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    飼糧蛋氨酸水平對配種前期雌性藍(lán)狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率、氮代謝及血清生化指標(biāo)的影響

    2015-12-21 08:24:52郭俊剛張鐵濤吳學(xué)壯虎高秀華楊福合邢秀梅
    動物營養(yǎng)學(xué)報 2015年9期
    關(guān)鍵詞:藍(lán)狐蛋氨酸雌性

    郭俊剛 張鐵濤 吳學(xué)壯 劉 志 崔 虎高秀華* 楊福合 邢秀梅

    (1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所,北京 100081;2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所,特種經(jīng)濟(jì)動物分子生物學(xué)省部重點共建實驗室,長春130112)

    種狐的體況與繁殖有著極密切的關(guān)系,過肥、過瘦都會降低繁殖力。配種前期的主要任務(wù)是平衡營養(yǎng),調(diào)整狐的體況,并使其控制在中等或中上等水平。此期間種狐的營養(yǎng)需求高,要求飼料營養(yǎng)全面。含硫氨基酸為藍(lán)狐的第一限制性氨基酸[1],在飼糧中添加適宜水平含硫氨基酸可改善氨基酸平衡狀況,滿足機(jī)體需要。而蛋氨酸為含硫氨基酸之一,在動物體內(nèi)不僅能合成機(jī)體蛋白質(zhì),而且能轉(zhuǎn)化為半胱氨酸和胱氨酸,滿足動物營養(yǎng)需 要[2]。崔 虎[3]研 究表明,在蛋白 質(zhì) 水 平 為30%飼糧中,蛋氨酸水平為1.14%時,育成期藍(lán)狐的生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率和氮代謝比較理想。郭俊剛等[4]研究表明,蛋白質(zhì)水平為26%的飼糧中添加0.6%蛋氨酸,即飼糧中蛋氨酸水平為0.99%時,冬毛期藍(lán)狐的生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化率和氮沉積較為理想,可在生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。然而,關(guān)于蛋氨酸在藍(lán)狐繁殖期上的應(yīng)用研究尚存在諸多空白,因此,為進(jìn)一步完善研究藍(lán)狐飼糧中適宜蛋氨酸水平,在前期試驗[5]得出配種前期雌性藍(lán)狐適宜蛋白質(zhì)水平基礎(chǔ)上,研究飼糧蛋氨酸水平對配種前期雌性藍(lán)狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率、氮代謝及血清生化指標(biāo)的影響,篩選出配種前期雌性藍(lán)狐飼糧中適宜蛋氨酸水平,以期達(dá)到蛋白質(zhì)資源的高效利用,節(jié)約養(yǎng)殖戶成本,提高養(yǎng)殖戶經(jīng)濟(jì)效益。

    1 材料與方法

    1.1 試驗動物與飼養(yǎng)管理

    選擇健康初產(chǎn)雌性北極狐(8~9月齡)150只,隨機(jī)分為5組,每組30個重復(fù),每個重復(fù)1只藍(lán)狐,均為單籠飼養(yǎng)。Ⅰ~Ⅴ組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加0、0.26%、0.52%、0.78%和1.04%蛋氨酸的試驗飼糧。預(yù)試期7d,正試期60d。試驗開始前,對藍(lán)狐進(jìn)行常規(guī)免疫接種,試驗期間注射1次加德納氏菌疫苗。每天09:00飼喂1次,自由飲水。試驗從2013年12月1日至2014年1月30日在農(nóng)業(yè)部長白山野生生物資源重點野外科學(xué)觀測試驗站進(jìn)行。

    1.2 試驗飼糧

    以膨化玉米、魚粉、豆粕等為主要原料,參照國內(nèi)文獻(xiàn)[5-6]報道,配制基礎(chǔ)飼糧,其組成及營養(yǎng)水平見表1。

    1.3 消化代謝試驗

    在正試期開始30d后,每組挑選8只體重相近的健康雌性藍(lán)狐進(jìn)行4d消化代謝試驗。采用全收糞法,消化代謝試驗期間飼養(yǎng)管理與日常飼養(yǎng)管理相同。每天收集的糞便稱重后按鮮重的5%加入10%硫酸溶液,并加少量甲苯防腐,保存于-20℃?zhèn)溆?。每天收集的尿液中?00mL加入10mL的10%硫酸溶液,加4滴甲苯用于防腐,保存于-20℃?zhèn)溆谩?/p>

