兒童熱性驚厥血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶變化及其臨床意義研究

陳昭儀，范聯(lián)，招順萬，林業(yè)輝，周杏，陳進喜，陳國華

（佛山市婦幼保健院，廣東528000）

兒童熱性驚厥血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶變化及其臨床意義研究

陳昭儀，范聯(lián)，招順萬，林業(yè)輝，周杏，陳進喜，陳國華

（佛山市婦幼保健院，廣東528000）

目的探討神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）在熱性驚厥（FS）患兒的變化及其臨床意義。方法根據(jù)驚厥發(fā)作次數(shù)、驚厥持續(xù)時間等將研究對象分為FS組（單純FS、發(fā)作1次、抽搐時間小于15 min）、FS1組（復(fù)雜FS、發(fā)作2次、每次抽搐時間小于15 min）、FS2組（復(fù)雜FS、發(fā)作1次、抽搐時間大于15 min）和對照組，各50例。采用放射免疫分析法檢測各組患兒血清NSE水平。結(jié)果FS組患兒發(fā)作第1天及第7天血清NSE水平[分別為（15.16±1.68）、（14.96±1.65）ng/mL]與對照組[分別為（15.00±1.88）、（14.82±1.46）ng/mL]比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；FS1、FS2組患兒發(fā)作第1天血清NSE水平[分別為（19.90±3.63）、（27.44±9.34）ng/mL]明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；FS2組患兒發(fā)作第1天血清NSE水平[（27.44±9.34）ng/mL]較FS1組[（19.90±3.63）ng/mL]高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；FS2組患兒發(fā)作第7天血清NSE水平[（16.61±3.32）ng/ml]仍高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論單純FS發(fā)作后血清NSE水平正常，但不能完全排除腦神經(jīng)元損傷，復(fù)雜FS發(fā)作后有明顯腦神經(jīng)元損傷，長程發(fā)作較反復(fù)短時間發(fā)作神經(jīng)元損傷更重。

磷酸丙酮酸水合酶；驚厥，發(fā)熱性；兒童

熱性驚厥（febrile seizure，F(xiàn)S）是兒童時期最常見驚厥性疾病，也是兒科急診最常見急癥之一，主要好發(fā)于4個月至3歲兒童，7歲后很少發(fā)作，在體溫上升期（38.5℃以上）出現(xiàn)驚厥，未伴中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染或其他可導(dǎo)致驚厥的疾病，根據(jù)驚厥發(fā)作特點分為單純FS及復(fù)雜FS[1-2]。FS發(fā)作時間短，驚厥緩解后往往不遺留異常神經(jīng)系統(tǒng)體征，因此，以往觀點認為，F(xiàn)S是一種良性、自限性疾病，但近年來越來越多的學(xué)者認識到該病可能會引起暫時性或不可逆性腦損傷，Meric等[3]和屈洪艷等[4]臨床研究顯示，神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）是一種容易檢測、有高度特異性且穩(wěn)定性強的腦損傷標志物，NSE釋放量與神經(jīng)元死亡量呈正相關(guān)，血清NSE水平的改變可反映中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損程度。本研究監(jiān)測了FS患兒血清NSE水平變化，旨在探討FS患兒腦損傷程度，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2012年10月1日至2014年9月1日本院兒科住院患兒200例作為研究對象，年齡6個月至7歲。診斷標準根據(jù)醫(yī)學(xué)會兒科分會小兒神經(jīng)組1983年提出的《關(guān)于高熱驚厥診斷及治療的建議》。（1）單純FS：①首次發(fā)病年齡4個月至3歲，最后復(fù)發(fā)年齡不超過7歲；②體溫38.5℃以上；③驚厥呈全身性抽搐，伴短暫意識喪失，持續(xù)時間不超過15 min，發(fā)作后很快清醒；④無中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染及其他腦損傷；⑤可伴呼吸、消化系統(tǒng)急性感染；（2）復(fù)雜FS：符合FS診斷標準，并具備以下任何一條者即可診斷：①發(fā)作形式有部分性發(fā)作；②起病24 h內(nèi)復(fù)發(fā)1次或多次；③驚厥持續(xù)時間大于15 min。根據(jù)驚厥發(fā)作次數(shù)、驚厥持續(xù)時間等分為四組：（1）對照組為非神經(jīng)系統(tǒng)疾病患兒；（2）FS組為單純FS、發(fā)作1次、抽搐時間小于或等于15 min患兒；（3）FS1組為復(fù)雜FS、發(fā)作2次、每次抽搐時間小于或等于15 min患兒；（4）FS2組為復(fù)雜FS、發(fā)作1次、抽搐時間大于15min患兒。200例患兒中皰疹性咽峽炎46例（23.0%），幼兒急疹31例（15.5%），急性咽炎45例（22.5%），急性化膿性扁桃體炎23例（11.5%），急性支氣管炎30例（15.0%），支氣管肺炎25例（12.5%）。各組患兒年齡及性別構(gòu)成比比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 各組患兒年齡及性別構(gòu)成比（n）

