限公司提供，酶活為85 000 U/g。

1.2 試驗(yàn)地點(diǎn)

試驗(yàn)在廣州花都區(qū)花東鎮(zhèn)莘田養(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選取120頭健康、體況相近的28日齡杜×（長×大）斷奶仔豬，按平均體重相近的原則，隨機(jī)分為3個(gè)處理組，其中第1組為對(duì)照組，第2、3組為試驗(yàn)組，每個(gè)處理組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10頭仔豬，各重復(fù)間差異不顯著。試驗(yàn)2、3組為基礎(chǔ)日糧中分別添加100、150 g/t脂肪酶。試驗(yàn)期共28 d。豬舍為半封閉式，高床漏縫地板。試驗(yàn)期仔豬自由采食，免疫和其他管理按照豬場(chǎng)正常生產(chǎn)管理程序進(jìn)行操作。

1.4 飼糧配方及營養(yǎng)水平

試驗(yàn)日糧配方參照美國NRC(2012)豬營養(yǎng)需要量設(shè)計(jì)，采用玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧(見表1)。

表1 基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.5.1 生長性能

試驗(yàn)期間詳細(xì)記錄每組試驗(yàn)豬的初始重、末重、日采食量（ADFI），計(jì)算日增重（ADG）、料重比（FCR）、腹瀉率（DR）等指標(biāo)。

1.5.2 表觀消化率的測(cè)定

日糧和糞樣中干物質(zhì)(DM)參照GB/T 6435—2006的方法測(cè)定；粗蛋白（CP）參照GB/T 6432—1994的方法進(jìn)行前處理，然后使用FOSS Kjeltec-2300全自動(dòng)凱氏定氮儀進(jìn)行測(cè)定；粗脂肪（EE）參照GB/T 6433—2006，使用上海纖檢SZC-C型脂肪測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定；總能（GE）使用IKAC2000熱量?jī)x進(jìn)行測(cè)定。

1.5.3 血清生化指標(biāo)的測(cè)定

血清樣采集在消化試驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行。消化試驗(yàn)結(jié)束后的第1 d開始繼續(xù)提供每個(gè)處理組的試驗(yàn)料，自由采食。在第4 d早上8：00喂料前，對(duì)每頭豬進(jìn)行前腔靜脈采血20 ml，室溫陰涼處傾斜靜置，待有血清析出時(shí)，3 000 r/min離心10 min，取上層血清分裝，置冰盒預(yù)冷后放-80℃保存待測(cè)。采用試劑盒（購自南京建成）檢測(cè)血清高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、總膽固醇（TC）和游離脂肪酸（NEFA），并計(jì)算高密度脂蛋白和低密度脂蛋白比。

1.6 數(shù)據(jù)處理及分析方法

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2010進(jìn)行整理，SPSS（19.0）統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，鄧肯式新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較，試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤（M±S.E.）”表示，置信區(qū)間95%。

2 結(jié)果與分析

2.1 脂肪酶對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響（見表2）

表2 飼糧中添加脂肪酶對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組比較，試驗(yàn)2組末重增加5.80%，差異不顯著（P＞0.05）；日增重方面，試驗(yàn)2組比對(duì)照組增加10.40%，差異顯著（P＜0.05）；與試驗(yàn)1組比較，差異顯著（P＜0.05）；日采食量試驗(yàn)1、2組分別增加7.15%、11.21%，極顯著高于對(duì)照組（P＜0.01），各組間差異極顯著（P＜0.01）；料重比和腹瀉率3個(gè)組無顯著差異（P＞0.05）。

2.2 脂肪酶對(duì)斷奶仔豬飼料表觀消化率的影響（見表3）

表3 飼糧中添加脂肪酶對(duì)斷奶仔豬飼料表觀消化率的影響

由表3可知，與對(duì)照組比較，試驗(yàn)1、2組干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、粗脂肪、總能和表觀消化率均有不同程度提高，但差異不顯著（P＞0.05）。其中，與對(duì)照組比較，試驗(yàn)1、2組干物質(zhì)表觀消化率分別提高0.95%、1.48%；粗蛋白表觀消化率分別提高0.36%、2.90%；粗脂肪表觀消化率分別提高2.20%、1.33%；總能表觀消化率分別提高0.84%、1.73%；表觀消化能分別提高0.82%、1.64%。

2.3 脂肪酶對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響(見表4)

由表4可知，游離脂肪酸試驗(yàn)1、2組與對(duì)照組比較，分別降低12.90%、25.81%，差異不顯著（P＞0.05）；高密度脂蛋白試驗(yàn)1組與2組比較，增加30.26%，差異顯著（P＜0.05），與對(duì)照組比較差異不顯著（P＞0.05）；低密度脂蛋白和HDL/LDL各組間差異不顯著（P＞0.05）。

