延黃婦炎清片對慢性盆腔炎大鼠血漿中TXB2、6-Keto-PGF1a的影響及意義

劉　虹，沈正龍，鄭學(xué)剛

1.湖北民族學(xué)院中醫(yī)藥學(xué)院(湖北 恩施 445000)

2.利川市民族中醫(yī)院內(nèi)一科(湖北 利川 445400)

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延黃婦炎清片對慢性盆腔炎大鼠血漿中TXB2、6-Keto-PGF1a的影響及意義

劉虹1，沈正龍2，鄭學(xué)剛1

1.湖北民族學(xué)院中醫(yī)藥學(xué)院(湖北 恩施 445000)

2.利川市民族中醫(yī)院內(nèi)一科(湖北 利川 445400)

【摘要】目的研究延黃婦炎清片對慢性盆腔炎大鼠血漿中血栓素B2(TXB2)與6-酮基-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的影響，探討延黃婦炎清片治療慢性盆腔炎的作用機(jī)制。方法SD大鼠50只隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、金雞片組及延黃婦炎清片大、小劑量組。采用苯酚膠漿法復(fù)制大鼠慢性盆腔炎模型，連續(xù)灌胃服藥1個月后，測定各組大鼠血漿中TXB2和6-Keto-PGF1a含量及TXB2/6-Keto-PGF1a值。結(jié)果與模型組比較，延黃婦炎清片大、小劑量組中的TXB2、TXB2/ 6-Keto-PGF1a水平較治療前降低；6-keto-PGF1a水平較治療前升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；與假手術(shù)組比較，延黃婦炎清片大、小劑量組的TXB2、6-Keto-PGF1a、TXB2/ 6-Keto-PGF1a水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論延黃婦炎清片是通過降低TXB2水平，恢復(fù)TXB2/6-Keto-PGF1a比值平衡，改善盆腔血液循環(huán)，減少炎性滲出、產(chǎn)生異物肉芽腫及纖維組織增生來治療盆腔炎的。

【關(guān)鍵詞】延黃婦炎清片；慢性；盆腔炎；血栓素B2；6-酮-前列腺素F1a

慢性盆腔炎(chronic pelvic inflammatory disease，CPID) 是指女性生殖器官、周圍結(jié)締組織及盆腔腹膜所發(fā)生的慢性炎癥病變，是育齡期婦女最常見的生殖器官炎癥之一[1]。全世界10%~20%[2]的性病患者可發(fā)展成為CPID，致使CPID的發(fā)病呈上升趨勢，其復(fù)發(fā)率也越來越高[3]。CPID的預(yù)防及治療是當(dāng)今醫(yī)學(xué)的難點[4]。本實驗通過觀察延黃婦炎清片對大鼠慢性盆腔炎血漿血栓素B2(TXB2)與6-酮基-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)含量的影響，探討其對CPID的作用機(jī)制。

1　材料與方法

1.1實驗藥物延黃婦炎清片：湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院制劑室，批號20120911，規(guī)格0.3g×50片；金雞片：廣西靈峰藥業(yè)有限公司，批號20120601，規(guī)格0.47g×72片；液化苯酚：武漢科瑞生物試劑有限公司，批號20121015；西黃蓍膠：上海一基實業(yè)有限公司，批號20111208。

1.2實驗試劑TXB2及6-keto-PGF1a試劑盒：南京建成生物工程研究所。

1.3實驗動物健康SD 6月齡雌性大鼠50只，體質(zhì)量(230±20)g，購自湖北省實驗動物研究中心，許可證號(鄂)2008-0005。

1.4主要儀器和設(shè)備LD4-2A 離心機(jī)：北京醫(yī)用離心機(jī)廠；手術(shù)刀片等手術(shù)器械：上海浦東金環(huán)醫(yī)療用品股份有限公司。

1.5實驗方法

1.5.1動物分組及模型建立隨機(jī)將50只SD大鼠分為5組：假手術(shù)組，模型組，金雞片組，延黃婦炎清片大、小劑量組，每組10只。造模前禁食水8h，所有大鼠均予3%戊巴比妥(0.1mL/100g)腹腔注射麻醉，常規(guī)消毒后，在下腹正中切開皮膚，切口長約1.5～2.0cm，暴露子宮，用4號針頭分別在子宮分叉處小心進(jìn)針。除假手術(shù)組外，各組大鼠均向卵巢方向緩慢注入苯酚膠漿0.04mL(液化苯酚5mL，西黃蓍膠1g，甘油1mL，加蒸餾水20mL，配成 25%的苯酚膠漿)，注畢，分層關(guān)腹，術(shù)后用青霉素進(jìn)行消毒術(shù)區(qū)。假手術(shù)組實行假手術(shù)，打開腹腔后隨即將腹腔關(guān)閉。術(shù)后7d開始灌胃給藥1個月[5]。金雞片組按金雞片1.020g/(kg·d) (按體表面積折算的臨床等效劑量的2倍換算) 灌胃，1次/d；延黃婦炎清片大、小劑量組分別按延黃婦炎清片1.296g/(kg·d)、0.648g/(kg·d)(按體表面積折算的臨床等效劑量的2倍、4倍換算)灌胃，1次/d；假手術(shù)組和模型對照組灌胃等容量生理鹽水，1次/d。

