乳鐵蛋白對滇撒配套系斷奶仔豬生產(chǎn)性能、血清抗氧化指標及組織抗氧化基因表達的影響

安清聰 李岑曦張春勇 潘洪彬 李美荃徐娜娜 陳克嶙 郭榮富（云南農(nóng)業(yè)大學，云南省動物營養(yǎng)與飼料重點實驗室，昆明650201）

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乳鐵蛋白對滇撒配套系斷奶仔豬生產(chǎn)性能、血清抗氧化指標及組織抗氧化基因表達的影響

安清聰 李岑曦?張春勇 潘洪彬 李美荃徐娜娜 陳克嶙 郭榮富??
（云南農(nóng)業(yè)大學，云南省動物營養(yǎng)與飼料重點實驗室，昆明650201）

摘 要：本試驗旨在研究乳鐵蛋白（lactoferrin，LF）對滇撒配套系斷奶仔豬生產(chǎn)性能、血清抗氧化指標及組織抗氧化基因表達量的影響。選用（28±2）日齡滇撒配套系斷奶仔豬192頭，隨機分為4個處理，每個處理6個重復，每個重復8頭，對照組飼喂基礎飼糧，LF1、LF2和LF3 3個試驗組在基礎飼糧基礎上分別添加125、250和500 mg／kg的LF。飼喂42 d后，測定平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（F／G）和腹瀉率。采用試劑盒檢測血清總抗氧化能力（T?AOC）、總超氧化物歧化酶（T?SOD）活力、丙二醛（MDA）含量和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH?Px）活力，采用實時熒光定量PCR（RT?qPCR）法測定心臟和肝臟谷氧還蛋白1（GRX1）、硫氧還蛋白1（TRX1）、超氧化物歧化酶（SOD）及GSH?Px基因表達量。結(jié)果表明：1）與對照組相比，LF2和LF3組顯著提高了ADG、ADFI（P＜0．05），LF1和LF2組顯著降低了料重比（P＜0．05），LF2和LF3組顯著降低了仔豬的腹瀉率（P＜0．05）。2）血清中，與對照組相比，LF1（P＜0．05）、LF2（P＜0．01）和LF3組（P＜0．05）T?SOD活力均顯著或極顯著提高；LF2組GSH?Px活力及T?AOC均顯著提高（P＜0．05）；LF2和LF3組的MDA含量均顯著降低（P＜0．05）。3）與對照組相比，LF1和LF2組GRX1、SOD和GSH?Px基因在心臟和肝臟中的表達量均增加，其中LF1組肝臟GSH?Px差異顯著（P＜0．05），LF2組肝臟GRX1、SOD和GSH?Px差異極顯著（P＜0．01）；LF1組TRX1基因在肝臟中的表達量極顯著提高（P＜0．01）；LF3組GRX1、TRX1基因在肝臟和心臟中及SOD、GSH?Px基因在心臟中的表達量均降低，其中心臟GRX1、TRX1和SOD差異極顯著（P＜0．01）。結(jié)果提示：在斷奶仔豬飼糧中添加一定量的LF（本試驗添加250 mg／kg最佳）可提高斷奶仔豬的生長性能，提高血清抗氧化指標及心臟和肝臟中抗氧化基因GRX1、TRX1、SOD 和GSH?Px的表達量。

