HPLC法同時測定糕點中7種食品添加劑

HPLC法同時測定糕點中7種食品添加劑

項林敏1，金煜彬2

(1.浙江海洋學院 經(jīng)濟管理學院 浙江 舟山 316000；2.溫州質(zhì)量技術監(jiān)督檢測院 浙江 溫州 325000)

摘要：建立了高效液相色譜法(HPLC)同時測定糕點中丙酸鈣(鈉)、雙乙酸鈉、脫氫乙酸、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜7種食品添加劑。實驗采用苯基柱，以0.02 mol/L磷酸二氫鉀和甲醇為流動相，采用梯度淋洗，不同的檢測波長下進行檢測。上述7種物質(zhì)回收率為92.0%—100.0%，相對標準偏差為0.75%—0.97%。

關鍵詞：液相色譜；同時測定；糕點

收稿日期：2015-04-01.

作者簡介：項林敏(1988-)，男，碩士研究生，E-mail:305583720@qq.com.

文章編號：2095-7386(2015)03-0016-04

DOI:10.3969/j.issn.2095-7386.2015.03.004

中圖分類號：TS 207

Simultaneous determination of 7 kinds of pastry food additives by HPLC

XIANGLin-min1,JINYu-bin2

(1.School of Economics and Management,Zhejiang Ocean University,Zhoushan 316000,China;

2. Wenzhou Supervision and Inspection Institute of Quality and Technology,Wenzhou 325000,China)

Abstract：A method is proposed for the simultaneous determination of 7 kinds of food additives in pastry,calcium propionate(sodium propionate),sodium diacetate,Dehydroacetic acid,benzoic acid,sorbic acid,sodium saccharin sodium and acesulfame by high performance liquid chromatography.The experiment is accomplished by using phenyl column with 0.02moL/L monopotassium phosphate and methanol as mobile phase and gradient elution with testing in different detection wavelengths.The aboving 7 kinds of substances recovery rate ranged from 92.0% to 101.0%, and the relate standard deviation ranged from 0.75% to 0.97%.

Key words：HPLC;simultaneous determination;pastry

1引言

食品添加劑是為改善食品色、香、味等品質(zhì)，以及為防腐和加工工藝的需要而加入食品中的人工合成或天然物質(zhì)。例如：防腐劑是指天然或合成的化學成分，用于加入食品、藥品、顏料、生物標本等，以延遲微生物生長或化學變化引起的腐敗。防腐劑是用以保持食品原有品質(zhì)和營養(yǎng)價值為目的的食品添加劑[1-2]。

糕點是一種以面粉或米粉、糖、油脂、蛋、乳品等為主要原料，配以各種輔料、餡料和調(diào)味料，初制成型，再經(jīng)蒸、炸、炒等方式加工制成的食品。其品種豐富，攜帶方便，越來越受到人們的喜愛。但由于其水分含量較高，比較容易霉變。在生產(chǎn)過程中，許多廠家采用了復合防腐劑，并加入了各種甜味劑以提高其口感。根據(jù)GB 2760-2011《食品安全國家標準食品添加劑使用標準》規(guī)定, 糕點中可以添加的防腐劑有丙酸鈣、丙酸鈉、山梨酸及其鉀鹽、雙乙酸鈉、脫氫乙酸及其鈉鹽；糕點中可限量添加的甜味劑有糖精鈉和安賽蜜(乙?；前匪徕?。而苯甲酸由于毒性較大，用量過多會對人體肝臟產(chǎn)生危害, 甚至致癌，已不能用在糕點類的食品中。

目前國家在抽檢糕點時都會檢測上述項目。而目前現(xiàn)有的國家標準[8-12]對糕點中丙酸鈣(鈉)、雙乙酸鈉、脫氫乙酸、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜等7種食品添加劑進行檢測時需要用5種方法來實現(xiàn)，消耗大量人力物力。因此有必要建立一種可以對糕點中7種添加劑同時檢測的方法，以提高檢測效率，降低檢測成本。

筆者主要是以回收率為技術指標，確定糕點中七種食品添加劑的前處理提取方法、確定檢出限和線性范圍，并最終研究出用HPLC法同時測定糕點中7種食品添加劑。

2材料與方法

2.1實驗儀器

液相色譜儀：Waters2695-2996-2475 DAD；真空抽濾器；高速冷凍離心機：Eppendorf 5430R；漩渦混合儀：IKA MS3 basic；超聲波發(fā)生器：上?？茖С晝x器 SK25200H。

2.2實驗材料

面包、蛋糕、月餅、磷酸、氫氧化鈉、磷酸二氫鉀、甲醇、苯基柱、預柱、0.45μm針式過濾器。

2.3標準品

丙酸、雙乙酸鈉、脫氫乙酸、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉、安賽蜜。

3實驗方法

3.1標樣溶液的配制

苯甲酸、山梨酸、安賽蜜、糖精鈉、脫氫乙酸標準儲備液：稱取標準品苯甲酸、山梨酸、安賽蜜、糖精鈉、脫氫乙酸各0.1 g(精確至0.000 1 g)，用水定容至100 mL容量瓶中，搖勻，即分別得1 mg/mL的苯甲酸、山梨酸、安賽蜜、糖精鈉、脫氫乙酸儲備液[8-9]。

