金鼓魚(yú)幼魚(yú)對(duì)蛋白質(zhì)的適宜需要量研究

林思源, 游翠紅, 王樹(shù)啟, 李遠(yuǎn)友

(汕頭大學(xué) 海洋生物研究所 廣東省海洋生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 廣東 汕頭 515063)

金鼓魚(yú)(Scatophagus argus)又名金錢(qián)魚(yú), 屬鱸形目(Perciformes)、鱸亞目(Percoidei)、金錢(qián)魚(yú)科(Scatophagidae)、金錢(qián)魚(yú)屬(Scatophagus), 是一種廣鹽(0~35‰)、植食性魚(yú)類, 因其體表分布有數(shù)十個(gè)黑色圓斑, 類似金錢(qián)狀, 故得名金錢(qián)魚(yú)。該魚(yú)主要分布于南海和東海南部, 尤以廣東沿海分布最為廣泛。因其具有較高的營(yíng)養(yǎng)與經(jīng)濟(jì)價(jià)值, 近年來(lái)已成為中國(guó)南方沿海較受歡迎的養(yǎng)殖品種之一; 同時(shí), 金鼓魚(yú)體態(tài)優(yōu)美, 體色會(huì)隨著環(huán)境的改變而變化, 是著名的觀賞魚(yú)類; 因此不少學(xué)者認(rèn)為金鼓魚(yú)是一種非常具有潛力的半咸水養(yǎng)殖魚(yú)類[1]。

目前, 關(guān)于廣鹽、植食性魚(yú)類的營(yíng)養(yǎng)需求方面的研究資料較少, 主要集中在藍(lán)子魚(yú)科(Siganidae)(與金鼓魚(yú)同屬鱸形目)魚(yú)類。王樹(shù)啟等[2]報(bào)道黃斑藍(lán)子魚(yú)(Siganus canaliculatus)幼魚(yú)對(duì)脂肪及蛋白的適宜需要量分別在 29.01%~34.37%和 6%~9%; 朱衛(wèi)等[3]報(bào)道點(diǎn)藍(lán)子魚(yú)(Siganus guttatus)對(duì)脂肪的適宜需要量為 13.94%。為了促進(jìn)金鼓魚(yú)人工養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展, 有必要對(duì)其營(yíng)養(yǎng)需求和飼料配方進(jìn)行研究。蛋白質(zhì)是魚(yú)類最重要的三大營(yíng)養(yǎng)素之一, 與魚(yú)類的生長(zhǎng)發(fā)育、生理功能和魚(yú)肉品質(zhì)等密切相關(guān), 也是影響魚(yú)類飼料成本的最主要因素[4]。為此, 本研究設(shè)計(jì)了5種不同蛋白水平的配合飼料, 通過(guò)8周飼養(yǎng)試驗(yàn), 比較不同飼料投喂組魚(yú)的生長(zhǎng)性能、飼料利用率、常規(guī)生化指標(biāo)、消化酶活性、免疫與抗氧化指標(biāo)等, 以確定金鼓魚(yú)幼魚(yú)對(duì)蛋白的適宜需要量, 為飼料配方的研發(fā)提供參考依據(jù)和資料, 豐富植食性海水魚(yú)類的營(yíng)養(yǎng)學(xué)內(nèi)容。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

在參考其他雜食、植食性魚(yú)類營(yíng)養(yǎng)需求的基礎(chǔ)上, 以酪蛋白為蛋白源, 魚(yú)油為脂肪源, 配制脂肪水平為8%、蛋白水平分別為24%、28%、32%、36%、40%的5種配合飼料(D1~D5), 其具體配方及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。將各種飼料原料混合均勻、加水, 用飼料機(jī)(上海漁機(jī)所生產(chǎn))制成直徑約1 mm的浮性顆粒飼料, 自然晾干后保存于4℃冰箱中備用。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)用金鼓魚(yú)幼魚(yú)(初始體質(zhì)量約4 g左右)購(gòu)于當(dāng)?shù)匾患宜a(chǎn)養(yǎng)殖公司。試驗(yàn)前, 將魚(yú)放在汕頭大學(xué)南澳臨海實(shí)驗(yàn)站的海上網(wǎng)箱中馴養(yǎng) 4周, 前兩周用冰鮮雜魚(yú)和商品飼料(廣東海大公司生產(chǎn)的金槍魚(yú)(Thunnus thynnus)飼料)混合投喂, 然后逐步過(guò)渡到完全投喂商品飼料; 后兩周用 5種試驗(yàn)飼料等量混合投喂。