關(guān)鍵詞：滇撒配套系斷奶仔豬；乳鐵蛋白；生長性能；血清抗氧化指標；抗氧化基因

?同等貢獻作者

??通信作者：郭榮富，教授，博士生導師，E?mail：rongfug＠163．com

當動物機體受到內(nèi)源或外源的刺激時，大量活性氧自由基（reactions oxygen species，ROS）、活性氮（reactive nitrogen species，RNS）在體內(nèi)積聚，造成細胞氧化損傷，即產(chǎn)生氧化應激［1－2］。早期斷奶仔豬由于受到來自營養(yǎng)、免疫、環(huán)境和心理等方面的應激，易出現(xiàn)采食量下降、飼料利用率降低、生長緩慢和抗病力減弱等為特征的“仔豬早期斷奶綜合征”，給養(yǎng)豬場帶來經(jīng)濟損失。乳鐵蛋白（lactoferrin，LF）是一種天然的鐵結(jié)合性糖蛋白。它不僅參與鐵的轉(zhuǎn)運，而且具有調(diào)節(jié)免疫、保護動物消化道、促進鐵的吸收等功能，是新生動物必需的營養(yǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)［3－4］。滇撒配套系豬是我國第1個具有地方豬血緣的配套系品種，具有產(chǎn)仔數(shù)高、抗病力強、肉質(zhì)優(yōu)良等特點［5－6］，是極具開發(fā)潛力的地方豬種遺傳資源。Comstock等［7］研究表明，飼喂新生仔豬含367或1 300 mg／kg牛LF的飼料代替初乳，發(fā)現(xiàn)其顯著提高了血清免疫球蛋白（Ig）G、IgA和脾細胞白細胞介素（IL）－10等免疫參數(shù)水平。Okazaki等［8］研究發(fā)現(xiàn)，牛LF能改善氮三乙酸根合鐵絡合物（Fe?NTA）誘導的腎小管氧化損傷。目前國內(nèi)外對LF的研究主要集中于人和動物在營養(yǎng)、免疫和抗癌等相關(guān)方向，LF對斷奶仔豬抗氧化保護的研究鮮見報道。谷氧還蛋白（glutaredoxin，GRX）和硫氧還蛋白（thioredoxin，TRX）是機體內(nèi)有別于超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH?Px）等抗氧化酶的抗氧化系統(tǒng)，主要通過介導巰基（－SH）和二硫鍵（－S－S－）的轉(zhuǎn)換，完成機體內(nèi)氧化還原反應，實現(xiàn)調(diào)控。探究GRX和TRX 2個抗氧化系統(tǒng)在斷奶仔豬抗氧化上的作用具有重要意義。因此，本試驗通過在滇撒配套系仔豬飼糧中添加不同水平的LF，研究其對滇撒配套系仔豬生長性能和抗氧化能力的影響，探討LF在滇撒配套系仔豬上的抗氧化效果，為提高滇撒配套系仔豬抗氧化能力提供科學依據(jù)。

1　材料與方法

1．1 試驗設計

選用（28±2）日齡［平均體重為（6．71± 0．59）kg］滇撒配套系斷奶仔豬192頭作為試驗動物，隨機分為4個處理，每個處理6個重復，每個重復8頭，對照組飼喂基礎飼糧，參照NRC（2012）豬營養(yǎng)需要量配制基礎飼糧，其組成及營養(yǎng)水平見表1。LF1、LF2和LF3 3個試驗組分別飼喂在基礎飼糧中添加125、250和500 mg／kg LF的試驗飼糧。試驗期42 d，仔豬自由飲水，按豬場常規(guī)程序消毒、免疫，仔豬的環(huán)境條件、飼糧和飼養(yǎng)管理皆逐步過渡，盡量減少應激反應。LF來源：進口LF（荷蘭DMV公司），以乳牛初乳為原料，利用超濾法從牛乳中分離純化LF，純度為95%。

表1　基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎）Table 1　Composition and nutrient levels of the basal diet（air?dry basis）　%

1．2 試驗主要試劑和儀器

RNAsimple Total RNA Kit（北京天根生化科技有限公司）；PrimeScript RT Master Mix（Per?fect Real Time）反轉(zhuǎn)錄試劑盒（日本TaKaRa公司）；SsoFastTMEvaGreenSupermix（美國Bio?Rad公司）。

iCyclerr iQTMReal?Time PCR Detection System（美國Bio?Rad公司）；CFX96TMReal?Time PCR Detection System（美國Bio?Rad公司）。

1．3 生長性能測定

1．4 樣品采集和保存

第42天08：00，所有試驗豬空腹稱重后，使用普通血清管于前腔靜脈采血10 mL，垂直放于37℃水浴鍋中，待血液凝固后取出，冷藏至析出血清，3 000 r／min離心10 min，分離制備血清，保存于－20℃冰箱中。采血后立即屠宰，每組每個重復屠宰1頭，共24頭仔豬，宰后迅速收集心臟和肝臟于5 mL凍存管內(nèi)，放入液氮迅凍，于－80℃保存。

