泰州地區(qū)寵物弓形蟲感染流行現(xiàn)狀調(diào)查與防治

卓國榮　周紅蕾　盧煒　魏寧　劉俊棟　高雪敏

摘要：為調(diào)查泰州地區(qū)寵物犬貓弓形蟲感染流行現(xiàn)狀，隨機(jī)采集泰州地區(qū)不同來源犬與貓的血液樣本，采用弓形蟲抗體ELISA試劑盒與弓形蟲抗體膠體金試紙條2種方法對該地區(qū)犬貓弓形蟲感染情況進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，并開展治療試驗(yàn)。結(jié)果表明，該地區(qū)597份寵物血清樣本經(jīng)ELISA試劑盒與膠體金試紙條2種方法檢測出的弓形蟲抗體陽性率分別為12.06%（犬8.05%，貓19.34%）、11.60%（犬7.79%，貓18.40%）;且農(nóng)村散養(yǎng)犬和豬與流浪犬和貓的血清弓形蟲抗體陽性率最高;成年犬和貓的弓形蟲抗體陽性率明顯高于幼年犬和貓;春季采集的犬和貓血清樣本弓形蟲抗體陽性率最高;陽性樣本寵物主人血清弓形蟲抗體陽性率為8.57%;對于具有臨床癥狀的感染犬貓通過綜合治療措施，治愈率達(dá)81.82%。同時數(shù)據(jù)顯示，ELISA試劑盒檢測敏感性高于膠體金試紙條，但兩者差異不顯著。

關(guān)鍵詞：泰州地區(qū);犬;貓;弓形蟲;流行病學(xué);調(diào)查;防治

中圖分類號： S852.7文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1002-1302（2019）08-0191-03

弓形蟲病是一種發(fā)生于世界各地的人畜共患寄生蟲病，由剛地弓形蟲（Toxoplasma gondii）感染引起的，可造成人及動物流產(chǎn)、畸胎、胎兒發(fā)育缺陷、生長受阻、死亡等不同程度的危害[1]，并加重艾滋病患者、腫瘤患者病情[2-3]。弓形蟲的宿主范圍廣泛，包括人、豬、馬、牛、羊、犬、貓、老鼠等多種哺乳動物及雞、鴨、鵝、鳥等禽類[4]，其中貓及貓科動物是弓形蟲的終末宿主，人與犬等為中間宿主，據(jù)2011年1月至2016年12月間文獻(xiàn)報道我國各地犬、貓、人血清弓形蟲抗體陽性率分別為2.60%[5]～47.22%[6]、11.10%[7]～39.08%[8]、5.17%[9]～16.30%[10]。

近5年來，我國飼養(yǎng)寵物數(shù)量急劇增加，人與犬貓接觸更加密切，增加了犬貓將弓形蟲傳播給人類的機(jī)會，有文獻(xiàn)表明密切接觸過寵物犬貓的人的弓形蟲感染率明顯高于無接觸者[11-13]，因此，犬貓傳播弓形蟲的危害應(yīng)引起寵物犬貓飼養(yǎng)者高度重視。

為了解江蘇省泰州地區(qū)犬貓弓形蟲感染流行現(xiàn)狀，本研究于2016年9月至2017年8月間采用弓形蟲抗體ELISA試劑盒與弓形蟲抗體膠體金試紙條2種方法對本地區(qū)犬貓進(jìn)行弓形蟲抗體檢測，同時針對患病寵物開展弓形蟲病治療試驗(yàn)，以調(diào)查出泰州地區(qū)寵物弓形蟲感染流行特點(diǎn)，對本地區(qū)寵物弓形蟲病的臨床診療與防控以及公共衛(wèi)生安全具有重要的指導(dǎo)意義。

1材料與方法

1.1調(diào)查對象

隨機(jī)采集江蘇省泰州海陵區(qū)、高港區(qū)、姜堰區(qū)、興化、泰興與靖江地區(qū)的犬與貓血清樣本共597份（犬385份，貓212份），其中來源于寵物醫(yī)院就診與體檢犬、貓血清樣本399份（犬278份，貓121份），來源于寵物市場犬、貓血清樣本118份（犬75份，貓43份），來源于農(nóng)村散養(yǎng)與流浪犬、貓血清樣本80份（犬32份，貓48份）。對所采集的每份血清樣本登記樣本來源、臨床癥狀、性別、年齡與采集時間，并做好編號與標(biāo)記，于-18 ℃凍存。

