飼糧纖維水平對高黎貢山仔豬與杜洛克仔豬生產(chǎn)性能、小腸形態(tài)學(xué)、小腸黏膜金屬硫蛋白1及組織急性期蛋白基因表達(dá)影響的比較研究

李美荃 信愛國 張春勇 安清聰 王榮蛟 潘洪彬 陳克嶙 郭榮富＊＊

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南省動(dòng)物營養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明 650201;2.云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，昆明 650224)

高黎貢山豬是我國云南省特有的山地放牧型小型豬種，主要分布在高黎貢山平均海拔2 300 m(987～3 980 m)的地區(qū)，具有耐粗飼、抗逆性強(qiáng)、貯脂能力強(qiáng)等特性，是我國珍稀的優(yōu)良地方豬種［1］。而杜洛克豬生產(chǎn)性能優(yōu)秀，主要表現(xiàn)為生長速度快、胴體瘦肉率及飼料轉(zhuǎn)化率高，已成為主要生產(chǎn)豬種雜交組合的終端父本，因此本研究選用杜洛克豬與高黎貢山豬進(jìn)行比較。已有研究表明，豬能消化粗纖維，粗纖維是豬飼糧中不可缺少的部分。優(yōu)質(zhì)適量的纖維具有提高豬的生產(chǎn)性能、增強(qiáng)豬的健康、維持胃腸道的微生態(tài)平衡、調(diào)控仔豬消化道的發(fā)育等作用。但關(guān)于粗纖維水平對金屬硫蛋白1(metallothionein 1，MT1)、急性期蛋白(acute phase proteins，APPs)基因表達(dá)的影響還鮮見報(bào)道。APPs作為一項(xiàng)能反映動(dòng)物健康狀態(tài)及潛在病變的靈敏指標(biāo)逐漸得到研究和發(fā)展。MT1具有抗氧化效應(yīng)，是動(dòng)物生理健康的重要標(biāo)識之一。Varel等［2］報(bào)道纖維可以減少消化道潰瘍的形成，有利于仔豬腸道健康;Urriola等［3］研究表明中國本地豬較培育豬對纖維有更高的消化能力;Hedemann等［4］研究報(bào)道可溶性纖維可抑制致病，更好的保護(hù)仔豬腸道;Hermes等［5］試驗(yàn)證明纖維有利于提高斷奶仔豬的生產(chǎn)性能，對腸道微生物的定植也有重大意義。在不同飼糧纖維水平下高黎貢山豬、杜洛克豬是否能保持各自的生產(chǎn)特性?不同纖維水平飼糧在影響腸道健康的同時(shí)可能引起金屬硫蛋白(MTs)和APPs的分泌量發(fā)生改變，這是否會(huì)對仔豬的健康產(chǎn)生影響?鑒于此，本試驗(yàn)通過研究不同纖維水平飼糧對高黎貢山仔豬、杜洛克仔豬小腸形態(tài)學(xué)的影響，探索不同纖維水平飼糧對仔豬小腸黏膜MT1和組織APPs mRNA表達(dá)的影響，旨在為開發(fā)利用高黎貢山豬種資源提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選擇35日齡健康的高黎貢山斷奶仔豬、杜洛克斷奶仔豬各24頭(公母各占1/2)為研究對象，試驗(yàn)設(shè)對照組和試驗(yàn)組，飼糧纖維水平分別為3.53%和7.04%。每組12個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭豬，飼養(yǎng)至60日齡，試驗(yàn)期為25 d。

1.2 飼糧配制和飼養(yǎng)管理

參照NRC(2012)豬營養(yǎng)需要推薦量配制試驗(yàn)飼糧，試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

試驗(yàn)豬飼喂時(shí)間在每天的08:00、12:00、16:00和20:00左右，每次喂料量以料槽中有少量余料為宜，自由飲水。豬舍溫度控制在25～28℃，舍內(nèi)相對濕度在65% ～70%。

1.3 測定指標(biāo)與方法

1.3.1 生產(chǎn)性能測定

測定試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)各組仔豬的體重和采食量，計(jì)算日增重、日采食量、料重比。