丙酸、雙乙酸鈉標準儲備液：稱取標準品丙酸、雙乙酸鈉各1 g(精確至0.000 1 g)，用水定容至100 mL，搖勻，即得10 mg/mL的丙酸、雙乙酸鈉儲備液[10-11]。

根據(jù)儀器響應值，各取7種標準儲備液適量混合，用水稀釋成表1的標準系列。

3.2高效液相色譜條件的選擇

色譜柱：Synergi Polar-RP250 mm×4.6 mm；

柱溫：30 ℃；

流動相：甲醇+0.02 mol/L磷酸二氫鉀(pH2.5)；流速1 mL/min；

檢測器：二極管陣列檢測器；

檢測波長：0—9 min，214 nm；

9.1—30 min，230 nm；

30.1—50 min，293 nm；

進樣量：10 μL。

梯度洗脫時間程序如表2所示。

表1　7種標準品的不同濃度　/(mg/mL)

表2梯度洗脫時間程序

時間/min甲醇/%0.02mol/L磷酸氫二鉀(pH=2.5)/%001009010010.1356534.0356535.03070503070

3.3樣品前處理

由于7種添加劑都易溶于水，本方法采用超聲提取法提取。經(jīng)過實驗得到以下方法：稱取樣品10 g(精確到0.01 g)于100 mL容量瓶中，加入50 mL水和1 mol/L磷酸溶液1 mL，超聲提取30 min，用氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至7—8，用水定容至刻度，搖勻。過濾，將濾液轉(zhuǎn)移至50 mL離心管中，5 000 r/min離心5 min。取上清液，經(jīng)0.45 μm濾膜過濾，其濾液為待測液。

4結果與分析

4.1色譜分離效果圖

按照上述參考條件，對7種化合物質(zhì)進行分析，得到標準樣品的譜圖如圖1所示，出峰循序依次為雙乙酸鈉、丙酸、安賽蜜、糖精鈉、山梨酸、苯甲酸、脫氫乙酸。

圖1　7種食品添加劑出峰圖

4.2工作曲線及檢測限

工作曲線以3.2的色譜條件進行測試分析，得到不同濃度下各組分的峰面積，以濃度和峰面積繪制標準曲線。得到7種物質(zhì)的標準曲線及檢測限，如表3所示。

表3　7種添加劑的線性范圍及檢出限　/(mg/kg)

4.3實際樣品的檢測

采用本方法對糕點中月餅、蛋糕、面包等進行檢測，結果見表4。從表4可以看出，方法準確度高，結果滿意。

表4　實際樣品的檢測結果　/(mg/kg)

4.4回收率及精密度(RSD)實驗

根據(jù)3.3方法加入5 mg/L標準混合溶液1 mL至樣品中，進行加標實驗，計算回收率，并用一混標標準溶液連續(xù)進樣10次，計算RSD，結果見表5。

表5　各組分RSD和回收率　/(mg/L)

5結論

綜上所述，該方法中山梨酸、苯甲酸、糖精鈉、安賽蜜、脫氫乙酸、雙乙酸鈉、丙酸鈣(鈉)色譜分離效果良好，可同時檢測。能夠幫助食品檢測機構在批量糕點檢測中節(jié)省人工時間，節(jié)省材料成本，同時提高效率，在更少的時間完成更多的任務，適合在實驗室間推廣。

參考文獻：

[1]譚朝勤,吳新. 高效液相色譜法同時測定面包糕點中苯甲酸(鈉)、山梨酸(鉀)、安賽蜜、糖精鈉和脫氫乙酸(鈉)的含量[J]. 廣東化工，2009(6).

[2]凌東輝,潘翊,鐘春霞. 糕點中脫氫乙酸的高效液相色譜C8柱測定[J]. 中國公共衛(wèi)生，2005(3) .

[3]車燕妮,蘇敬武,劉新榮,等.常溫液相色譜法快速測定食品中安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉[J]. 預防醫(yī)學文獻信息，2004(3).

[4]何云亞,陸昱養(yǎng). 高效液相色譜法同時測定食品中5種添加劑[J]. 中國衛(wèi)生檢驗雜志，2007(4).

[5]方波,徐明敏,陳波.豆制品中7種防腐劑的高效液相色譜法同時測定[J]. 中國衛(wèi)生檢驗雜志，2011(4).

[6]王冬梅,王家保,李俊玲.液相色譜法同時測定乳制品中糖精鈉、苯甲酸、山梨酸[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2005(8).

[7]楊紅梅,劉艷琴,殷曉燕,等. 高效液相色譜法同時測定食品中安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉以及脫氫乙酸[J].食品科技，2007(10).

[8]GB/T 23495-2009，食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測定高效液相色譜法[S].

[9]GB/T23377-2009，食品中脫氫乙酸的測定高效液相色譜法[S].

[10]GB/T23383-2009，食品中雙乙酸鈉的測定高效液相色譜法[S].

[11]GB/T23382-2009，食品中丙酸鈉、丙酸鈣的測定高效液相色譜法[S].

[12]GB/T5009.29-2003，食品中山梨酸、苯甲酸的測定高效液相色譜法[S].