自身抗體與狼瘡腎炎病理類型的相關(guān)性分析

嚴(yán)艷玲，袁　林，楊明輝，劉云峰，向詩飛 ，張翠蘭，向　陽，袁國華，

1.開縣人民醫(yī)院(重慶 開縣 400500)

2.風(fēng)濕性疾病發(fā)生與干預(yù)湖北重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(湖北 恩施 445000)

3.湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院風(fēng)濕免疫科(湖北 恩施 445000)

4.川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫研究所(四川 南充 637000)

?

自身抗體與狼瘡腎炎病理類型的相關(guān)性分析

嚴(yán)艷玲1，袁林2，楊明輝4，劉云峰1，向詩飛3，張翠蘭3，向陽2，袁國華2，4

1.開縣人民醫(yī)院(重慶 開縣 400500)

2.風(fēng)濕性疾病發(fā)生與干預(yù)湖北重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(湖北 恩施 445000)

3.湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院風(fēng)濕免疫科(湖北 恩施 445000)

4.川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫研究所(四川 南充 637000)

【摘要】目的探討自身抗體與狼瘡腎炎(lupus nephritis,LN) 病理類型的相關(guān)性。方法采用免疫印跡法測定75例行腎活檢LN患者的抗dsDNA、抗Sm、抗SSA、抗U1nRNP、抗核小體(NUC)及抗組蛋白(HIS)抗體，并與56例無腎臟損害的系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)患者對(duì)照，分析自身抗體與LN病理類型的關(guān)系。結(jié)果75例LN患者中，抗dsDNA、抗Sm和抗HIS陽性率均明顯高于無腎臟損害患者(P<0.05)；75例LN病理類型分屬Ⅰ～Ⅵ型，與無腎臟損害組對(duì)照，抗dsDNA和抗HIS抗體陽性率在各型LN中均增高，但僅Ⅱ型LN差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，抗SSA抗體在Ⅰ型LN中與無腎臟損害組對(duì)照，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，抗U1nRNP抗體在Ⅴ型LN中與無腎臟損害組對(duì)照，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論抗dsDNA抗體、抗Sm抗體和抗HIS抗體陽性可指導(dǎo)LN的診斷，且抗dsDNA抗體和抗HIS抗體與Ⅱ型LN發(fā)病相關(guān)，抗SSA抗體與Ⅰ型LN發(fā)病有關(guān)，抗U1nRNP抗體則可能在Ⅴ型LN病變中發(fā)揮作用。

【關(guān)鍵詞】系統(tǒng)性紅斑狼瘡；狼瘡腎炎；自身抗體；相關(guān)性；分析

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種自身免疫性疾病,可累及全身多個(gè)系統(tǒng)，其中腎臟受累最為常見。狼瘡腎炎(lupus nephritis，LN)導(dǎo)致的腎功能衰竭是SLE死亡的主要原因之一?；颊哐逯锌沙霈F(xiàn)多種自身抗體，包括抗dsDNA、抗Sm、抗SSA、抗U1nRNP/Sm、抗核小體(NUC)及抗組蛋白(HIS)抗體。自身抗體如抗dsDNA、抗NUC抗體等與LN的相關(guān)性已有文獻(xiàn)報(bào)道[1-2]，但自身抗體與狼瘡腎臟損害病理特點(diǎn)的相關(guān)性報(bào)道甚少，本文通過觀察75例狼瘡腎臟損害患者自身抗體分布，分析自身抗體與狼瘡腎損害病理特點(diǎn)的相關(guān)性。

1　資料與方法

1.1一般資料2012 年12 月至2014年1 月在湖北民族學(xué)院附屬民大醫(yī)院和川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科收集行腎活檢的SLE住院患者75例，其中男6例，女69例；年齡14～61 歲,平均(33. 2±13.0)歲；病程1～204個(gè)月，中位數(shù)10個(gè)月。同時(shí)收集同期住院的SLE而無腎臟受累的患者56例作為對(duì)照組，男5例,女51例；年齡15～58歲,平均(32. 2±9.0)歲；病程1～177 個(gè)月，中位數(shù)9個(gè)月。所選患者均符合1997年美國風(fēng)濕病學(xué)院(ACR)修訂的SLE分類診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。同時(shí)所有患者均符合LN診斷標(biāo)準(zhǔn)：①24h尿蛋白定量>0.5g；②尿中紅細(xì)胞或白細(xì)胞>5個(gè)/HP或顆粒管型；③腎功能異常；④腎臟病理證實(shí)。符合以上4條中至少1條并排除其它原因可診斷LN。同時(shí)參照2003年國際腎臟病-病理協(xié)會(huì)(ISN/RPS)有關(guān)LN病理方案分型[4]，及SLE疾病活動(dòng)性指數(shù)(systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI)評(píng)估疾病活動(dòng)程度[5]。