1.3.2 小腸形態(tài)學(xué)觀察

試驗(yàn)結(jié)束后，屠宰對照組和試驗(yàn)組仔豬各24頭，迅速采集十二指腸、空腸和回腸，參照陳恒燦等［6］方法進(jìn)行前處理后觀察小腸形態(tài)學(xué)變化。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets(air-dry basis) %

1.3.3 MT1、APPs mRNA 相對表達(dá)量檢測

對屠宰的48頭斷奶仔豬，迅速采集肝臟、胰臟、脾臟、腎臟、十二指腸、空腸、回腸7種組織，-80℃速凍，用于檢測MT1、C-反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)、觸珠蛋白(haptoglobin，HP)、α1-酸性糖蛋白(α1-acid glycoprotein，AGP)和血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid-A，SAA)mRNA相對表達(dá)量。6個(gè)基因引物設(shè)計(jì)采用Primer Express Software。各基因引物序列見表2。

小腸組織的MT1以β-肌動(dòng)蛋白(β-actin)為內(nèi)參基因進(jìn)行相對定量，APPs均是以18S rRNA、甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)和β-actin共同為內(nèi)參基因進(jìn)行相對定量，相對定量計(jì)算方法采用 Pfaffl［7］的方法，結(jié)果以 mRNA 相對表達(dá)量表示。

表2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物Table 2 Primers for real-time qPCR

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

所有數(shù)據(jù)均采用Excel 2003進(jìn)行整理，采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，組間數(shù)據(jù)采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果

2.1 生產(chǎn)性能

由表3可見，飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，高黎貢山仔豬的日增重極顯著高于杜洛克仔豬(P＜0.01)，日采食量顯著高于杜洛克仔豬(P＜0.05)，料重比顯著低于杜洛克仔豬(P＜0.05)。飼糧纖維水平為3.53%時(shí)，高黎貢山仔豬的日增重極顯著低于杜洛克仔豬(P＜0.01)，料重比顯著高于杜洛克仔豬(P＜0.05)。杜洛克仔豬飼糧纖維水平為3.53%時(shí)，日增重極顯著高于其飼糧纖維水平為7.04%(P＜0.01)，料重比顯著低于其飼糧纖維水平為7.04%(P＜0.05)，日采食量差異不顯著(P＞0.05)。高黎貢山仔豬飼糧纖維水平為3.53%時(shí)，日增重極顯著低于其飼糧纖維水平為7.04%(P＜0.01)，日采食量顯著低于其飼糧纖維水平為7.04%時(shí)(P＜0.05)，料重比顯著高于其飼糧纖維水平為7.04%(P＜0.05)。

2.2 小腸形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果

由表4可見，飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，高黎貢山仔豬十二指腸、空腸、回腸的絨毛長度極顯著大于杜洛克仔豬(P＜0.01);十二指腸、空腸隱窩深度極顯著低于杜洛克仔豬(P＜0.01);十二指腸、空腸、回腸絨毛長度/隱窩深度極顯著大于杜洛克仔豬(P＜0.01)。飼糧纖維水平為3.53%時(shí)，高黎貢山仔豬十二指腸、空腸、回腸的絨毛長度極顯著小于杜洛克仔豬(P＜0.01);十二指腸、空腸隱窩深度極顯著高于杜洛克仔豬(P＜0.01);十二指腸、空腸、回腸絨毛長度/隱窩深度極顯著小于杜洛克仔豬(P＜0.01)。高黎貢山仔豬飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，十二指腸、空腸、回腸的絨毛長度極顯著大于其飼糧纖維水平為3.53%時(shí)(P＜0.01);十二指腸、空腸、回腸隱窩深度極顯著低于其飼糧纖維水平為3.53%時(shí)(P＜0.01);十二指腸、空腸、回腸絨毛長度/隱窩深度極顯著大于其飼糧纖維水平為3.53%時(shí)(P＜0.01)。杜洛克仔豬飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，十二指腸、空腸、回腸的絨毛長度極顯著小于其飼糧纖維水平為3.53%時(shí)(P＜0.01);十二指腸、空腸、回腸隱窩深度極顯著高于其飼糧纖維水平為3.53%時(shí)(P＜0.01);十二指腸、空腸、回腸絨毛長度/隱窩深度極顯著小于其飼糧纖維水平為 3.53%時(shí)(P＜0.01)。