1.5.2指標(biāo)檢測給藥1個月后，大鼠用1%戊巴比妥鈉(25mg/kg)經(jīng)腹腔麻醉后，經(jīng)腹主動脈采血，經(jīng)抗凝，離心后取上清液，采用放射免疫法檢測大鼠血漿中的TXB2及6-Keto-PGF1a的水平[6]。

1.6統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS12.0 統(tǒng)計軟件，計量資料采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

與模型組比較，延黃婦炎清片大、小劑量組及金雞片組大鼠血漿6-Keto-PGF1a水平明顯增高，TXB2及TXB2/6-Keto-PGF1a水平明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與假手術(shù)組比較，延黃婦炎清片大、小劑量組及金雞片組的TXB2、6-Keto-PGF1a、TXB2/ 6-Keto-PGF1a水平無顯著性差異(P>0.05)；模型組的TXB2、TXB2/6-Keto-PGF1a水平明顯升高，6-Keto-PGF1a水平明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1　各組大鼠血漿中TXB2、6-Keto-PGF1a及TXB2/6-Keto-PGF1a比值變化(n=10，±s)

表1　各組大鼠血漿中TXB2、6-Keto-PGF1a及TXB2/6-Keto-PGF1a比值變化(n=10，±s)

組別劑量/(g·kg-1)TXB2/(pg·mL-1)6-Keto-PGF1a/(pg·mL-1)TXB2/6-Keto-PGF1a假手術(shù)組—436.23±89.9824.23±5.0318.00±3.89模型組—507.08±96.99#17.92±5.24#28.30±5.72#金雞片組1.020443.96±87.12*21.08±4.53*21.06±4.85*延黃婦炎清片大劑量組1.296438.48±90.26*22.18±4.95*19.77±4.35*延黃婦炎清片小劑量組0.648442.59±91.65*21.26±5.06*20.82±4.69*

注：與模型組比較，＊P<0.05；與假手術(shù)組比較，#P<0.05。

3　討論

本方由延胡索、黃柏、金銀花、花蕊石、五靈脂、白芍、甘草等藥物構(gòu)成，延胡索為罌粟科植物延胡索CorydalisyanhusuoW.T.Wang的干燥塊莖，主要含有原小檗堿型生物堿、原阿片型生物堿等生物堿。延胡索味辛、苦，性溫。歸肝、脾經(jīng)。有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、催眠、抗心肌缺血等作用。黃柏是蕓香科植物黃皮樹PhellodendronchinenseSchneid.的干燥樹皮。主要含有小檗堿、藥根堿、木蘭花堿等生物堿，味苦，性寒，歸腎、膀胱經(jīng)，具有降壓、抗心律失常、抗?jié)?、抗病原體等作用，還對免疫功能有影響。金銀花為忍冬藤科植物忍冬LonicerajaponicaThunb.的干燥花蕾或帶初開的花，主要含有綠原酸、異綠原酸和馬錢素等。味甘、性寒，歸肺、心、胃經(jīng)。具有抗炎及解熱、中樞興奮、抗病原微生物等作用?；ㄈ锸癁槭只浦参锇捉鍿inapisalbaL.或芥Brassicajuncta(L.)Czern.et Coss.的干燥成熟種子。主要含有各種異硫氰酸酯及其糖苷、氨基酸、脂肪酸等，味辛，性溫，歸肺經(jīng)。具有抗菌、祛痰的作用。五靈脂為鼯鼠科動物復(fù)齒鼯鼠TrogopterusxanthipesMilne-Edwards的干燥糞便。含有五靈脂脂酸等10種化合物，味苦，性溫，歸肝、脾經(jīng)。對血液流變有影響，能改善微循環(huán)、抗血小板聚集、增強(qiáng)免疫功能。白芍為毛茛科植物芍藥Paeonialactiforapall.的干燥根，含芍藥甙、芍藥花甙、牡丹甙等多種成分，味苦、酸，微寒，歸肝、脾經(jīng)。具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解痙、解熱、抗驚厥、抗炎及免疫調(diào)節(jié)作用。甘草為豆科植物甘草GlycyrrizauralensisFisch.、脹果甘草GlycrrhizainflataBat.或光果甘草GhycyrrhizaglabraL.的干燥根及根莖，含有甘草甜素、烏拉爾甘草皂甙甲等成分，味甘、性平，歸心、肺、脾、胃經(jīng)。具有解熱、抗炎、鎮(zhèn)靜、抗?jié)?、抗過敏、抗心律失常等作用。延黃婦炎清片是由玄胡索散、花蕊石散、蠲痛散及芍藥甘草湯，如《婦人大全良方》中提出玄胡索散可以治療婦人血?dú)夤バ模妒幧駮分姓撌龌ㄈ锸⒖梢曰鲋雇?，《婦人良方》中記載蠲痛散可治療婦人小服疼痛。方中金銀花與黃柏配伍具有清熱解毒燥濕之功，使?jié)駸嶂暗媒?；延胡索、花蕊石及五靈脂等配伍更有化瘀止痛之功效；芍藥和甘草配伍極具緩急止痛功效，全方配伍嚴(yán)謹(jǐn)，共奏清熱燥濕、化瘀止痛之功效，能解除患者疼痛之苦。

