雅培i2000全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀剩余試劑檢測(cè)結(jié)果分析

張愛(ài)民，張桂芬

雅培i2000全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀剩余試劑檢測(cè)結(jié)果分析

張愛(ài)民，張桂芬

目的：探討雅培i2000全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀剩余試劑檢測(cè)的可行性。方法：利用剩余試劑分別檢測(cè)特定血清甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）、糖類抗原199（carbohydrate antigen 199，CA-199）的濃度，進(jìn)行精密度、準(zhǔn)確度分析，并與原裝試劑分別檢測(cè)這3個(gè)項(xiàng)目的低、中、高3個(gè)濃度的同一組血清標(biāo)本做均值比較及相關(guān)性分析。結(jié)果：剩余試劑檢測(cè)AFP、CEA、CA-199的精密度變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）均小于5%，符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，準(zhǔn)確度結(jié)果較好；2種試劑檢測(cè)血清樣本結(jié)果呈良好的線性關(guān)系（r＞0.95），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：雅培i2000全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的剩余試劑可以進(jìn)行AFP、CEA、CA-199檢測(cè)，能夠保證檢驗(yàn)質(zhì)量，降低檢測(cè)成本。

全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀；剩余試劑；甲胎蛋白；癌胚抗原；糖類抗原199

0　引言

電化學(xué)免疫分析是電化學(xué)發(fā)光和免疫測(cè)定相結(jié)合的新一代標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種激素、腫瘤標(biāo)志物、藥物及其他微量活性物質(zhì)的測(cè)定[1-2]。雅培i2000全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀是目前檢驗(yàn)科在免疫定量檢測(cè)這一領(lǐng)域使用最為廣泛的儀器之一，具有靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確、精密度及線性評(píng)價(jià)良好、交叉污染小等優(yōu)點(diǎn)，可滿足臨床的要求[3]。其配套試劑為進(jìn)口原裝試劑，試劑盒獨(dú)立包裝，測(cè)定人份固定，掃描條碼自動(dòng)獲取試劑信息，檢測(cè)成本較高。在實(shí)際的工作中我們發(fā)現(xiàn)，每500人份試劑檢測(cè)完畢后，還有一定量的剩余試劑，但儀器不會(huì)再進(jìn)行檢測(cè)，造成了試劑的浪費(fèi)。經(jīng)過(guò)測(cè)試，發(fā)現(xiàn)剩余試劑還能檢測(cè)40份左右的標(biāo)本。為了能夠在保證檢驗(yàn)質(zhì)量和儀器性能的基礎(chǔ)上，充分利用好這部分剩余試劑，降低檢測(cè)成本，我們將剩余試劑的檢測(cè)量定在了25人份，并以甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）、癌胚抗原（carcinotembryonic antigen，CEA）、糖類抗原（carbohydrate antigen199，CA-199）為例，對(duì)剩余試劑的精密度、準(zhǔn)確性和相關(guān)性進(jìn)行了檢測(cè)和分析。

1　材料和方法

1.1材料

1.1.1儀器

美國(guó)雅培i2000全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀。

1.1.2試劑

原裝試劑為雅培i2000 AFP配套試劑（批號(hào)30155LF00）、CEA配套試劑（批號(hào)32123L00）、CA-199配套試劑（批號(hào)29133M500）；剩余試劑為以上原裝試劑完成規(guī)定檢測(cè)人份，經(jīng)儀器掃描后為“0TEST”的同批號(hào)同項(xiàng)目的試劑，分別準(zhǔn)備3盒，加蓋后放入2～6℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?；質(zhì)控品為美國(guó)伯樂(lè)公司提供的TM1（批號(hào)54541）、TM2（批號(hào)54562）質(zhì)控品。

2　結(jié)果

2.1精密度檢測(cè)結(jié)果

精密度檢測(cè)結(jié)果顯示，所測(cè)結(jié)果CV均小于5%，在允許范圍之內(nèi)，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1　精密度檢測(cè)CV結(jié)果%

2.2準(zhǔn)確度檢測(cè)結(jié)果

用剩余試劑檢測(cè)AFP、CEA、CA-199的TM1和TM2各10次，質(zhì)控結(jié)果均在允許范圍內(nèi)，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2　準(zhǔn)確性檢測(cè)結(jié)果（±s）

表2　準(zhǔn)確性檢測(cè)結(jié)果（±s）

2.93±0.43 3.07±0.31 CEA/（ng·ml-1）10.33±0.83 10.40±1.00 AFP/（ng·ml-1）TM1組別剩余試劑原裝試劑148.23±13.41 159.00±16.00 CA-199/（U·ml-1）TM2 AFP/（ng·ml-1）CEA/（ng·ml-1）CA-199/（U·ml-1）75.92±5.74 26.14±3.79 545.29±33.01 71.80±7.80 26.50±2.65 552.00±55.00