表1 飼料配方及常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分Tab.1 Ingredients and composition of experiment diets

1.3 養(yǎng)殖試驗(yàn)分組及日常管理

養(yǎng)殖試驗(yàn)在南澳臨海實(shí)驗(yàn)站所屬海域的試驗(yàn)魚(yú)排的網(wǎng)箱中進(jìn)行, 網(wǎng)箱規(guī)格為0.6 m×0.6 m×1.5 m。網(wǎng)箱四周上半部設(shè)有50目的密網(wǎng)以防止配合飼料隨水流飄走, 網(wǎng)箱頂部有蓋網(wǎng)以防止試驗(yàn)魚(yú)逃逸和鳥(niǎo)類啄食。試驗(yàn)魚(yú)分為5組, 每組3個(gè)平行網(wǎng)箱, 每個(gè)網(wǎng)箱放魚(yú)20尾。試驗(yàn)魚(yú)分組前, 將魚(yú)停食24 h, 然后選取體質(zhì)健壯、規(guī)格基本一致的魚(yú)(平均體質(zhì)量約4.3 g)用 0.01%苯氧基乙醇(α-phenoxyethanol)麻醉,稱質(zhì)量后放入相應(yīng)網(wǎng)箱中。每天投喂兩次(8: 30, 16:30), 飽食投喂, 每次每個(gè)網(wǎng)箱輪流投喂 3次, 半小時(shí)內(nèi)吃完。每天檢查網(wǎng)箱是否存在破損, 記錄水溫、魚(yú)死亡情況及投餌量。養(yǎng)殖期間, 水溫為(24±2)℃,溶氧量大于5 mg/L。養(yǎng)殖周期為8周。

1.4 樣品采集

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí), 將魚(yú)停食24 h, 用0.01%苯氧基乙醇麻醉后逐條稱質(zhì)量并記錄。養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí), 從每個(gè)網(wǎng)箱中隨機(jī)取6尾魚(yú), 其中3尾魚(yú)直接置于–20℃凍存, 用于測(cè)定全魚(yú)的常規(guī)生化成分; 另外3尾魚(yú)經(jīng)稱體質(zhì)量、測(cè)量體長(zhǎng)后, 解剖肝臟稱質(zhì)量,然后分別取肝臟、胃、腸組織樣品。肝臟樣本用于測(cè)定消化酶和氨基酸代謝酶活性、免疫與抗氧化指標(biāo)等; 胃、腸組織用于測(cè)定消化酶活性。所有樣品取出后迅速用液氮速凍, 保存在–80℃冰箱中備用。

1.5 生長(zhǎng)、生理生化指標(biāo)的測(cè)定

1.5.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo)

增質(zhì)量率、特定生長(zhǎng)率、餌料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率、成活率和肝體比等按照下列公式計(jì)算:

式中:Wt為養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚(yú)的平均體質(zhì)量(g);W0為養(yǎng)殖試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)魚(yú)的平均體質(zhì)量(g);Wh為魚(yú)肝臟質(zhì)量(g);n為試驗(yàn)天數(shù)。

1.5.2 飼料及全魚(yú)生化成分的測(cè)定

配合飼料及全魚(yú)樣品的水分、粗蛋白、粗脂肪、灰分含量均按照國(guó)GB/T 6435-1986、GB/T 6432-1994、GB/T 6433-2006、GB/T 6438-2008進(jìn)行測(cè)定[2]。

1.5.3 生理指標(biāo)的測(cè)定

相關(guān)酶活性均采用南京建成生物工程研究所的試劑盒進(jìn)行測(cè)定, 具體方法詳見(jiàn)各自說(shuō)明書(shū)。測(cè)定指標(biāo)包括胃、腸、肝組織的胃蛋白酶、胰蛋白酶、淀粉酶; 肝臟的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,GPT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(glutamic oxalacetic transaminase,GOT); 肝臟的免疫與抗氧化指標(biāo)包括谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathion peroxidase, GPX)、過(guò)氧化氫酶(catalase, CAT)、溶菌酶(lysozyme)、酸性磷酸酶(acid phosphatase, ACP)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD )總抗氧化力(activity in the anterior intestine, T-AOC)、丙二醛(malonaldehyde, MDA)等。

