超高效液相色譜-二極管陣列檢測-串聯(lián)質(zhì)譜法測定茶葉中15 種黃酮醇糖苷類化合物

王智聰 ， 沙躍兵， 余笑波， 梁月榮

（1. 浙江省計(jì)量科學(xué)研究院，浙江 杭州310018；2. 浙江大學(xué)茶葉研究所，浙江 杭州310058）

我國具有豐富的茶葉資源，飲茶及茶文化已有數(shù)千年的歷史。茶不僅具有提神解渴的功效，而且具有良好的醫(yī)藥保健功效，有“茶醫(yī)百病”之說。茶葉中含有豐富的黃酮醇糖苷類化合物?，F(xiàn)代研究表明，黃酮醇糖苷類化合物具有顯著的抗氧化、抗癌、抗動(dòng)脈硬化、預(yù)防心血管疾病和保護(hù)肝臟等多種生理功能［1，2］。茶葉中的黃酮糖苷類化合物主要包括楊梅素糖苷、槲皮素糖苷和山柰素糖苷等［3，4］，在黃酮醇母體結(jié)構(gòu)C 環(huán)3 位連接的糖鏈可以是單糖，如葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖等，也可以是由其組成的二糖或三糖等（見圖1）。

黃酮醇糖苷類化合物是茶湯苦澀味和色澤形成的重要因子，對(duì)茶葉品質(zhì)非常重要［5］。Scharbert等［5］研究指出，黃酮醇糖苷類化合物不僅是紅茶澀味的主要呈味物質(zhì)，對(duì)咖啡因的苦味也有一定的增效作用；黃酮醇糖苷類化合物雖然在茶葉中含量相對(duì)較低，但其呈味閾值非常低，如槲皮素-3-葡萄糖-鼠李糖二糖糖苷（Q-GRh）的呈味閾值是表沒食子兒茶素沒食子酸酯的一萬九千分之一，是茶黃素的一萬六千分之一。

黃酮醇糖苷類化合物的定量分析主要有液相色譜-紫外檢測和液相色譜-質(zhì)譜檢測等方法［6-10］，而定性主要通過液相色譜-紫外檢測-質(zhì)譜聯(lián)用以及核磁共振檢測等方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)確認(rèn)［11-21］。如Wu等［7，11］采用常規(guī)色譜柱測定了茶葉中的黃酮醇糖苷類化合物，分析時(shí)間大于60 min；Jiang 等［6］采用超高效液相色譜法測定，分析時(shí)間縮短，分離能力也增強(qiáng)，如常規(guī)液相色譜無法分離的Q-GRh 和山柰素-3-葡萄糖-鼠李糖-葡萄糖三糖糖苷（K-GRhG）得到了較好的分離，但僅分析了茶葉中的8 種黃酮醇糖苷類化合物。采用液相色譜-紫外檢測-質(zhì)譜聯(lián)用方法不僅能提供紫外光譜信息，還可以測定化合物的相對(duì)分子質(zhì)量和質(zhì)譜碎片離子，綜合進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析；同時(shí)，質(zhì)譜具有靈敏度高、抗干擾能力強(qiáng)等特點(diǎn)，已成為復(fù)雜基質(zhì)組分測定的重要方法。本文采用超高效液相色譜-二極管陣列檢測-串聯(lián)質(zhì)譜（UPLCPDA-MS／MS）方法，結(jié)合紫外光譜、質(zhì)譜參數(shù)以及色譜保留規(guī)律等鑒定了茶葉中的15 種黃酮醇糖苷類化合物，其結(jié)構(gòu)如圖1 和表1 所示。

圖1 黃酮醇糖苷類化合物的結(jié)構(gòu)Fig.1 Structures of flavonol glycosides

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器、試劑與材料

ACQUITY 超高效液相色譜-質(zhì)譜系統(tǒng)，配二極管陣列檢測器和串聯(lián)四極桿質(zhì)譜檢測器（美國Waters公司）；AG285 型精密電子天平（瑞士Mettler Toledo 公司）；5810R 型高速冷凍離心機(jī)（德國Eppendorf 公司）；Milli-Q 超純水系統(tǒng)（美國Millipore 公司）；KQ-100DE 型數(shù)控超聲波清洗器（昆山超聲儀器有限公司）。