1.2 方法

1.2.1 血液標本的收集各組分別于驚厥發(fā)作第1、7天經(jīng)靜脈穿刺采血4 mL，置于無熱源及內(nèi)毒素試管中，靜置10 min后3 000 r/min離心10 min分離血清。

1.2.2 檢驗方法采用放射免疫分析法，樣品中NSE與包被球上NSE抗體結(jié)合，再與125I-抗-NSE結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，用放射免疫計數(shù)方法測定包被球每分鐘計數(shù)值，即可檢測樣品中NSE水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗；各組年齡和性別構(gòu)成比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

FS組患兒發(fā)作第1、7天血清NSE水平與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；FS1、FS2組患兒發(fā)作第1天血清NSE水平明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；FS1組患兒發(fā)作第1天血清NSE水平較FS2組低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；FS2組患兒發(fā)作第7天血清NSE水平仍高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 各組患兒發(fā)作第1、7天血清NSE水平比較（±s，ng/mL）

表2 各組患兒發(fā)作第1、7天血清NSE水平比較（±s，ng/mL）

注：與對照組同時間點比較，aP＜0.05；與FS1組同時間點比較，bP＜0.05。

組別對照組FS組FS1組FS2組n 發(fā)作第1天發(fā)作第7天50 50 50 50 15.00±1.88 15.16±1.68a19.90±3.63a27.44±9.34ab14.82±1.46 14.96±1.65 14.93±1.97 16.61±3.32a

3 討論

烯醇化酶（enolase）是參與糖酵解的關(guān)鍵酶，又稱為2-磷酸甘油酸水解酶，在糖酵解途徑中將2-磷酸甘油酸轉(zhuǎn)化為磷酸烯醇式丙酮酸，烯醇化酶以二聚體形式存在，由免疫性質(zhì)不同的3個亞單位α、β、γ亞基以二聚體形式組成αα、ββ、γγ、αγ、αβ 5種同工酶，其中γγ型特異存在于神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細胞中，腦膠質(zhì)細胞核其他神經(jīng)組織不含該酶，故稱為NSE[5]。NSE相對分子質(zhì)量為7.8×104，理化性質(zhì)穩(wěn)定，受外界影響較小，占大腦組織全部可溶性蛋白的1.5%～3.0%，在健康者腦組織中水平最高，健康者體液中水平低，腦損傷時神經(jīng)細胞崩解，血腦脊液屏障破壞，該酶進入腦脊液和血液中，致血清水平升高，故血清NSE水平改變可反映中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損程度[6]。

