磁微粒化學(xué)發(fā)光法在術(shù)前四項(xiàng)定量檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值

朱小燕，黎興盛，李智珍，陳秀榮

(1、宜春市婦幼保健院；2、宜春市職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江西宜春336000)

磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法在術(shù)前四項(xiàng)定量檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值

朱小燕1，黎興盛1，李智珍1，陳秀榮2

(1、宜春市婦幼保健院；2、宜春市職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江西宜春336000)

目的了解術(shù)前四項(xiàng)檢查的臨床價(jià)值。方法用磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法對(duì)6212例患者在術(shù)前進(jìn)行乙肝表面抗原（HB-sAg）、丙型肝炎病毒抗體（抗-HCV）、梅毒螺旋體抗體（抗-TP）、人類免疫缺陷病毒抗體（抗-HIV）定量檢測(cè)，對(duì)其陽(yáng)性的標(biāo)本再用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）進(jìn)行定性檢測(cè)。結(jié)果6212例標(biāo)本中，定量檢測(cè)陽(yáng)性率分別為HBsAg8.24%（512/6212）、抗-HCV陽(yáng)性0.097%（6/6212）、抗-TP陽(yáng)性1.92%（119/6212），查出1例抗-HIV1/2陽(yáng)性標(biāo)本，經(jīng)ELISA法檢測(cè)也為陽(yáng)性，再送HIV確證實(shí)驗(yàn)室確證為陽(yáng)性。兩種方法HBsAg檢測(cè)陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝345.8，P＜0.001）。抗H-CV和抗-TP檢測(cè)陽(yáng)性率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論術(shù)前四項(xiàng)定量檢測(cè)可發(fā)現(xiàn)低濃度的標(biāo)本，降低漏診率，對(duì)加強(qiáng)醫(yī)護(hù)人員的自我保護(hù)和防范意識(shí)，減少職業(yè)暴露的風(fēng)險(xiǎn)和醫(yī)源性感染具有重要意義。

磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法；術(shù)前四項(xiàng)；定量；應(yīng)用價(jià)值

隨著診療技術(shù)的不斷規(guī)范，各家醫(yī)院對(duì)于手術(shù)前、輸血前、產(chǎn)前檢查開展了四種傳染性病原體的聯(lián)合檢測(cè)項(xiàng)目，包括乙肝表面抗原（HBsAg）、丙型肝炎病毒抗體（抗-HCV）、梅毒螺旋體抗體（抗-TP）、人類免疫缺陷病毒抗體（抗-HIV）的檢測(cè)，簡(jiǎn)稱“術(shù)前四項(xiàng)”[1]。酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）是術(shù)前四項(xiàng)檢測(cè)的傳統(tǒng)方法，但該法對(duì)低濃度標(biāo)本的檢測(cè)效果不佳，容易造成漏診與誤診等問題，而磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法具有靈敏度高、準(zhǔn)確率高、反應(yīng)迅速、影響因素少等優(yōu)點(diǎn)，在國(guó)內(nèi)近年來得以迅速開展，給臨床診斷和流行病學(xué)篩查帶來了好處[2]。本研究就對(duì)我院近一年來6212例術(shù)前四項(xiàng)標(biāo)本進(jìn)行微粒子化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行了定量檢測(cè)，結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料6212例標(biāo)本均來自我院2014年6月至2015年5月住院患者和產(chǎn)前檢查的孕婦?；颊叽蟛糠譃榕?。

1.2 方法患者均抽取靜脈血3ml，常規(guī)分離血清后進(jìn)行磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法檢測(cè)，陽(yáng)性標(biāo)本均采用ELISA進(jìn)行定性檢測(cè)，磁微粒化學(xué)發(fā)光法及ELISA法檢測(cè)均嚴(yán)格按儀器及試劑盒說明書要求進(jìn)行操作?？?HIV定量及定性檢測(cè)均為陽(yáng)性的標(biāo)本，按規(guī)定程序送我市疾病預(yù)防控制中心做確認(rèn)試驗(yàn)。

1.3 試劑和儀器磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法采用鄭州安圖生物科技有限公司Autolumo A2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光測(cè)定儀，使用試劑為其配套試劑，鄭州安圖Auto Bio-4.0酶標(biāo)儀和深圳邁瑞MW-12A洗板機(jī)。ELISA法試劑盒均購(gòu)自上?？迫A生物工程股份有限公司，試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 12.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)數(shù)資料以百分率表示，各組數(shù)據(jù)之間采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

6212例標(biāo)本中，定量檢測(cè)陽(yáng)性率分別為HB-sAg8.24%（512/6212）、抗-HCV陽(yáng)性0.097%1（6/ 6212）、抗-TP陽(yáng)性1.92%（119/6212），查出1例抗-HIV1/2陽(yáng)性標(biāo)本，經(jīng)ELISA法檢測(cè)也為陽(yáng)性，再送HIV確證實(shí)驗(yàn)室確證為陽(yáng)性。兩種方法HB-sAg檢測(cè)陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2＝345.8，P＜0.001），抗H-CV和抗-TP檢測(cè)陽(yáng)性率沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。詳細(xì)情況見表1。