表3 不同纖維水平飼糧對仔豬生產(chǎn)性能的影響Table 3 Effects of different levels of dietary fiber on performance of piglets

表4 不同纖維水平飼糧對仔豬小腸形態(tài)學(xué)的影響Table 4 Effects of different levels of dietary fiber on intestinal morphology of piglets μm

2.3 小腸黏膜MT1 mRNA相對表達(dá)量

不同纖維水平飼糧對仔豬小腸黏膜MT1 mRNA相對表達(dá)量的影響如圖1所示。各組仔豬的MT1 mRNA相對表達(dá)量在十二指腸均極顯著高于空腸和回腸(P＜0.01)。在十二指腸中，高黎貢山仔豬飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，MT1 mRNA相對表達(dá)量極顯著高于其他3組(P＜0.01);杜洛克仔豬在飼糧纖維水平為7.04%時(shí)MT1 mRNA相對表達(dá)量極顯著高于飼糧纖維水平為3.53%時(shí)(P＜0.01)。在空腸中，飼糧纖維水平為 7.04%時(shí)，高黎貢山仔豬與杜洛克仔豬之間MT1 mRNA相對表達(dá)量差異不顯著(P＞0.05);飼糧纖維水平為3.53%時(shí)，高黎貢山仔豬MT1 mRNA相對表達(dá)量極顯著高于杜洛克仔豬(P＜0.01);高黎貢山仔豬與杜洛克仔豬在飼糧纖維水平為7.04%時(shí)MT1 mRNA相對表達(dá)量極顯著高于飼糧纖維水平為3.53%時(shí)(P＜0.01);在回腸中，高黎貢山仔豬飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，MT1 mRNA相對表達(dá)量極顯著高于其他3組(P＜0.01)，其他3組間差異不顯著(P＞0.05)。

圖1 仔豬小腸黏膜中MT1 mRNA表達(dá)趨勢Fig.1 Expression trend of MT1 mRNA in intestinal mucosa of piglets

2.4 不同組織APPs mRNA相對表達(dá)量

CRP mRNA表達(dá)差異(圖2):CRP mRNA相對表達(dá)量在胰臟最高，極顯著高于其他組織(P＜0.01)。飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，高黎貢山仔豬肝臟、脾臟、胰腺、空腸CRP mRNA相對表達(dá)量極顯著高于同飼糧纖維水平時(shí)的杜洛克仔豬(P＜0.01)。飼糧纖維水平為3.53%時(shí)，高黎貢山仔豬脾臟、腎臟、胰腺、空腸、回腸CRP mRNA相對表達(dá)量極顯著高于飼糧纖維水平為7.04%及3.53%時(shí)的杜洛克仔豬(P＜0.01)，極顯著低于飼糧纖維水平為7.04%時(shí)的高黎貢山仔豬(P＜0.01)。在腎臟中，飼糧纖維水平為3.53%時(shí)的高黎貢山仔豬CRP mRNA相對表達(dá)量最高。在十二指腸中，飼糧纖維水平為7.04%的杜洛克仔豬 CRP mRNA相對表達(dá)量最高。

圖2 仔豬組織中CRP mRNA表達(dá)趨勢Fig.2 Expression trend of CRP mRNA in tissues of piglets

HP mRNA表達(dá)差異(圖3):飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，高黎貢山仔豬肝臟、脾臟、腎臟、胰臟、十二指腸、空腸HP mRNA相對表達(dá)量極顯著高于同飼糧纖維水平時(shí)的杜洛克仔豬、飼糧纖維水平為3.53%時(shí)的高黎貢山仔豬及杜洛克仔豬(P＜0.01)。飼糧纖維水平為3.53%時(shí)，高黎貢山仔豬肝臟、脾臟、腎臟、十二指腸、空腸HP mRNA相對表達(dá)量極顯著高于杜洛克仔豬(P＜0.01)，極顯著低于飼糧纖維水平為7.04%時(shí)的高黎貢山仔豬(P＜0.01)。