1.6 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(n=3)表示, 各組數(shù)據(jù)用Excel初步處理后, 用 Spss16.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(ANOVA)和 Duncan多重比較分析比較組間差異, 當(dāng)P<0.05時(shí)認(rèn)為差異顯著; 根據(jù)增質(zhì)量率與飼料蛋白水平做二次回歸分析, 確定金鼓魚(yú)達(dá)到最佳生長(zhǎng)效果時(shí)的飼料蛋白水平。

左邊界和地基右邊界y方向約束，上邊界和路基右邊界自由，下邊界y和z方向約束。加寬路基處理后，計(jì)算模型的網(wǎng)格劃分如圖3所示。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

以蛋白水平24% ~40%的5種配合飼料投喂金鼓魚(yú)幼魚(yú) 8周后, 魚(yú)體的生長(zhǎng)性能及相應(yīng)指標(biāo)變化等見(jiàn)表2。各組魚(yú)的成活率均在85%以上, 相互之間無(wú)顯著性差異(P>0.05); 增質(zhì)量率、特定生長(zhǎng)率和蛋白質(zhì)效率均隨著飼料蛋白水平的升高呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì), 而飼料系數(shù)的變化呈相反趨勢(shì)。當(dāng)飼料蛋白水平為 32.4%時(shí)(D3組)試驗(yàn)魚(yú)生長(zhǎng)效果較好, 其中, 增質(zhì)量率和特定生長(zhǎng)率顯著大于 D1與 D2組(P<0.05), 與 D1組相比分別增長(zhǎng) 76.97%和 46.03%(表3), 同時(shí)餌料系數(shù)卻顯著低于 D1和 D2組(P<0.05), 與D1組相比減少41.97%(表3), 蛋白質(zhì)效率顯著高于其他4組(P<0.05)。各組魚(yú)肝體比無(wú)顯著性差異(P>0.05)。構(gòu)建金鼓魚(yú)幼魚(yú)的增質(zhì)量率(y)和飼料蛋白水平(x)的二次曲線回歸方程:y= –838.35773+58.32379x–0.83883x2, 當(dāng)飼料蛋白水平為 35.15時(shí),其增質(zhì)量率達(dá)到最大水平(圖1)。

2.2 飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)全魚(yú)體成分的影響

不同飼料投喂金鼓魚(yú) 8周后, 全魚(yú)的生化成分變化見(jiàn)表4。全魚(yú)的灰分和水分含量沒(méi)有顯著差異(P>0.05); 粗脂肪含量與飼料蛋白水平變化趨勢(shì)相反,其中D1組粗脂肪含量顯著高于D3~D5組(P<0.05); 全魚(yú)粗蛋白含量隨著飼料蛋白水平的上升而上升, D5與D4組顯著高于其他3組(P<0.05)。結(jié)果說(shuō)明, 飼料蛋白水平會(huì)對(duì)全魚(yú)粗脂肪及粗蛋白水平產(chǎn)生顯著影響。

表2 飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)和飼料利用的影響Tab.2 Effects of varying dietary protein levels on the growth performance and feed utilization efficiency of butterfish juveniles

表3 主要生長(zhǎng)指標(biāo)組間差異百分比比較Tab.3 The variation range of some mean growth perfor-mance indexes

2.3 飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)消化酶活性的影響

飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)幼魚(yú)消化酶活性的影響見(jiàn)圖2~圖4。飼料蛋白水平的變化并不影響消化道中脂肪酶及淀粉酶活性(P>0.05), 但對(duì)蛋白酶活性卻產(chǎn)生了顯著影響。其中, 胃蛋白酶和腸道中胰蛋白酶活性均隨著飼料蛋白水平的升高呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì), 與增質(zhì)量率變化趨勢(shì)相似。D3與 D4組魚(yú)胃蛋白酶活力顯著高于 D1、D2組(P<0.05); D4組