表1 兩種方法檢測(cè)陽(yáng)性率比較[n（%）]

3 討論

磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法是化學(xué)發(fā)光免疫分析法與磁性微粒載體技術(shù)相結(jié)合的一種檢測(cè)方法，它利用磁微粒具有磁性應(yīng)性，成本低、能耗少和無污染等特點(diǎn)，將待測(cè)物抗原（抗體）包被磁微粒，辣根過氧化物酶標(biāo)志待測(cè)物抗原（抗體）制備酶結(jié)合物，通過免疫反應(yīng)形成抗原-抗體-酶標(biāo)志抗原（抗體）復(fù)合物，該復(fù)合物催化發(fā)光底物發(fā)出光子，發(fā)光強(qiáng)度與待測(cè)物抗體(抗原）的含量成正比。由于懸浮性磁微粒作為載體具有較高的比表面積，能夠更為充分地與樣品反應(yīng)，加之外加磁場(chǎng)的靈活應(yīng)用，較之酶標(biāo)板載體具有更高的靈敏度、更快的檢測(cè)速度和更好的重復(fù)性等優(yōu)點(diǎn)，目前已被廣泛應(yīng)用于生物及醫(yī)學(xué)檢測(cè)等多個(gè)領(lǐng)域。

本資料顯示，HBsAg的陽(yáng)性率為8.24%，低于梁華[3]等的報(bào)道，這可能與本次研究的大多為女性患者有關(guān)。能及早檢出HBsAg就能早期確診HBV感染，在病情觀察中大大縮短了“窗口期”的時(shí)間，而ELISA檢測(cè)在乙型肝炎早期檢測(cè)HBsAg呈陰性。對(duì)于一些低濃度的標(biāo)本，尤其是處在陰陽(yáng)臨界值的標(biāo)本，ELISA法的重復(fù)性比較差，容易出現(xiàn)假陰性。而磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法在乙型肝炎血清陽(yáng)性檢出率和重復(fù)穩(wěn)定性方面均顯著優(yōu)于ELISA法，能準(zhǔn)確的進(jìn)行定性定量檢測(cè)，對(duì)于可疑的低值血清更具優(yōu)勢(shì)[4，5]。

本資料顯示，丙型肝炎的檢出率只有0.097%，與李青梅[6]等報(bào)道的較為相近，但明顯低于我國(guó)人群丙肝抗體陽(yáng)性率3.2%[7，8]，可能與患者來源和檢測(cè)方法有關(guān)，由于感染HCV后抗HCV出現(xiàn)較慢，一般在發(fā)病后2～6個(gè)月，甚至1年才轉(zhuǎn)陽(yáng)，所以不論哪種方法檢測(cè)HCV抗體，都存在一定漏檢率。

近年來梅毒的發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì)[9]，2008年國(guó)家衛(wèi)生部公布27種法定報(bào)告的甲、乙類傳染病中，梅毒發(fā)病率由原來的第7位上升至第5位。梅毒的診斷依賴病史、癥狀、體征，暗視野顯微鏡檢查和血清學(xué)檢查。梅毒感染者血清中可產(chǎn)生非特異性反應(yīng)素抗體和梅毒螺旋體的特異性抗體，血清學(xué)檢測(cè)是實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒的重要依據(jù)之一。由于梅毒感染具有較長(zhǎng)潛伏期，部分感染者可能并無癥狀，處于隱性感染狀態(tài)，具有較大危害性，體內(nèi)雖感染有病原體但可以無臨床表現(xiàn)，健康者或其他各種疾病的病人輸入了由他們提供的血液或血液制品，就可以使受血者感染梅毒。

目前我國(guó)正處于HIV感染的快速增長(zhǎng)期，已由高危人群轉(zhuǎn)向普通人群，而經(jīng)血液傳播是HIV傳播的主要途徑之一。2009年頒發(fā)的《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》推薦使用敏感性和特異性高的試劑用于篩查，如建議化學(xué)發(fā)光法作為HIV抗體篩查方法，有效降低經(jīng)血液傳播HIV的風(fēng)險(xiǎn)[10]。

綜上所述，應(yīng)用磁微粒化學(xué)發(fā)光法在手術(shù)前、輸血前及產(chǎn)前對(duì)患者進(jìn)行術(shù)前四項(xiàng)的定量檢測(cè)，可及早發(fā)現(xiàn)“窗口期”患者，降低漏檢率，有利于病原體的早期檢出，對(duì)疾病早期治療提供依據(jù)，也有利于對(duì)醫(yī)務(wù)人員及時(shí)采取防護(hù)措施，避免醫(yī)源性感染，對(duì)于減少和預(yù)防醫(yī)療糾紛也有極其重要的意義。

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[2]李金明．感染性疾病血清學(xué)檢驗(yàn)中應(yīng)重視對(duì)弱反應(yīng)性標(biāo)本的確認(rèn)[J]．中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，29(7)：577-580．

[3]梁華，于路妹，朱磊，等.輸血前四項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)的結(jié)果分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，30(1)：81-82.

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R446.62

A

1674-1129(2015)06-0767-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2015.06.028

2015-07-20；

2015-09-15)