中藥柔性脂質(zhì)體的制備工藝研究

魏雪仙，張世川，劉玉璇，國大亮

(天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津 300193)

柔性脂質(zhì)體(flexible liposomes)又被稱為變形脂質(zhì)體(deformable liposomes)，柔性脂質(zhì)體的膜具有高度變形性和柔韌性，使其擁有更高的包封率和更小的粒徑，適合于包封成分復(fù)雜的中藥提取物。高質(zhì)量的柔性脂質(zhì)體應(yīng)具備高度變形性的脂質(zhì)膜、均勻的粒徑、較高的包封率、和良好的穩(wěn)定性。本文對(duì)中藥柔性脂質(zhì)體的制備工藝進(jìn)行總結(jié)歸納，為中藥柔性脂質(zhì)體制備工藝的優(yōu)化提供有意參考。

1 柔性脂質(zhì)體的分類

柔性脂質(zhì)體主要包括傳遞體(transfersomes)和醇質(zhì)體(ethosomes)兩種［1］。傳遞體是在一般脂質(zhì)體的膜材中加入膽酸鈉、脫氧膽酸鈉、司盤或者吐溫等表面活性劑，表面活性劑可以起到邊緣活性劑(edge activator)的作用軟化磷脂膜，增加脂質(zhì)體的變形性［2］。醇質(zhì)體是由磷脂或類脂，乙醇，水組成的脂質(zhì)小體，有時(shí)加入適量的丙二醇以提高其穩(wěn)定性［3］。

2 柔性脂質(zhì)體性能優(yōu)勢

柔性脂質(zhì)體膜具有優(yōu)越的柔順性和變形性，更小的粒徑，易于通過皮膚上的微孔道而攜帶藥物穿過皮膚。其對(duì)藥物的包封率高于普通脂質(zhì)體，穩(wěn)定性也遠(yuǎn)優(yōu)于普通脂質(zhì)體與非離子型囊泡［4］。有研究報(bào)道柔性脂質(zhì)體能增強(qiáng)雙氯芬酸鈉的經(jīng)皮滲透效果［5］。脂質(zhì)體已被多次證明能夠提高各種藥物的治療指數(shù)［6］。通過腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子柔性納米脂質(zhì)體(BDNF－FNL)腦內(nèi)透過率的研究證實(shí)了柔性納米脂質(zhì)體可提高BDNF生物大分子藥物的腦內(nèi)藥物濃度［7］。利用靶細(xì)胞特異性表達(dá)某些物質(zhì)，將識(shí)別該物質(zhì)的配體修飾在脂質(zhì)體表面，就可以達(dá)到靶向定位的效果［8］。有研究顯示柔性脂質(zhì)體，經(jīng)修飾后其靶向性得到提高。

3 中藥柔性脂質(zhì)體的制備工藝

3.1 薄膜蒸發(fā)法 將類脂與脂溶性藥物溶于氯仿等有機(jī)溶劑中，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)使之在容器內(nèi)壁上形成薄膜，然后加入含有水溶性藥物的磷酸鹽緩沖液，不斷振搖即可生成脂質(zhì)體。胡玉佳等［9］采用薄膜分散法制備丹參酮傳遞體，丹參酮傳遞體球形圓整，大小較均勻，算術(shù)平均粒徑約為110 nm。柔性脂質(zhì)體的粒徑比傳統(tǒng)的剛性脂質(zhì)體粒徑小，可能是由于柔性脂質(zhì)體膜的流動(dòng)性更好，表面張力小，易于包裹成體積較小的脂質(zhì)微粒。薄膜蒸發(fā)法操作簡單方便，適用于實(shí)驗(yàn)室少量制備柔性脂質(zhì)體，但有機(jī)溶劑常無法完全除盡，殘留的有機(jī)溶劑可能影響藥物的包封率。

3.2 薄膜超聲法 此法是在薄膜蒸發(fā)法的基礎(chǔ)上再經(jīng)超聲波處理，制得均勻的單室脂質(zhì)體。薄膜超聲法制備柔性脂質(zhì)體，粒徑更小，更均勻，擁有較高包封率，透皮效果良好。許明旺等［10］采用薄膜超聲法制備威靈仙柔性脂質(zhì)體，并用改進(jìn)Franz擴(kuò)散池研究其對(duì)離體大鼠皮膚的透皮效果，威靈仙柔性脂質(zhì)包封率達(dá)到60%以上，其體外透皮擴(kuò)散能力是威靈仙醇提液的2.35倍。劉廣等［11］采用薄膜超聲法制備延胡索乙素柔性脂質(zhì)體，測得包封率為82.7%，粒徑達(dá)到110 nm左右，透皮率和皮內(nèi)滯留率明顯高于酊劑。

3.3 逆向薄膜蒸發(fā)法 此法是將一定比例的磷脂、膽固醇、表面活性劑溶于有機(jī)溶劑，脂溶性藥物一并溶入有機(jī)溶劑，將水溶性藥物溶于水相中，超聲使之成為穩(wěn)定W/O乳劑，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑形成反膠束，再水化、超聲制得柔性脂質(zhì)體。禤智東［12］采用逆向薄膜蒸發(fā)法制備了茶多酚柔性脂質(zhì)體，通過單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)平面法優(yōu)化茶多酚柔性脂質(zhì)體的制備工藝，茶多酚柔性脂質(zhì)體的形狀規(guī)則，呈球形，平均粒徑為171.2 nm，包封率為57.26%，體外經(jīng)皮滲透實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，添加了邊緣活性劑膽酸鈉的茶多酚柔性脂質(zhì)體可提高透皮滲透性能。逆向薄膜蒸發(fā)法應(yīng)在減壓蒸發(fā)有機(jī)溶劑時(shí)應(yīng)盡量緩慢，使W/O內(nèi)相的水充分?jǐn)U散出來分散脂質(zhì)，形成均勻的濃柔性脂質(zhì)體。

