調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在胃癌中的研究進(jìn)展

凌博凡，侯　茜，陳玉超(綜述)，鄒　璽，王瑞平(審校)

(南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，南京 210029)

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調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在胃癌中的研究進(jìn)展

凌博凡，侯茜，陳玉超(綜述)，鄒璽※，王瑞平(審校)

(南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，南京 210029)

摘要：調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg細(xì)胞)是人體內(nèi)存在的一類功能獨(dú)特的T淋巴細(xì)胞亞群，其參與了自身免疫性疾病、移植免疫、腫瘤免疫等免疫活動(dòng)。研究發(fā)現(xiàn)，Treg細(xì)胞的過(guò)度表達(dá)幫助了腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸，通過(guò)調(diào)節(jié)其表達(dá)水平以達(dá)到控制腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸是近年來(lái)腫瘤研究的一大熱點(diǎn)。該文就Treg細(xì)胞的研究近況及其在胃癌中的研究進(jìn)展予以綜述。

關(guān)鍵詞：胃癌；調(diào)節(jié)性T細(xì)胞；治療；預(yù)后

調(diào)節(jié)性T細(xì)胞 (regulatory T cells，Treg細(xì)胞)是人體內(nèi)存在的一類功能獨(dú)特的T淋巴細(xì)胞亞群，它能夠分泌白細(xì)胞介素(interleukin，IL)4、IL-10和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)等炎性因子，抑制效應(yīng)T淋巴細(xì)胞發(fā)揮作用，與多種免疫性疾病的發(fā)生或免疫狀態(tài)密切相關(guān)，其不僅參與自身免疫耐受的調(diào)節(jié)，而且在腫瘤免疫和移植免疫中也具有重要的作用。目前，Treg細(xì)胞與胃癌的相關(guān)研究相對(duì)較少，現(xiàn)就Treg細(xì)胞的研究近況及其在胃癌中的研究進(jìn)展予以綜述。

1Treg細(xì)胞概述

1.1Treg細(xì)胞的分類根據(jù)Treg細(xì)胞來(lái)源可分為天然型Treg細(xì)胞和誘導(dǎo)型Treg細(xì)胞兩種。天然型Treg細(xì)胞(CD4+CD25+Treg細(xì)胞)是由胸腺細(xì)胞自然分化而來(lái)的一個(gè)Treg細(xì)胞亞群；誘生型Treg細(xì)胞是外周成熟CD4+CD25-T細(xì)胞在受到特異性抗原刺激并在細(xì)胞因子的誘導(dǎo)下轉(zhuǎn)化的具有Treg細(xì)胞功能特征的細(xì)胞亞群。研究證明，天然型Treg細(xì)胞是通過(guò)細(xì)胞間接觸的方式起作用，如CD4+CD25+Treg細(xì)胞不與靶細(xì)胞直接接觸則不能發(fā)揮抑制靶細(xì)胞活性的作用；而誘導(dǎo)型Treg細(xì)胞是通過(guò)細(xì)胞因子依賴途徑發(fā)揮作用的[1]。

1.2Treg細(xì)胞的特征CD4+CD25+Treg 具有免疫無(wú)能性和免疫抑制性兩大特性：前者表現(xiàn)為接受抗原刺激后，既不增殖也不分泌IL-2等T細(xì)胞活化現(xiàn)象；后者表現(xiàn)為CD4+CD25+Treg經(jīng)T細(xì)胞抗原受體刺激活化后能抑制其他的CD4+和CD8+T細(xì)胞亞群及B細(xì)胞的活化和細(xì)胞因子的分泌。目前認(rèn)為，CD4+CD25+Treg細(xì)胞的作用機(jī)制有以下3種[2]：①在體外，通過(guò)細(xì)胞間接觸依賴機(jī)制發(fā)揮作用；②在體內(nèi)，主要依靠抑制性細(xì)胞因子,如IL-10、IL-4及TGF-β等發(fā)揮作用；③通過(guò)與抗原呈遞細(xì)胞的相互作用來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫應(yīng)答。

1.3Treg細(xì)胞的鑒別方法Treg細(xì)胞表面表達(dá)高水平的 IL-2受體、細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4(cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4，CTLA-4)、糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的腫瘤壞死因子受體、叉頭狀/翅膀狀螺旋轉(zhuǎn)錄因子(forkhead box P3，F(xiàn)oxp3)，其中識(shí)別調(diào)節(jié)性T細(xì)胞最敏感的標(biāo)志物是Foxp3[3-4]。此外，研究還發(fā)現(xiàn)CD127也可作為一種識(shí)別標(biāo)志物，其表達(dá)與Foxp3呈負(fù)相關(guān)，因此亦可以通過(guò)CD127識(shí)別Treg細(xì)胞[5]。此外，還有一些表面標(biāo)志物需要作進(jìn)一步的研究。

