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    不同品系栝樓種子萌發(fā)特性比較

    2015-12-22 19:00鄒琳周潔邊麗華王曉劉偉張永清
    山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年4期
    關(guān)鍵詞:品系溫度

    鄒琳+周潔+邊麗華+王曉+劉偉+張永清

    摘要:以栝樓品系KXY-001和KXY-005為試材,研究不同萌發(fā)溫度和果實(shí)貯藏時(shí)間對(duì)種子萌發(fā)特性、淀粉酶活性及抗氧化酶(CAT、SOD、POD)活性的影響。結(jié)果表明:栝樓品系KXY-001和KXY-005種子的最佳萌發(fā)溫度均為25℃;若以收獲的栝樓種子用于播種為目的,品系KXY-005可于果實(shí)采收后0~10d內(nèi)采種,品系KXY-001可于果實(shí)采后10~20d后采種。

    關(guān)鍵詞:栝樓;品系;溫度;貯藏時(shí)間;萌發(fā)特性

    中圖分類號(hào):S567.901文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào):A文章編號(hào):1001-4942(2015)04-0052-04

    栝樓(TrichosantheskirilowiiMaxim.)為葫蘆科栝樓屬多年生攀援藤本,其果實(shí)、果皮、種子和根分別作為中藥瓜蔞、瓜蔞皮、瓜蔞子和天花粉入藥,用于防治多種疾病[1,2]。生產(chǎn)上栝樓以種子繁殖為主,其萌發(fā)特性直接影響藥材產(chǎn)量。此外,栝樓果實(shí)采后需長(zhǎng)期晾曬,種子的萌發(fā)能力勢(shì)必發(fā)生變化。若收獲的種子以播種為目的,確定果實(shí)合理的貯藏時(shí)間非常重要。本研究以生產(chǎn)上2個(gè)主栽栝樓品系(KXY-001和KXY-005)為試材,比較了其種子的最適萌發(fā)溫度及果實(shí)貯藏不同時(shí)間后種子的萌發(fā)特性,以期為生產(chǎn)上栝樓優(yōu)良品種的選育及確定不同品系栝樓果實(shí)最佳貯藏時(shí)間提供依據(jù)。

    1材料與方法

    1.1試驗(yàn)材料

    栝樓品系KXY-001和KXY-005均采自濟(jì)南禾寶中藥材有限公司生產(chǎn)基地,經(jīng)山東中醫(yī)藥大學(xué)張永清教授鑒定為葫蘆科栝樓屬栝樓(TrichosantheskirilowiiMaxim.)。其中,品系KXY-001主要特點(diǎn)為果型較大,圓球形,直徑約8~12cm,表皮白綠色,皮薄,籽粒飽滿;品系KXY-005主要特點(diǎn)為果型較小,橢圓形,直徑約6~10cm,表皮網(wǎng)狀墨綠色,皮厚。二者生物學(xué)特征如表1所示。

    收稿日期:2014-12-12

    基金項(xiàng)目:“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃課題“山茱萸、栝樓、厚樸、盾葉薯蕷規(guī)范化種植基地及其SOP優(yōu)化升級(jí)研究”(2011BAI06B06);山東省海外高層次人才資助專項(xiàng)資金

    1.2試驗(yàn)方法

    1.2.1不同溫度下種子的萌發(fā)特性比較選取籽粒飽滿、大小均一的栝樓種子,用10%H2O2消毒15min,蒸餾水沖洗3~4次,晾干備用。將種子置于鋪有兩層濾紙且用蒸餾水潤(rùn)濕的培養(yǎng)皿(直徑20cm)中,每皿50粒,分別置于10、15、20、25℃光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)條件:光強(qiáng)260~270μmol/(m2·s),14h光/10h暗,相對(duì)濕度65%~70%。從試驗(yàn)當(dāng)日起,每天記錄種子萌發(fā)數(shù)(以胚根頂出種皮為發(fā)芽標(biāo)準(zhǔn)),適時(shí)補(bǔ)充蒸餾水,以連續(xù)5d不再有種子萌發(fā)的時(shí)間作為種子發(fā)芽結(jié)束期。