1．5 血清抗氧化指標測定

采用硫代巴比妥酸（thibabituric acid，TBA）法測定血清中丙二醛（MDA）含量，采用比色法測定血清中總超氧化物歧化酶（T?SOD）、GSH?Px活力和總抗氧化能力（T?AOC）。以上指標均使用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)試劑盒進行檢測，并嚴格按照說明書操作方法測定。

1．6 組織抗氧化基因表達量測定

1．6．1 引物設計

參照NCBI普通豬的GRX1、TRX1、SOD和GSH?Px基因序列，并用NCBI數(shù)據(jù)庫中的Primer?Blast工具確認引物的特異性，利用Primer 5．0軟件設計進行引物設計，由上海生工生物工程股份有限公司合成引物。選用在豬機體內(nèi)穩(wěn)定表達的β肌動蛋白（β?actin）基因作為內(nèi)參基因。實時熒光定量PCR（RT?qPCR）引物信息見表2。

表2　實時熒光定量PCR引物信息Table 2　Information of primers used for RT?qPCR

1．6．2 總RNA提取及cDNA的合成

按照RNAsimple Total RNA Kit試劑盒說明書提取滇撒配套系仔豬心臟和肝臟總RNA，將提取的所有總RNA進行1%瓊脂糖凝膠電泳，檢測其完整性，結(jié)果如圖1所示，28S、18S條帶清晰，無DNA污染條帶，無明顯降解條帶。吸取總RNA樣品1 μL，加入99 μL焦碳酸二乙酯（DEPC）處理水，分別測OD260nm、OD280 nm，OD260nm／OD280 nm在1．8～2．0間的RNA樣品可用。參照PrimeScriptRT Master Mix（Perfect Real Time）反轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書將提取的總RNA進行反轉(zhuǎn)錄，合成cDNA的第1條鏈，－20℃冰箱保存。

圖1　總RNA提取電泳圖Fig．1　Agarose gel electrophoresis result oftotal RNA extraction

1．6．3 RT?qPCR

以合成的cDNA第1條鏈為模板，由GRX1、TRX1、SOD、GSH?Px和β?actin基因的特異性引物進行RT?qPCR擴增。采用Eva GreenⅠ染料法，按照預先篩選好的RT?qPCR反應條件和體系在美國Bio?Rad公司的CFX96TMReal?Time PCR Detec?tion System儀器上進行。每次反應都設置標準品、未知樣品（重復3次）和1個陰性對照。結(jié)果通過Bio?Rad CFX96TM軟件分析制作標準曲線，根據(jù)標準曲線和熔解曲線的循環(huán)閾值（Ct）計算定量結(jié)果。反應體系為20 μL：SsoFastTMEvaGreen Supermix 10 L，上、下游引物（10 μmol／L）各1 μL，cDNA模板2 μL，加滅菌去離子水至20 μL。經(jīng)過優(yōu)化，最后確定實施試驗的反應條件為：95℃10 s；95℃5 s，59℃20 s，72℃15 s，40個循環(huán)。

1．7 統(tǒng)計分析

所有組織的GRX1、TRX1、SOD和GSH?Px基因表達量均以β?actin為內(nèi)參基因，最終以相對表達量來表示，相對熒光定量計算方法采用Pfaffl［9］方法。所有數(shù)據(jù)均先用Excel進行初步整理，后采用SPSS 17．0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計處理，結(jié)果用平均值±標準差表示，采用Duncan氏法進行多重比較。P＜0．05為差異顯著，P＜0．01為差異極顯著。

2　結(jié) 果

2．1 LF對滇撒配套系仔豬生長性能的影響

由表3可知，4組所選滇撒配套系斷奶仔豬在初重上沒有顯著性差異（P＞0．05），42 d試驗期結(jié)束后，LF2組仔豬末重顯著高于對照組和LF1組（P＜0．05），LF3組顯著高于對照組（P＜0．05）。與對照組相比，LF2和LF3組仔豬的ADG和ADFI顯著升高（P＜0．05），且LF2組仔豬ADG和ADFI均高于LF1組（P＜0．05），LF2組的ADFI也顯著高于LF3組（P＜0．05）。LF2組仔豬料重比和腹瀉率均顯著低于LF1、LF3組和對照組（P＜0．05），且LF1組仔豬料重比顯著低于對照組（P＜0．05）；而在仔豬腹瀉率上，LF3組顯著低于對照組（P＜0．05）。

