Fe(Ⅲ)分光光度法測定鹽酸氯丙嗪

鄒大喜，黃選忠

(湖北省興山縣疾病預(yù)防控制中心，湖北興山 443711)

Fe(Ⅲ)分光光度法測定鹽酸氯丙嗪

鄒大喜，黃選忠

(湖北省興山縣疾病預(yù)防控制中心，湖北興山 443711)

建立了以Fe(Ⅲ)為氧化劑分光光度法測定鹽酸氯丙嗪的方法。在鹽酸介質(zhì)中，F(xiàn)e(Ⅲ)將鹽酸氯丙嗪氧化形成一種紅色化合物，該化合物的最大吸收波長位于525 nm，其摩爾吸光系數(shù)ε=1.05×104L／(mol·cm)。鹽酸氯丙嗪的質(zhì)量濃度在0～20.0 mg／L范圍內(nèi)與體系的吸光度呈良好的線性關(guān)系，線性相關(guān)系數(shù)r=0.999 2，加標回收率為94.0%～100.4%，測定結(jié)果的相對標準偏差為0.55%～1.42%(n=6)。該法靈敏度較高、選擇性及重現(xiàn)性良好，可用于藥品和血清中鹽酸氯丙嗪的測定。

Fe(Ⅲ)；分光光度法；鹽酸氯丙嗪

鹽酸氯丙嗪(CPZ)屬于含叔胺基的吩噻嗪類藥物，具有多方面的藥理作用，安定作用較強，臨床用于治療精神分裂癥和狂躁癥，亦具有鎮(zhèn)吐［1］和降血壓的功效［2］。由于鹽酸氯丙嗪的硫氮雜蒽母核中含有的S原子具有還原性，可被空氣中的氧緩慢氧化成紅色的游離基［3］從而使藥物變質(zhì)，同時該藥血藥濃度在500～700 ng／mL時治療有效，但超過700 ng／mL時有潛在中毒可能［4］，因此為了保證藥物品質(zhì)及防止藥物中毒，需要準確測量鹽酸氯丙嗪的含量。

目前，鹽酸氯丙嗪的測定方法主要有滴定法、分光光度法［2-3，5］、熒光光度法［6］、氣相色譜法［7］、高效液相色譜法［4，8］和化學(xué)發(fā)光法［9］等，其中光度法或靈敏度較低或操作費時，而氣相色譜法、高效液相色譜法和化學(xué)發(fā)光法等需要專門的儀器設(shè)備，使其應(yīng)用受到了限制。在光度法中鐵氰化鉀-Fe(Ⅲ)-CPZ 體系［2］和鄰二氮菲-Fe(Ⅲ)-CPZ 體系［3］測定的是Fe(Ⅲ)-CPZ 體系中的還原產(chǎn)物Fe(Ⅱ)，文獻［5］利用CPZ與剛果紅形成締合物來定量測定鹽酸氯丙嗪。而利用Fe(Ⅲ)-CPZ體系的氧化產(chǎn)物來定量測定鹽酸氯丙嗪尚未見報道。筆者實驗發(fā)現(xiàn)，在酸性條件下，F(xiàn)e(Ⅲ)可加速鹽酸氯丙嗪氧化反應(yīng)并定量生成紅色化合物，依此建立了以Fe(Ⅲ)為氧化劑光度法測定鹽酸氯丙嗪的方法，該方法與鐵氰化鉀-Fe(Ⅲ)-CPZ 體系和鄰二氮菲-Fe(Ⅲ)-CPZ體系相比，具有簡便快速、靈敏度高的特點，將其應(yīng)用于鹽酸氯丙嗪片劑和血清中鹽酸氯丙嗪含量的測定，結(jié)果可靠。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

紫外／可見分光光度計：TU-1810SPC型，北京普析通用儀器有限公司；

鹽酸氯丙嗪化學(xué)對照品：中國藥品生物制品檢定所；

鹽酸氯丙嗪(CPZ)標準溶液：1 000.0 mg／L，稱取于105℃干燥2 h的鹽酸氯丙嗪化學(xué)對照品0.100 0 g，用超純水溶解定容至100 mL，現(xiàn)用現(xiàn)配，使用前稀釋成100.0 mg ／L的標準使用溶液；