AGP mRNA表達(dá)差異(圖4):腎臟和胰腺的AGP mRNA相對表達(dá)量極顯著高于其他組織(P＜0.01)，十二指腸AGP mRNA微量表達(dá)。飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，高黎貢山仔豬肝臟、脾臟、腎臟和胰腺AGP mRNA相對表達(dá)量極顯著高于同飼糧纖維水平時(shí)的杜洛克仔豬及飼糧纖維水平為3.53%時(shí)的高黎貢山仔豬及杜洛克仔豬(P＜0.01)。

SAA mRNA表達(dá)差異(圖5):空腸 SAA mRNA相對表達(dá)量極顯著高于絕大部分組織(P＜0.01)，脾臟SAA mRNA相對表達(dá)量極顯著低于其他組織(P＜0.01)。飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，高黎貢山仔豬肝臟、腎臟、十二指腸和空腸SAA mRNA相對表達(dá)量極顯著高于同飼糧纖維水平時(shí)的杜洛克仔豬、飼糧纖維水平為3.53%時(shí)的高黎貢山仔豬和杜洛克仔豬(P＜0.01)。飼糧纖維水平為3.53%時(shí)，高黎貢山仔豬肝臟、腎臟、空腸SAA mRNA相對表達(dá)量極顯著高于同飼糧纖維水平時(shí)的杜洛克仔豬(P＜0.01)，極顯著低于飼糧纖維水平為7.04%時(shí)的高黎貢山仔豬(P＜0.01)。

圖3 仔豬組織中HP mRNA表達(dá)趨勢Fig.3 Expression trend of HP mRNA in tissues of piglets

仔豬組織CRP、HP、AGP、SAA基因表達(dá)譜:4個(gè)APPs基因的mRNA相對表達(dá)量由高到底依次是飼糧纖維水平為7.04%時(shí)的高黎貢山仔豬、飼糧纖維水平為3.53%時(shí)的高黎貢山仔豬、飼糧纖維水平為7.04%時(shí)的杜洛克仔豬和飼糧纖維水平為3.53%時(shí)的杜洛克仔豬。

3 討論

3.1 適宜纖維水平飼糧可改善仔豬生產(chǎn)性能

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，相較于飼糧纖維水平為3.53%時(shí)，飼糧纖維水平為7.04%時(shí)杜洛克仔豬日采食量、日增重顯著下降，料重比則顯著升高。這可能是高纖維導(dǎo)致飼糧適口性下降，杜洛克仔豬腸道明顯不能適應(yīng)高纖維飼糧所致。同時(shí)，高黎貢山仔豬腸道則明顯不適應(yīng)纖維水平為3.53%的飼糧，其日采食量、日增重極顯著低于、料重比顯著高于同飼糧纖維水平時(shí)的杜洛克仔豬及飼糧纖維水平為7.04%時(shí)高黎貢山仔豬。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，顯著提高高黎貢山仔豬日采食量，促進(jìn)生長，提高料重比。Hermes等［5］報(bào)道，飼糧中的纖維可提高豬的生長性能，并能促進(jìn)腸道微生物區(qū)系和發(fā)酵指標(biāo)的完善。Castillo等［8］研究報(bào)道，適宜纖維水平飼糧可促進(jìn)斷奶仔豬生長和預(yù)防腹瀉。高黎貢山仔豬是較適應(yīng)惡劣自然環(huán)境的放養(yǎng)豬種，長期處于放養(yǎng)條件下適應(yīng)了高纖維飼糧，對低纖維飼糧反而表現(xiàn)出不適應(yīng)。本試驗(yàn)結(jié)果提示，在同樣高纖維水平飼糧下，高黎貢山仔豬生產(chǎn)性能明顯高于杜洛克仔豬;高纖維飼糧有利于高黎貢山仔豬生長潛力的充分發(fā)揮，利用其腸道耐粗飼特性可優(yōu)化利用云南特有高黎貢山豬資源。