甲醇和乙腈為色譜純，購自德國Merck 公司；甲酸為分析純，購自Sigma-Aldrich 公司；實(shí)驗(yàn)用水為Milli-Q 制備的超純水；綠茶（西湖龍井，杭州茶廠有限公司）和紅茶（滇紅茶，云南省鳳慶縣佰藝茶廠）購自當(dāng)?shù)爻?；?biāo)準(zhǔn)品槲皮素-3-葡萄糖-鼠李糖二糖糖苷（Q-GRh）、槲皮素-3-半乳糖糖苷（Q-Ga）、槲皮素-3-葡萄糖糖苷（Q-G）、山柰素-3-葡萄糖-鼠李糖二糖糖苷（K-GRh）、山柰素-3-葡萄糖糖苷（KG）購自Sigma-Aldrich 公司。

表1 綠茶和紅茶中的15 種黃酮醇糖苷類化合物Table 1 Fifteen flavonol glycosides in green and black teas

1.2 實(shí)驗(yàn)條件

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取Q-GRh 標(biāo)準(zhǔn)品，加入甲醇超聲溶解，配制1 000 mg／L 的母液；用50% （v／v）甲醇水溶液稀釋上述母液，配制質(zhì)量濃度分別為0.1、0.2、0.5、1.0 和2.0 mg／L 的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.2.2 供試樣品的制備

取適量綠茶及紅茶，粉碎，過篩（篩孔尺寸：0.9 mm×0.9 mm），精確稱取篩下物1.5 g 于50 mL 帶蓋螺口玻璃試管中，分別加入30 mL 80% （v／v）甲醇水溶液，超聲萃取15 min，以4 000 r／min 離心15 min，取上清液1 mL，加入4 mL 水稀釋，稀釋液用0.22 μm 聚四氟乙烯（PTFE）針式過濾器過濾后供UPLC-PDA-MS／MS 分析，每個(gè)樣品平行制備兩份。

1.2.3 色譜條件

Waters ACQUITY UPLC HSS T3 色譜柱（150 mm×2. 1 mm，1.7 μm）；柱溫為35 ℃；自動(dòng)進(jìn)樣器溫度為15 ℃；紫外檢測波長為370 nm；進(jìn)樣體積為2 μL；流動(dòng)相A 為含0.1% （v／v）甲酸的水溶液；流動(dòng)相B 為含0.1% （v／v）甲酸的乙腈；流速為0.3 mL／min。梯度洗脫程序：0 ～1 min，0.1% B；1 ～2 min，0.1% B ～0.3% B；2 ～3 min，0.3% B ～0.5%B；3 ～4 min，0.5% B ～2% B；4 ～5 min，2% B ～5% B；5 ～8 min，5% B ～15% B；8 ～12 min，15%B ～17% B；12 ～15 min，17% B ～24% B；15 ～17 min，24% B ～26% B；17 ～20 min，26% B ～35% B；20 ～21 min，35% B ～60% B；21 ～22 min，60% B～95% B；22 ～23 min，95% B；23 ～23.1 min，95% B ～0.1% B；23.1 ～26 min，0.1% B。

1.2.4 質(zhì)譜條件

采用電噴霧離子（ESI）源，正離子模式；毛細(xì)管電壓為3.0 kV，離子源溫度為150 ℃；脫溶劑氣（氮?dú)猓囟葹?00 ℃；霧化氣（氮?dú)猓┝魉贋?00 L／h，錐孔氣（氮?dú)猓┝魉贋?0 L／h，碰撞氣（氬氣）流速為0.13 mL／min；在化合物的定性識(shí)別中，對(duì)各目標(biāo)組分進(jìn)行子離子掃描，掃描范圍為m／z 100 ～900，碰撞電壓為35 V，裂解電壓為12 V；在化合物的定量分析中，采用多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）方式，母離子均為加氫離子［M＋H］＋，子離子均為脫糖苷的苷元離子，楊梅素糖苷類化合物的子離子均為m／z 319，槲皮素糖苷類化合物的子離子均為m／z 303，山柰素糖苷類化合物的子離子均為m／z 287。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜分離

