復(fù)合酸化劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、抗體水平及糞便微生物的影響

■韓慶功 崔艷紅 李 丹 宋云義 羅 正 劉保國(guó)

（1.河南科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，河南新鄉(xiāng) 453003；2.建明工業(yè)（珠海）有限公司，廣東珠海 519040）

斷奶仔豬腹瀉一直是困擾養(yǎng)豬業(yè)的重大難題，尤其是近幾年，在我國(guó)仔豬腹瀉呈大范圍流行狀態(tài)。大腸桿菌、沙門氏菌等是引起斷奶仔豬腹瀉的重要病原菌。此外，斷奶應(yīng)激會(huì)引起仔豬腸道微生態(tài)平衡的紊亂，造成腸黏膜受損，致使腸黏膜屏障不能發(fā)揮其正常的功能，引起斷奶仔豬腹瀉、生長(zhǎng)受阻，因此如何通過調(diào)節(jié)使仔豬腸道微生態(tài)保持平衡，阻止病原菌入侵，增加腸道有益菌，同時(shí)減輕斷奶應(yīng)激造成的危害，促進(jìn)動(dòng)物健康成為研究的熱點(diǎn)。

在配合飼料中添加一定量的抗生素，不僅能預(yù)防畜禽疾病，并能提高畜禽的成活率和飼料轉(zhuǎn)化率，因此抗生素被廣泛用作控制腸道病原菌感染，但同時(shí)也會(huì)造成腸道共生菌群生態(tài)平衡的破壞，加劇了抗生素耐藥性的擴(kuò)散，導(dǎo)致“超級(jí)細(xì)菌”的出現(xiàn)及嚴(yán)重的畜禽產(chǎn)品生物安全和食品安全問題。相比之下，酸化劑可調(diào)節(jié)動(dòng)物消化道內(nèi)pH值，為消化酶的激活創(chuàng)造適宜的環(huán)境和抑制消化道有害微生物增殖，減少病原菌感染，在減緩腸道應(yīng)激、預(yù)防腸道感染性疾病方面表現(xiàn)出巨大的優(yōu)勢(shì)[1]。本試驗(yàn)通過在飼料中添加抗生素替代物——酸化劑，探討其對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、抗體變化和腸道菌群的影響，為在養(yǎng)豬生產(chǎn)中合理地使用抗生素替代品——酸化劑，解決斷奶仔豬腹瀉問題提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)材料

酸化劑：試驗(yàn)用酸化劑，由建明工業(yè)（珠海）有限公司提供，主要成分為左旋乳酸、富馬酸、丙酸、甲酸、檸檬酸；試驗(yàn)用抗生素恩拉霉素，由浙江海正藥業(yè)股份有限公司提供，獸藥添字（2010）110273006；硫酸黏桿菌素，由河北遠(yuǎn)征禾木藥業(yè)有限公司提供，獸藥添字（2011）030462217；試驗(yàn)用飼料由河南誼發(fā)牧業(yè)有限公司提供。

1.1.2 試驗(yàn)豬群及分組

試驗(yàn)選擇胎次為4～6胎，分娩期相差3 d左右的長(zhǎng)×大二元母豬12頭，隨機(jī)分成3個(gè)處理組（對(duì)照組和試驗(yàn)1、2組），各處理組試驗(yàn)仔豬以窩為單位，以每窩為一個(gè)重復(fù)小組，每個(gè)處理組4個(gè)重復(fù)，試驗(yàn)28日齡斷奶仔豬共126頭。每圈豬自然成群，不再調(diào)圈，防止調(diào)圈的應(yīng)激，采取同舍飼養(yǎng)，自由采食，全自動(dòng)飲水器供水，各分組室內(nèi)均勻分布，條件盡可能一致，試驗(yàn)期共35 d。

1.1.3 試驗(yàn)地點(diǎn)

河南省鶴壁市河南誼發(fā)牧業(yè)有限公司種豬場(chǎng)。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)設(shè)空白對(duì)照組；試驗(yàn)1組(抗生素組)，添加硫酸黏桿菌素10 mg/kg+恩拉霉素10 mg/kg；試驗(yàn)2組(酸化劑組)，添加酸化劑5 kg/t。

1.2.2 試驗(yàn)測(cè)定指標(biāo)