鹽酸溶液：0.10 mol／L；

FeCl3水溶液：0.04 mol／L，現(xiàn)用現(xiàn)制；

FeCl3鹽酸溶液：0.04 mol／L，溶劑為0.140 mol／L的鹽酸；

實驗所用試劑均為分析純；

實驗用水為超純水(電阻率為18.25 ΜΩ·cm)。

1.2 實驗方法

分別移取含有0，25.0，50.0，75.0，100.0，150.0，200.0 μg 鹽酸氯丙嗪的標準溶液或適量樣品溶液(含鹽酸氯丙嗪小于200 μg)于10 mL比色管中，加入純水至7.0 mL左右，加入FeCl3鹽酸溶液2.50 mL，用水稀釋至標線，混勻，配制成質(zhì)量濃度為0，2.5，5.0，7.5，10.0，15.0，20.0 μg／mL的鹽酸氯丙嗪系列標準溶液及樣品溶液。以試劑空白作參比，用1 cm比色皿測量525 nm波長處的吸光度，以工作曲線法測定鹽酸氯丙嗪含量。

2 結(jié)果與討論

2.1 吸收光譜

按照1.2方法分別對10，15 mg／L鹽酸氯丙嗪標準溶液顯色后，在分光光度計上自動快速掃描，繪制吸收光譜，見圖1。

圖1 吸收光譜

由圖1可知，在弱酸性條件下鹽酸氯丙嗪氧化產(chǎn)物的最大吸收波長(λmax)位于525 nm波長處，試劑空白的λmax位于360 nm波長處，Δλ=165 nm。10 mg／L和15 mg／L鹽酸氯丙嗪氧化產(chǎn)物的λmax完全一致，即最大吸收波長不隨濃度的變化而改變。

2.2 Fe(Ⅲ)的濃度及FeCl3溶液用量

在室溫條件下，鹽酸氯丙嗪分子中的S 可被空氣中的氧緩慢氧化成紅色的化合物，而Fe(Ⅲ)能加速該氧化反應(yīng)，并隨著Fe(Ⅲ)濃度的增加鹽酸氯丙嗪紅色氧化產(chǎn)物的吸光度逐漸升高，當(dāng)0.04 mol／L 的FeCl3溶液用量超過2.0 mL時其吸光度達最大值，且其用量在2.0～3.0 mL時吸光度基本穩(wěn)定。實驗選用2.50 mL FeCl3溶液，此時顯色液中Fe(Ⅲ)濃度為0.010 mol／L。

2.3 酸度的影響及鹽酸溶液的用量

分別用磷酸、硫酸、鹽酸進行了酸度試驗，結(jié)果表明，適量的鹽酸可增加鹽酸氯丙嗪氧化反應(yīng)速度及產(chǎn)物的吸光度；相同濃度的磷酸對該反應(yīng)無加速作用且表現(xiàn)出不同程度的抑制作用，這是因為磷酸可與Fe(Ⅲ)生成無色穩(wěn)定的絡(luò)合物Fe(HPO4)2-，使Fe(Ⅲ)氧化鹽酸氯丙嗪的能力降低［2］；硫酸對該反應(yīng)無明顯的加速作用。0.10 mol／L的鹽酸溶液用量在3.0～4.0 mL時體系有最大且穩(wěn)定的吸光度，實驗選用3.50 mL的鹽酸溶液，此時顯色液中H+濃度為0.035 mol／L，pH≈1.45。

2.4 鹽酸和FeCl3水溶液混合加入試驗

在鹽酸氯丙嗪溶液中分別加入FeCl3溶液2.50 mL和鹽酸溶液3.50 mL與一次加入 FeCl3鹽酸溶液2.50 mL時進行比對試驗，結(jié)果表明，兩種情況吸光度基本一致。而將FeCl3和鹽酸配制成混合溶液一次性加入，既能提高工作效率又增加了FeCl3溶液的穩(wěn)定性。

2.5 反應(yīng)機理

鹽酸氯丙嗪的硫氮雜蒽母核中含有的S原子具有還原性，可被空氣中的氧緩慢氧化成紅色的游離基［3］，由于Fe(Ⅲ)是一氧化劑，可與鹽酸氯丙嗪發(fā)生氧化-還原反應(yīng)，F(xiàn)e(Ⅲ)被還原成Fe(Ⅱ)，鹽酸氯丙嗪被氧化成紅色的游離基，因而Fe(Ⅲ)可加速該氧化反應(yīng)。由于本體系中Fe(Ⅲ)濃度為0.010 mol／L，在pH≥2的情況下即可形成Fe(OH)3膠體［10］，試驗中加入鹽酸溶液可使顯色液的pH值控制在1.45左右，從而防止Fe(Ⅲ)形成Fe(OH)3膠體，提高了Fe(Ⅲ)氧化鹽酸氯丙嗪的能力。除Fe(Ⅲ)外，硫酸鈰銨等氧化劑也可將鹽酸氯丙嗪氧化為紅色的游離基［11］。