表3　不同水平乳鐵蛋白對滇撒配套系仔豬生產(chǎn)性能的影響Table 3　Effects of different levels of lactoferrin on growth performance of Diansa piglets

2．2 LF對滇撒配套系仔豬血清抗氧化指標的影響

由表4可知，血清中，與對照組相比，LF1（P＜0．05）、LF2（P＜0．01）和LF3組（P＜0．05）T?SOD活力均顯著或極顯著提高；LF2組GSH?Px活力及T?AOC均顯著提高（P＜0．05）；LF2和LF3組的MDA含量均顯著降低（P＜0．05）。

2．3 LF對滇撒配套系仔豬心臟和肝臟抗氧化基因表達量的影響

與對照組相比，LF1和LF2組GRX1基因在心臟和肝臟表達量均有升高，其中LF2組在肝臟中的表達量極顯著上調(diào)（P＜0．01）；而LF3組GRX1基因在心臟（P＜0．01）和肝臟中（P＞0．05）的表達量均降低（圖2－A）。與對照組相比，心臟和肝臟TRX1基因表達量在LF1組中升高，LF2和LF3組下降，其中LF1組在肝臟中及LF3組在心臟中差異極顯著（P＜0．01）（圖2－B）。與對照組相比，LF1和LF2組SOD和GSH?Px基因在2個組織中表達量均增加，其中LF1組肝臟GSH?Px差異顯著（P＜0．05），LF2組肝臟這2個基因表達量差異極顯著（P＜0．01）；LF3組心臟SOD（P＜0．01）和GSH?Px基因表達量（P＞0．05）下調(diào)，肝臟SOD和 GSH?Px基因表達量（P＞0．05）上調(diào)（圖2－C、圖2－D）。

表4　不同水平乳鐵蛋白對滇撒配套系仔豬血清抗氧化指標的影響Table 4　Effects of different levels of lactoferrin on serum antioxidant indexes of Diansa piglets

圖2　不同水平乳鐵蛋白對滇撒配套系仔豬心臟和肝臟GRX1、TRX1、SOD和GSH?Px基因表達量的影響Fig．2　Effects of different levelsof lactoferrin on expression levels of GRX1，TRX1，SOD and GSH?Px genes in heart and liver of Diansa piglets

2．4 GRX1、TRX1、SOD和GSH?Px基因在相同組織中的表達差異

在肝臟中，LF1和對照組GSH?Px基因表達量最高，其次為SOD、TRX1和GRX1基因，而LF2和LF3組則為TRX1基因表達量最低。其中，LF1組GSH?Px和SOD基因表達量極顯著高于GRX1和TRX1基因（P＜0．01），且GSH?Px基因表達量高于SOD基因（P＜0．05）；LF2組GSH?Px和SOD基因表達量極顯著高于GRX1和TRX1基因（P＜0．01）；LF3組同LF2組；對照組同LF1組（圖3－A）。

在心臟中，LF1、LF3和對照組的GSH?Px基因表達量最高，其次為SOD、TRX1基因，GRX1基因表達量最低，而LF2組的TRX1基因表達量最低。其中LF1組GSH?Px和SOD基因表達量極顯著高于GRX1和TRX1基因（P＜0．01）；LF2組GSH?Px基因表達量顯著高于TRX1基因（P＜0．05）；LF3 組GSH?Px和SOD基因表達量極顯著高于GRX1基因（P＜0．01），GSH?Px基因表達量顯著高于TRX1基因（P＜0．05）；對照組GSH?Px基因表達量極顯著高于GRX1基因（P＜0．01），顯著高于TRX1基因（P＜0．05），SOD基因表達量顯著高于GRX1基因（P＜0．05）（圖3－B）。