2.3標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果

在智能化潮流的席卷下，不管是傳統(tǒng)的設(shè)備制造企業(yè)、系統(tǒng)集成商，還是近年來(lái)新興的智能物流解決方案提供者，都面臨著機(jī)遇和挑戰(zhàn)。作為智能化物流設(shè)備領(lǐng)域一支不可忽視的力量，我們來(lái)聽(tīng)一聽(tīng)上海音鋒機(jī)器人股份有限公司副總經(jīng)理吳偉剛先生對(duì)行業(yè)有何看法

2種試劑檢測(cè)患者血清樣品的結(jié)果呈良好的線性關(guān)系（r＞0.95），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），結(jié)果見(jiàn)表3。

表3　標(biāo)本原裝試劑與剩余試劑檢測(cè)血清AFP、CEA、CA-199結(jié)果比較（±s）

表3　標(biāo)本原裝試劑與剩余試劑檢測(cè)血清AFP、CEA、CA-199結(jié)果比較（±s）

組別低濃度血清　中濃度血清　高濃度血清AFP/（ng·ml-1）CEA/（ng·ml-1）CA-199/（U·ml-1）AFP/（ng·ml-1）CEA/（ng·ml-1）CA-199/（U·ml-1）AFP/（ng·ml-1）CEA/（ng·ml-1）CA-199/（U·ml-1）剩余試劑　7.58±0.29　3.61±0.13　15.86±0.61　86.25±2.83　63.46±2.08　166.42±6.48 329.71±14.86 478.92±20.64 846.76±34.93原裝試劑　7.69±0.26　3.66±0.12　16.05±0.58　87.38±2.77　64.18±2.16　170.37±6.29 335.64±13.45 483.11±19.84 858.31±33.25 r值?。?.95?。?.95　＞0.95?。?.95?。?.95?。?.95?。?.95?。?.95?。?.95 P值?。?.05　＞0.05?。?.05　＞0.05?。?.05?。?.05　＞0.05?。?.05?。?.05

3　討論

雅培i2000全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀采用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析，將化學(xué)發(fā)光或生物發(fā)光體系與免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于檢測(cè)樣品中的抗原、抗體和分析物。以吖啶酯為發(fā)光的標(biāo)記物，固相載體為極細(xì)小的順磁性顆粒，將包被了單克隆抗體的磁性微粒和待測(cè)標(biāo)本加入到反應(yīng)管中，標(biāo)本中的抗原與微粒上的抗體結(jié)合，再加上吖啶酯標(biāo)記的單克隆抗體，經(jīng)過(guò)溫育，形成固相包被抗體-抗原-吖啶酯標(biāo)記復(fù)合物。經(jīng)過(guò)洗滌、分離，將未結(jié)合的多余抗原和標(biāo)記抗體洗去，加入氧化劑發(fā)光，這部分光的積分與被測(cè)抗原的量成正比，可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計(jì)算出待測(cè)物的含量。其測(cè)定原理與酶免疫中的雙抗體夾心法和競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合法相似[4]。國(guó)內(nèi)有文獻(xiàn)對(duì)其綜合性能進(jìn)行了分析，并均給予了較高的評(píng)價(jià)[5-7]。

AFP、CEA、CA-199是臨床應(yīng)用較為廣泛的腫瘤標(biāo)志物，在腫瘤的篩查、診斷和療效觀察中有著重要的臨床意義[8-9]。AFP是原發(fā)性肝癌的高特異性和高靈敏度的腫瘤標(biāo)志物，在其他惡性腫瘤如睪丸癌、畸胎癌、胃癌、胰腺癌等也可以升高。CEA是一個(gè)廣譜性腫瘤標(biāo)志物，它能反映出多種腫瘤的存在。CA-199是糖抗原的一種，其增高多提示有胰腺炎、肝硬化、糖尿病、消化道腫瘤的可能。本實(shí)驗(yàn)從精密度、準(zhǔn)確度、標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果3個(gè)方面對(duì)剩余的AFP、CEA、CA-199配套試劑的檢測(cè)性能進(jìn)行了分析，所有檢測(cè)均在室內(nèi)質(zhì)控在控的情況下進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，用剩余試劑檢測(cè)低濃度血清中的AFP、CEA、CA-199時(shí)，精密度CV分別為3.21%、3.06%、4.33%，檢測(cè)高濃度血清中的相同指標(biāo)分別為3.61%、3.42%、3.68%，均小于5%，符合臨床工作要求[10]；準(zhǔn)確度和重復(fù)性結(jié)果較好，2種試劑檢測(cè)患者血清樣品的結(jié)果呈良好的線性關(guān)系（r＞0.95），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明500人份/盒同批號(hào)的剩余試劑檢測(cè)25人份以內(nèi)的標(biāo)本能夠達(dá)到性能穩(wěn)定、質(zhì)量可靠要求。