茶葉成分復(fù)雜，對(duì)茶湯滋味和色澤起重要作用的非揮發(fā)性組分包含糖類、氨基酸類、有機(jī)酸類、兒茶素類、黃酮醇糖苷類、茶黃素類等化合物，為了有效地進(jìn)行組分分離，應(yīng)當(dāng)選擇較長的色譜柱。實(shí)驗(yàn)中采用粒徑為1.7 μm、柱長為150 mm 的色譜柱，各組分得到了較好的分離；實(shí)驗(yàn)也比較了流動(dòng)相的有機(jī)相分別為甲醇和乙腈的洗脫情況，對(duì)選定的色譜柱，使用甲醇洗脫時(shí)系統(tǒng)壓力超過69 MPa，因此實(shí)驗(yàn)中采用乙腈進(jìn)行洗脫。在優(yōu)化的色譜條件下，選定的黃酮醇糖苷類化合物在12 ～18.5 min 之間全部洗脫出來，對(duì)應(yīng)的色譜圖見圖2，各組分的保留時(shí)間見表2。

圖2 綠茶和紅茶中15 種黃酮醇糖苷類化合物的色譜圖（檢測波長：370 nm）Fig.2 UPLC chromatograms of the 15 flavonol glycosides in green tea and black tea （detection wavelength：370 nm）

表2 綠茶和紅茶中黃酮醇糖苷類化合物的含量（n＝2）Table 2 Contents of flavonol glycosides in green tea and black tea （n＝2）

2.2 茶葉中黃酮醇糖苷類化合物的識(shí)別

對(duì)茶葉中黃酮醇糖苷類化合物的識(shí)別盡量通過相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比對(duì)確認(rèn)，如色譜保留時(shí)間、一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜等參數(shù)；對(duì)無法得到市售標(biāo)準(zhǔn)品的一些化合物，參考紫外吸收光譜，通過相對(duì)分子質(zhì)量及二級(jí)質(zhì)譜碎片離子進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析，與其結(jié)構(gòu)相似的化合物進(jìn)行比較，并與參考文獻(xiàn)進(jìn)行比對(duì)確認(rèn)。

如峰7、9、10、13 和15，其色譜保留時(shí)間、相對(duì)分子質(zhì)量和二級(jí)質(zhì)譜碎片離子在相同的實(shí)驗(yàn)條件下，均與其對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品相似，因此可分別識(shí)別為Q-GRh、Q-Ga、Q-G、K-GRh 和K-G。

峰1、2 和3，其對(duì)應(yīng)的分子離子峰［M＋H］＋分別為m／z 627、481 和481，初步判斷為M-GRh、M-Ga和M-G，測定的相對(duì)分子質(zhì)量與其理論相對(duì)分子質(zhì)量相匹配；峰1 的特征子離子碎片為m／z 465 和319，分別為失去葡萄糖的碎片離子［M-G］＋和失去蕓香糖（葡萄糖＋鼠李糖）的碎片離子［M-G-Rh］＋；峰2 和峰3 的特征子離子碎片為m／z 319，為失去半乳糖的碎片離子［M-Ga］＋或失去葡萄糖的碎片離子［M-G］＋。對(duì)黃酮醇糖苷化合物中含有葡萄糖或半乳糖的異構(gòu)體，在反相液相色譜分離中，一般含半乳糖的黃酮醇糖苷化合物的色譜保留時(shí)間小于含葡萄糖的黃酮醇糖苷化合物的保留時(shí)間［4，12，13，15-17］，因此可識(shí)別峰2 和3 分別為M-Ga 和M-G。

采用SPSS 16.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用頻數(shù)及百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

峰14 的分子離子峰［M＋H］＋為m／z 449，初步判斷為K-Ga，且測定的相對(duì)分子質(zhì)量與其理論相對(duì)分子質(zhì)量相匹配；其特征子離子碎片m／z 287，為失去半乳糖的碎片離子［M-Ga］＋，且一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜參數(shù)與其異構(gòu)體K-G 一致，色譜保留時(shí)間小于KG，由此得到確認(rèn)。相應(yīng)的，峰12 和6 的分子離子峰［M＋H］＋分別為m／z 595 和611，其特征的子離子碎片分別為m／z 449／287 和m／z 465／303，分別為失去鼠李糖的碎片離子［M-Rh］＋（m／z 449／465）和失去半乳糖及鼠李糖的碎片離子［M-Ga-Rh］＋（m／z 287／303），并且二級(jí)質(zhì)譜參數(shù)與其異構(gòu)體K-GRh／G-GRh 極其相識(shí)，初步判斷峰12 和峰6分別為K-GaRh 和G-GaRh，且測定的相對(duì)分子質(zhì)量與其理論相對(duì)分子質(zhì)量相匹配。