1.2ENA自身抗體譜檢測應(yīng)用免疫斑點(diǎn)法測定，試劑盒由德國歐蒙醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷有限公司提供，嚴(yán)格按試劑盒說明操作。檢測抗體包括抗dsDNA、抗Sm、抗SSA、抗U1nRNP/Sm、抗NUC及抗HIS抗體。

1.3腎穿刺活檢術(shù)及腎臟病理檢查應(yīng)用半自動(dòng)腎穿刺活檢針，在B超或彩超引導(dǎo)下行經(jīng)皮腎穿刺活檢術(shù)。穿刺次數(shù)2～3次,將合格的標(biāo)本分段或整條置光鏡和電鏡標(biāo)本固定液中即刻送檢。腎穿刺標(biāo)本分別行直接免疫熒光、光鏡和透射電鏡檢查。光鏡標(biāo)本行蘇木精-伊紅染色法 (hematoxylin-eosin staining,HE)、過碘酸六胺銀染色(periodic acid-silver metheramine，PASM)、過碘酸雪夫染色(periodic acid-schiff stain，PAS)和Masson染色, 病理分型根據(jù)2003年國際腎病學(xué)會(huì)(ISN)和腎臟病理學(xué)會(huì)工作組(RPS)制定的LN的病理學(xué)分型標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分型[6]。Ⅰ型為輕微性LN,Ⅱ型為系膜增生性LN，Ⅲ型為局灶性LN，Ⅳ型為彌漫性LN,Ⅴ型為膜性LN,Ⅵ型為硬化性LN。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1兩組LN患者陽性率比較LN患者抗dsDNA、抗Sm和抗HIS抗體陽性率均明顯高于非LN組(P<0.05)，LN患者抗NUC抗體陽性率與非LN組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1　兩組LN患者ENA陽性率比較[n(%)]

2.2病理分型75例SLE腎臟受損中Ⅱ型LN最為常見，占50.7%，Ⅰ型、Ⅴ型次之，Ⅵ型患者最為少見，見表2。

2.3自身抗體在不同病理類型LN中的分布與非LN組對(duì)照，抗dsDNA抗體和抗HIS抗體陽性率在Ⅱ型LN中均為50%，明顯高于非LN組的17.8% (χ2=10.964，P=0.001)和28.6%(χ2=4.448，P=0.035)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在Ⅲ型和Ⅳ型LN中，抗dsDNA抗體和HIS抗體陽性率同樣較非LN組高，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；抗SSA抗體在Ⅰ型LN中為83.3%，與非LN組51.8%相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.021，P<0.05)；在12例Ⅴ型LN中，8例(66.7%)抗U1nRNP抗體為陽性，明顯高于非LN組37.5%(χ2=5.104，P=0.028)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05 )，見表2。

表2　自身抗體在不同病理類型狼瘡中的分布情況[n(%)]

注：與非LN組比較，aP<0.05；bP<0.01。

3　討論

SLE是一種多因素參與的特異性自身免疫性疾病?；颊叩耐怀霰憩F(xiàn)為有多種自身抗體，并通過免疫復(fù)合物等途徑，可侵犯身體多臟器，影響臟器功能，造成多器官、多系統(tǒng)受累，臨床表現(xiàn)缺乏特異性，是臨床上常誤診和漏診發(fā)生率較高的疾病之一，隨著免疫分子學(xué)科技術(shù)的不斷發(fā)展，抗dsDNA、抗Sm、抗SSA、抗U1nRNP、抗NUC及抗HIS抗體等自身抗體的發(fā)現(xiàn)及精確檢測，是SLE診斷的里程碑，必將為SLE早期診斷，早期治療提供有力的保障，為SLE患者帶來福音。