    1.4 血清制備

    在正試期開始40d后,每組挑選10只健康雌性藍(lán)狐進(jìn)行腿部靜脈采血5mL,采血時間08:30至09:30,裝于促凝管中,靜置析出血清后3 500r/min、4~8 ℃ 離 心 5min,血 清 分 裝 于1.5mL的Eppendorf管中,于-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.5 測試指標(biāo)及方法

    樣品分析:105℃烘干法測定干物質(zhì)含量;索氏浸提法測定粗脂肪含量,采用索氏脂肪提取器,主要試劑為無水乙醚;凱氏定氮法測定粗蛋白質(zhì)含量,采用Kjeltec8400全自動凱氏定氮儀。利用Hitachi日立L-8900全自動專用氨基酸分析儀分析氨基酸含量。待血清樣品室溫解凍后,采用威圖-E全自動生化分析儀測定血清生化指標(biāo)。尿素氮(UN)、天門冬酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、總蛋白(TP)和白蛋白(ALB)測定所用試劑全部購自中生北控有限公司,球蛋白(GLOB)由總蛋白和白蛋白差值計算獲得。

    表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air-dry basis) %

    干物質(zhì)消化率(%)=[(干物質(zhì)食入量-干物質(zhì)排泄量)/干物質(zhì)食入量]×100;

    粗蛋白質(zhì)消化率(%)=[(粗蛋白質(zhì)食入量-粗蛋白質(zhì)排泄量)/粗蛋白質(zhì)食入量]×100;

    粗脂肪消化率(%)=[(粗脂肪食入量-粗脂肪排泄量)/粗脂肪食入量]×100;

    氨基酸表觀消化率(%)=[(氨基酸食入量-氨基酸排泄量)/氨基酸食入量]×100;

    氮沉積(g/d)=食入氮-糞氮-尿氮。

    1.6 數(shù)據(jù)處理

    用統(tǒng)計軟件SAS 9.1對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,表中結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用單因素方差分析(one-way ANOVA)進(jìn)行差異顯著性檢驗,并對差異顯著者進(jìn)行Duncan氏法多重比較,檢驗差異顯著性,其中P<0.05為差異顯著,P<0.01為差異極顯著,P>0.05為差異不顯著。

    2 結(jié) 果

    2.1 飼糧蛋氨酸水平對配種前期雌性藍(lán)狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

    由表2可以看出,干物質(zhì)采食量和干物質(zhì)排出量各組間差異不顯著(P>0.05),但隨著飼糧蛋氨酸水平的提高,干物質(zhì)排出量有相對降低的趨勢。干物質(zhì)消化率和粗脂肪消化率隨著飼糧蛋氨酸水平的提高,有相對提高的趨勢(P>0.05)。Ⅲ組粗蛋白質(zhì)消化率顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)。

    表2 飼糧蛋氨酸水平對配種前期雌性藍(lán)狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響Table 2 Effects of dietary Met levels on nutrient digestibility of female blue foxes in prepare breeding period

    2.2 飼糧蛋氨酸水平對配種前期雌性藍(lán)狐氮代謝的影響

    由表3可以看出,各組雌性藍(lán)狐食入氮含量差異不顯著(P>0.05),Ⅴ組糞氮含量顯著低于Ⅱ組(P<0.05)。Ⅲ組和Ⅳ組尿氮含量顯著低于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)。Ⅳ組氮沉積量極顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.01),Ⅲ組和Ⅴ組氮沉積含量顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)。

    表3 飼糧蛋氨酸水平對配種前期雌性藍(lán)狐氮代謝的影響Table 3 Effects of dietary Met levels on nitrogen metabolism of female blue foxes in prepare breeding period g/d

    2.3 飼糧蛋氨酸水平對配種前期雌性藍(lán)狐氨基酸表觀消化率的影響

    由表4可以看出,Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組蛋氨酸表觀消化率顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05),Ⅳ組和Ⅴ組蘇氨酸表觀消化率顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05),Ⅰ組蘇氨酸、甘氨酸、亮氨酸、纈氨酸表觀消化率顯著低于Ⅳ組和Ⅴ組(P<0.05),Ⅰ組和Ⅱ組半胱氨酸表觀消化率極顯著低于Ⅳ組和Ⅴ組(P<0.01),Ⅴ組精氨酸表觀消化率顯著高于Ⅰ組(P<0.05),Ⅰ組谷氨酸表觀消化率極顯著低于Ⅳ組和Ⅴ組(P<0.01)。

    表4 飼糧蛋氨酸水平對配種前期雌性藍(lán)狐氨基酸表觀消化率的影響Table 4 Effects of dietary Met levels on amino acid apparent digestibility of female blue foxes in prepare breeding period %