圖3　GRX1、TRX1、SOD和GSH?Px基因在滇撒配套系仔豬相同組織（肝臟／心臟）中的表達差異Fig．3　Differences of expression levels of GRX1，TRX1，SOD and GSH?Px genes in the same tissue（liver／heart）of Diansa piglets

3　討 論

3．1 LF對滇撒配套系斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響

Wang等［10］在斷奶仔豬（杜洛克×長白×約克夏）飼糧中添加1．0 g／kg的LF，30 d后發(fā)現(xiàn)，飼喂LF的仔豬ADG和ADFI分別比對照組極顯著和顯著提高34．0%和17．0%，料重比和腹瀉率分別顯著降低12．8%和66．2%，李美君等［11］和伍喜林［12］在斷奶仔豬飼糧中添加LF，也得到類似的結(jié)果。這些試驗均與本試驗結(jié)果一致。以上試驗均證實，LF可通過免疫調(diào)節(jié)、促鐵離子吸收等途徑改善腸黏膜形態(tài)，刺激腸道細胞生長，使腸絨毛長度增長，表面積增大；同時抑制腸道需鐵有害菌的生長，增加益生菌數(shù)量，保護腸道功能，從而降低斷奶仔豬腹瀉率，提高斷奶仔豬的生長性能［10－11］。本試驗在滇撒配套系斷奶仔豬飼糧中添加125、250和500 mg／kg的LF，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，3組均能在不同程度上夠改善斷奶仔豬的生長性能，而其中以250 mg／kg添加組得到的效果最佳。

3．2 LF對滇撒配套系斷奶仔豬血清抗氧化指標的影響

李婷等［13］研究表明，LF對脂質(zhì)過氧化、羥自由基和二苯基苦酰肼基自由基（DPPH）這3種自由基有明顯的清除作用。Kruzel等［14］也發(fā)現(xiàn)LF可以減輕脂多糖（LPS）誘導的線粒體功能障礙，減少氧化應激和氧化所致的DNA損傷。張凱［15］在早期斷奶仔豬飼糧中添加LF，500和700 mg／kg添加組與對照組相比，血清中MDA含量顯著降低，T?SOD和GSH?Px活力顯著增加。本試驗在斷奶仔豬飼糧中添加不同水平的LF，檢測血清中抗氧化指標，發(fā)現(xiàn)當添加量為125 mg／kg時，T?SOD、GSH?Px活力和T?AOC升高，MDA含量下降，當添加水平提高到250 mg／kg時，作用效果達到最大，但繼續(xù)增加LF（添加量500 mg／kg），T?SOD、GSH?Px活力和T?AOC下降，MDA含量增加。推測可能是由于LF添加超過最適水平后，自由基被大量清除，抗氧化酶活力也隨之降低，也可能是LF的過量添加抑制了抗氧化酶活力。羅芳［16］提取牛初乳中的LF，體外測定LF的T?AOC及羥基自由基和超氧自由基的清除率，發(fā)現(xiàn)在LF水平在2～6 mg／mL范圍時，T?AOC及羥基自由基和超氧自由基的清除率隨LF水平增大而增大，而當水平在6～10 mg／mL范圍內(nèi)時，變化就不太明顯。這與本試驗結(jié)果一致。另有研究表明，LF 對Fe3＋、Cu2＋、Co3＋、Mn2＋等分子大小相近的金屬都有結(jié)合作用［15，17－18］，促進微量金屬元素在腸道的吸收，而這些微量元素作為T?SOD和GSH?Px等抗氧化酶的重要輔酶、輔基或酶激活劑，可以顯著提高抗氧化酶活力。因此LF可以降低脂質(zhì)氧化和氧自由基的產(chǎn)生，提高機體的抗氧化能力，維持機體健康生長。