SLE患者血清中抗dsDNA抗體、抗Sm、抗SSA、抗U1nRNP、抗NUC及抗HIS抗體水平與LN的臨床表現(xiàn)、活動(dòng)性指標(biāo)等密切相關(guān)[7]。姚曦等[8]報(bào)道抗dsDNA抗體與LN的發(fā)生、發(fā)展高度相關(guān)。本組結(jié)果顯示LN患者抗dsDNA抗體陽性率明顯高于非LN患者，說明抗dsDNA抗體可能是LN的致病性抗體之一；抗Sm抗體也是診斷SLE的特異性指標(biāo)之一，雖然與SLE病情活動(dòng)與否無關(guān)，但治療后抗Sm抗體仍持續(xù)陽性，故抗Sm抗體又稱為回顧性抗體、也是SLE的標(biāo)志性抗體，并已成為ARA2007年修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一；抗SSA、抗RNP是抗ENA抗體家族中的兩種抗體，在SLE中出現(xiàn)的幾率比較高，但因其特異性差，臨床上很少將其作為診斷指標(biāo)?？筃UC抗體是核小體刺激機(jī)體而產(chǎn)生的，核小體可刺激T細(xì)胞的活化，從而激活B細(xì)胞，產(chǎn)生抗體如抗NUC、抗dsDNA抗體，并形成抗原抗體復(fù)合物參與SLE的發(fā)病，同時(shí)也可作為自身抗體與腎小球結(jié)合為“橋梁”，介導(dǎo)自身抗體與腎小球基底膜、系膜細(xì)胞等相結(jié)合，導(dǎo)致補(bǔ)體活化，炎癥細(xì)胞聚集和細(xì)胞因子釋放，從而誘發(fā)LN的發(fā)生。有研究顯示，SLE患者血清中NUC水平高于正常人和其他風(fēng)濕性疾病患者，且在LN中抗NUC、抗dsDNA抗體的陽性率明顯高于非LN組[9-10]，我們的結(jié)果顯示，LN患者抗dsDNA抗體、抗NUC、抗HIS陽性率高于非LN患者，提示dsDNA抗體、抗NUC、抗HIS與LN的發(fā)病相關(guān)。

通過對(duì)ENA在不同病理類型LN中的情況進(jìn)行分析，LN與非LN組比較，抗dsDNA抗體和抗HIS抗體陽性率在Ⅱ型LN中明顯高于非LN組，且抗dsDNA抗體、抗Sm抗體和抗HIS抗體陽性率在LN患者組均明顯高于非LN組；在Ⅲ型和Ⅳ型LN中，抗dsDNA抗體和抗HIS抗體陽性率同樣較非LN組增高，本研究各病理類型之間數(shù)據(jù)差異較大，各類型之間比較很難實(shí)現(xiàn)，故只能在數(shù)據(jù)角度上分析，得出此結(jié)論，目前，國內(nèi)外已有的研究成果亦無相關(guān)報(bào)道。而在12例Ⅴ型LN中，8例(66.7%)抗U1nRNP抗體為陽性，在對(duì)照組中則為37.5%，而在12例Ⅴ型LN中，8例(66.7%)抗SSA抗體為陽性，和對(duì)照組51.8%，兩者陽性率均明顯高于對(duì)照組，故可以認(rèn)為抗U1nRNP抗體則可能在Ⅴ型LN病變中發(fā)揮作用。

本研究在一定程度上證實(shí)了抗dsDNA抗體和抗HIS抗體與Ⅱ型LN發(fā)病有關(guān)，而抗U1nRNP抗體則可能在Ⅴ型LN病變中發(fā)揮作用，故抗dsDNA抗體、抗Sm抗體和抗HIS抗體可以提高對(duì)Ⅱ型LN診斷率，而抗U1nRNP抗體則可為Ⅴ型LN確定診斷提供幫助。但由于本研究因病例數(shù)較少，故本研究結(jié)果僅能為臨床醫(yī)師對(duì)該疾病的診斷提供參考。

[參考文獻(xiàn)]

[2]羅靜,郭琿,王彩虹,等.抗C1q抗體與系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動(dòng)及狼瘡腎炎的關(guān)系[J].中華臨床免疫和變態(tài)反應(yīng)雜志,2011,5(2):102-108.