2.6 線性范圍及體系的穩(wěn)定性

對1.2中系列標準溶液進行測定，以吸光度對鹽酸氯丙嗪的質(zhì)量濃度進行線性回歸，鹽酸氯丙嗪的質(zhì)量濃度在0～20.0 mg／L范圍內(nèi)符合比耳定律，工作曲線方程為A=0.037 0+0.026 1c，r=0.999 2。由曲線斜率法計算得表觀摩爾吸光系數(shù)為ε=1.05×104L／(mol·cm)。若以吸光度為0.01計，方法的檢出限為0.38 mg／L。

在選擇的實驗條件下，鹽酸氯丙嗪的氧化反應(yīng)可立即完成，其氧化產(chǎn)物的吸光度在2 min內(nèi)基本穩(wěn)定，圖2為10 mg／L鹽酸氯丙嗪在525 nm波長處的吸光度隨時間的變化曲線。

圖2 體系的穩(wěn)定性

2.7 共存物質(zhì)的影響

按實驗方法對10.0 mg／L的鹽酸氯丙嗪進行測定，當(dāng)相對誤差控制在±5%以內(nèi)時，考察了常見離子和藥物賦形劑的干擾情況。結(jié)果表明，50倍的淀粉、葡萄糖、乳糖、氨基乙酸、丙氨酸、笨丙氨酸、精氨酸、山梨酸鉀；10倍的K+，Na+，Ca2+，Mg2+，NO-，3SO42-；5倍 的 Zn2+，Mn2+，Cd2+，Al3+，Cu2+，Co2+，Ni2+，Pb2+，Hg2+；1倍的F-對測定結(jié)果無明顯的影響，說明該方法的選擇性良好。

2.8 精密度試驗

用本法對含有50.0 μg和100.0 μg鹽酸氯丙嗪的標準溶液平行測定6次，計算測定結(jié)果的相對標準偏差，結(jié)果見表1。由表1可知，兩種標準溶液測定結(jié)果的相對標準偏差分別為1.42%和0.55%，說明方法的精密度良好。

表1 精密度試驗結(jié)果

2.9 樣品分析及回收試驗

將8片鹽酸氯丙嗪片劑(標示量為25 mg／片)用水輕而快地洗去糖衣(以片劑表面糖衣剛?cè)芙馔隇槎?，棄去洗滌液，加水研磨溶解后定容至200 mL。過濾，濾去不溶物，取濾液(棄掉30 mL初濾液)10.0 mL用水稀釋至100 mL，得稀釋液。取稀釋液1.00～1.50 mL(含鹽酸氯丙嗪小于200 μg)和1∶20～1∶5稀釋的血清1.00 mL，按1.2方法顯色后，測定鹽酸氯丙嗪的量，同時做標準加入回收試驗，結(jié)果見表2。由表2可知，本法測定結(jié)果結(jié)果與標示值相吻合，加標回收率為94.0%～100.4%。

表2 樣品分析及回收試驗結(jié)果

3 結(jié)語

以Fe(Ⅲ)為氧化劑光度測定鹽酸氯丙嗪，方法靈敏度較高，選擇性及重現(xiàn)性良好，操作簡便快速，測定結(jié)果準確，可用于片劑和血清中鹽酸氯丙嗪含量的測定。

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Determination of Chlorpromazine Hydrochloride by Spectrophotometry with Fe(Ⅲ)

Zou Daxi， Huang Xuanzhong
(Prevention and Health Protection Centre of Hubei Xingshan County， Xingshan 443711， China)

Spectrophotometry was established for the determination of chlorpromazine hydrochloride with Fe(Ⅲ) as oxidizing agent. In the medium of hydrochloric acid，chlorpromazine hydrochloride was oxidied by Fe(Ⅲ) to form a red compound，the maximum absorption wavelength of the compound was 525 nm，the molar absorptivity was 1.05×104L／(mol·cm). The concentration of chlorpromazine hydrochloride was linear with absorbance in the range of 0-20.0 mg／L, and the correlation coefficient was 0.999 2. The recovery rate was 94.0%-100.4%，the relative standard deviation of detection results ranged from 0.55% to 1.42% (n=6). The method had high sensitivity，good selectivity and reproducibility，it can be used for the determination of chlorpromazine hydrochloride in drug and serum.

Fe(Ⅲ); spectrophotometry; chlorpromazine hydrochloride

O657.3

：A

：1008-6145(2015)03-0059-03

10.3969／j.issn.1008-6145.2015.03.016

聯(lián)系人：鄒大喜；E-mail: zoudaxee@qq.com

2015-01-12