Caveolin-1在復(fù)發(fā)膀胱尿路上皮癌組織中的表達(dá)及臨床意義

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(1.廣東省江門市五邑中醫(yī)院病理科，廣東 江門 529031；2.廣州醫(yī)科大學(xué)衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院病理教研室；3.廣州醫(yī)科大學(xué)港灣醫(yī)院病理科；4.廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院病理科)

·臨床醫(yī)學(xué)·

Caveolin-1在復(fù)發(fā)膀胱尿路上皮癌組織中的表達(dá)及臨床意義

符青云1，周春輝2*，廖昆玲3，黃世章4

(1.廣東省江門市五邑中醫(yī)院病理科，廣東 江門 529031；2.廣州醫(yī)科大學(xué)衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院病理教研室；3.廣州醫(yī)科大學(xué)港灣醫(yī)院病理科；4.廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院病理科)

目的研究Caveolin-1在膀胱尿路上皮癌初發(fā)與復(fù)發(fā)之間表達(dá)的差異，探討Caveolin-1與膀胱尿路上皮癌復(fù)發(fā)的分子機(jī)理及具有的臨床病理意義。方法應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)23例初發(fā)膀胱尿路上皮癌和37例復(fù)發(fā)膀胱尿路上皮癌組織中Caveolin-1的表達(dá)，分析其與膀胱尿路上皮癌臨床病理特征、腫瘤復(fù)發(fā)之間的關(guān)系。

結(jié)果初發(fā)組與復(fù)發(fā)組膀胱尿路上皮癌的臨床病理特征相似，而復(fù)發(fā)組Caveolin-1的陽性表達(dá)率和表達(dá)水平顯著高于初發(fā)組(P<0.05)。結(jié)論初發(fā)與復(fù)發(fā)膀胱尿路上皮癌在Caveolin-1表達(dá)方面存在一定的差異，特定基因異?？赡苁前螂啄蚵飞掀ぐ┮讖?fù)發(fā)的分子基礎(chǔ)。

Caveolin-1； 膀胱尿路上皮癌； 復(fù)發(fā)

膀胱尿路上皮癌是泌尿系統(tǒng)僅次于腎癌的常見惡性腫瘤。膀胱尿路上皮癌具有易復(fù)發(fā)、易轉(zhuǎn)移等特征。盡管非肌層浸潤性腫瘤可以迅速通過手術(shù)來處理，但手術(shù)切除膀胱尿路上皮癌后，大部分患者會(huì)出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)，其中有16%～25%會(huì)出現(xiàn)低分化或去分化現(xiàn)象，而大約有10%的非浸潤型尿路上皮癌進(jìn)展成為浸潤型，或者進(jìn)一步發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，初次診斷為肌層浸潤型的膀胱尿路上皮癌患者中有50%出現(xiàn)了隱蔽的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[1-2]。可見，膀胱尿路上皮癌的浸潤性和術(shù)后的高復(fù)發(fā)性已成為函待解決的一大難題。膀胱腫瘤的診斷，目前主要依靠病理活組織檢查和膀胱鏡檢查，但此檢測(cè)手段為創(chuàng)傷性檢查，且難于發(fā)現(xiàn)微小及隱匿性病變。而尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查可作為輔助手段，不過其敏感性較低，對(duì)早期、低級(jí)別膀胱腫瘤的診斷尤其缺乏敏感性，而且此方法特別需依賴病理醫(yī)師的臨床經(jīng)驗(yàn)。另外，應(yīng)用組織病理學(xué)對(duì)膀胱尿路上皮癌進(jìn)行分期或分級(jí)雖具有一定合理性，但其不能準(zhǔn)確預(yù)測(cè)大多數(shù)膀胱尿路上皮癌的預(yù)后情況[3]。因此，有必要尋找新的腫瘤標(biāo)記物用于膀胱尿路上皮癌的早期診斷、監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)和判斷預(yù)后。