圖4 仔豬組織中AGP mRNA表達(dá)趨勢Fig.4 Expression trend of AGP mRNA in tissues of piglets

3.2 不同纖維水平飼糧對小腸黏膜形態(tài)的影響

表4結(jié)果顯示，飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，高黎貢山仔豬十二指腸、空腸、回腸絨毛長度均極顯著高于杜洛克仔豬，隱窩深度均極顯著低于杜洛克仔豬;飼糧纖維水平為3.53%時(shí)，結(jié)果則相反。Urriola等［9］等試驗(yàn)得出，飼喂相同玉米-豆粕型飼糧時(shí)梅山豬比約克夏豬的養(yǎng)分表觀消化率更高。高黎貢山豬具有耐粗飼、抗逆性強(qiáng)、貯脂能力強(qiáng)等特性，是我國優(yōu)良的地方豬種［1］。本結(jié)果顯示，飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，高黎貢山仔豬的腸道發(fā)育比杜洛克仔豬健康，消化吸收能力更強(qiáng)。從腸道結(jié)構(gòu)的角度解釋了高黎貢山仔豬耐粗飼特性。這一結(jié)果與高黎貢山仔豬在飼糧纖維水平為7.04%時(shí)生產(chǎn)性能高于杜洛克仔豬的試驗(yàn)結(jié)果相互映證。

圖5 仔豬組織中SAA mRNA表達(dá)趨勢Fig.5 Expression trend of SAA mRNA in tissues of piglets

在十二指腸、空腸、回腸中，高黎貢山仔豬在飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，絨毛長度均比高黎貢山仔豬在飼糧纖維水平為3.53%時(shí)長，且差異均極顯著。這一試驗(yàn)結(jié)果提示，較高纖維水平的飼糧可以促進(jìn)高黎貢山仔豬腸道的發(fā)育，從而增強(qiáng)其對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力。

3.3 不同纖維水平飼糧對仔豬小腸黏膜MT1、組織APPs基因的誘導(dǎo)表達(dá)

3.3.1 小腸黏膜MT1基因的表達(dá)差異

研究報(bào)道，MT1參與細(xì)胞的增殖與凋亡［10］。李振華等［11］研究報(bào)道，隨著食管癌的發(fā)展和惡性程度的增高，MT1的表達(dá)量呈升高趨勢，這種趨向性對判斷腫瘤的惡性程度及進(jìn)展有積極意義。

由圖1可見，高黎貢山仔豬在飼糧纖維水平7.04%時(shí)其十二指腸中MT1 mRNA相對表達(dá)量極顯著高于飼糧纖維水平3.53%時(shí);杜洛克仔豬在飼糧纖維水平為7.04%時(shí)其胰腺中MT1 mRNA相對表達(dá)量極顯著高于飼糧纖維水平為3.53%時(shí)。人類醫(yī)學(xué)研究表明，如果提高化療病人正常細(xì)胞中的MTs的含量就能減少化療病人化療毒副反應(yīng)［12］。謝憶山等［13］報(bào)道，MTs在腸道的表達(dá)與大腸癌患者愈后恢復(fù)情況密切相關(guān)。上述研究表明MTs對腸道細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用。本試驗(yàn)結(jié)果提示，高黎貢山仔豬飼喂高纖維的飼糧可誘導(dǎo)腸道MT1表達(dá)的上調(diào)，增強(qiáng)腸道對高纖維飼糧的適應(yīng)性，這可能是MT1調(diào)節(jié)腸道健康的重要方式之一，對MT1與腸道保護(hù)的作用機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

3.3.2 組織APPs基因表達(dá)差異

機(jī)體循環(huán)系統(tǒng)中APPs的含量與機(jī)體的潛在狀態(tài)有關(guān)，在評價(jià)動(dòng)物機(jī)體健康方面有較大的應(yīng)用價(jià)值［14］。許美芳等［15］研究報(bào)道，健康豬與患病豬組織中APPs的表達(dá)呈現(xiàn)顯著差異。