健康指標(biāo)：腹瀉率、毛色、精神狀態(tài)，死淘率。死亡豬只要稱重記錄，便于進(jìn)行料重比統(tǒng)計(jì)，要求每天詳細(xì)記錄。

生長(zhǎng)性能指標(biāo)：試驗(yàn)開始、結(jié)束時(shí)分別空腹稱重，以圈為單位計(jì)算日增重、日采食量以及料重比。

免疫指標(biāo)：豬瘟抗體水平檢測(cè)，從斷奶到保育結(jié)束，試驗(yàn)正式開始時(shí)采血，以后每10 d采血一次。每組固定同一豬只采樣。用注射器進(jìn)行前腔靜脈采血3 ml左右，在室溫待血清自然析出后，倒入1.5 ml離心管中，3 000 r/min離心15 min分離血清，并分裝于1.5 ml離心管中，編號(hào)，保存于-20℃冰箱待檢。采用IDEXX CSFV Ab試劑盒。

糞便微生物：每組每隔10 d采樣1次，每次每組采集8頭豬的新鮮糞便，低溫保存。主要測(cè)定乳酸桿菌、雙歧桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌含量和產(chǎn)氣莢膜梭菌，培養(yǎng)基主要選用乳酸桿菌培養(yǎng)基、雙歧桿菌BS培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)瓊脂、膽硫乳瓊脂、營(yíng)養(yǎng)瓊脂等。

1.2.3 統(tǒng)計(jì)分析

測(cè)定結(jié)果采用SAS8.1軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果及分析

2.1 酸化劑對(duì)斷奶仔豬健康的影響

試驗(yàn)豬場(chǎng)現(xiàn)代化程度高，飼養(yǎng)管理規(guī)范，由于環(huán)境控制及疾病凈化較好，整個(gè)豬群精神狀態(tài)良好，試驗(yàn)過程中沒有發(fā)現(xiàn)傳染病發(fā)生，只是在對(duì)照組出現(xiàn)了零星的普通病，而酸化劑組及抗生素組沒有發(fā)生，說明酸化劑對(duì)疾病的預(yù)防有一定的效果。

2.2 酸化劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響（見表1）

表1 酸化劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

由表1可以看出，酸化劑組與對(duì)照組相比，日增重提高了6.01%、日耗料量降低了6.72%（P＞0.05），料重比降低了11.40%（P＜0.05），表明酸化劑對(duì)斷奶仔豬有一定的促生長(zhǎng)作用。酸化劑組的料重比（1.656）略優(yōu)于抗生素組的料重比（1.741），但兩者之間差異不顯著，表明酸化劑可以作為抗生素的替代品得到較好的飼喂效果，不會(huì)影響其經(jīng)濟(jì)效益。

2.3 酸化劑對(duì)仔豬豬瘟抗體水平的影響（見表2）

表2 酸化劑對(duì)仔豬豬瘟抗體水平的影響（OD值）

由表2可見，試驗(yàn)開始即豬只28日齡時(shí)第一次采血進(jìn)行抗體水平檢測(cè)，抗生素組、酸化劑組抗體平均水平略高于對(duì)照組，但三組之間差異不顯著(P＞0.05)；在豬只第38日齡時(shí)，酸化劑組的抗體水平最高，但與對(duì)照組之間差異不顯著，抗生素組的豬瘟抗體水平明顯低于對(duì)照組和酸化劑組，差異顯著(P＜0.05)。在試驗(yàn)豬只48日齡時(shí)，酸化劑組的平均抗體水平維持在較高的水平，與對(duì)照組和抗生素組相比，抗體水平分別提高了7.30%、13.16%，但統(tǒng)計(jì)分析與對(duì)照組和添加抗生素組之間差異不顯著。在豬只58日齡時(shí)，酸化劑組與對(duì)照組、抗生素組之間差異顯著(P＜0.05)，分別提高了21.6%、37.9%，并且豬瘟抗體水平OD值維持在較高水平（0.846 5±0.109 9）。試驗(yàn)表明，酸化劑能夠提高豬只的免疫能力，減緩抗體水平的下降，使抗體在保護(hù)水平上維持較長(zhǎng)的時(shí)間，而抗生素對(duì)豬瘟抗體滴度的提高有一定的影響。

2.4 酸化劑對(duì)仔豬糞便微生物數(shù)量的影響（見表3）

表3 酸化劑對(duì)仔豬糞便微生物數(shù)量的影響(cfu/ml)

