辣椒紅油膏中有機(jī)溶劑殘留的測(cè)定方法

陸榮利，段 晉，張?jiān)倨?，王繼偉，周 靜

（云南瑞寶生物科技有限公司，昆明 651701）

辣椒紅油膏中有機(jī)溶劑殘留的測(cè)定方法

陸榮利，段 晉，張?jiān)倨?，王繼偉，周 靜

（云南瑞寶生物科技有限公司，昆明 651701）

以甲醇、乙醇、丙酮為標(biāo)準(zhǔn)液，毛細(xì)管柱作分離柱，頂空氣相色譜法測(cè)定辣椒紅油膏中的溶劑殘留。3種溶劑在0～2 000μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（R＝0.999 6～0.999 8）；樣品最低檢測(cè)限為1.67 mg／kg；甲醇、乙醇、丙酮的回收率分別為91.7～109.7%、92.7% ～105.4%、91.4% ～105.9%。甲醇、乙醇、丙酮的RSD分別為2.86%～5.79%、2.98% ～4.75%、2.68%～4.96%。

辣椒紅油膏；溶劑殘留；頂空氣相色譜法

辣椒具有改善菜肴的色澤及味道，增進(jìn)食欲、祛寒解表、活絡(luò)生肌之功效，在蔬菜和調(diào)味品中占有舉足輕重的地位。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，辣椒具有抗氧化、抗疲勞、鎮(zhèn)痛、防止動(dòng)脈粥樣硬化、抗癌等功效，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥行業(yè)［1-2］。除此之外，動(dòng)物學(xué)家發(fā)現(xiàn)辣椒及其提取物具有提高動(dòng)物膚色、增強(qiáng)抗病力、提高飼料報(bào)酬、減少熱應(yīng)激等作用。

辣椒紅油膏，是一種橙紅色到深紅色的色素［3］，屬于四萜類天然色素，外觀為深紅色粘性油狀液體或者是深胭脂紅色針狀結(jié)晶［4］。辣椒紅油膏是經(jīng)過辣椒去籽，干燥后造粒后用溶劑提取，精制后得到的辣椒紅產(chǎn)品，其作為著色劑得以廣泛使用。在辣椒紅油膏的生產(chǎn)過程中，使用到正己烷、乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑，而正己烷、乙醇等均屬于二類、三類受控毒性溶劑［5］，溶劑殘留量是辣椒紅產(chǎn)品的重要質(zhì)量指標(biāo)之一［6］，檢測(cè)和控制辣椒紅油膏中有機(jī)溶劑殘留量，對(duì)辣椒紅產(chǎn)品的質(zhì)量控制和使用安全具有重要意義。

辣椒紅油膏中溶劑殘留的檢測(cè)方法主要是單一種類的溶劑殘留檢測(cè)分析，方亞群等［7］建立了頂空氣相色譜法測(cè)定辣椒紅中正己烷殘留量；李麗君等［8］建立了測(cè)定辣椒紅中二氯甲烷殘留量的分析方法，采用HS-GC進(jìn)行分析檢測(cè)，結(jié)果表明，方法準(zhǔn)確，可靠；徐文科等［9］采用HS-GC測(cè)定了辣椒紅中正己烷溶劑殘留。目前，同時(shí)測(cè)定辣椒紅油膏中多種溶劑殘留的HS-GC分析方法較少，基于此，本文采用HS-GC分析檢測(cè)辣椒紅油膏中混合有機(jī)溶劑的殘留量，旨在建立快速，簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確的溶劑殘留檢測(cè)方法。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

甲醇（w≥99.5%，色譜純，Merck）；乙醇（w≥99.5%，色譜純，Merck）；丙酮（w≥99.5%，色譜純，Merck）；食用油（金龍魚玉米油，于120℃干燥箱烘干處理3h）；高純氮?dú)猓é铡?9.999%，云銅鋅業(yè)股份有限公司）。

氣相色譜儀GC-2014C（島津有限公司）；自動(dòng)頂空進(jìn)樣器HS-16A（上海思達(dá)分析儀器有限責(zé)任公司）；靜音無(wú)油空氣泵CA-2（武漢科林普豐儀器有限公司）；高純氫氣發(fā)生器（武漢科林普豐儀器有限公司）；頂空瓶。