1.2試劑與儀器

弓形蟲抗體膠體金試紙條（GICA），泰州三聯(lián)百晗生物科技有限公司研制，產(chǎn)品在有效期內(nèi);動物弓形蟲IgG抗體檢測試劑盒（ELISA），珠海經(jīng)濟(jì)特區(qū)海泰生物制藥有限公司生產(chǎn)，產(chǎn)品在有效期內(nèi);儀器包括酶標(biāo)儀、離心機(jī)、冰箱、10～100 μL可調(diào)移液器等。

1.3檢查方法

1.3.1臨床癥狀檢查

患弓形蟲病的犬、貓會出現(xiàn)相應(yīng)的臨床癥狀。犬弓形蟲病主要表現(xiàn)精神萎靡、飲食欲降低至廢絕，體溫升高至40～42 ℃，并表現(xiàn)為稽留熱，患犬往往有眼分泌物與鼻分泌物、呼吸次數(shù)增加、嚴(yán)重的呼吸困難或喘息，嚴(yán)重感染的患犬出現(xiàn)貧血、尿液深黃甚至血尿;消化系統(tǒng)受破壞，出現(xiàn)輕度腹瀉至出血性腹瀉。有些患犬在患病后期表現(xiàn)出抽搐、運(yùn)動共濟(jì)失調(diào)等神經(jīng)癥狀，逐漸體溫下降，衰竭而亡。妊娠母犬發(fā)病會出現(xiàn)早產(chǎn)、流產(chǎn)，產(chǎn)出死胎或弱胎。很多犬感染弓形蟲后不發(fā)病，表現(xiàn)為隱性感染，臨床癥狀不明顯，但可向體外排出弓形蟲包囊。弓形蟲病在臨床癥狀上與犬瘟熱、犬布魯氏桿菌病等有類似之處，須要鑒別診斷。

貓弓形蟲病急性期主要表現(xiàn)精神萎靡不振，食欲下降，發(fā)熱至40 ℃以上。有些患貓表現(xiàn)出對光反應(yīng)遲鈍、眼結(jié)膜充血、嘔吐、腹瀉等癥狀。有些患貓出現(xiàn)黃疸、運(yùn)動無力、走路困難。懷孕貓發(fā)病可表現(xiàn)流產(chǎn)、產(chǎn)死胎等現(xiàn)象。慢性期主要表現(xiàn)為厭食、發(fā)熱（體溫在39.7～41.1 ℃之間，持續(xù)時間長的可達(dá)1周）。有些貓出現(xiàn)運(yùn)動失調(diào)、驚厥、瞳孔不均、視覺喪失、抽搐等中樞神經(jīng)癥狀，懷孕貓同樣可出現(xiàn)流產(chǎn)或死胎。貓弓形蟲病應(yīng)與貓流感、貓瘟熱等病進(jìn)行鑒別診斷。

采集樣本時對犬貓進(jìn)行臨床檢查，記錄臨床癥狀，測量體溫，對于發(fā)熱犬、貓及有類似癥狀的犬、貓做好標(biāo)記。

1.3.2犬貓血清樣本弓形蟲抗體檢測

使用動物弓形蟲IgG抗體檢測試劑盒與弓形蟲抗體膠體金試紙條分別對犬、貓血清樣本進(jìn)行弓形蟲抗體檢測，檢測操作方法嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行。

1.3.3寵物主人血清弓形蟲抗體檢測

對于犬貓血清弓形蟲抗體檢測結(jié)果為陽性的樣本，將檢測結(jié)果反饋給寵物主人，由寵物主人到醫(yī)院進(jìn)行自身弓形蟲抗體檢測，并記錄檢測結(jié)果。

1.4治療方案

根據(jù)患犬狀況，治療原則為抗弓形蟲感染，對癥治療（退熱、控制繼發(fā)感染、補(bǔ)液、補(bǔ)充電解質(zhì)、增強(qiáng)肝臟解毒能力），以及飼養(yǎng)環(huán)境消毒。

驅(qū)殺弓形蟲用藥為磺胺嘧啶注射液0.06 g/kg+甲氧芐胺嘧啶（14 mg/kg TMP），肌肉注射，2次/d，連用3 d;3 d后若血檢仍有炎癥，給予頭孢噻呋鈉5 mg/kg，皮下注射;補(bǔ)液與補(bǔ)充體能給予復(fù)方氯化鈉注射液30 mL/kg、維生素C注射液100～500 mg/次、三磷酸腺苷二鈉注射液10～20 mg/次、注射用輔酶A 25～50 U/次、50%葡萄糖5～10 g/次，混勻后靜脈滴注，滴注頻率為1次/d，連用5～7 d;將犬貓日?；顒拥膮^(qū)域進(jìn)行環(huán)境消毒，對貓排泄的糞便單獨(dú)消毒并深埋。