峰4／5 和8／11，其對(duì)應(yīng)的分子離子峰［M＋H］＋分別為m／z 773／773 和757／757，初步判斷為槲皮素三糖糖苷（Q-GaRhG／Q-GRhG）和山柰素三糖糖苷（K-GaRhG／K-GRhG），且測定的相對(duì)分子質(zhì)量分別與其理論相對(duì)分子質(zhì)量相匹配；峰4／5 和8／11，其特征的子離子碎片為m／z 611／465／303 和595／449／287，其中碎片m／z 611 和595 分別為槲皮素三糖糖苷及山柰素三糖糖苷失去一分子葡萄糖的碎片離子［M-G］＋或失去一分子半乳糖的碎片離子［MGa］＋；碎片m／z 465 和449 分別為槲皮素三糖糖苷及山柰素三糖糖苷失去一分子葡萄糖和一分子鼠李糖的碎片離子［M-GRh］＋或失去一分子半乳糖和一分子鼠李糖的碎片離子［M-GaRh］＋；碎片m／z 303和287 分別為槲皮素三糖糖苷及山柰素三糖糖苷失去兩分子葡萄糖和一分子鼠李糖的碎片離子［MGRhG］＋或失去一分子半乳糖、一分子鼠李糖和一分子葡萄糖的碎片離子［M-GaRhG］＋。以QGRhG 為例，其對(duì)應(yīng)的二級(jí)子離子譜圖如圖3 所示，m／z 773 為分子離子峰［M＋H］＋，m／z 611 為［MG］＋碎片離子，m／z 465 為［M-GRh］＋碎片離子，m／z 303 為［M-GRhG］＋碎片離子。

圖3 Q-GRhG 的二級(jí)質(zhì)譜圖Fig.3 MS／MS spectrum of Q-GRhG

如表1 所示，黃酮醇糖苷類化合物連接不同種類及數(shù)量的糖苷，因此其色譜保留差異顯著。由于糖鏈中的羥基具有極性，三糖糖苷類化合物的極性最大，在反相液相色譜中其保留最弱，其次為二糖糖苷，最后為單糖糖苷類化合物。對(duì)楊梅素、槲皮素及山柰素糖苷類化合物，均有類似的色譜保留規(guī)律，如M-GRh＜M-Ga＜M-G，Q-GaRhG＜Q-GRhG＜Q-GaRh＜Q-GRh＜Q-Ga＜Q-G，K-GaRhG＜K-GRhG＜K-GaRh＜K-GRh＜K-Ga＜K-G。另外，在黃酮醇母體結(jié)構(gòu)的B 環(huán)中，楊梅素有3 個(gè)羥基，槲皮素有2 個(gè)羥基，山柰素有1 個(gè)羥基，因此，總體來講，楊梅素、槲皮素及山柰素糖苷類化合物的保留時(shí)間遞增；同時(shí)，對(duì)于糖苷類型相同的3 種黃酮醇糖苷化合物，其保留時(shí)間有如下規(guī)律：M-G（M-Ga）＜Q-G（M-Ga）＜K-G（MGa），M-GRh ＜Q-GRh＜K-GRh，Q-GaRh＜K-GaRh，Q-GRhG（Q-GaRhG）＜K-GRhG（K-GaRhG）。其次，如前所述，含有葡萄糖或半乳糖的黃酮醇糖苷異構(gòu)體化合物，含半乳糖的黃酮醇糖苷異構(gòu)體的保留時(shí)間小于含葡萄糖的黃酮醇糖苷異構(gòu)體的保留時(shí)間，可由槲皮素單糖糖苷的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行證明，即Q-Ga＜Q-G；因此，在同分異構(gòu)體化合物，如峰2／3、4／5、6／7、8／11、12／13 以及峰14／15 的識(shí)別過程中，均認(rèn)定保留時(shí)間較小的為含半乳糖的黃酮醇糖苷化合物。