本研究結(jié)果顯示，F(xiàn)S組患兒發(fā)作第1、7天血清NSE水平[分別為（15.16±1.68）、（14.96±1.65）ng/mL]與對照組[分別為（15.00±1.88）、（14.82±1.46）ng/mL]比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；提示單純FS患兒腦細胞損傷小，與國內(nèi)一些研究結(jié)果有所不同[7-8]，但國外學(xué)者均認為，創(chuàng)傷、卒中、缺氧、驚厥等各種原因造成的腦神經(jīng)元損傷，NSE首先進入腦脊液，隨著血腦脊液屏障和腦腦脊液屏障的改變，釋放入血，其水平升高與損傷時間有關(guān)[9]。單純FS患兒抽搐時間短，缺氧時間短，神經(jīng)元損傷相對小，血腦脊液屏障改變不大，可能是FS組患兒血清NSE水平與對照組無差異的原因，但不能完全排除單純FS患兒無腦損傷，單純FS引起腦損傷較小，檢測NSE可能不是其靈敏指標。

復(fù)雜FS患兒血清NSE水平較高可能與驚厥產(chǎn)生腦損傷的原理有關(guān)，F(xiàn)S引起腦損傷的機制較復(fù)雜，目前尚未完全闡明，綜合各方面研究，目前認為其發(fā)病機制可能與以下方面有關(guān)：（1）低氧血癥，驚厥可有嚴重換氣不足及呼吸暫停，導(dǎo)致機體缺氧和二氧化碳潴留、腦血流量下降，導(dǎo)致腦部缺血、缺氧。（2）能量和代謝異常，發(fā)熱時機體代謝率增加，驚厥時機體耗能加大，F(xiàn)S可能導(dǎo)致解偶聯(lián)蛋白表達增多，使線粒體腺苷三磷酸（adenosine triphosphoric acid，ATP）生成減少，影響了線粒體能量儲備功能，大腦能量供給缺乏[10]；腦細胞代謝率改變，細胞膜鈉、鈣泵功能下調(diào)，使Na+、Ca2+進入細胞內(nèi)，造成細胞源性腦水腫和細胞膜蛋白質(zhì)、脂質(zhì)破壞，使細胞腫脹死亡；Ca2+還可進入腦小動脈內(nèi)壁，引起腦動脈痙攣加重腦細胞缺氧缺血性損傷，導(dǎo)致腦組織發(fā)生不可逆的損害[11]，進而導(dǎo)致腦損傷。（3）神經(jīng)介質(zhì)介導(dǎo)，在FS時許多神經(jīng)介質(zhì)參與了驚厥性腦損傷的發(fā)病過程，白介素-1、興奮性氨基酸、γ氨基丁酸、一氧化氮、一氧化碳、硫化氫等氣體信號分子和Zn2+是參與驚厥性腦損傷發(fā)病過程的重要介質(zhì)，驚厥發(fā)生時大腦氧和能量缺乏使興奮性神經(jīng)介質(zhì)被誘導(dǎo)表達而抑制性神經(jīng)介質(zhì)被抑制，大腦興奮-抑制平衡的自穩(wěn)態(tài)被破壞，神經(jīng)元正常突觸成分病理性擴展，出現(xiàn)神經(jīng)元變性、壞死、丟失和再生性發(fā)芽等病理損傷[10]。閆秀梅等[12]動物實驗提示，F(xiàn)S可導(dǎo)致發(fā)育期大鼠腦損傷，并主要表現(xiàn)為神經(jīng)元凋亡與壞死2種形式，驚厥持續(xù)時間越長，腦缺氧越嚴重，神經(jīng)元凋亡與壞死也與腦缺氧時間呈正相關(guān)，從而使復(fù)雜FS患兒血清NSE水平明顯增加；本研究還發(fā)現(xiàn)，持續(xù)長時間的驚厥比反復(fù)多次短時間驚厥患兒血清NSE水平更高，而且持續(xù)時間更長，可能與缺氧預(yù)適應(yīng)有關(guān)。1990年有學(xué)者首次發(fā)現(xiàn)了短暫腦缺血顯著增強海馬神經(jīng)元對以后嚴重缺血的耐受能力，近年來，吳穹等[13]和陳麗[14]的研究也支持這一結(jié)論，提示復(fù)雜FS可能在首次驚厥產(chǎn)生短時間的缺氧后再次發(fā)生驚厥時大腦神經(jīng)元對缺氧耐受能力有所增強，從而使神經(jīng)元細胞破壞較輕，血清NSE水平相對較低，當然，在本研究中FS患兒驚厥發(fā)作次數(shù)均未超過2次，所以，如果驚厥頻率在3次以上者血清NSE水平如何尚不清楚，有待于進一步研究。