2結(jié)果與分析

2.1血清弓形蟲抗體結(jié)果

由表1可知，597份血清樣本中，ELISA法檢測出陽性樣本72份（犬31份，貓41份），陽性率12.06%;GICA法檢測出陽性樣本69份（犬30份，貓39份），陽性率11.56%。ELISA法與GICA法檢測犬血清弓形蟲抗體陽性率分別為 8.05%、7.79%，檢測出貓血清弓形蟲抗體陽性率分別為 19.34%、18.40%。經(jīng)分析可知，貓血清弓形蟲抗體陽性率明顯高于犬血清弓形蟲抗體陽性率，ELISA法與GICA法檢測總樣本陽性率差別不顯著（P>0.05），但ELISA法敏感性高。

2.23種不同來源犬貓血清樣本弓形蟲抗體結(jié)果

由表2可知，597份血清樣本中，ELISA法對來源于就診與體檢犬與貓血清樣本、寵物市場犬與貓血清樣本、農(nóng)村散養(yǎng)與流浪犬貓血清樣本的弓形蟲抗體陽性檢出數(shù)量分別為42份（犬22份，貓20份）、12份（犬5份，貓7份）與18份（犬4份，貓14份），陽性率分別為10.53%（犬7.91%，貓 16.53%）、10.17%（犬6.67%，貓16.28%）、22.50%（犬 12.50%，貓29.17%）;GICA法對就診與體檢犬貓血清樣本、寵物市場犬貓血清樣本、農(nóng)村散養(yǎng)與流浪犬貓血清樣本的弓形蟲抗體陽性檢出數(shù)量分別為40份（犬21份，貓19份）、12份（犬5份，貓7份）與17份（犬4份，貓13份），陽性率分別為10.03%（犬7.55%，貓15.70%）、10.17%（犬6.67%，貓16.28%）、21.25%（犬12.50%，貓27.08%）。

分析表明，在不同來源血清樣本中，貓的弓形蟲抗體陽性率均高于犬的陽性率，其中農(nóng)村散養(yǎng)與流浪犬貓的血清弓形蟲抗體陽性率最高，寵物市場犬貓弓形蟲抗體陽性率最低，表明衛(wèi)生條件差，更容易導(dǎo)致弓形蟲感染。ELISA法與GICA法檢測不同來源犬與貓的血清弓形蟲抗體陽性率差別不顯著（P>0.05），但ELISA法檢出率稍高于GICA法。

2.3幼年與成年犬貓血清樣本弓形蟲抗體結(jié)果

由表3可知，597份血清樣本中，年齡<12月齡的幼年犬、貓血清樣本為360份，年齡>12月齡的成年犬、貓血清樣本為237份。ELISA法對幼年犬貓、成年犬貓血清樣本的弓形蟲抗體陽性檢出數(shù)分別為28份（犬13份，貓15份）、44份（犬18份，貓26份），陽性率分別為7.78%（犬5.53%，貓12.00%）、18.57%（犬12.00%，貓29.89%）;GICA法對幼年犬貓、成年犬貓血清樣本的弓形蟲抗體陽性檢出數(shù)分別為27份（犬13份，貓14份）、42份（犬17份，貓25份），陽性率分別為7.50%（犬5.53%，貓11.20%）、17.72%（犬 11.33%，貓28.74%）。

分析發(fā)現(xiàn)，2種方法檢測的成年犬貓血清樣本弓形蟲抗體陽性率均高于幼年犬貓弓形蟲抗體陽性率，并且差異顯著（P<0.05），表明隨著犬貓年齡的增長，被弓形蟲感染的機(jī)會增加。2種方法對于幼年犬貓、成年犬貓的血清樣本檢測結(jié)果差異不顯著（P>0.05）。