Caveolin-1(Cav-1)是Caveolae(胞膜窖)的主要結(jié)構(gòu)成分和標(biāo)志性結(jié)構(gòu)蛋白，通過磷酸化和/或去磷酸化等途徑與信號(hào)分子相互作用，參與物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)，調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡、黏附及運(yùn)動(dòng)，與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系密切相關(guān)[4-5]。大多數(shù)實(shí)驗(yàn)支持Caveolin-1為候選的抑癌基因，但同時(shí)有研究認(rèn)為Caveolin-1高表達(dá)能促進(jìn)癌細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移，腫瘤預(yù)后較差[4-7]。因此，本研究應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)23例初發(fā)膀胱尿路上皮癌和37例復(fù)發(fā)膀胱尿路上皮癌患者術(shù)后標(biāo)本組織切片中Caveolin-1表達(dá)情況，并對(duì)臨床病理特征進(jìn)行回顧性分析，進(jìn)一步探討Caveolin-1表達(dá)異常對(duì)膀胱尿路上皮癌臨床診斷、復(fù)發(fā)、治療及預(yù)后評(píng)估的意義。

1 資料與方法

1.1一般資料選取2005年1月～2013年2月在廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院經(jīng)手術(shù)治療的60例具備完整臨床和病理資料的膀胱尿路上皮癌患者作為研究對(duì)象。分為兩組，其中初發(fā)組為首次發(fā)病患者，共23例，男14例，女9例，年齡35～66歲，中位年齡45歲；復(fù)發(fā)組為復(fù)發(fā)患者，共37例，男22例，女15例，年齡33～69歲，中位年齡47歲。所有病例的病理診斷均為膀胱尿路上皮癌。

1.2試劑兔抗人Caveolin-1多克隆抗體購自Cell Signaling Technology公司，稀釋度為1∶250；SABC免疫組化試劑盒和DAB顯色試劑盒均購自武漢博士德生物工程有限公司。

1.3方法免疫組化采用SABC法，用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.4結(jié)果判定采用Olympus光學(xué)顯微鏡觀察Caveolin-1的表達(dá)情況，陽性結(jié)果為細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞膜著黃色或棕褐色。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)如下：0分：陽性細(xì)胞數(shù)≤5%；1分：陽性細(xì)胞數(shù)6%～20%；2分：陽性細(xì)胞數(shù)21%～50%；3分：陽性細(xì)胞數(shù)>50%。0分定為陰性，而1、2、3 分為陽性。

1.5統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1初發(fā)與復(fù)發(fā)膀胱尿路上皮癌患者臨床病理特征的比較初發(fā)與復(fù)發(fā)膀胱尿路上皮癌患者的臨床病理特征見表1。兩組的腫瘤分級(jí)、分期的比例相似；初發(fā)組腫瘤單發(fā)10例，占43.5%，而復(fù)發(fā)組13例，占35.1%；對(duì)于腫瘤復(fù)發(fā)時(shí)間，初發(fā)組平均為17.6個(gè)月，復(fù)發(fā)組腫瘤再復(fù)發(fā)平均時(shí)間為20.4個(gè)月。

表1初發(fā)與復(fù)發(fā)膀胱尿路上皮癌患者的臨床病理特征比較(例)

臨床病理特征初發(fā)組復(fù)發(fā)組χ2值P值TNM分期 Ⅰ690.2150.975 Ⅱ913 Ⅲ59 Ⅳ36組織學(xué)分級(jí) Ⅰ12171.1890.552 Ⅱ615 Ⅲ58腫瘤數(shù)目 單發(fā)10130.4180.518 多發(fā)1324復(fù)發(fā)時(shí)間 1年以內(nèi)10170.2910.864 1^3年814 3年以上56

2.2初發(fā)與復(fù)發(fā)膀胱尿路上皮癌組織Caveolin-1表達(dá)特征的比較免疫組化結(jié)果顯示，23例初發(fā)膀胱尿路上皮癌組織Caveolin-1表達(dá)均為陰性，而37例復(fù)發(fā)膀胱尿路上皮癌組織中，有22例陽性表達(dá)，陽性率為59.46%，兩者之間差異有顯著性(χ2=21.593，P<0.01，圖1)。