3.3.2.1 組織CRP基因表達(dá)差異

圖2顯示，在仔豬的各個(gè)組織中均檢測到CRP mRNA的存在，所有組織中以胰腺的相對表達(dá)量最高。這可能與仔豬斷奶后胰臟迅速發(fā)育和消化酶分泌的誘導(dǎo)作用有關(guān)。高黎貢山仔豬飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，高黎貢山仔豬胰腺和肝臟中CRP mRNA相對表達(dá)量極顯著高于其他3組。杜洛克仔豬飼糧纖維水平為7.04%時(shí)其胰腺中CRP mRNA相對表達(dá)量極顯著高于飼糧纖維水平為3.53%時(shí)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，高纖維飼糧誘導(dǎo)組織中CRP基因表達(dá)的上調(diào)。Sasaki等［16］研究表明，兒童在細(xì)菌感染的急性期，血清中CRP含量顯著升高。本試驗(yàn)中高黎貢山仔豬大部分組織中CRP mRNA相對表達(dá)量高于杜洛克仔豬，這可能與高黎貢山仔豬長期生長的粗放生態(tài)環(huán)境密切相關(guān)。Montagne等［17］研究報(bào)道，斷奶仔豬飼喂高纖維飼糧會(huì)增加細(xì)菌感染的幾率、影響日增重，尤其在惡劣條件下。本試驗(yàn)中，仔豬飼喂高纖維水平飼糧時(shí)，大部分組織中CRP mRNA相對表達(dá)量高于飼喂低纖維水平飼糧時(shí)。這一結(jié)果提示，高纖維飼糧誘導(dǎo)CRP表達(dá)上調(diào)是否與細(xì)菌的感染相關(guān)值得進(jìn)一步研究。

3.3.2.2 組織HP基因表達(dá)差異

圖3顯示，在仔豬的各個(gè)組織中均檢測到HP mRNA的存在，以腎臟的相對表達(dá)量最高。高黎貢山仔豬在飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，大部分組織中HP mRNA相對表達(dá)量極顯著高于其他3組。HP具有結(jié)合游離血紅蛋白、在紅細(xì)胞破壞后減少血紅蛋白及鐵的流失并保護(hù)腎臟的功能。本試驗(yàn)結(jié)果提示，高纖維飼糧能誘導(dǎo)HP基因表達(dá)的上調(diào)，對相關(guān)組織可能起到更好的保護(hù)作用。在十二指腸中，高黎貢山仔豬HP mRNA相對表達(dá)量極顯著高于杜洛克仔豬。魯建云等［18］報(bào)道HP有結(jié)合血紅蛋白、促進(jìn)血管生成等作用。由此推測，HP mRNA的高表達(dá)可能與高黎貢山仔豬長期飼喂高纖維飼糧對腸道血管發(fā)育的刺激作用有關(guān)。在肝臟和脾臟中，高黎貢山仔豬HP mRNA相對表達(dá)量極顯著高于杜洛克仔豬。Langlois等［19］研究表明，HP還具有重要的免疫調(diào)節(jié)功能。Quaye［20］報(bào)道，結(jié)合珠蛋白與炎癥引起的疾病相關(guān)。飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，高黎貢山仔豬和杜洛克仔豬大部分組織HP mRNA相對表達(dá)量高于飼糧纖維水平為3.53%時(shí)。結(jié)果提示，高纖維飼糧可以誘導(dǎo)HP在組織中的表達(dá)上調(diào)，從而提高仔豬的免疫調(diào)節(jié)能力。