    1.2.2不同果實(shí)貯藏時(shí)間下種子的萌發(fā)特性比較果實(shí)采收后每隔10d隨機(jī)選取4個(gè)果實(shí)取種,用于種子萌發(fā)試驗(yàn),萌發(fā)溫度25℃,其余條件同上。至發(fā)芽結(jié)束期,取栝樓種子檢測(cè)淀粉酶、抗氧化酶(SOD、POD和CAT)活性,每皿作為一個(gè)處理,每個(gè)理重復(fù)6次。

    1.3測(cè)定指標(biāo)與方法

    (l)淀粉酶活性采用紫外法測(cè)定[3]。以每分鐘OD值變化表示淀粉酶的相對(duì)活性。

    (2)SOD活性采用核黃素-NBT法[4]進(jìn)行測(cè)定。以每毫克蛋白每每分鐘抑制光化還原50%的氯化硝基氮藍(lán)四唑(NBT)為一個(gè)酶活性單位(U),酶活性以U/mgprotein表示。

    (3)POD活性采用愈創(chuàng)木酚比色法[5]進(jìn)行測(cè)定。以每毫克蛋白每分鐘A470變化0.01為1個(gè)酶活性單位(U)、酶活性以U/mgprotein表示。

    (4)CAT活性采用紫外吸收法[3,6]進(jìn)行測(cè)定。以每毫克蛋白每分鐘A240減少0.01為一個(gè)酶活單位(U),酶活性以U/mgprotein表示。

    1.4數(shù)據(jù)分析

    采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析,MicrosoftExcel軟件繪制圖表。

    2結(jié)果與分析

    2.1不同溫度下種子的萌發(fā)特性比較

    2.1.1萌發(fā)率比較由表2可見,10℃和15℃條件下2個(gè)品系栝樓種子均未萌發(fā);20℃條件下,KXY-001萌發(fā)率為16.43%,KXY-005種子萌發(fā)率為0;25℃條件下,KXY-001種子萌發(fā)率較20℃條件下有所升高,達(dá)到32.86%,KXY-005萌發(fā)率為31.43%。由此可見,相同溫度條件下KXY-001種子的萌發(fā)率高于KXY-005,25℃為2個(gè)栝樓品系種子的最佳萌發(fā)溫度。

    2.1.2淀粉酶及抗氧化酶活性比較不同溫度下.2個(gè)品系栝樓種子淀粉酶活性變化如圖1A所示。10℃條件下KXY-005中淀粉酶活性比KXY-001高41.51%;15℃和20℃條件下KXY-001中淀粉酶活性比KXY-005分別高54.86%和111.59%;25℃條件下,2個(gè)品系中淀粉酶活性無顯著性差異。總的來看,隨溫度升高兩栝樓品系中淀粉酶活性均有所升高,KXY-001、KXY-005種子中淀粉酶活性分別在20、25℃時(shí)最高。

    2個(gè)品系栝樓種子SOD活性隨著溫度升高均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),且均在20℃時(shí)最高(圖1B)。20℃和25℃條件下KXY-001中SOD活性分別比KXY-005高出52.69%和201.00%。

    不同溫度下2個(gè)品系栝樓種子POD活性如圖1C所示。KXY-001種子POD活性隨著溫度升高呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢(shì),于20℃時(shí)達(dá)最高。KXY-005種子中POD活性隨溫度升高呈現(xiàn)先升高后降低再升高的變化趨勢(shì),在15℃時(shí)達(dá)最高。

    不同溫度下2個(gè)品系栝樓種子CAT活性由圖1D所示。不同溫度下2個(gè)栝樓品系種子CAT活性變化趨勢(shì)與SOD相似,均隨溫度的升高呈先升高后降低的變化趨勢(shì),且均在20℃時(shí)最高;25℃條件下KXY-001CAT活性比KXY-005高出43.39%。endprint

    2.2不同果實(shí)貯藏時(shí)間下種子的萌發(fā)特性比較

    2.2.1萌發(fā)率比較由表3可知,不同果實(shí)貯藏時(shí)間對(duì)種子萌發(fā)率影響明顯。剛采收的栝樓果實(shí)其種子萌發(fā)率較低,隨果實(shí)貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),種子萌發(fā)率呈先升高后降低的變化趨勢(shì)。KXY-001和KXY-005種子萌發(fā)率分別在貯藏第20d和第10d時(shí)最高,分別為27.14%和28.57%。