2Treg細(xì)胞在胃癌方面的研究

Treg細(xì)胞在胃癌中的研究報(bào)道相對(duì)較少，同時(shí)研究結(jié)果也互有矛盾之處。

大部分臨床研究提示，Treg細(xì)胞與胃癌的不良預(yù)后相關(guān)。Perrone等[6]和Liotta等[7]研究發(fā)現(xiàn)，Treg細(xì)胞可作為一個(gè)判斷胃癌預(yù)后的獨(dú)立因素，其在腫瘤組織中的高表達(dá)提示患者術(shù)后生存期縮短及較高的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率。Lu等[8]研究發(fā)現(xiàn)，胃癌組織中Treg細(xì)胞的表達(dá)率與胃癌TNM分期及預(yù)后密切相關(guān)，Treg細(xì)胞表達(dá)水平越高，患者分期越晚，預(yù)后越差。Lee等[9]通過(guò)檢測(cè)胃癌前哨淋巴結(jié)中Treg細(xì)胞的密度發(fā)現(xiàn)，淋巴結(jié)中高密度表達(dá)Foxp3+Treg細(xì)胞的轉(zhuǎn)移陽(yáng)性率高，檢測(cè)下游的非前哨淋巴結(jié)，結(jié)果也是如此，故此認(rèn)為，Treg細(xì)胞在胃癌轉(zhuǎn)移中可能扮演了一個(gè)重要的角色，其可以成為胃癌轉(zhuǎn)移治療的一個(gè)靶點(diǎn)。

Treg可能通過(guò)釋放某些信號(hào)因子發(fā)揮抑制淋巴細(xì)胞活化和增殖的作用，從而加速腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移。Deng等[10]抽取胃癌患者的血液發(fā)現(xiàn)，患者外周血中Treg細(xì)胞的含量明顯高于正常人；分離患者的外周血單核細(xì)胞，并在體外與胃癌細(xì)胞株及正常胃黏膜細(xì)胞株進(jìn)行聯(lián)合培養(yǎng)后，檢測(cè)上清液發(fā)現(xiàn)，Treg細(xì)胞的表達(dá)與缺氧誘導(dǎo)因子1α(hypoxia inducible factor-1 alpha，HIF-1α)的表達(dá)呈正相關(guān)，同時(shí)其表達(dá)水平也與胃癌的惡性程度呈正相關(guān)，胃癌細(xì)胞在缺氧條件下可通過(guò)誘導(dǎo)Foxp3的表達(dá)提高HIF-1α的表達(dá)水平，加速腫瘤生長(zhǎng)。Mizukami等[11]分別檢測(cè)了Foxp3+Treg細(xì)胞在胃癌患者外周血淋巴細(xì)胞、腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞、區(qū)域淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞中的表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)oxp3+Treg細(xì)胞在腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞中的表達(dá)率與正?；颊呦啾炔町愑薪y(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(12.4±7.5)%比(4.1±5.3)%]，但與腫瘤分期無(wú)關(guān)。同時(shí)體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，造成Treg細(xì)胞在腫瘤區(qū)域淋巴結(jié)中富集的原因可能與趨化因子配體17[chemokine (C-C motif) ligand 17，CCL17]和CCL22的高表達(dá)造成Treg向腫瘤部位聚集，從而使腫瘤局部處于免疫抑制狀態(tài)，而不利于抗腫瘤免疫反應(yīng)有關(guān)[11]。Yuan等[12]研究發(fā)現(xiàn)，高表達(dá)Foxp3的Treg細(xì)胞與胃癌TNM分期呈正相關(guān)，其還可抑制自體CD4+CD25-的T細(xì)胞增殖，引起外周T細(xì)胞的免疫耐受，且該類Treg細(xì)胞的表達(dá)水平與腫瘤微環(huán)境中的環(huán)加氧酶2及前列腺素E2的水平呈正相關(guān)。經(jīng)環(huán)加氧酶2抑制劑和前列腺素E2受體拮抗劑作用后，可抑制Treg細(xì)胞的表達(dá)[12]。

亦有研究發(fā)現(xiàn)，在賁門癌患者的腫瘤基質(zhì)中，F(xiàn)oxp3+Treg細(xì)胞表達(dá)水平較高者，其中位生存期較表達(dá)低者長(zhǎng)，因此抑制Treg細(xì)胞的表達(dá)可能并不是一個(gè)合適的治療手段[11]。盡管Foxp3+Treg細(xì)胞在Ⅳ期胃癌患者中的表達(dá)水平明顯高于Ⅰ期患者，但是其表達(dá)水平與生存期無(wú)關(guān)，但Foxp3+Treg細(xì)胞富集部位與患者的預(yù)后具有相關(guān)性，F(xiàn)oxp3+Treg細(xì)胞分布范圍小、位置相對(duì)固定的患者，其生存期較分布相對(duì)彌散者長(zhǎng)[11]。因此認(rèn)為，在胃癌患者中真正重要的是Treg細(xì)胞分布的位置及范圍而并不是表達(dá)水平。