[3]Hochberg MC .Updating the American College of Rheumatology revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus[J].A rthritis Rheum,1997,40(9):1 725.

[4]Eeing J J, D Dagti V, Schwartz M M,et al.The classification of glomerulonephritis in systemic lupus erythematosus revisited[J].Kidney international,2004,65(2):521-530.

[5]Bombardier C, Gladman D,Urowitz M B,et al.Derivation of the SLEDAI.A disease activity index for luPus Patients[J].Arthritis & Rheumatism,1992,35(6):630-640.

[6]鄒萬忠,王海燕.狼瘡腎炎病理學(xué)分類的演變和現(xiàn)狀[J].中華腎臟病雜志,2004,20(5):377-379.

[7]Moura C G,Lima I,Barbosa L,et al.Anti-C1q antibodies: association with nephritis and disease activity in systemic lupus erythematosus[J].Journal of clinical laboratory analysis,2009,23(1):19-23.

[8]姚曦,李向培,倪進(jìn)東,等.SLE患者臨床表現(xiàn)、自身抗體的相關(guān)性分析及其性別、年齡特征調(diào)查[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2008,43(1):75-78.

[9] 龔寶琪,劉偉麗,齊文成,等.抗核小體抗體對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡的診斷價(jià)值及臨床意義[J].中國實(shí)用內(nèi)科雜志(臨床版),2006,26(9):682-684.

[10] 吳東海,祖寧,張榮富.AnuA、抗dsDNA及抗C1q抗體在系統(tǒng)性紅斑狼瘡及狼瘡腎炎診斷中的作用[J].中日友好醫(yī)院學(xué)報(bào),2007,21(1):5-8.

A Correlational Analysis of Autoantibodies and Lupus Nephritis Pathological Types

YAN Yan-ling1,YUAN Lin2,YANG Ming-hui4,etal.

(1.KaixianPeople′sHospital，Kaixian400500，China；2.RheumaticDiseaseandInterventioninHubei

ProvinceKeyLaboratory,Enshi445000,China;3.DepartmentofRheumatismandImmunology,Affiliated

HospitalofHubeiUniversityforNationalities,Enshi445000,China;4.InstituteofRheumatology

andImmunoAffiliatedHospitalofNorthSichuanMedicalCollege,Nanchong63700,China)

【Abstract】Objective To analyze the association between anti-extractable nucler antigen(ENA) and the histological changes in luPus nephritis(LN).Methods The anti-dsDNA,anti-SSAl,anti-U1nRNP/Sm,anti-nucleosome (NUC),and anti-histone antibody were detected in 75 patients with LN underwent renal biopsy and 56 patients without LN by using Western-blot assay,followed by analyzeing the relations between the anti-ENA autoantibodies and LN pathological changes.Results In 75 patients with LN,anti-dsDNA antibodies,Sm and anti-histones (HIS) antibodies positive rate were significantly higher than those of patients without kidney damage (P<0.01);75 cases of LN pathological type belong to Ⅰ~Ⅵ type,compared with no kidney damage control group,anti-dsDNA antibodies and protein antibody positive rate in each model LN resistance group were increased,but only type Ⅱ LN difference was statistically significant (P<0.01),and anti-SSA antibody in type Ⅰ LN compared with no kidney damage control group,the difference was statistically significant (P<0.05).Conclusion Anti-dsDNA antibodies,anti-Sm and anti-histones antibody positive can guide the diagnosis of LN,and dsDNA antibodies associated with the onset of type Ⅱ LN,anti-SSA antibody associated with the onset of type Ⅰ LN,and anti-U1nRNP antibodies may play a role in the type Ⅴ LN pathological changes.

【Key words】Systemic lupus erythematosus; Lupus nephritis; autoantibodies

基金項(xiàng)目湖北民族學(xué)院博士科研啟動(dòng)基金項(xiàng)目(MY2010B004)。

[收稿日期2014-07-05]

【中圖分類號(hào)】R593.242

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1008-8164(2014)03-0012-03

作者簡介嚴(yán)艷玲(1986- )，湖北巴東人，碩士，研究方向：風(fēng)濕病的基礎(chǔ)理論研究及方劑開發(fā)應(yīng)用。