3.3.2.3 組織AGP基因表達(dá)差異

許美芳等［21］報(bào)道，AGP基因除肝臟外在其他組織也有表達(dá)。圖4表明，在仔豬的各個(gè)組織中均檢測到AGP mRNA的存在，所有組織中以腎臟和胰腺中AGP mRNA相對表達(dá)量最高。飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，高黎貢山仔豬肝臟、腎臟、胰腺和十二指腸中AGP mRNA相對表達(dá)量極顯著高于其他3組。本試驗(yàn)結(jié)果提示，腎臟中AGP基因的高表達(dá)可能對腎臟具有一定的保護(hù)作用。Gunnarsson等［22］報(bào)道指出，AGP能夠通過增加胞質(zhì)鈣的濃度來影響嗜中性粒細(xì)胞，從而參與免疫的調(diào)節(jié)。AGP的主要生理功能是與藥物結(jié)合及調(diào)節(jié)機(jī)體免疫反應(yīng)。張建江等［23］報(bào)道，細(xì)菌感染者AGP表達(dá)量明顯升高有利于提高機(jī)體的抗病力。由此推測，AGP表達(dá)量的升高有利于提高仔豬機(jī)體免疫的調(diào)節(jié)能力，從而提高對環(huán)境的適應(yīng)能力。

3.3.2.4 組織SAA基因表達(dá)差異

圖5顯示，在仔豬的各個(gè)組織中均檢測到SAA mRNA的存在，所有組織中以空腸的相對表達(dá)量最高。高黎貢山仔豬在飼糧纖維水平為7.04%時(shí)，肝臟、腎臟、十二指腸和空腸中SAA mRNA相對表達(dá)量極顯著高于其他3組。許美芳等［21］報(bào)道，SAA是靈敏的全身炎癥標(biāo)志物，能降低內(nèi)毒素的毒性，在炎癥時(shí)機(jī)體的保護(hù)性防御中發(fā)揮重要作用。本試驗(yàn)結(jié)果提示，SAA mRNA相對表達(dá)量在空腸中最高，這可能有利于高黎貢山豬空腸更好適應(yīng)高纖維飼糧。在肝臟、腎臟、空腸中SAA mRNA相對表達(dá)量，高黎貢山仔豬極顯著高于同飼糧纖維水平的杜洛克仔豬。在人類醫(yī)學(xué)上，Urieli-Shoval等［24］報(bào)道卵巢癌癥和卵巢腫瘤患者具有較高的血清SAA含量，SAA在卵巢癌的卵巢腫瘤發(fā)生中可能有一定的治療作用。Mcdonald等［25］報(bào)道，在正常牛、馬和綿羊的初乳中也可檢測到SAA，其可能與新生幼畜對母體外環(huán)境的適應(yīng)和哺乳動(dòng)物的組織重塑有關(guān)。前人的研究結(jié)果說明SAA對機(jī)體具有保護(hù)性防御的作用。本試驗(yàn)結(jié)果提示，高纖維飼糧可誘導(dǎo)SAA基因在組織中表達(dá)上調(diào)，適應(yīng)了高纖維飼糧的高黎貢山仔豬機(jī)體有更強(qiáng)的保護(hù)性防御能力。

綜上，不同纖維水平飼糧對高黎貢山仔豬和杜洛克仔豬的生產(chǎn)性能、小腸黏膜形態(tài)以及小腸黏膜 MT1、組織 CRP、HP、AGP、SAA 基因表達(dá)具有明顯影響。高黎貢山仔豬在高飼糧纖維水平下的APPs基因表達(dá)的上調(diào)，可能不同于杜洛克仔豬，更不同于兒童感染疾病時(shí)的情況，很可能是長期適應(yīng)后而形成的一種保護(hù)機(jī)制。飼喂高纖維飼糧的高黎貢山仔豬生產(chǎn)性能明顯優(yōu)于飼喂低纖維飼糧的高黎貢山仔豬，而與飼喂低纖維飼糧的杜洛克仔豬相當(dāng)，這也是高黎貢山豬長期對粗纖維飼料和環(huán)境變化適應(yīng)的結(jié)果，其機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

① 高黎貢山仔豬適應(yīng)高纖維水平(7.04%)的飼糧，而杜洛克仔豬適應(yīng)低纖維水平(3.53%)飼糧。

②7.04%的高纖維飼糧可提高高黎貢山仔豬的生產(chǎn)性能，有利于小腸黏膜的發(fā)育，上調(diào)小腸黏膜MT1及組織APPs mRNA的表達(dá)。

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