    2.2.2淀粉酶及抗氧化酶活性比較不同果實(shí)貯藏時(shí)間下,2個(gè)栝樓品系種子淀粉酶活性隨果實(shí)貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)呈先升高后降低再升高的變化趨勢(shì)(圖2A)。KXY-001在果實(shí)貯藏第10d時(shí)達(dá)到最大,而KXY-005淀粉酶活性在30d時(shí)最高。

    不同果實(shí)貯藏時(shí)間下,2個(gè)品系種子SOD活性如圖2B所示。KXY-001種子SOD活性隨果實(shí)貯藏時(shí)間延長(zhǎng)呈先升高后降低的變化趨勢(shì),果實(shí)貯藏20d時(shí)SOD活性達(dá)最高,是剛采收果實(shí)種子的5.06倍。KXY-005種子SOD活性隨果實(shí)貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)呈先降低后增加的變化趨勢(shì),果實(shí)貯藏30d時(shí)SOD活性最高,是剛采果實(shí)種子的6.54倍。

    不同果實(shí)貯藏時(shí)間下,2個(gè)品系種子POD活性如圖2C所示。KXY-001種子POD活性隨果實(shí)貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),呈先升高后降低的變化趨勢(shì)。KXY-005種子POD活性隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)呈先降低后升高再降低的變化趨勢(shì)。果實(shí)貯藏第20d時(shí),KXY-001和KXY-005種子POD活性均達(dá)最高,分別為剛采收果實(shí)種子的4.40倍和1.20倍。

    不同果實(shí)貯藏時(shí)間下,2個(gè)品系種子CAT活性如圖2D所示。隨果實(shí)貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),KXY-001種子CAT活性呈先降低后升高再降低的變化趨勢(shì),KXY-005種子CAT活性呈先升高后降低的變化趨勢(shì),二者均在果實(shí)貯藏20d時(shí)達(dá)最大,分別為剛采收果實(shí)的11.20倍和6.44倍。

    3結(jié)論與討論

    本試驗(yàn)結(jié)果表明,栝樓品系KXY-001和KXY-005種子的最佳萌發(fā)溫度均為25℃,低溫不利于其萌發(fā)。山東屬典型的暖溫帶季風(fēng)氣候,經(jīng)常出現(xiàn)倒春寒現(xiàn)象,為栝樓種子萌發(fā)帶來嚴(yán)峻挑戰(zhàn),種子抗寒特性是品種選育的重要方向。KXY-001屬于本地優(yōu)選種質(zhì),也是目前生產(chǎn)上主要栽培品系之一,較能適應(yīng)主產(chǎn)區(qū)的氣候特征。在吸脹萌發(fā)期,種子內(nèi)會(huì)積累有害物質(zhì)代謝和呼吸代謝所產(chǎn)生的活性氧,保護(hù)酶系統(tǒng)(如SOD、POD、CAT)主要擔(dān)負(fù)著清除活性氧的作用,使活性氧維持在一個(gè)較低的水平[7~9]。SOD、POD、CAT在低溫條件下活性較低,隨著溫度升高不斷變化,相互協(xié)調(diào)。

    果實(shí)采收后立即采種,KXY-001種子萌發(fā)率較低,貯藏10d和20d后采種,萌發(fā)率明顯升高,且淀粉酶活性也較高。果實(shí)采后貯藏0~10d采種,kXY-005種子萌發(fā)率較高。隨著貯藏時(shí)間延長(zhǎng),抗氧化酶活性均表現(xiàn)出不同程度的先升高后降低,這可能是源于果實(shí)貯藏早期水分逐漸喪失,導(dǎo)致生物膜中的脂質(zhì)過氧化,抗氧化酶活性增加以保護(hù)機(jī)體免受氧化損傷,而貯藏后期果實(shí)失水程度加劇,活性氧產(chǎn)生和消除之間的平衡體系遭到破壞,抗氧化系統(tǒng)受到損壞。總體來看,若以收獲的栝樓種子用于播種為目的,KXY-005可于果實(shí)采收后0~10d內(nèi)采種,而KXY-001可于果實(shí)采后10~20d采種。endprint

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