腸道中胰蛋白酶活性最高, 顯著高于D1、D2與D5組(P<0.05); 但各組魚(yú)肝臟胰蛋白酶活性差異不顯著(P>0.05)。說(shuō)明金鼓魚(yú)可以通過(guò)提高胃、腸道的蛋白酶活性增強(qiáng)對(duì)飼料中蛋白成分的消化吸收。

表4 飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)全魚(yú)生化成分的影響Tab.4 Effects of varying dietary protein levels on the body biochemical composition of butterfish juveniles

圖1 不同飼料蛋白水平下金鼓魚(yú)幼魚(yú)的增質(zhì)量率Fig.1 Weight gain rate of butterfish juveniles fed diets with different levels of protein

圖2 不同飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)幼魚(yú)胃、腸道和肝臟蛋白酶活性的影響Fig.2 Effects of varying dietary protein levels on the on protease activities in stomach, forgut and liver of butterfish

圖3 不同飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)幼魚(yú)胃、腸道和肝臟脂肪酶活性的影響Fig.3 Effects of varying dietary protein levels on the lipase activities in stomach, forgut and liver of butterfish

圖4 不同飼料對(duì)金鼓魚(yú)幼魚(yú)腸道和肝臟淀粉酶活性的影響Fig.4 Effects of varying dietary protein levels on the amylase activities in forgut and liver of butterfish

2.4 飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)幼魚(yú)谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

不同飼料投喂組魚(yú)肝臟的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性見(jiàn)圖5。結(jié)果顯示, 隨著飼料蛋白水平升高, 肝臟中GPT和GOT的活性呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì), 這與各飼料組魚(yú)的增質(zhì)量率的變化趨勢(shì)一致; 其中D3、D4組魚(yú)的GPT活性顯著高于D1與D5組, D3組魚(yú)的GOT活性顯著高于D1組(P<0.05)。說(shuō)明飼料蛋白水平顯著影響金鼓魚(yú)幼魚(yú)肝臟中這兩種轉(zhuǎn)氨酶的活性。

圖5 飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的影響Fig.5 Effects of varying dietary protein levels on the GPT and GOT activities in liver of butterfish juveniles

2.5 飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)幼魚(yú)免疫、抗氧化指標(biāo)的影響

飼料蛋白水平顯著影響金鼓魚(yú)幼魚(yú)肝臟抗氧化酶活性。其中超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶及總抗氧化力的變化趨勢(shì)與增質(zhì)量率的變化趨勢(shì)相符, 分別在D3、D4和D3組達(dá)到最大值, 且均顯著高于D1、D2和D5組(P<0.05)。丙二醛(MDA)變化趨勢(shì)與前三者相反, 以 D3組最低, 顯著低于 D1與 D2組(P<0.05); 此外, 谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPX)活性在各組之間無(wú)顯著性差異。以上結(jié)果表明, 適宜的飼料蛋白水平對(duì)改善金鼓魚(yú)幼魚(yú)的免疫及抗氧化能力有一定幫助。

3 討論

3.1 蛋白水平影響金鼓魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能

魚(yú)類對(duì)蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)需求與魚(yú)類的食性有較大關(guān)系, 植食性魚(yú)類對(duì)蛋白質(zhì)的需求小于雜食性魚(yú)類,而肉食性魚(yú)類的蛋白營(yíng)養(yǎng)需求最高[2]。例如, 植食性的黃斑藍(lán)子魚(yú)為 29.01%~34.37%[2]、雜食性的美國(guó)紅魚(yú) (Sciaenops ocellatus)的蛋白需求量為40%[5]、絲尾 鳠 (Cuvier & Valenciennes)為 44%[6]等; 肉食性魚(yú)類較高, 如 佛羅里達(dá)鯧 鲹 (Trachinotus carolinus)為45%[7]、黑線鱈魚(yú) (Melano grammus aeglefinusL.)為 49.9%[8]、大西洋鱈 (Gadus morhuaL.)為 54.0%[9]、點(diǎn)帶石斑魚(yú) (Epinephelus malabaricus)為55%[10], 一般在45%~55%。

表5 飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)幼魚(yú)肝臟免疫和抗氧化指標(biāo)的影響Tab.5 Effects of varying dietary protein levels on the immune and antioxidant indexes in liver of butterfish juveniles