2.3 茶葉中黃酮醇糖苷類化合物的定量方法

由于不易獲得市售的黃酮醇糖苷類標(biāo)準(zhǔn)品，文獻(xiàn)中對(duì)其定量多數(shù)采用相對(duì)定量的方法，如Price等［4］采用紫外檢測方法，以黃酮醇苷元槲皮素和山柰素為標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)其他黃酮醇糖苷進(jìn)行相對(duì)定量。由于茶葉組成化學(xué)成分復(fù)雜，各黃酮醇糖苷類化合物之間以及與其他干擾成分之間不能完全分離，并且茶葉中黃酮醇糖苷類化合物含量較低，特別是槲皮素和山柰素等游離苷元的含量非常低，在紫外檢測方法定量中以此作為標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)其他黃酮醇糖苷的定量會(huì)造成較大的誤差。鑒于質(zhì)譜的高靈敏度和高選擇性，同時(shí)由于本文研究的幾種黃酮醇糖苷的同分異構(gòu)體化合物均具有良好的色譜分離性能，因此，本文采用MRM 方式進(jìn)行定量，母離子均采用加氫離子峰［M＋H］＋，子離子均為脫糖苷的苷元離子。

由于一些黃酮醇糖苷化合物無市售的標(biāo)準(zhǔn)品，本文采用相對(duì)定量的方法，即以Q-GRh 為標(biāo)準(zhǔn)品，配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，外標(biāo)法準(zhǔn)確定量茶葉中的Q-GRh 含量；茶湯中其他黃酮醇糖苷類化合物的含量根據(jù)各自的峰面積和茶葉中Q-GRh 的峰面積和含量進(jìn)行確定（見式（1））。

式（1）中，Cj表示茶湯中其他黃酮醇糖苷化合物的含量，Ci表示茶湯中Q-GRh 的含量；Aj表示茶湯中其他黃酮醇糖苷化合物的峰面積，Ai表示茶湯中QGRh 的峰面積；Mj表示其他黃酮醇糖苷化合物的相對(duì)分子質(zhì)量，Mi表示Q-GRh 的相對(duì)分子質(zhì)量；Fj表示其他黃酮醇糖苷化合物相對(duì)于Q-GRh 的摩爾響應(yīng)系數(shù)。由于無法得到所有黃酮醇糖苷類化合物的標(biāo)準(zhǔn)品，無法準(zhǔn)確測定黃酮醇糖苷類化合物的質(zhì)譜響應(yīng)差異，因此本文均假定其他黃酮醇糖苷化合物的質(zhì)譜響應(yīng)與Q-GRh 一致，即各黃酮醇糖苷類化合物的Fj均等于1。

同時(shí)考慮茶湯樣品制備及稀釋的影響，茶葉中黃酮醇糖苷類化合物的含量按式（2）進(jìn)行計(jì)算。

2.4 茶葉中黃酮醇糖苷類化合物的含量及分布

對(duì)1.2.2 節(jié)制備的綠茶及紅茶樣品，采用1.2.3 節(jié)及1.2.4 節(jié)的色譜-質(zhì)譜方法進(jìn)行分析，采用2.3 節(jié)的定量方法進(jìn)行計(jì)算，綠茶及紅茶中黃酮醇糖苷類化合物的含量如表2 所示，結(jié)果以兩次測定的平均值及標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）來表示。

由表2 可知，綠茶和紅茶中黃酮醇糖苷類化合物的含量并不一致，其含量分布如圖4 所示。綠茶中黃酮醇糖苷類化合物的總量為8 048.6 mg／kg，紅茶中黃酮醇糖苷類化合物的總量為4 628.3 mg／kg，綠茶中的黃酮醇糖苷總量是紅茶的1.7 倍。Wu 等［7］指出，除茶葉品種外，茶葉生長環(huán)境、采摘時(shí)間、加工工藝、貯藏條件等都會(huì)對(duì)茶葉中黃酮醇糖苷類化合物的分布和含量有一定的影響。綠茶中含量較高的黃酮醇糖苷類化合物是M-Ga、M-G、Q-GaRhG、Q-GRhG、K-GaRhG 和K-GRhG，其含量占總黃酮類化合物的72.2%，而紅茶中含量較高的黃酮醇糖苷類化合物是Q-GRh、Q-G、K-GRh 和K-Ga，其含量占總黃酮的70.6%。