1.2 儀器條件

1.2.1 氣相條件

色譜柱：ZB-WAXPLUS毛細(xì)管柱，0.25 mm ×30m，膜厚0.25μm；載氣：氮?dú)?；柱溫?0℃；進(jìn)樣口：200℃；檢測(cè)器：220℃；分流模式：分流；運(yùn)行時(shí)間：5min。

1.2.2 頂空條件

平衡溫度：80℃；定量管溫度：100℃；傳輸管溫

度：110℃；頂空瓶平衡時(shí)間：40min；氣相循環(huán)時(shí)間：40min；加壓時(shí)間：0.2min；充樣時(shí)間：0.2min；定量環(huán)平衡時(shí)間：0.05 min；進(jìn)樣時(shí)間：1 min；進(jìn)樣量：1 mL；清掃時(shí)間：2min；載氣壓力：0.26MPa.

1.3 實(shí)驗(yàn)步驟

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制定

①分別稱取約0.1 g（準(zhǔn)確到0.000 1 g）甲醇、乙醇、丙酮于3支20mL比色管中，各加處理過的食用油至10 g（準(zhǔn)確到0.000 1 g），分別標(biāo)為A、B、C管，超聲5min混勻。

②分別稱?、僦蠥、B、C管的溶液0.2 g（準(zhǔn)確到0.000 1 g）于一支20 m L比色管中，加處理過的食用油至10 g（準(zhǔn)確到0.000 1 g），超聲5 min混勻。

③分別稱?、谥械娜芤?.05、0.1、0.25、0.5、1.0、2.5 g于6只20 mL頂空瓶中，加處理過的食用油至 6 g（準(zhǔn)確到0.000 1 g），超聲5 min混勻。

④分別稱取①中A、B、C管的溶液0.1、0.2g（準(zhǔn)確到0.000 1 g）于2只20 mL頂空瓶中，各加處理過的食用油至6 g（準(zhǔn)確到0.000 1 g），超聲5 min混勻。

⑤把8個(gè)裝有標(biāo)準(zhǔn)液的頂空瓶超聲5 min后放入自動(dòng)頂空進(jìn)樣器中進(jìn)行加熱平衡后自動(dòng)進(jìn)入色譜分析。以質(zhì)量為縱坐標(biāo)、峰面積為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線得：甲醇y＝0.237 4x＋1.588 5，R2＝0.999 8；乙醇y＝0.246x＋1.063 5，R2＝0.999 6丙酮y＝0.254 5x＋1.533 7，R2＝0.999 7。

1.3.2 樣品的測(cè)定

準(zhǔn)確稱取約6 g樣品于20mL頂空瓶中，密封后置于自動(dòng)頂空進(jìn)樣器中平衡40 min，取液上氣測(cè)定，以保留時(shí)間定性，峰面積外標(biāo)法定量，根據(jù)甲醇、乙醇、丙酮的曲線公式計(jì)算得溶劑殘留的質(zhì)量，再用（1）式的計(jì)算公式算得最后結(jié)果。

ρ＝M1×1 000／（M2×1 000）（1）式中：ρ為樣品中殘留溶劑的含量，mg／kg；M1為樣品中殘留溶劑的質(zhì)量，μg；M2為樣品質(zhì)量，g；

2 結(jié)果與討論

2.1 平衡溫度的選擇

頂空分析中，平衡溫度越高，被測(cè)物質(zhì)的蒸汽壓越高，頂空氣體的濃度越高，分析靈敏度越高，但過高的平衡溫度容易導(dǎo)致頂空取樣時(shí)溶劑組分的冷凝，降低進(jìn)樣精度，結(jié)合各溶劑的沸點(diǎn)、頂空瓶的耐壓及氣密性等因素，實(shí)際運(yùn)用中實(shí)驗(yàn)室采用平衡溫度為80℃。

2.2 平衡時(shí)間的選擇

在溫度80℃條件下，用食用油把標(biāo)準(zhǔn)樣品配成質(zhì)量濃度為50 mg／kg，重量為6 g的溶液，在不同恒溫時(shí)間下測(cè)定，比較了時(shí)間為30、40、50、60、70min的平衡效果。結(jié)果表明，各組分響應(yīng)值隨著時(shí)間的增加而增加，當(dāng)時(shí)間超過40min后，響應(yīng)值變化較小，故最終選擇40 min作為最佳平衡時(shí)間。