迄今, 尚未有關(guān)于金鼓魚(yú)蛋白營(yíng)養(yǎng)需求的報(bào)道,但對(duì)黃斑藍(lán)子魚(yú)、點(diǎn)藍(lán)子魚(yú)[11]、等食性相近的海水魚(yú)類的研究表明, 植食性海水魚(yú)類的蛋白需求量在29%~34%。且蛋白需求量隨生長(zhǎng)階段的不同有較大差異, 一般幼魚(yú)蛋白營(yíng)養(yǎng)需求高于成魚(yú)。本研究發(fā)現(xiàn),飼料蛋白水平顯著影響金鼓魚(yú)幼魚(yú)的增質(zhì)量率和特定生長(zhǎng)率。隨著飼料蛋白水平的提高, 金鼓魚(yú)幼魚(yú)的增質(zhì)量率和特定生長(zhǎng)率變化趨勢(shì)一致, 均在 D3組(32%)達(dá)到最大值; 飼料系數(shù)變化趨勢(shì)與增質(zhì)量率和特定生長(zhǎng)率相反, 在 D3組達(dá)到最小值, 表明 D3組飼料的蛋白水平達(dá)到魚(yú)體最大生長(zhǎng)所需?；貧w曲線分析表明, 當(dāng)飼料的蛋白含量為 35.15%時(shí)幼魚(yú)的增質(zhì)量率最高。當(dāng)飼料蛋白水平大于D3組(32%)后, 隨著飼料蛋白水平升高, 蛋白質(zhì)效率不斷下降, 表明高蛋白飼料使得魚(yú)體中更多的蛋白用于能量代謝,造成排放到水體中的氮增加, 導(dǎo)致蛋白質(zhì)浪費(fèi)[12-14]。

金鼓魚(yú)幼魚(yú)肝體比隨飼料蛋白水平的上升而下降, 但各組間無(wú)顯著差異。一方面, 可能是金鼓魚(yú)幼魚(yú)在生長(zhǎng)、代謝中要維持適宜的能量, 所以當(dāng)日糧中蛋白質(zhì)提供的能量不足時(shí), 選擇性地積累一定量的脂肪, 并以此作為能量來(lái)源[11]; 另一方面, 可能是由于低蛋白組含有較高水平的淀粉, 導(dǎo)致飼料中糖類含量的提高, 引起糖原在肝臟中的積累, 引起肝體比增大[15]。

3.2 飼料蛋白水平影響金鼓魚(yú)幼魚(yú)魚(yú)體常規(guī)生化成分

金鼓魚(yú)魚(yú)體粗蛋白含量隨著飼料蛋白水平的上升而上升, 這與在黃斑藍(lán)子魚(yú)[2]和鯔魚(yú) (Mugilcephalus linnaeus)[16]中的研究結(jié)果一致, 但與高榮兵[17]對(duì)點(diǎn)藍(lán)子魚(yú)幼魚(yú)的研究報(bào)道不一致, 他們發(fā)現(xiàn):

隨著飼料蛋白水平從 21%上升到 48%, 點(diǎn)藍(lán)子魚(yú)魚(yú)體粗蛋白呈先上升后下降的趨勢(shì)。此外, 也有研究表明, 飼料蛋白水平對(duì)魚(yú)體粗蛋白含量并無(wú)顯著影響,如對(duì)白梭吻鱸魚(yú) (Sciaenops ocellatus)[18]、大菱鲆幼魚(yú) (Scophthalmus maximus L.)[19]等的研究, 出現(xiàn)這些結(jié)果與魚(yú)類的食性、生境、規(guī)格、養(yǎng)殖條件及日常管理等有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)中當(dāng)?shù)鞍姿礁哂?6.1%后, 金鼓魚(yú)魚(yú)體蛋白含量增速明顯放緩, 暗示D5組飼料蛋白水平過(guò)高, 金鼓魚(yú)通過(guò)其他代謝途徑消耗了魚(yú)體過(guò)剩的蛋白質(zhì)[20]。