TXB2是由血栓素A2轉(zhuǎn)化而來，它由血小板生成，有促進(jìn)血小板聚集和強(qiáng)烈的收縮血管的作用。6-keto-PGF1a是由PGI2代謝產(chǎn)生，而PGI2主要是血管內(nèi)皮細(xì)胞所產(chǎn)生，因此，6-keto-PGF1a降低及TXB2升高均提示血液粘度增加，血流速度減慢。在生理狀態(tài)下，TXA2和6-keto-PGF1a處于動態(tài)平衡，病理狀態(tài)下，兩者失衡。用活血化瘀中藥治療慢性盆腔炎，可使患者血漿中TXB2含量較治療前降低，6-keto-PGF1a含量較治療前升高，從而使治療后二者比例(TXB2/6-keto-PGF1a)比治療前有顯著降低，證明可以通過降低血漿TXB2含量，提高6-keto-PGF1a的含量而降低TXB2/6-keto-PGF1a比值，來改善機(jī)體血液動力學(xué)水平，從而增加盆腔循環(huán)血量而起到治療作用[7]。

本組結(jié)果表明模型組TXB2、TXB2/6-Keto-PGF1a水平較假手術(shù)組升高，模型組6-keto-PGF1a水平較假手術(shù)組降低，說明模型大鼠體內(nèi)存在TXA2-PGI2失衡，血液動力學(xué)改變及血小板聚集、血栓形成增加，可能是導(dǎo)致子宮及盆腔周圍組織損傷，盆腔局部組織缺血、缺氧的內(nèi)在原因。本實驗研究證明，延黃婦炎清片能通過下調(diào)TXB2水平，提高6-keto-PGF1a的含量，恢復(fù)TXB2-PGI2比值平衡，增加組織供血、供氧，改善盆腔血液循環(huán)，減少炎性滲出、產(chǎn)生異物肉芽腫及纖維組織增生的機(jī)會，從而起到治療慢性盆腔炎的作用，同時也為清熱燥濕、化瘀止痛法在治療慢性盆腔炎的應(yīng)用及其地位奠定了一定的理論、實驗基礎(chǔ)。

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Value of Yan Huang Fu Yan Qing Tablet on TXB2,6-Keto-PGF1a in Plasma of Rats with Chronic Pelvic Inflammation

LIU Hong1,SHEN Zheng-long2,ZHENG Xue-gang1

(1.DepartmentofGynecology,SchoolofTraditionalChineseMedicine,HubeiUniversity

forNationalities,Enshi445000,China;2.DepartmentofInternalMedicine,Lichuan

HospitalofNationalTraditionalChineseMedicine,Lichuan445400,China)

【Abstract】Objective To study the mechanism of action of the yan huang fu yan qing tablet and the treatment of chronic pelvic inflammatory disease.Methods 50 SD rats were randomly divided into control group, model group,positive control group (golden group) and Yan huang fu yan qing tablet of big and small dose group.By using phenol mucilage,the chronic pelvic inflammation model in rats was copied,after 1 month of continuous lavage,TXB2 and 6-Keto-PGF1a content in rat plasma and TXB2/-Keto-PGF1a values in each group was determined.Results Compared with model group, Yan huang fu yan qing tablet of big and small dose group of TXB2,TXB2/6-Keto-PGF1a level was reduced;the6-keto-PGF1a level was higher,the difference is statistically significant (P<0.05);Compared with control group, Yan huang fu yan qing tablet for large and small dose group of TXB2 and 6-Keto-PGF1a,TXB2/-Keto-there was no significant difference in the quality PGF1a.Conclusion Through the lower levels of TXB2,Yan huang fu yan qing tablet restored TXB2/6-Keto-PGF1a ratio balance,improved pelvic blood circulation, reduced inflammatory exudation and foreign body granuloma and fibrous tissue hyperplasia of the chance to treat pelvic inflammatory disease.

【Key words】Yan huang fu yan qing tablet； chronic pelvic inflammatory disease；Thromboxane B2；6-ketone-prostaglandin-F1a

基金項目湖北省恩施州農(nóng)業(yè)與社會發(fā)展科技指導(dǎo)性計劃項目 (恩州科業(yè)[2013]9號)。

[收稿日期2014-03-09]

【中圖分類號】R285.5；R711.33

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

【文章編號】1008-8164(2014)03-0019-03

作者簡介劉虹(1988- )，女，云南玉溪人，碩士在讀，研究方向：中醫(yī)治療月經(jīng)病的理論基礎(chǔ)及臨床研究。