本研究未檢測腦脊液NSE水平，但有研究發(fā)現(xiàn)，無論是癲癇還是FS患兒血清NSE水平均明顯高于腦脊液NSE水平，而且二者有很強的相關(guān)性，因小兒腰穿技術(shù)難度大，家長難以接受，故建議從臨床實際出發(fā)，可以單純檢查血清NSE來評估FS患兒腦損傷情況[15]。

綜上所述，F(xiàn)S組患兒血清NSE水平與對照組無明顯差異，但并不能完全證明其未產(chǎn)生神經(jīng)元損傷，復(fù)雜FS患兒血清NES水平明顯升高，提示存在神經(jīng)元損傷，這些均提醒醫(yī)護人員對FS患兒不能掉以輕心，可根據(jù)血清NSE水平評估患兒預(yù)后，注意隨訪觀察患兒，包括智力、行為、學(xué)習(xí)能力等，并及早進行干預(yù)，降低FS后遺癥發(fā)生率。

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本刊編輯部

Clinic significance of serum neuron specific enolase change of children with febrile seizure

Chen Zhaoyi，F(xiàn)an Lian，Zhao Shunwan，Lin Yehui，Zhou Xing，Chen Jinxi，Chen Guohua
（Foshan Women and Children Health-care Hospital，F(xiàn)oshan，Guangdong 528000，China）

ObjectiveTo investigate the change and its significance of serum neuron specific enolase（NSE）in children with febrile seizure（FS）.MethodsAccording to the frequency and duration of FS，the research object was divided into four groups，i.e.group FS（simple FS，1 seizure lasting less than 15 min），group FS1（complex FS，2 seizure lasting less than 15 min），group FS2（complex FS，1 seizure lasting more than 15 min）and the control group，50 cases in each group.It was adopted radio-immuni-assay to detect the serum NSE concentration.ResultsThe difference had no statistical significance in the concentration of serum NSE on the 1st and 7th days of FS between simple group FS and the control group[（15.16±1.68），（14.96±1.65）ng/mL respectively]vs.[（15.00±1.88）ng/mL，（14.82±1.46）ng/mL respectively]（P＞0.05），the concentrations of serum NSE in the group FS1，group FS2 on the 1stday was higher than those of the control group[（19.90±3.63）ng/mL vs.（27.44±9.34）ng/mL respectively]. There was statistical significance in difference（P＜0.05）.The concentrations of serum NSE in the group FS1，group FS2，whose FS duration was over 15 min was higher than those whose FS was repeated and short（＞twice，＜15 min）[（27.44±9.34）ng/mL vs.（19.90± 3.63）ng/mL]，whose difference had statistical significance（P＜0.05）.The concentrations of serum NSE[（16.61±3.32）ng/mL]of the FS patients lasted over 15 min on the 7th day was higher than that of the control group，whose difference had statistical significance（P＜0.05）.ConclusionThe serum NSE concentration after simple FS is normal.The neurons damage should be considered. The complex FS may lead to obvious neurons damage.The degree of long-time attack is heavier to neuron damage than that of repeated short-time occurrence.

Phosphopyruvate hydratase；Seizures，febrile；Child

10.3969/j.issn.1009-5519.2015.04.006

：A

：1009-5519（2015）04-0497-03

2014-10-21）

廣東省佛山市衛(wèi)生局課題（2013170）。

陳昭儀（1978-），女，廣東陽江人，主治醫(yī)師，主要從事兒科臨床工作；E-mail：403312608@qq.com。