圖4 綠茶和紅茶中黃酮醇糖苷化合物的含量分布Fig.4 Content distributions of flavonol glycosides in green tea and black tea

綠茶和紅茶中楊梅素總糖苷、槲皮素總糖苷和山柰素總糖苷的含量分布也不盡相同。在綠茶中，楊梅素總糖苷、槲皮素總糖苷和山柰素總糖苷的含量分別占總黃酮醇糖苷含量的17. 5%、32. 8% 和49.7%；在紅茶中，其比例分別為0.7%、43.6% 和55.7%。結(jié)果如圖5 所示。

圖5 綠茶和紅茶中楊梅素、槲皮素及山柰素單糖糖苷、二糖糖苷及三糖糖苷總量的分布Fig.5 Distributions of mono-glycosides （mG），di-glycosides （dG）and tri-glycosides （tG）of myricetins （M），quercetins （Q）and kaempferols （K）in green tea and black tea

綠茶和紅茶中黃酮醇單糖糖苷、二糖糖苷及三糖糖苷以及各種黃酮醇糖苷類化合物的含量分布也有差異。綠茶和紅茶中楊梅素黃酮醇單糖糖苷總量占其楊梅素總糖苷的比例基本一致，均為92.5% 左右；綠茶和紅茶中二糖糖苷占其楊梅素總糖苷的比例也大致相同，約占7.5%。對(duì)于槲皮素黃酮醇糖苷，綠茶和紅茶中單糖糖苷總量、二糖糖苷總量及三糖糖苷總量分別占其槲皮素總糖苷的比例相差較大，如綠茶中，二糖糖苷總量占到槲皮素總糖苷的9.3%，三糖糖苷總量占62.6%；而紅茶中，兩者的比例分別為44.1% 和7.1%；顯示出較大的差異。對(duì)于山柰素黃酮醇糖苷，綠茶和紅茶中單糖糖苷總量、二糖糖苷總量及三糖糖苷總量的分布也有相似的特點(diǎn)。雖然黃酮醇類化合物的個(gè)體含量差異巨大，但在綠茶或紅茶中，槲皮素單糖糖苷總量占其槲皮素總糖苷的比例以及山柰素單糖糖苷總量占其山柰素總糖苷的比例基本一致，在綠茶中其比例分別為28.1% 和20.3%，在紅茶中其比例分別為48.8% 和40.1%；槲皮素和山柰素二糖糖苷總量及三糖糖苷總量占其總糖苷的比例在綠茶或紅茶中的分布也有類似的規(guī)律，如槲皮素和山柰素二糖糖苷總量占糖苷的比例在綠茶中分別為9.3% 和8.2%，在紅茶中分別為44.1% 和45.2%；槲皮素和山柰素三糖糖苷總量占糖苷的比例在綠茶中分別為62.6% 和71.5%，在紅茶中分別為7.1% 和14.7%。

3 結(jié)論

本文建立了超高效液相色譜-二極管陣列檢測-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜測定茶葉中黃酮醇糖苷類化合物的方法。通過與標(biāo)準(zhǔn)品比對(duì)、色譜保留規(guī)律的探討以及一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜碎片離子的結(jié)構(gòu)解析，鑒定了綠茶和紅茶中的15 種黃酮醇糖苷類化合物，包括3 種楊梅素糖苷、6 種槲皮素糖苷和6 種山柰素糖苷類化合物。含量測定采用串聯(lián)四極桿質(zhì)譜檢測方法，以Q-GRh 為標(biāo)準(zhǔn)品外標(biāo)法進(jìn)行定量，其他黃酮醇糖苷以Q-GRh 為標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行相對(duì)定量。結(jié)果表明綠茶和紅茶中黃酮醇糖苷類化合物的含量和分布差異顯著，所建立的方法可以快速鑒定和測定茶葉中的黃酮醇糖苷類化合物，對(duì)茶葉化學(xué)成分研究、制茶工藝改進(jìn)、茶湯滋色研究、黃酮醇糖苷類化合物的制備及其功效研究等具有重要意義。

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