3．3 LF對滇撒配套系斷奶仔豬組織抗氧化基因表達量的影響

3．3．1 LF對GRX1和TRX1基因在組織中表達的影響

GRX和TRX分別是GRX酶系統(tǒng)和TRX酶系統(tǒng)的重要成員，通過調(diào)控巰基和二硫鍵之間的轉(zhuǎn)換來改變細胞內(nèi)的氧化還原狀態(tài)，使蛋白質(zhì)巰基免受氧化損傷，從而實現(xiàn)對蛋白質(zhì)功能的調(diào)控［19－20］。此外GRX還能特異地修復某些蛋白質(zhì)和酶，如肌動蛋白（actin）、酪氨酸羥化酶（tyrosine hydroxylase，TH）、肌酸激酶（creatine kinase，CK）等的生物學活力來發(fā)揮抗氧化作用。本試驗通過在滇撒配套系仔豬飼料中添加不同水平的LF，發(fā)現(xiàn)當添加量為125 mg／kg時，TRX1基因在心臟和肝臟中的表達量達到最高，繼續(xù)添加，其表達量降低。添加量為250 mg／kg時，GRX1基因表達量最高，繼續(xù)添加，其表達量降低。說明TRX1基因?qū)F的敏感度高于GRX1基因，即TRX1基因最適的LF添加水平低于GRX1基因。Gallogly等［21］發(fā)現(xiàn)，在氧化應激狀態(tài)下，細胞中的GRX1基因表達量會增加，抑制GRX1基因表達時，氧化性的細胞會增加。說明在氧化應激條件下，GRX1和TRX1的基因表達量會增加。飼糧中加入一定量的LF，能進一步誘導其表達量上調(diào)。安清聰?shù)龋?2］研究報道，培養(yǎng)的胎兒皮膚成纖維細胞隨著維生素E水平的增大，GRX1、TRX1基因表達量增高，濃度大于80 μg／mL時，其表達量呈下降趨勢。維生素E與LF都能夠阻斷脂質(zhì)過氧化的達到抗氧化作用，兩者作用機理相似。試驗添加適量維生素E能夠誘導GRX1、TRX1基因表達，但添加量超過最適水平，其表達量會隨之下調(diào)，這與本試驗結(jié)果一致。

3．3．2 LF對SOD和GSH?Px基因在組織中表達的影響

SOD和GSH?Px一起構(gòu)成體內(nèi)重要的抗氧化系統(tǒng)，保護細胞膜及細胞內(nèi)的核酸免受自由基的攻擊。本試驗在斷奶仔豬飼糧中添加不同水平的LF，檢測到在肝臟中，3個添加水平（125、250和500 mg／kg）的SOD基因的表達量分別比對照組高出55．71%、79．24%和50．84%。而在心臟中，SOD基因表達量則是先升高后降低。GSH?Px基因在心臟和肝臟中的表達量變化與SOD基因類似：肝臟中，125、250和500 mg／kg 3組的GSH?Px基因表達量分別比對照組高出56．13%、74．56%和43．11%。3個試驗組的這2個基因在心臟中的表達量都高于肝臟，與本試驗中GRX1和TRX1基因表達結(jié)果一致。Xu等［23］在仔豬飼料中添加牛LF，研究發(fā)現(xiàn)，500 mg／kg添加組能顯著增加血清中銅／鋅SOD（Cu／Zn?SOD）、GSH?Px活力和T?AOC及Cu／Zn?SOD和GSH?Px基因在肝臟中的表達量，降低血清MDA含量，這與本試驗結(jié)果一致。當機體發(fā)生氧化應激時，自由基增加，刺激機體SOD和GSH?Px基因表達，此時外源地添加一定量的LF，能進一步增加其表達量。且在本試驗中，組織SOD和GSH?Px基因表達量的上調(diào)與血清中相應酶的活性增加的結(jié)果是一致的。

綜上，在滇撒配套系斷奶仔豬飼糧中添加適宜水平LF，可改善仔豬的生長性能，改善血液抗氧化指標，提高仔豬抗氧化能力。

4　結(jié) 論

①添加適宜LF可提高滇撒配套系斷奶仔豬的ADG和ADFI，降低仔豬料重比和腹瀉率，改善仔豬生產(chǎn)性能。綜合仔豬生產(chǎn)性能和血液抗氧化參數(shù)結(jié)果，推薦LF適宜添加量為250 mg／kg。

②LF可改善滇撒配套系斷奶仔豬血清T?SOD、GSH?Px活力，降低血清MDA含量，提高仔豬抗氧化能力。

③LF可以提高滇撒配套系斷奶仔豬心臟和肝臟中抗氧化基因GRX1、TRX1、SOD和GSH?Px基因的表達，提高仔豬抗氧化能力。

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Effects of Lactoferrin on Growth Performance，Serum Antioxidant Indices and Tissue Antioxidant Gene Expressions of Diansa Weaned Piglets

AN Qingcong LI Cenxi

?