整個(gè)試驗(yàn)期間，從試驗(yàn)豬只新鮮糞便中沒有檢測(cè)到沙門氏菌。在試驗(yàn)開始前，使用快速檢測(cè)法檢測(cè)產(chǎn)氣莢膜梭菌，在培養(yǎng)至第5 h，對(duì)照組、抗生素組與酸化劑組分別檢測(cè)到產(chǎn)氣莢膜梭菌；在豬只38日齡和48日齡采集的糞便中，在培養(yǎng)2、3、4 h和5 h時(shí)，三組均檢測(cè)到產(chǎn)氣莢膜梭菌；在58日齡對(duì)照組和試驗(yàn)2組均未檢測(cè)到產(chǎn)氣莢膜梭菌，只有試驗(yàn)1組在第5 h檢測(cè)到。試驗(yàn)期間，三組的產(chǎn)氣莢膜梭菌的含量逐漸減少，表明添加抗生素及酸化劑開始時(shí)對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌的影響不大，但隨著飼喂時(shí)間的延長(zhǎng)，抗生素和酸化劑逐漸發(fā)揮作用，抑制有害菌產(chǎn)氣莢膜梭菌的生長(zhǎng)。

其它微生物的變化見表3，細(xì)菌總數(shù)在試驗(yàn)開始時(shí)三組之間沒有顯著的變化，在第38日齡抗生素組與對(duì)照組和酸化劑組相比差異顯著(P＜0.05)，但對(duì)照組與酸化劑組相比差異不顯著(P＞0.05)。整個(gè)試驗(yàn)周期內(nèi)，在細(xì)菌總數(shù)上酸化劑組與對(duì)照組相比，差異均不顯著。糞便中大腸桿菌的數(shù)量變化，在試驗(yàn)開始豬只28日齡時(shí)，試驗(yàn)1組與對(duì)照組、試驗(yàn)2組相比差異顯著(P＜0.05)，即抗生素組大腸桿菌數(shù)量最少；在豬只38日齡時(shí)，酸化劑組與對(duì)照組、抗生素組之間差異顯著，大腸桿菌數(shù)量明顯減少，與對(duì)照組相比，大腸桿菌數(shù)量減少 40.38%(P＜0.05)，但對(duì)照組、抗生素組之間差異不顯著；在豬只第48日齡、58日齡時(shí)，酸化劑組的大腸桿菌數(shù)量分別比對(duì)照組降低了15.46%和28.13%(P＞0.05)。糞便中的有益菌——乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量明顯高于對(duì)照組和抗生素組，并且豬只日齡越小，酸化劑的數(shù)量增加越明顯，整個(gè)試驗(yàn)期間，與對(duì)照組相比，乳酸桿菌的數(shù)量是對(duì)照組的1.05～2.27倍，雙歧桿菌數(shù)量是對(duì)照組的1.16～1.70倍，但對(duì)照組、抗生素組之間差異不顯著。研究結(jié)果表明，酸化劑可以促進(jìn)腸道菌群平衡，對(duì)病原菌具有排斥或抑制作用，阻止了有害菌在腸道的黏附或定植。

3 討論

酸化是人為地將有機(jī)酸或無機(jī)酸，單獨(dú)或以混合物的形式添加到畜禽飼糧或飲水中，以降低其pH值的過程。飼用酸化劑是指能使飼料或飲水酸化(pH值降低)的一類物質(zhì)。主要是由檸檬酸、延胡索酸、乳酸、異位酸、乙酸、丙酸、甲酸及其鹽類，山梨酸、琥珀酸、蘋果酸和無機(jī)酸化劑以單獨(dú)或混合形式組成的。最初應(yīng)用酸化劑僅作為改善飼料適口性的一種風(fēng)味添加劑[2-3]。隨著研究的深入，飼糧中添加酸化劑不僅可以降低胃腸道pH值，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，抑制腸道有害微生物的繁殖，促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)，提高代謝率，而且還可以提高動(dòng)物體免疫機(jī)能。

3.1 酸化劑可提高幼齡動(dòng)物飼料利用率

動(dòng)物機(jī)體消化道內(nèi)存在多種消化酶，如胃蛋白酶、胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶等。不同的酶所需的最適宜pH值不盡相同，多數(shù)酶最適pH值接近中性，而淀粉酶的最適pH值為6.8～7.0，胃蛋白酶的活性pH值范圍為2.0～3.5。動(dòng)物飼料中添加酸化劑后，可以適當(dāng)降低胃內(nèi)的pH值，這對(duì)胃蛋白酶的活化劑——胃蛋白酶原的激活有很重要的促進(jìn)作用，進(jìn)而促進(jìn)蛋白在胃內(nèi)的消化，加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。另一方面，低pH值可減緩胃排空的速度，延長(zhǎng)飼料在胃中停留時(shí)間，使蛋白質(zhì)分解更完全、更徹底[4]，從而進(jìn)一步提高動(dòng)物對(duì)飼料的利用率。