3.4 逆向擠出凍干法 采用冷凍干燥法對(duì)脂質(zhì)體混懸液進(jìn)行凍干處理可有效防止脂質(zhì)體氧化、水解、分層、聚集等影響質(zhì)量現(xiàn)象發(fā)生，方便脂質(zhì)體長期貯存或制成其他劑型。任艷等［13］采用逆向擠出凍干法制備了積雪苷柔性脂質(zhì)體凍干制劑，積雪苷柔性脂質(zhì)體為白色球狀，平均包封率為31.43%，粒徑可達(dá)70 nm，復(fù)溶后進(jìn)行透皮實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示積雪苷柔性脂質(zhì)體可顯著提升高活性成分在皮膚中的滯留量，相比于普通剛性脂質(zhì)體有了較大進(jìn)步。

3.5 乙醇注入超聲法 將磷脂與膽固醇等類脂質(zhì)及脂溶性藥物溶于有機(jī)溶劑中，然后將此溶液經(jīng)注射器緩緩注入預(yù)熱好的磷酸鹽緩沖液或藥物水溶液中，不斷攪拌至有機(jī)溶劑除盡為止。此方法制備的脂質(zhì)體粒徑較大，可經(jīng)超聲進(jìn)一步減小粒徑，所得產(chǎn)品大多為單室脂質(zhì)體，少數(shù)為多室脂質(zhì)體。乙醇注入法制得的醇質(zhì)體較其他方法制得的柔性脂質(zhì)體平均粒徑小，有更強(qiáng)的透皮能力。劉星言等［14］采用乙醇注入超聲法制備川芎嗪醇質(zhì)體，并以丙烯酸樹脂為主要成分，加入琥珀酸作為交聯(lián)劑，檸檬酸三乙酯作為增塑劑制備成了川芎嗪脂質(zhì)體貼劑。制得的川芎嗪醇質(zhì)體粒徑分布均勻，平均粒徑為78.71 nm，平均包封率為86.42%，貼劑透皮效果較好，達(dá)到了緩釋和提高生物利用度的目的。

4 柔性脂質(zhì)體制備新技術(shù)

4.1 超臨界流體技術(shù) 超臨界流體技術(shù)常見于中藥材提取，可用于脂質(zhì)體制備的有超臨界溶液快速膨脹法［15］(RESS)、超臨界反溶劑法［16］(SAS)和超臨界流體逆向蒸發(fā)法［17］(SCRPE)。張志麗等［18］采用超臨界CO2法制備姜黃素脂質(zhì)體，超臨界CO2萃取釜壓力為25 MPa，溫度為40℃，制得姜黃素脂質(zhì)體平均粒徑為98.56 nm，包封率為80.43%。超臨界流體技術(shù)應(yīng)用于脂質(zhì)體的制備可以減少或消除有機(jī)溶劑的殘留，有廣闊的發(fā)展前景。

4.2 雙不對(duì)稱離心技術(shù) 雙不對(duì)稱離心不同于傳統(tǒng)意義上的離心，除了基于中心的公轉(zhuǎn)之外，還有自身的自轉(zhuǎn)。雙不對(duì)稱離心技術(shù)要求樣品材料有足夠的黏性，使樣品和反應(yīng)罐之間有足夠的黏附力。雙不對(duì)稱離心技術(shù)可用于無菌脂質(zhì)體的制備，全程工藝在一個(gè)密封瓶中進(jìn)行，脂質(zhì)體的粒徑大小取決于離心速度、脂質(zhì)濃度、均質(zhì)時(shí)間和輔助混合的玻璃珠等。應(yīng)用雙不對(duì)稱離心技術(shù)在優(yōu)化條件下制得的鈣黃綠素脂質(zhì)體平均粒徑為(60±5)nm，包封率為(56±3.3)%［19］。雙不對(duì)稱離心技術(shù)具有設(shè)備小巧、操作簡單、無有機(jī)溶劑，制備的脂質(zhì)體粒徑小等優(yōu)點(diǎn)，值得推廣應(yīng)用。

4.3 膜接觸器技術(shù) 膜接觸器可有效混合兩種材料，很多種類的分散系統(tǒng)都可以用膜接觸器來制備。膜接觸器已經(jīng)用來制備乳劑、沉淀、聚合物、脂質(zhì)納米小體，最近用來制備柔性脂質(zhì)體。膜接觸器技術(shù)制備的脂質(zhì)體粒徑均勻，脂溶性藥物的包封率高，易于放大規(guī)模生產(chǎn)?；谝掖甲⑷敕ㄖ苽渲|(zhì)體的理論優(yōu)勢，Laouini等［20］使用中空纖維組件的膜接觸器提高了脂質(zhì)膜接觸面積，增大了包封效率。Jaafar－Maalej等［21］使用了一種多孔玻璃膜制得了二丙酸氯地米松脂質(zhì)體，脂質(zhì)體平均粒徑約為100 nm，包封率為98%。

5 展望

中藥柔性脂質(zhì)體的制備工藝還有待進(jìn)一步優(yōu)化，中藥成分復(fù)雜，多數(shù)選用復(fù)方，藥物滲漏問題比較凸出，選擇制備工藝時(shí)需要充分考慮中藥成分結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)。新技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用使脂質(zhì)體的質(zhì)量和種類都有了很大的提高，合理運(yùn)用這些新工藝和新方法，中藥柔性脂質(zhì)體包封率、穩(wěn)定性及釋藥性能必將進(jìn)一步改善和提高。

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