金鼓魚(yú)魚(yú)體粗脂肪含量隨著飼料蛋白水平的上升而下降, 但各組之間無(wú)顯著性差異。研究表明, 魚(yú)體脂肪沉積與魚(yú)體對(duì)能量的需要量有關(guān), 且在一定程度上與飼料系數(shù)有關(guān)[21], 另一方面, 試驗(yàn)飼料基本等脂等能, 所以蛋白水平較低的飼料中含有較高含量的碳水化合物, 魚(yú)體可能通過(guò)轉(zhuǎn)化部分碳水化合物而獲得一定的脂肪, 導(dǎo)致魚(yú)體脂肪沉積量上升[22]。此外, 飼料蛋白水平?jīng)]有對(duì)金鼓魚(yú)幼魚(yú)的水分和灰分含量產(chǎn)生顯著影響, 類似的結(jié)果見(jiàn)于黃斑藍(lán)子魚(yú)。然而, 金鼓魚(yú)幼魚(yú)魚(yú)體體成分改變的原因是否只與飼料的蛋白水平相關(guān)仍然有待研究。有學(xué)者認(rèn)為, 魚(yú)體基本營(yíng)養(yǎng)組成與多種營(yíng)養(yǎng)因素有關(guān), 是復(fù)雜的代謝調(diào)控的結(jié)果[23]。本研究結(jié)果表明, 在適宜范圍內(nèi)提高飼料蛋白水平可以改善金鼓魚(yú)肉質(zhì), 減少體內(nèi)脂肪沉積。

3.3 試驗(yàn)飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)幼魚(yú)蛋白酶成活性的影響

魚(yú)類消化酶的活性與其食性、飼料組成等有很大關(guān)系。在一定范圍內(nèi), 蛋白酶活性隨著飼料蛋白水平的增加而增加[24]。本研究發(fā)現(xiàn), 試驗(yàn)魚(yú)消化道中蛋白酶活性的變化趨勢(shì)基本一致, 隨飼料蛋白水平的上升, 胃、肝臟和腸道蛋白酶活性均呈先上升后下降的趨勢(shì), 這與在其他魚(yú)類中的研究結(jié)果相似[25-27], 表明飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)幼魚(yú)蛋白酶活性有顯著影響。同時(shí), 金鼓魚(yú)幼魚(yú)前腸胰蛋白酶活性高于肝臟, 這與對(duì)鯪(Cirrhina molitorella)[28]、草魚(yú)(Ctenopharyngodon idellus)[29]的研究結(jié)果一致。一般而言, 肝臟是消化酶分泌器官, 而消化的主要場(chǎng)所是腸道[30], 肝臟消化酶活性直接受消化酶分泌活性的影響; 而腸道消化酶活性受肝臟分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)兩個(gè)過(guò)程的影響[31], 本研究發(fā)現(xiàn), 在相同的飼料蛋白水平下金鼓魚(yú)幼魚(yú)肝臟和腸道蛋白酶變化趨勢(shì)基本一致, 表明飼料蛋白水平可能主要對(duì)肝臟中蛋白酶分泌過(guò)程產(chǎn)生影響。綜上, 作者認(rèn)為在一定范圍內(nèi)飼料蛋白水平的升高,可以促進(jìn)金鼓魚(yú)幼魚(yú)蛋白酶活性, 從而提高其對(duì)飼料蛋白的消化吸收[27-28]。

3.4 試驗(yàn)飼料蛋白含量變化對(duì)金鼓魚(yú)幼魚(yú)肝臟谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響

肝臟中兩種轉(zhuǎn)氨酶酶活性的升高表明轉(zhuǎn)氨基作用增強(qiáng), 組織中氨基酸代謝物增加, 谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)主要存在于肝細(xì)胞漿內(nèi), 作用于底物丙酮酸、a-酮戊二酸的廣譜酶, 外來(lái)化合物可產(chǎn)生抑制或誘導(dǎo)作用[32]。GOT和GPT活性通?？捎脕?lái)指示動(dòng)物的肝臟功能。林仕梅等[33]研究表明, 中華絨鰲蟹肝胰腺中GOT活力較肌肉中高, 認(rèn)為肝胰臟是氨基酸合成和脫氨的主要場(chǎng)所。在本研究中, 對(duì)不同組魚(yú)肝臟中GPT和GOT的活性測(cè)定后發(fā)現(xiàn), 二者均在D3組中活力最高, 表明D3組蛋白含量可有效促進(jìn)金鼓魚(yú)幼魚(yú)的氨基酸代謝, 有利于金鼓魚(yú)幼魚(yú)體內(nèi)代謝平衡,這一結(jié)果與石英等[34]對(duì)血鸚鵡的研究結(jié)果相似, 該研究認(rèn)為, 適宜的蛋白水平會(huì)在一定程度上促進(jìn)魚(yú)類肝臟中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性, 但過(guò)高的飼料蛋白水平會(huì)降低這兩種酶的活性。