2.3 氣液相比例的選擇

氣液相的體積比對(duì)檢測(cè)具有兩面性。頂空容量越大，氣體提取的越充分，平衡時(shí)間也越短，但檢測(cè)靈敏度越低。但查閱文獻(xiàn)，一般樣品占頂空瓶體積的1／3左右，結(jié)合油膏的密度，所以選擇6 g的樣品量。

2.4 精密度、回收率、檢出限測(cè)定

對(duì)添加10、100、1 000μg標(biāo)樣的模擬樣品分別做6個(gè)重復(fù)，結(jié)果見表1。

表1 加標(biāo)樣品精密度、回收率測(cè)定結(jié)果Table 1 Precision，recovery measurement results of spiked samp le

續(xù)表

由表1可知，在加標(biāo)10～2000μg范圍內(nèi)，各殘留溶劑的結(jié)果分別為：甲醇最低檢測(cè)限為1.67 mg／kg，回收率為91.7～109.7%，RSD為 2.86% ～5.79%；乙醇最低檢測(cè)限為1.67mg／kg，回收率為92.7%～105.4%，RSD為2.98%～4.75%；丙酮最低檢測(cè)限為1.67 mg／kg，回收率為91.4%～105.9%，RSD為2.68% ～4.96%能滿足客戶及國(guó)標(biāo)食品添加劑辣椒紅（GB／T10783）中對(duì)溶劑殘留的要求［10］。

［1］ 殷紅妹，張信岳.腸瀉停膠囊抗炎、鎮(zhèn)痛、抗菌作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國(guó)中醫(yī)藥科技，2005（5）：285-286.

［2］ 汪倪萍，魏偉.中藥活性成分的抗炎免疫和鎮(zhèn)痛作用［J］.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2003（4）：366-369

［3］ 李艷梅，王水泉，李春生.辣椒紅色素的性質(zhì)及其應(yīng)用［J］.農(nóng)產(chǎn)品加工，2009（2）：52-54.

［4］ 王紹霞，唐小華，周永紅，等.辣椒紅色素提取工藝的研究［J］.食品工業(yè)科技，2008，29（08）：196 -199.

［5］ 張艷紋，張莉華，馬金萍，等.頂空氣相色譜法測(cè)定葉黃素中有機(jī)溶劑殘留量［J］.中國(guó)食品添加劑，2014，（2）：243-245.

［6］ 閻朝，郭入安，閻炳宗.用氣相色譜法研究辣椒紅中6號(hào)溶劑和乙醇?xì)埩袅考袄苯芳t儲(chǔ)存過程中的氧化現(xiàn)象［J］.中國(guó)食品添加劑，2000（1）：6-8.

［7］ 方亞群，向仕學(xué)，謝碧俊，等.頂空氣相色譜法測(cè)定辣椒紅素中正己烷殘留量［J］.預(yù)防醫(yī)學(xué)情報(bào)雜志，1999，15（1）：33-34.

［8］ 李麗君，張泉，岳明新.頂空氣相色譜法測(cè)定辣椒紅色素中二氯甲烷的殘留量［J］.遼寧化工，2008，37 （9）：644-645，648.

［9］ 徐文科，劉健.頂空氣相色譜法測(cè)定辣紅素中溶劑殘留［J］.中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志，2002，25（4）：210 -211.

［10］ GB 10783-2008食品添加劑辣椒紅［S］.

Study on Determ ination M ethod of Residual Solvents of in Pap rika O leoresin

LU Rong-li，DUAN Jin，ZHANG Zai-qi，W ANG Ji-wei，ZHOU Jing

（Yunnan Rainbow Bio-tech.Co.，Ltd Kunming651701，China）

Residual solvents in paprika oleoresin were determined by headspace gas chromatography withmethanol，ethanol，acetone as standard solutions and capillary column as separation column.In a range of 0～2 000μg，three solvents have good linear relationship（R2＝0.999 6～0.999 8）.The sample detection lim itwas1.67mg／kg，the recoveries were for methanol 91.7～109.7%，ethanol 92.7% ～105.4%，acetone 91.4%～105.9%respectively.The RSDSwere formethanol2.86%～5.79%，ethanol 2.98% ～4.75%acetone 2.68%～4.96%respectively.

paprika oleoresin；residual solvents；headspace gas chromatography

O657

A

1004-275X（2015）03-0046-03

12.3969／j.issn.1004-275X.2015.03.013

收稿：2015-02-04

陸榮利（1980-），女，云南宣威人，工程師，主要從事分析檢測(cè)工作。