    2.4 飼糧蛋氨酸水平對配種前期雌性藍(lán)狐血清生化指標(biāo)的影響

    由表5可以看出,Ⅲ組和Ⅳ組丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性顯著高于Ⅰ組(P<0.05),而天門冬酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性各組間差異不顯著(P>0.05)。白蛋白和球蛋白含量隨飼糧蛋氨酸水平的提高,有先升高后降低的趨勢(P>0.05)。Ⅲ組總蛋白含量顯著高于Ⅰ組(P<0.05),尿素氮含量各組間差異不顯著(P>0.05)。

    3 討 論

    3.1 飼糧蛋氨酸水平對配種前期雌性藍(lán)狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

    配種前期的主要任務(wù)是平衡營養(yǎng),調(diào)整雌性藍(lán)狐的體況,并使其控制在中等或中上等水平。在整個配種前期限制飼喂,因此雌性藍(lán)狐各組干物質(zhì)采食量差異不顯著,隨著試驗組雌性藍(lán)狐飼糧中蛋氨酸添加水平的提高,營養(yǎng)物質(zhì)消化率呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢,干物質(zhì)排出量呈現(xiàn)降低的趨勢,在雌性藍(lán)狐飼糧中添加0.52%的蛋氨酸干物質(zhì)消化率、粗蛋白質(zhì)消化率和粗脂肪消化率在各組中最高。蛋氨酸為藍(lán)狐的第一限制性氨基酸[7],如果蛋氨酸缺乏就會導(dǎo)致體內(nèi)蛋白質(zhì)合成受阻,造成機(jī)體損害,添加適宜水平蛋氨酸可改善氨基酸平衡狀況,滿足其對含硫氨基酸的需要。Dahlman[8]研究表明,飼糧中添加蛋氨酸可以提高粗脂肪的消化率,促進(jìn)藍(lán)狐生長,提高飼料轉(zhuǎn)化率。本試驗結(jié)果表明,飼糧中添加蛋氨酸可以提高粗脂肪消化率,但效果并不是十分明顯,可能是配種前期為控制雌性藍(lán)狐體況限飼的原因,當(dāng)飼糧采食水平較低時,食糜的排空速度也較慢,有利于營養(yǎng)物質(zhì)被充分消化吸收,因此消化率會相應(yīng)升高。

    表5 飼糧蛋氨酸水平對配種前期雌性藍(lán)狐血清生化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of dietary Met levels on serum biochemical parameters of female blue foxes n prepare breeding period

    3.2 飼糧蛋氨酸水平對配種前期雌性藍(lán)狐氮代謝的影響

    本試驗結(jié)果可知,各組藍(lán)狐的干物質(zhì)采食量和蛋白質(zhì)水平之間差異不顯著,藍(lán)狐的食入氮含量與干物質(zhì)采食量和蛋白質(zhì)水平之間存在很大的相關(guān)性,因而各組藍(lán)狐的食入氮含量不存在顯著差異。楊春花等[9]研究表明,飼糧氨基酸平衡可減少尿氮排出,提高氮的利用率。董志巖等[10]研究表明,飼糧蛋白質(zhì)水平一定的情況下,提高限制性氨基酸水平,尿氮和糞氮排出量均顯著降低。本試驗研究結(jié)果表明,隨著飼糧蛋氨酸水平的提高,糞氮和尿氮排出量分別具有降低的趨勢,而氮沉積具有相對增加的趨勢。蛋氨酸是藍(lán)狐的限制性氨基酸,提高飼糧中蛋氨酸水平,有利于提高藍(lán)狐的營養(yǎng)物質(zhì)消化率,尤其是蛋白質(zhì)消化率,這由本試驗結(jié)果可得到證實。飼糧中添加蛋氨酸可以提高氮沉積,提高藍(lán)狐對飼糧中氮的利用率,這與張鐵濤等[11]的研究結(jié)果基本一致。