2.4不同季節(jié)采集血清樣本弓形蟲抗體結(jié)果

由表4可知，597份血清樣本中，春季采樣127份（犬73份，貓54份），夏季采樣175份（犬101份，貓74份），秋季采樣210份（犬142份，貓68份），冬季采樣85份（犬69份，貓16份）。ELISA法對春季、夏季、秋季與冬季采集的犬貓血清樣本弓形蟲抗體陽性檢出數(shù)量分別為23份（犬7份，貓16份）、11份（犬6份，貓5份）、31份（犬14份，貓17份）、7份（犬4份，貓3份），陽性率分別為18.11%（犬9.59%，貓 29.63%）、6.29%（犬5.94%，貓6.76%）、14.76%（犬 9.86%，貓25.00%）、8.24%（犬5.80%，貓18.75%）;GICA法對春季、夏季、秋季與冬季采集的犬貓血清樣本弓形蟲抗體陽性檢出數(shù)量分別為22份（犬7份，貓15份）、11份（犬6份，貓5份）、30份（犬14份，貓16份）、6份（犬3份，貓3份），陽性率分別為17.32%（犬9.59%，貓27.78%）、6.29%（犬5.94%，貓6.76%）、14.29%（犬9.86%，貓23.53%）、7.06%（犬4.35%，貓18.75%）。

表明春季采集的犬貓總血清樣本弓形蟲抗體陽性率最高，秋季次之，夏季最低;貓的血清弓形蟲抗體陽性率也是春季最高，秋季次之，夏季最低，但犬的血清弓形蟲抗體陽性率秋季最高，春季次之，冬季最低，這可能與犬秋季外出活動覓食增加有關(guān)。2種方法檢測結(jié)果差異不顯著（P>0.05）。

2.5部分寵物主人血清弓形蟲抗體結(jié)果

犬、貓血清弓形蟲抗體檢測為陽性的寵物主人有35人至醫(yī)院進(jìn)行了個人血清弓形蟲抗體檢測，結(jié)果有3位寵物主人血清弓形蟲抗體為陽性，陽性率為8.57%，表明寵物感染弓形蟲會增加寵物主人遭受弓形蟲感染概率。

2.6治療效果

對具有臨床癥狀的11只抗體陽性犬、貓開展了治療試驗(yàn)，經(jīng)過1個療程治療，9只臨床癥狀消失，恢復(fù)正常，有2只幼年寵物死亡，治療有效率81.82%，表明弓形蟲病經(jīng)過綜合治療治愈率較高。

3討論與結(jié)論

目前，我國檢測弓形蟲感染的方法有顯微鏡鏡檢、動物接種、薩賓-費(fèi)爾德曼染色試驗(yàn)（DT）、間接血凝試驗(yàn)（IHA）、改良凝集試驗(yàn)（MAT）、間接熒光抗體試驗(yàn)（IFA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、免疫膠體金技術(shù)（GICA）以及分子生物學(xué)診斷技術(shù)（PCR）等檢查方法[14-16]。臨床中應(yīng)用較多的方法為IHA、ELISA與GICA，本研究表明ELISA法與GICA法檢測出的陽性結(jié)果具有較高的符合率（95.83%），兩者沒有明顯差異。ELISA法操作相對復(fù)雜，更利于大批量樣本同時檢測，免疫膠體金試紙條操作簡便，適合對單個樣本的快速檢測，便于臨床推廣使用。

2005年公布的我國人群弓形蟲平均感染率為 7.88%[17]，由于弓形蟲對母體與胎兒具有嚴(yán)重危害，因此是人類優(yōu)生優(yōu)育的大敵，做好弓形蟲感染的預(yù)防工作，對于阻止弓形蟲病的發(fā)生具有重要意義。目前，我國寵物犬貓飼養(yǎng)量大，人與犬貓接觸密切率增加，是引起人類弓形蟲感染的危險因素，因此，做好犬貓弓形蟲感染篩查工作，對于預(yù)防人類弓形蟲感染具有重要意義。本次流行病學(xué)調(diào)查顯示，泰州地區(qū)犬的弓形蟲感染率為8.05%，貓的弓形蟲感染率為19.34%，比2012年泰州地區(qū)犬貓弓形蟲抗體陽性率有所下降[18]，低于江蘇省南京市市區(qū)犬弓形蟲抗體陽性率19.5%[7]、宿遷地區(qū)貓弓形蟲抗體陽性率35.85%[19]，但陽性樣本寵物主人弓形蟲抗體陽性率達(dá)到8.57%，仍應(yīng)引起泰州地區(qū)飼養(yǎng)寵物者高度重視，一方面要加強(qiáng)弓形蟲危害宣傳，另一方面寵物主人要養(yǎng)成良好衛(wèi)生習(xí)慣，不給寵物吃生食、生肉，對寵物活動的區(qū)域經(jīng)常消毒，對犬貓糞便消毒深埋，定期給犬貓口服驅(qū)蟲藥物，定期帶犬貓至寵物醫(yī)院進(jìn)行弓形蟲抗體檢查，以便早發(fā)現(xiàn)早治療。

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