表4 飼糧中添加脂肪酶對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 脂肪酶對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響

近年來，隨著對(duì)脂肪酶研究的持續(xù)深入和對(duì)其生產(chǎn)工藝技術(shù)的不斷推進(jìn)，飼料業(yè)對(duì)脂肪酶的接受程度越來越高。添加脂肪酶可作為內(nèi)源脂肪酶不足時(shí)的補(bǔ)充，用以促進(jìn)油脂消化，提高動(dòng)物機(jī)體生長性能。幼齡畜禽的消化機(jī)能發(fā)育還不完善，本身分泌的內(nèi)源酶就不足，加之生產(chǎn)上難以避免的應(yīng)激——如仔豬斷奶，會(huì)造成內(nèi)源酶分泌的突然減少；而成年畜禽同樣難免處于病理、應(yīng)激狀態(tài)時(shí)內(nèi)源酶的分泌發(fā)生障礙或減少（Choct等,1992）。

張勇等（1999）研究表明，在32日齡斷奶仔豬日糧中添加0.1%由淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等組合成的酶制劑可促進(jìn)斷奶仔豬生長。Kpoxuha等(1998)研究指出：復(fù)合酶制劑中添加蛋白酶和脂肪酶對(duì)仔豬的增重和它們對(duì)配合飼料的利用帶來有益的影響。Tan等（1994）研究結(jié)果顯示：在含高油玉米、全脂米糠、干苜蓿粉、餅粕等的基礎(chǔ)日糧中添加脂肪酶，可以補(bǔ)充幼齡動(dòng)物內(nèi)源脂肪酶的分泌不足，同時(shí)可提高飼料表觀消化能5%～11%，提高畜禽增長速度4%～10%，提高飼料利用率2%～7%。時(shí)本利等（2010）選擇28日齡斷奶仔豬為試驗(yàn)對(duì)象，在日糧中添加200 g/t脂肪酶，結(jié)果表明：與對(duì)照組比，飼料中添加200 g/t脂肪酶顯著提高平均日增重，且脂肪酶添加對(duì)仔豬腹瀉沒有影響。藍(lán)海恩等（2011）選擇健康、體重相近[(13.50±0.50)kg]大約克去勢(shì)公豬進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果表明：與對(duì)照組相比，在日糧添加250 g/t脂肪酶，可提高斷奶仔豬的平均日增重（13.95%）、降低料重比（15.48%），且均差異顯著（P＜0.05）。周詳?shù)龋?012）選擇體況相近、體重7.00 kg左右的三元雜交（杜長大）保育仔豬進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果表明：與對(duì)照組相比，添加200 g/t和400 g/t脂肪酶處理組的平均日增重分別提高7.68%（P＞0.05）和12.19%（P＜0.05）；日均采食量分別提高了3.45%和6.89%，差異均不顯著（P＞0.05）；料重比分別降低了3.75%（P＞0.05）、5.63%（P＜0.05）。這些研究表明，在日糧中添加脂肪酶可提高乳仔豬生產(chǎn)性能的作用。此外，Dierick等（2002）研究表明，適量添加脂肪酶能對(duì)一些消化道有害微生物的生長具有顯著的抑制作用，起到類似抗生素的作用，并由此推測(cè)脂肪酶的部分分解產(chǎn)物可起到抑制有害微生物、殺滅病毒，同時(shí)降低飼料中抗生素的使用。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示：與對(duì)照組比較，試驗(yàn)2組末重增加5.80%，差異不顯著（P＞0.05）；日增重方面，試驗(yàn)2組比對(duì)照組增加10.40%，差異顯著（P＜0.05），且與試驗(yàn)1組比較，差異顯著（P＜0.05）；日采食量試驗(yàn)1、2組分別比對(duì)照組增加7.15%、11.21%，差異極顯著（P＜0.01），組間差異極顯著（P＜0.01）。以上結(jié)果與前人研究結(jié)果基本一致，添加脂肪酶對(duì)斷奶仔豬日采食量和平均日增重均有一定提高，可達(dá)到提高生長性能的效果。