3.5 試驗(yàn)飼料蛋白水平對(duì)金鼓魚(yú)幼魚(yú)肝臟免疫與抗氧化指標(biāo)的影響

所有抗氧化指標(biāo)中, 總抗氧化力可以反映所有非酶體系抗氧化系統(tǒng)的能力[35]。SOD、CAT在魚(yú)類中的作用主要是清除活性氧, 對(duì)過(guò)氧化氫(H2O2)和超氧化物(O2-)有清除作用[36]。GPX促進(jìn)過(guò)氧化氫和脂質(zhì)過(guò)氧化物的分解, 是一種高效的抗脂質(zhì)過(guò)氧化酶[37]。本研究發(fā)現(xiàn), 隨著飼料蛋白水平的上升, 金鼓魚(yú)幼魚(yú)肝臟中T-AOC、GPX、SOD和CAT水平均呈先上升后下降的趨勢(shì), 相反的, MDA水平呈先下降后上升的趨勢(shì), 且均在 D3(32%)與 D4組(36%)中表現(xiàn)最好, 表明金鼓魚(yú)幼魚(yú)抗氧化能力與飼料蛋白水平有關(guān)。綜合各種指標(biāo), 我們認(rèn)為飼料蛋白水平在32%左右, 金鼓魚(yú)幼魚(yú)的抗氧化能力較高。

酸性磷酸酶是溶酶體的標(biāo)志酶之一, 與細(xì)胞代謝有關(guān), 常作為魚(yú)類非特異性免疫的一個(gè)指標(biāo)。堿性磷酸酶是膜結(jié)合蛋白, 參與多種代謝物的轉(zhuǎn)運(yùn)[38]。溶菌酶被認(rèn)為是評(píng)估魚(yú)類抗病及免疫能力的主要指標(biāo)之一[35]。隨著飼料蛋白水平的上升, 金鼓魚(yú)幼魚(yú)溶菌酶和酸性磷酸酶均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì), 并且各組間有顯著差異, 這與樂(lè)貽榮等[39]在奧尼羅非魚(yú)(Oreochromis niloticus×O.aureus)中的報(bào)道不同, 該研究認(rèn)為飼料蛋白水平變化對(duì)奧尼羅非魚(yú)溶菌酶活性無(wú)顯著影響, 表明不同種魚(yú)類的飼料蛋白水平對(duì)其免疫能力的影響有所不同。在本研究中, 蛋白含量較低組金鼓魚(yú)的免疫和抗氧化指標(biāo)的活性均有所下降, 可能與飼料中必需氨基酸供應(yīng)不足有關(guān)[40]; 另一方面, 不同的蛋白源含有的氨基酸未必完全適宜某種魚(yú)類, 所以當(dāng)飼料蛋白水平上升到一定程度后,營(yíng)養(yǎng)拮抗因子也會(huì)在魚(yú)體中增多, 從而影響魚(yú)體免疫和抗氧化的能力[41]。綜上, 32%~36%的飼料蛋白水平可能有利于提高金鼓魚(yú)的免疫與抗氧化能力。

4 小結(jié)

研究結(jié)果表明, 金鼓魚(yú)幼魚(yú)飼料中蛋白的適宜添加量為35%左右。在此飼料蛋白水平下, 金鼓魚(yú)的增質(zhì)量率最大, 魚(yú)體蛋白含量較高, 脂肪含量較低,消化道的蛋白酶活性較高, 魚(yú)體的免疫與抗氧化能力較強(qiáng)。本研究首次確定金鼓魚(yú)幼魚(yú)對(duì)蛋白質(zhì)的適宜需要量, 為其飼料配方研發(fā)提供了參考依據(jù)。

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