圖1 Caveolin-1在膀胱尿路上皮癌組織中的表達(dá) A：復(fù)發(fā)病例Caveolin-1的陽性表達(dá)；B：初發(fā)病例Caveolin-1的陰性表達(dá)

2.3復(fù)發(fā)病例中Caveolin-1染色強(qiáng)度與腫瘤分級(jí)的關(guān)系在37例復(fù)發(fā)病例中，22例出現(xiàn)了Caveolin-1陽性表達(dá)，而其中染色強(qiáng)度與腫瘤分級(jí)情況見表2。Caveolin-1染色強(qiáng)度呈散在性分布，與腫瘤分級(jí)并無明顯相關(guān)性。

表2復(fù)發(fā)膀胱尿路上皮癌組織中Caveolin-1染色強(qiáng)度與腫瘤分級(jí)的關(guān)系(例)

分級(jí)染色強(qiáng)度弱中強(qiáng)合計(jì)χ2值P值1級(jí)14168.3380.0802級(jí)523103級(jí)5016合計(jì)116522

3 討 論

惡性腫瘤細(xì)胞具有異質(zhì)性，從而決定了其復(fù)雜多樣的生物學(xué)行為，即使同樣的腫瘤形態(tài)及臨床病理特征，仍有可能會(huì)出現(xiàn)不同的臨床表現(xiàn)和預(yù)后轉(zhuǎn)歸。目前判斷膀胱尿路上皮癌預(yù)后的重要參數(shù)仍然是基于腫瘤的臨床分期和病理分級(jí)，但仍有少部分病人不能得到恰當(dāng)?shù)脑u(píng)估。因此，在膀胱尿路上皮癌的預(yù)防治療中，篩選有復(fù)發(fā)可能的病人和預(yù)測(cè)治療效果是極為重要的問題。一直以來，很多學(xué)者都致力于探討膀胱尿路上皮癌預(yù)后的影響因素，以期給病人治療和術(shù)后隨訪提供較好的個(gè)體化方案，但目前多數(shù)主要對(duì)臨床參數(shù)進(jìn)行研究，這可能受主觀因素影響較大，因此結(jié)論不太一致[8]。此外，多數(shù)研究常常只橫向探討影響腫瘤復(fù)發(fā)的外在因素，而甚少縱向深入探討腫瘤復(fù)發(fā)的內(nèi)在因素，尤其對(duì)初發(fā)與復(fù)發(fā)腫瘤之間的差異與內(nèi)在聯(lián)系少有研究進(jìn)行。

Caveolin-1是caveolae的標(biāo)志性結(jié)構(gòu)蛋白，為21～25 kDa完整的膜蛋白，其編碼基因定位于染色體7q31.1的D7S522位點(diǎn)，而多種腫瘤(如肝癌、卵巢癌、前列腺癌、子宮肌瘤、胃腺癌等)中此位點(diǎn)都有出現(xiàn)缺失或斷裂,這說明Caveolin-1為腫瘤抑制蛋白[9]。但同時(shí)有研究發(fā)現(xiàn)，在一些腫瘤(前列腺癌、食管癌、結(jié)腸癌等)中Caveolin-1卻表達(dá)上調(diào)，而且與腫瘤分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤細(xì)胞的耐藥性有一定的關(guān)系[6-7,10]。

盡管初發(fā)與復(fù)發(fā)的膀胱尿路上皮癌中，癌細(xì)胞的很多病理指標(biāo)均類似，差異無顯著性，如腫瘤分級(jí)和分期，但是在分子指標(biāo)上面，Caveolin-1的表達(dá)出現(xiàn)了顯著的不同：首先，在初發(fā)組中，幾乎沒有Caveolin-1的表達(dá)，而在37例復(fù)發(fā)組中，有22例患者出現(xiàn)了Caveolin-1的陽性表達(dá)；其次，這種Caveolin-1陽性表達(dá)與復(fù)發(fā)腫瘤分期之間差異無顯著性，也就是說，Caveolin-1的陽性表達(dá)，可能僅僅與腫瘤復(fù)發(fā)本身相關(guān)。換言之，雖然還不清楚腫瘤復(fù)發(fā)和Caveolin-1表達(dá)的因果關(guān)系，但腫瘤復(fù)發(fā)和Caveolin-1的表達(dá)具有相關(guān)性，膀胱尿路上皮癌容易復(fù)發(fā)的一個(gè)分子基礎(chǔ)可能是基因表達(dá)異常。因此，膀胱尿路上皮癌術(shù)后應(yīng)進(jìn)行多種相關(guān)分子的檢測(cè)，這有助于腫瘤預(yù)后的判斷，以便于更合理地制定個(gè)體化監(jiān)測(cè)、治療方案。