3.2 脂肪酶對(duì)斷奶仔豬飼料表觀利用率的影響

乳仔豬對(duì)飼料的消化率受多方面因素的影響，比如豬只的品種、性別、健康狀況、生長階段、飼糧營養(yǎng)水平、添加劑等。近年來，養(yǎng)殖業(yè)的飼料原料價(jià)格不斷上漲，飼料的消化率在很大程度上決定著對(duì)養(yǎng)豬的經(jīng)濟(jì)效益。大量研究證實(shí)，日糧中適量添加脂肪酶可提高畜禽對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化率和消化酶活性，從而使動(dòng)物的生長性能得到提高。Dierick等（2004）研究結(jié)果顯示，在豬動(dòng)物油脂源日糧中添加0.05%的脂肪酶，能顯著提高飼料干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗灰分和消化能的表觀消化率（P＜0.05）。Polin等（1980）將0.1%的脂肪酶添加到含4%動(dòng)物油的玉米型白萊航公雞基礎(chǔ)日糧中，結(jié)果顯示：脂肪酶能明顯改善脂肪的吸收（P＜0.05），提高干物質(zhì)的消化率。楊新文（2010）研究表明，添加100、300 g/t脂肪酶可顯著提高南方鲇的粗脂肪消化率（P＜0.05），對(duì)蛋白質(zhì)消化率影響不顯著（P＞0.05），但隨著脂肪酶的增加而明顯增加。何前等（2010）研究表明，脂肪酶可顯著提高嶺南黃公雞的粗脂肪表觀利用率（P＜0.05），粗蛋白質(zhì)消化率也隨著脂肪酶添加量的增加而升高的趨勢(shì)（P＞0.05）。谷金皇（2010）研究發(fā)現(xiàn)，脂肪酶能顯著提高瓦氏黃顙魚的粗脂肪消化率（P＜0.05），高濃度脂肪酶對(duì)粗蛋白質(zhì)消化率影響顯著（P＜0.05），低濃度差異不顯著（P＞0.05）。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示：仔豬日糧中添加脂肪酶對(duì)斷奶仔豬的各養(yǎng)分利用率的影響不顯著（P＞0.05），但有提高的趨勢(shì)。表明日糧中添加脂肪酶可提高斷奶仔豬對(duì)飼料表觀利用率，促進(jìn)各營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。

3.3 脂肪酶對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響

仔豬的血液與機(jī)體的代謝、營養(yǎng)狀況和疾病有著密切的聯(lián)系，當(dāng)仔豬受到外界因子的影響而產(chǎn)生生理變化時(shí)，會(huì)迅速的反映在血液指標(biāo)中（陳琨飛，2012）。仔豬血液中游離脂肪酸、甘油三酯和膽固醇等是反映脂類代謝變化的重要指標(biāo)（張冬梅等，2009），這三者來源均為機(jī)體合成和腸道消化吸收。其變化反映了仔豬對(duì)體內(nèi)脂類代謝能力和對(duì)飼料中脂類消化吸收能力的大小。目前，關(guān)于脂肪酶對(duì)血脂指標(biāo)影響的文獻(xiàn)報(bào)道，在乳仔豬的研究中還不多，散見于對(duì)家禽的研究中。雷建平（2012）研究發(fā)現(xiàn)，添加脂肪酶能夠改善家禽脂肪吸收，且降低總膽固醇，提高血脂轉(zhuǎn)運(yùn)和減少脂質(zhì)在血管壁沉積。高峰等（2003）研究指出，在小麥基礎(chǔ)日糧中添加酶制劑，可顯著提高斷奶仔豬的生長性能，同時(shí)仔豬血清中血糖濃度也呈上升趨勢(shì)。龔俊勇等（2015）研究結(jié)果顯示：在白羽肉雞日糧中添加100 g/t脂肪酶可提高高密度脂蛋白含量，同時(shí)降低甘油三酯、總膽固醇、低密度脂蛋白含量，達(dá)到改善肉雞血清生化指標(biāo)的結(jié)果。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示：游離脂肪酸試驗(yàn)1、2組與對(duì)照組比較，分別降低12.90%、25.81%，差異不顯著（P＞0.05）；高密度脂蛋白試驗(yàn)1與2組比較，增加30.26%，差異顯著（P＜0.05），與對(duì)照組比較差異不顯著（P＞0.05）。此研究結(jié)果與前人研究結(jié)果基本相似，添加脂肪酶可降低仔豬血清中游離脂肪酸含量，即表明脂肪酶在提高飼糧中脂類養(yǎng)分的消化率的同時(shí)，促進(jìn)了脂類水解產(chǎn)物游離脂肪酸在仔豬體內(nèi)的沉積。

4 結(jié)論

日糧中添加脂肪酶可達(dá)到提高斷奶仔豬的日增重和日采食量；同時(shí)可提高斷奶仔豬對(duì)飼料中粗脂肪、粗蛋白和總能的表觀消化率，降低游離脂肪酸含量，提高高密度脂蛋白含量。