    3.3 飼糧蛋氨酸水平對配種前期雌性藍(lán)狐氨基酸表觀消化率的影響

    在動物營養(yǎng)中,決定飼料氨基酸利用率的首要指標(biāo)是消化率,它決定于飼料中氨基酸在消化道內(nèi)的消化、吸收狀況。本試驗結(jié)果表明,隨著蛋氨酸水平的提高,氨基酸表觀消化率相應(yīng)提高。蛋氨酸作為蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)組成部分和彌補(bǔ)氨基酸平衡的營養(yǎng)性添加劑,提供氨基酸轉(zhuǎn)換過程中所需的活性甲基,飼糧中添加適宜水平蛋氨酸能提高蛋白質(zhì)和其他氨基酸消化利用率。Dilger等[12]研究表明,某一氨基酸添加量的差別會影響其他氨基酸的消化率,所以氨基酸表觀消化率隨飼糧氨基酸攝入量的增加而增加[13]。Dahlman等[14]研究表明,飼糧中添加DL-蛋氨酸或L-蛋氨酸能夠提高藍(lán)狐的氨基酸表觀消化率,補(bǔ)充外源性的氨基酸比調(diào)節(jié)飼糧中氨基酸比例效果更加明顯。蛋氨酸是毛皮動物第一限制性氨基酸,含硫氨基酸需要量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于其他家畜。張鐵濤等[11]研究在育成期藍(lán)狐飼糧中添加蛋氨酸,可以提高飼糧中含硫氨基酸的表觀消化率,本試驗結(jié)果與其結(jié)果基本一致。在動物飼糧生產(chǎn)中添加限制性合成氨基酸,能夠促進(jìn)飼糧中氨基酸平衡,更符合理想蛋白質(zhì)模型,因此,提高了飼糧中蛋白質(zhì)和氨基酸利用率。粗蛋白質(zhì)和各種氨基酸消化率是根據(jù)飼料和糞便中粗蛋白質(zhì)含量和干物質(zhì)消化率計算的,由于受各種氨基酸之間的協(xié)同和拮抗關(guān)系的影響,還受到胃腸道微生物及其代謝產(chǎn)物,消化道分泌物和經(jīng)消化道排泄的代謝產(chǎn)物,消化道黏膜脫落物的影響。因此,本試驗中各種氨基酸表觀消化率與粗蛋白質(zhì)消化率變化規(guī)律也不完全一致。

    3.4 飼糧蛋氨酸水平對配種前期雌性藍(lán)狐血清生化指標(biāo)的影響

    Gugolek等[15]研究表明,飼糧中添加蛋氨酸可提高藍(lán)狐血紅蛋白水平,可能對造血具有積極影響,有利于改善藍(lán)狐健康狀況,并且指出藍(lán)狐對蛋氨酸需要量近年來呈現(xiàn)增加的趨勢。天門冬酸氨基轉(zhuǎn)移酶和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶是蛋白質(zhì)代謝過程中2種重要的酶,在蛋白質(zhì)合成和分解中發(fā)揮作用,其活性能夠直接反映機(jī)體蛋白質(zhì)合成代謝的狀況。Ⅲ組丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性最高,說明飼糧中添加適宜水平蛋氨酸有利于體內(nèi)蛋白質(zhì)和氨基酸相互轉(zhuǎn)化。血清總蛋白是機(jī)體蛋白質(zhì)的一個來源,用于修補(bǔ)組織和提供能量,在一定程度上也代表了飼糧蛋白質(zhì)水平以及動物對蛋白質(zhì)的消化吸收程度。本試驗研究結(jié)果表明,飼糧中添加蛋氨酸可以顯著提高血清中總蛋白含量,可以提高白蛋白和球蛋白含量。周勤飛等[16]研究表明,母兔飼喂不同水平蛋氨酸飼糧,球蛋白含量呈上升趨勢,白蛋白含量先上升后下降,說明飼糧中適宜的蛋氨酸水平能促進(jìn)體內(nèi)蛋白質(zhì)營養(yǎng)利用,本試驗結(jié)果與其基本一致。血清尿素含量氮是衡量動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸平衡的一個重要指標(biāo)[11]。血清尿素氮含量過高會導(dǎo)致尿氮的增加,從而降低了機(jī)體對氮的利用率。通常較低的血清尿素氮含量表明氨基酸平衡較好,機(jī)體蛋白質(zhì)合成率較高。本試驗結(jié)果血清尿素氮含量各組間雖差異不顯著,但隨著飼糧蛋氨酸水平的提高,有相對降低的趨勢。

    4 結(jié) 論

    在蛋白質(zhì)水平為29.31%飼糧中添加0.52%蛋氨酸,即飼糧中蛋氨酸總水平為1.03%時,配種前期雌性藍(lán)狐的營養(yǎng)物質(zhì)消化率和血清生化指標(biāo)較為理想,并且滿足配種前期雌性藍(lán)狐的蛋氨酸需要量。

    [1] DAHLMAN T,VALAJA J,NIEMEL?P,et al.Influence of protein level and supplementary L-methionine and lysine on growth performance and fur quality of blue fox(Alopex lagopus)[J].Acta Agriculture Scandinavica Section,2002,52(4):174-182.

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