ZHANG Chunyong PAN Hongbin LI Meiquan XU Nana CHEN Kelin GUO Rongfu

??

（責任編輯 王智航）

（Yunnan Key Laboratory of Animal Nutrition and Feeds，Yunnan Agricultural University，Kunming 650201，China）

?Contributed equally

??Corresponding author，professor，E?mail：rongfug＠163．com

Abstract：This experiment was conducted to investigate the effects of lactofferin（LF）on growth perform?ance，serum antioxidant indices and tissue antioxidant gene expressions in Diansa weaned piglets．A total of 192 Diansa weaned piglets at the age of（28±2）days were randomly divided into 4 groups with 6 replicates in every group and with 8 piglets in every replicate．The control group was fed a basal diet，and LF1，LF2 and LF3 groups were respectively supplemented with 125，250 and 500 mg／kg LF in the basal diet．Average daily weight（ADG），average daily feed intake（ADFI），feed to gain ratio（F／G）and diarrhea rate were deter?mined after feeding 42 days．Kits were used for detecting serum antioxidant indices：total antioxidant capacity （T?AOC），total superoxide dismutase（T?SOD）activity，malondialdehyde（MDA）content and glutathione peroxidase（GSH?Px）activity．The expression levels of glutraredoxin 1（GRX1），thioredoxin 1（TRX1），su?peroxide dismutase（SOD）and GSH?Px genes in heart and liver were detected by real?time quantitative PCR （RT?qPCR）．The results showed as follows：1）compared with control group，LF2 and LF3 groups signifi?cantly improved ADG and ADFI（P＜0．05），LF1 and LF2 groups significantly（P＜0．05）reduced F／G，and LF2 and LF3 groups significantly reduced dairrhea rate（P＜0．05）．2）In serum，compared with control group，T?SOD activity were significantly increased in LF1（P＜0．05），LF2（P＜0．01）and LF3（P＜0．05）groups，GSH?Px activity and T?AOC in LF2 group were significantly increased（P＜0．05），and the contents of MDA in LF2 and LF3 groups were significantly decreased（P＜0．05）．3）Compared with control group，the expression levels of GRX1，SOD and GSH?Px genes in heart and liver were increased in LF1 and LF2 groups．In liver，the difference of GSH?Px gene in LF1 group was significant（P＜0．05），and those of GRX1，SOD and GSH?Px genes in LF2 group were extremely significant（P＜0．01）．TRX1 gene expression level in LF1 group was extremely significantly increased（P＜0．01）．The expression levels of GRX1 and TRX1 genes in both tissues，SOD and GSH?Px genes in heart in LF3 group were decreased．a(chǎn)nd the differences of GRX1，TRX1 and SOD genes in heart was extremely significant（P＜0．01）．The results suggest that the additon of LF （250 mg／kg was the best in this study）with a certain amount in diets can improve growth performance of weaned piglets，and enhance antioxidant capacity of piglets by improving the serum antioxidant indices and up?regulating antioxidant gene expressions．［Chinese Journal of Animal Nutrition，2015，27（7）：2018?2026］

Key words：Diansa weaned piglet；lactofferim；growth performance；serum antioxidant indice；antioxidant gene

作者簡介：安清聰（1968—），女，甘肅靖遠人，副教授，主要從事動物營養(yǎng)與免疫分子基礎研究。E?mail：naccynaccy＠163．com

基金項目：云南省重大科技專項基金項目（201212ZA018）；云南省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設（云財教【2013】160＃）

收稿日期：2015－02－05

doi：10．3969／j．issn．1006?267x．2015．07．006

文章編號：1006?267X（2015）07?2018?09

文獻標識碼：A

中圖分類號：S828