[1] Margel D,Tal R,Baniel J.Serum tumor markers may predict overall and disease specific survival in patients with clinically organ confined invasive bladder cancer[J].J Urol，2007,178 (6):2297-2300.

[2] Jemal A,Siegel R,Xu J,et al.Cancer statistics[J].CA Cancer J Clin，2010,60(5):277-300.

[3] Shariat SF,Palapattu GS,Karakiewicz PI,et al.Discrepancy between clinical and pathologic stage:impact on prognosis after radical cystectomy[J].Eur Urol，2007,51(1):137-149.

[4] Ho CC,Kuo SH,Huang PH,et al.Caveolin-1 expression is significantly associated with drug resistance and poor prognosis in advanced non-small cell lung cancer patients treated with gemcitabine-based chemotherapy[J].Lung Cancer,2008,59(1):105-110.

[5] Joo HJ,Oh DK,Kim YS,et al.Increased expression of Caveolin-1 and microvessel density correlates with metastasis and poor prognosis in clear cell renal cell carcinoma[J].BJU Int，2004,93(3):291-296.

[6] Kato K,Hida Y,Miyamoto M,et al.Overexpression of caveolin-1 in esophageal squamous cell carcinoma correlates with lymph node met astasis and pathologic stage[J].Cancer,2002,94(4):929-933.

[7] Yang CP,Galbiati F,Volont D,et al.Upregulation of caveolin-1 and caveolae organelles in Taxol-resist ant A549 cells[J].FEBS Lett,1998,439 (3):368-372.

[8] 曾福華,楊土保,江勃年，等.原發(fā)淺表性膀胱癌預(yù)后影響因素分析[J].中華泌尿外科雜志,2004,25( 10):669-672.

[9] Razani B,Schlegel A,Liu J,et al.Caveolin-1,a putative tumor suppressor gene[J].Biochem Soc Trans,2001,29(Pt4):494-499.

[10] Nasu Y,Timme TL,Yang G,et al.Suppression of caveolin expression induces androgen sensitivity in metastatic androgen-insensitive mouse prostate cancer cells [J].Nat Med,1998,4 (9):1062-1064.

ExpressionandClinicalSignificanceofCaveolin-1inRecurrentBladderCancer

FU Qingyun,ZHOU Chunhui,LIAO Kunling,et al

(DepartmentofPathology,WuyiTraditionalChineseMedicineHospital,Jiangmen,Guangdon529031,China)

ObjectiveTo investigate the different expression of Caveolin-1 between primary and recurrent bladder cancer,explore its relationship with the molecular basis and clinical pathological characteristics of recurrent bladder cancer.

MethodsWe examined the expression of Caveolin-1 in 23 cases with primary bladder cancer and 37 cases with recurrent bladder cancer by immunohistochemistry,and analyzed the relationship between molecular expression and tumor recurrence.

ResultsPathological characteristics were similar between the primary and the recurrent bladder cancer tissue.The expression of Caveolin-1 was significantly higher in the recurrent bladder cancer than that in the primary bladder cancer.ConclusionThere was different expression of Caveolin-1 between primary bladder cancer and recurrent bladder cancer.Gene abnormality might be the molecular basis of recurrent bladder cancer.

Caveolin-1; bladder cancer; recurrent cancer

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2015.03.014

2015-02-17；

2015-04-23

*通訊作者，E-mail:2314970312@qq.com.

R737

A

(此文編輯：蔣湘蓮)