李娜等[5]通過在斷奶仔豬日糧中添加不同的酸化劑研究對(duì)仔豬生產(chǎn)性能的影響，結(jié)果表明，兩種不同的酸化劑均提高了斷奶仔豬日增重、飼料轉(zhuǎn)化率，降低了料重比。唐武能等[6]將不同類型的復(fù)合酸化劑添加到斷奶仔豬日糧中，添加0.15%普通復(fù)合酸化劑和0.15%緩釋復(fù)合酸化劑的試驗(yàn)組的日增重分別比對(duì)照組提高9.51%和16.16%（P＜0.05）；腹瀉率分別比對(duì)照組下降32.89%和46.68%，死亡率分別下降16.72%和24.48%。說明添加0.15%普通復(fù)合酸化劑和0.15%緩釋復(fù)合酸化劑均能顯著提高日增重，但比較而言，添加0.15%緩釋復(fù)合酸化劑更加顯著提高仔豬的日增重，降低料重比、腹瀉率和死亡率。楊春雷等[7]選擇20日齡杜長(zhǎng)大雜交斷奶仔豬60頭，隨機(jī)分為4個(gè)組，1組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)日糧；2、3、4組為試驗(yàn)組，分別飼喂pH值為3.0、4.0和5.0的酸化日糧。試驗(yàn)期為30 d。結(jié)果表明，2、3、4組的末質(zhì)量和平均日增重顯著高于對(duì)照組（1 組）（P＜0.05），且與對(duì)照組相比，使用醋酸處理日糧后斷奶仔豬的平均日增重（2、3、4組）分別提高了22.22%、30.41%、16.08%。李書偉等[8]通過在斷奶仔豬日糧中添加0.10%、0.15%和0.20%的復(fù)合酸化劑，結(jié)果表明，試驗(yàn)1、2、3組分別比對(duì)照組日增重提高5.92%、10.94%和9.63%，腹瀉率分別比對(duì)照組下降17.57%、53.58%和55.64%，死亡率分別下降15.35%、30.57%和30.98%，表現(xiàn)出了良好的促生長(zhǎng)、防疾病效果。本試驗(yàn)在斷奶豬日糧中添加酸化劑，日增重提高了6.01%、日耗料量降低了6.72%(這可能與分組時(shí)的初始頭數(shù)和體重有關(guān)，但差異不顯著)，料重比降低了11.40%(P＜0.05)，飼料利用效率明顯優(yōu)于對(duì)照組，說明日糧中添加酸化劑具有改善、提高飼料利用效率的功效。

3.2 酸化劑可減少仔豬應(yīng)激反應(yīng)，增強(qiáng)免疫功能

仔豬斷奶后，由于受到斷奶、環(huán)境改變、去勢(shì)、日糧變化、管理不當(dāng)?shù)葢?yīng)激因素，加上仔豬自身生理特點(diǎn)極易發(fā)生腹瀉、消瘦、仔豬水腫病及飼料利用率低、生長(zhǎng)緩慢、高死亡率等仔豬斷奶綜合征[9]。李鵬等[10]研究表明，添加0.1%乳酸型酸化劑A、0.3%乳酸型酸化劑B的試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，斷奶仔豬血清IgA含量顯著增高（P＜0.05），分別提高了32.14%、40.54%，添加0.1%磷酸型酸化劑A、0.3%磷酸型酸化劑B的試驗(yàn)組與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05），但是都有提高趨勢(shì)；斷奶仔豬血清IgG含量4個(gè)試驗(yàn)組與對(duì)照組相比都有顯著提高（P＜0.05），分別提高了76.31%、54.60%、68.44%、69.08%；仔豬血清IgM含量4個(gè)試驗(yàn)組與對(duì)照組相比差異顯著（P＞0.05），但都有不同程度的提高。說明添加酸化劑可以提高仔豬的體液免疫水平。蘇琴等[11]利用在斷奶仔豬日糧中添加普通酸化劑與緩釋酸化劑，研究酸化劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能及血清生化指標(biāo)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，兩種酸化劑均能降低料重比、提高平均日增重，并且均能在一定程度上提高血清蛋白濃度，尤其是緩釋酸化劑組的IgA水平顯著高于普通酸化劑組。盧娜等[12]通過在斷奶仔豬日糧中添加兩種酸化劑，研究其對(duì)斷奶仔豬的作用效果，結(jié)果表明，斷奶仔豬血清中白蛋白含量，2個(gè)試驗(yàn)組比對(duì)照組分別提高9.60%和18.74%；尤其試驗(yàn)2組與對(duì)照組相比白蛋白的含量顯著提高(P＜0.05)。血清中總蛋白含量，2個(gè)試驗(yàn)組比對(duì)照組分別提高2.83%和6.26%。對(duì)血清中球蛋白的含量無顯著影響(P＞0.05)。本試驗(yàn)添加酸化劑后主要檢測(cè)了豬主要疫病豬瘟的抗體水平，試驗(yàn)結(jié)果說明，斷奶仔豬日糧中添加復(fù)合有機(jī)酸化劑可以在一定程度上增強(qiáng)機(jī)體免疫應(yīng)答功能。