根據(jù)配套校準(zhǔn)品說(shuō)明書，同批號(hào)試劑可定標(biāo)一次，穩(wěn)定期為30 d，所以剩余試劑可不需再定標(biāo)。剩余試劑操作方法：在主屏幕下選擇Reagents，再選擇Reagent history，選中測(cè)試量顯示“0 TEST”的相應(yīng)項(xiàng)目信息，點(diǎn)Delete鍵刪除。將剩余試劑盒重新裝載掃描后，儀器試劑庫(kù)存恢復(fù)到“500 TEST”時(shí)即可進(jìn)行剩余試劑的使用。使用剩余試劑的注意事項(xiàng)有：（1）刪除試劑盒前應(yīng)先掃描一盒同批號(hào)的相應(yīng)新試劑盒，掃描后取出，以保存試劑的相應(yīng)信息，避免再次定標(biāo)。（2）剩余試劑當(dāng)天不能使用時(shí)應(yīng)及時(shí)取出，加蓋放入2～6℃冰箱，在1周內(nèi)使用完畢。（3）剩余試劑的檢測(cè)量一定要小于25人份，否則會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果和儀器的性能。（4）為保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，每次使用應(yīng)帶著室內(nèi)質(zhì)控嚴(yán)密監(jiān)控。

綜上所述，雅培i2000全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀剩余AFP、CEA、CA-199配套試劑可以用于臨床檢測(cè)。在實(shí)際工作中，操作方法簡(jiǎn)單、檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確，能夠降低檢驗(yàn)成本，減少資源的浪費(fèi)。

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（收稿：2014-10-30修回：2015-02-15）

Analysis on detection results by remaining reagent of Abbott i2000 automatic electrochemical luminescence analyzer

ZHANG Ai-min,ZHANG Gui-fen
（Department of Clinical Laboratory,the Affiliated Hospital of Logistics University of PAP,Tianjin 300162,China）

Objective To explore the feasibility of detection by using remaining reagent of Abbott i2000 automatic electrochemical luminescence analyzer.Methods The remaining and original reagents of the analyzer were both used to detect the concentrations of AFP,CEA and CA-199 in low-,medium-and high-concentration serums,the precisions and accuracies were analyzed,and the mean comparison and correlation analysis were carried out.Results The remaining reagent had the precisions for AFP,CEA and CA-199 all less than 5%which accorded with the national standard,and also behaved well in the accuracy.There was a high correlation between the detecting results by the remaining and original reagents,with r＞0.95 and P＞0.05.Conclusion The remaining reagent of Abbott i2000 automatic electrochemical luminescence analyzer can be used to test AFP,CEA and CA-199,with detection quality ensured and cost decreased.[Chinese Medical Equipment Journal，2015，36（10）：100-102]

automatic electrochemical luminescence analyzer;remaining reagent;AFP;CEA;CA-199

[中國(guó)圖書資料分類號(hào)]R318.6；TH776A

1003-8868（2015）10-0100-03

10.7687/J.ISSN1003-8868.2015.10.100

張愛(ài)民（1970—），女，主要從事臨床檢驗(yàn)方面的研究工作，E-mail：zhang_ai_min@sina.com。

300162天津，武警后勤學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科（張愛(ài)民，張桂芬）通訊作者：張桂芬，E-mail：563295075@qq.com

1.1.3標(biāo)本

1.2方法

1.2.1檢測(cè)儀器的準(zhǔn)備

原裝試劑完成規(guī)定檢測(cè)人份后，對(duì)儀器做相應(yīng)設(shè)定：ready狀態(tài)→Reagents→Reagents history→選定“0 TEST”相應(yīng)項(xiàng)目試劑盒→Delete刪除，重新運(yùn)行儀器，重新掃描后的“0 TEST”試劑盒恢復(fù)為“500 TEST”即可檢測(cè)。

1.2.2精密度檢測(cè)

分別選取低、高2種濃度的患者混合血清，用原裝和剩余試劑分別重復(fù)檢測(cè)10次，計(jì)算變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）。

1.2.3準(zhǔn)確度檢測(cè)

選取美國(guó)伯樂(lè)公司生產(chǎn)的TM1和TM2質(zhì)控品，用剩余試劑分別連續(xù)檢測(cè)10次，將結(jié)果與廠商提供數(shù)值進(jìn)行比較及相關(guān)性分析。

1.2.4標(biāo)本檢測(cè)

選用剩余試劑對(duì)低、中、高3個(gè)濃度的各10份血清樣品進(jìn)行AFP、CEA、CA-199的測(cè)定。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法