3基于Treg細(xì)胞的治療

通常認(rèn)為Treg細(xì)胞是腫瘤預(yù)后不佳的指標(biāo)，所以清除Treg細(xì)胞就成為腫瘤免疫治療的一項(xiàng)重要策略[13-14]。采用單克隆抗體去除CD25+細(xì)胞或阻斷Treg細(xì)胞表面的CTLA-4通路是目前主要的兩種治療方案。Okita等[15]在體外擴(kuò)增LAK細(xì)胞的同時(shí)加入抗CD25單克隆抗體，去除CD25+的Treg細(xì)胞后，LAK細(xì)胞的增殖能力顯著上升，其殺傷性T細(xì)胞殺傷胃癌細(xì)胞株的能力也顯著增強(qiáng)。由于T細(xì)胞的分化、增殖以及發(fā)揮免疫應(yīng)答都必須先識(shí)別特異性抗原，CTLA-4與B7分子結(jié)合后，能抑制T細(xì)胞的活化、分化和增殖，使得T細(xì)胞活性下降，因此抗CTLA-4單克隆抗體免疫治療成為一種可行的治療手段，其單克隆抗體Ipilimumab已被應(yīng)用于黑色素瘤的臨床治療[16]。在胃癌方面，Ralph等[17]在一個(gè)小型的Ⅱ期臨床試驗(yàn)中運(yùn)用抗CTLA-4單克隆抗體——Tremelimumab治療18例晚期胃癌患者，其中1例患者腫瘤部分緩解并維持了 32 個(gè)月，4例患者病情穩(wěn)定，經(jīng)治療后的患者中位生存期較對(duì)照組顯著上升(17.1 個(gè)月比4.7 個(gè)月)，同時(shí)其表現(xiàn)出的低毒及安全更是備受關(guān)注，現(xiàn)該藥已進(jìn)入Ⅲ期臨床試驗(yàn)階段。

隨著對(duì)腫瘤免疫學(xué)的認(rèn)識(shí)及細(xì)胞免疫治療研究的深入，越來(lái)越多的免疫治療藥物已經(jīng)進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段，而某些藥物也已開(kāi)始在臨床應(yīng)用。美國(guó)食品藥品管理局近期也批準(zhǔn)了多個(gè)腫瘤免疫治療藥物進(jìn)入臨床，如上文中提及的Ipilimumab已被批準(zhǔn)用于黑色素瘤的臨床治療，并有大量免疫治療藥物進(jìn)入Ⅲ期臨床試驗(yàn)。

4小結(jié)

目前，腫瘤的免疫治療較其他治療方式，無(wú)論在方法還是有效率方面都有著一定的差距，但是這種治療方法相對(duì)安全、低毒，因而近來(lái)也受到了廣泛關(guān)注，可以說(shuō)有著較大的發(fā)展空間。Treg細(xì)胞以其獨(dú)特的免疫抑制作用，在胃癌的免疫逃逸、轉(zhuǎn)移遷移中扮演著重要的角色，影響著人體抗腫瘤免疫應(yīng)答以及腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸。如何有效地控制機(jī)體的Treg 細(xì)胞、改善機(jī)體抗腫瘤免疫抑制狀態(tài)是胃癌免疫治療的關(guān)鍵。準(zhǔn)確地把握Treg細(xì)胞的特點(diǎn)，就有可能為胃癌的治療探索出一條有效的診療途徑。

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Research Progress of Regulatory T Cell in Gastric Cancer

LINGBo-fan,HOUQian,CHENYu-chao,ZOUXi,WANGRui-ping.

(DepartmentofOncology,AffiliatedHospitalofNanjingUniversityofTCM，Nanjing210029，China)

Abstract:Regulatory T cells (Treg) is a T lymphocyte subset with unique function in human body,which participate in autoimmune disease,transplantation immunity,tumor immunity and so on.Researches showed that,the overexpression of Treg cell help the immune escape of tumor cells,therefore regulating the expression of Treg cell could control the tumor cell immune escape,has become a hot spot in the field in recent years.Here reviews the recent progress of Treg cells and its role in gastric cancer.

Key words:Gastric cancer； Regulatory T cells； Treatment； Prognosis

基金項(xiàng)目：2011江蘇省中醫(yī)藥局開(kāi)放課題項(xiàng)目(JD11028)，江蘇省中醫(yī)院院級(jí)課題(Y12010)

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.03.016

中圖分類號(hào)：R735.2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1006-2084(2015)03-0426-03

收稿日期：2013-08-20修回日期：2014-06-24編輯：伊姍