3.3 酸化劑可促進(jìn)胃腸道內(nèi)有益菌的增殖

大多數(shù)病原菌，如大腸桿菌、葡萄球菌和梭狀芽孢桿菌等的最適pH值是中性偏堿性，在pH值為4時(shí)基本失活，而乳酸菌在腸道內(nèi)pH值為3.5時(shí)仍能生長(zhǎng)。日糧中添加酸化劑被動(dòng)物攝入后可以降低腸道pH值，使有害微生物的適宜生存環(huán)境遭到破壞，改善胃腸道內(nèi)的微生物菌群，促進(jìn)益生菌的生長(zhǎng)繁殖，抑制或殺滅有害菌群。因此酸化劑對(duì)動(dòng)物有雙重作用，不但可減少病原菌的繁殖，還能促進(jìn)益生菌的定植，促進(jìn)動(dòng)物胃腸道健康，減少腹瀉。關(guān)飛等[13]提供體外抑菌試驗(yàn)表明，復(fù)合酸化劑對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、黃曲霉菌在一定濃度下是有殺滅和抑制作用的。張旭暉等[14]研究結(jié)果表明，在斷奶仔豬日糧中添加有機(jī)酸化劑可顯著改善仔豬料重比(P＜0.05或P＜0.01)；可顯著(P＜0.05)或極顯著(P＜0.01)降低腹瀉率；各組有機(jī)酸化劑對(duì)大腸桿菌和產(chǎn)氣莢膜桿菌均有顯著(P＜0.05)或極顯著(P＜0.01)抑制作用。對(duì)金色葡萄球菌均有顯著(P＜0.05)或極顯著(P＜0.01)抑制作用。說明在仔豬飼糧中添加有機(jī)酸化劑能夠有效地改善斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能和腸道健康，降低腸道有害菌總數(shù)。本試驗(yàn)通過糞便中大腸桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌的檢測(cè)，表明添加酸化劑后，整個(gè)試驗(yàn)期乳酸桿菌的數(shù)量是對(duì)照組的1.05～2.27倍，雙歧桿菌數(shù)據(jù)是對(duì)照組的1.16～1.70倍。大腸桿菌數(shù)量試驗(yàn)組分別比對(duì)照組降低了15.46%和28.13%。說明添加酸化劑后可以改善仔豬腸道菌群關(guān)系，提高有益菌數(shù)量，減少機(jī)體發(fā)生腹瀉的幾率。

隨著人們食品安全意識(shí)的增強(qiáng)，各國(guó)對(duì)抗生素使用監(jiān)管力度的加強(qiáng)，安全、高效的抗生素替代物必將日益廣泛地應(yīng)用到動(dòng)物生產(chǎn)中。酸化劑因具有無污染、無殘留、吸收迅速、參與能量代謝及無生態(tài)毒理的綠色環(huán)保型飼料添加劑受到廣泛地關(guān)注，成為與微生態(tài)制劑、寡糖、抗菌肽、酶制劑、植物提取物等并列的重要添加劑。本研究通過在斷奶仔豬飼料中添加有機(jī)酸化劑，研究表明，有機(jī)酸化劑可以提高日增重，降低料重比，并且可以改善腸道菌群關(guān)系，促進(jìn)有益菌的增殖和提高機(jī)體的免疫功能。有機(jī)酸化劑的應(yīng)用為替代抗生素在飼料中的添加成為可能，為綠色畜禽產(chǎn)品的生產(chǎn)創(chuàng)造了條件，符合當(dāng)今及未來生產(chǎn)綠色畜禽產(chǎn)品的要求，其在畜牧業(yè)生產(chǎn)中的廣泛應(yīng)用，必將帶動(dòng)養(yǎng)殖業(yè)向更健康的層次發(fā)展，產(chǎn)生良好的生態(tài)效益、經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。