辣椒紅油膏中有機(jī)溶劑殘留的測定方法

陸榮利，段 晉，張?jiān)倨?，王繼偉，周 靜

（云南瑞寶生物科技有限公司，昆明 651701）

辣椒紅油膏中有機(jī)溶劑殘留的測定方法

陸榮利，段 晉，張?jiān)倨?，王繼偉，周 靜

（云南瑞寶生物科技有限公司，昆明 651701）

以甲醇、乙醇、丙酮為標(biāo)準(zhǔn)液，毛細(xì)管柱作分離柱，頂空氣相色譜法測定辣椒紅油膏中的溶劑殘留。3種溶劑在0～2 000μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（R＝0.999 6～0.999 8）；樣品最低檢測限為1.67 mg／kg；甲醇、乙醇、丙酮的回收率分別為91.7～109.7%、92.7% ～105.4%、91.4% ～105.9%。甲醇、乙醇、丙酮的RSD分別為2.86%～5.79%、2.98% ～4.75%、2.68%～4.96%。

辣椒紅油膏；溶劑殘留；頂空氣相色譜法

辣椒具有改善菜肴的色澤及味道，增進(jìn)食欲、祛寒解表、活絡(luò)生肌之功效，在蔬菜和調(diào)味品中占有舉足輕重的地位。近年來研究發(fā)現(xiàn)，辣椒具有抗氧化、抗疲勞、鎮(zhèn)痛、防止動(dòng)脈粥樣硬化、抗癌等功效，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥行業(yè)［1-2］。除此之外，動(dòng)物學(xué)家發(fā)現(xiàn)辣椒及其提取物具有提高動(dòng)物膚色、增強(qiáng)抗病力、提高飼料報(bào)酬、減少熱應(yīng)激等作用。

辣椒紅油膏，是一種橙紅色到深紅色的色素［3］，屬于四萜類天然色素，外觀為深紅色粘性油狀液體或者是深胭脂紅色針狀結(jié)晶［4］。辣椒紅油膏是經(jīng)過辣椒去籽，干燥后造粒后用溶劑提取，精制后得到的辣椒紅產(chǎn)品，其作為著色劑得以廣泛使用。在辣椒紅油膏的生產(chǎn)過程中，使用到正己烷、乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑，而正己烷、乙醇等均屬于二類、三類受控毒性溶劑［5］，溶劑殘留量是辣椒紅產(chǎn)品的重要質(zhì)量指標(biāo)之一［6］，檢測和控制辣椒紅油膏中有機(jī)溶劑殘留量，對(duì)辣椒紅產(chǎn)品的質(zhì)量控制和使用安全具有重要意義。

辣椒紅油膏中溶劑殘留的檢測方法主要是單一種類的溶劑殘留檢測分析，方亞群等［7］建立了頂空氣相色譜法測定辣椒紅中正己烷殘留量；李麗君等［8］建立了測定辣椒紅中二氯甲烷殘留量的分析方法，采用HS-GC進(jìn)行分析檢測，結(jié)果表明，方法準(zhǔn)確，可靠；徐文科等［9］采用HS-GC測定了辣椒紅中正己烷溶劑殘留。目前，同時(shí)測定辣椒紅油膏中多種溶劑殘留的HS-GC分析方法較少，基于此，本文采用HS-GC分析檢測辣椒紅油膏中混合有機(jī)溶劑的殘留量，旨在建立快速，簡便，準(zhǔn)確的溶劑殘留檢測方法。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

甲醇（w≥99.5%，色譜純，Merck）；乙醇（w≥99.5%，色譜純，Merck）；丙酮（w≥99.5%，色譜純，Merck）；食用油（金龍魚玉米油，于120℃干燥箱烘干處理3h）；高純氮?dú)猓é铡?9.999%，云銅鋅業(yè)股份有限公司）。

氣相色譜儀GC-2014C（島津有限公司）；自動(dòng)頂空進(jìn)樣器HS-16A（上海思達(dá)分析儀器有限責(zé)任公司）；靜音無油空氣泵CA-2（武漢科林普豐儀器有限公司）；高純氫氣發(fā)生器（武漢科林普豐儀器有限公司）；頂空瓶。

1.2 儀器條件

1.2.1 氣相條件

色譜柱：ZB-WAXPLUS毛細(xì)管柱，0.25 mm ×30m，膜厚0.25μm；載氣：氮?dú)?；柱溫?0℃；進(jìn)樣口：200℃；檢測器：220℃；分流模式：分流；運(yùn)行時(shí)間：5min。

1.2.2 頂空條件

平衡溫度：80℃；定量管溫度：100℃；傳輸管溫

度：110℃；頂空瓶平衡時(shí)間：40min；氣相循環(huán)時(shí)間：40min；加壓時(shí)間：0.2min；充樣時(shí)間：0.2min；定量環(huán)平衡時(shí)間：0.05 min；進(jìn)樣時(shí)間：1 min；進(jìn)樣量：1 mL；清掃時(shí)間：2min；載氣壓力：0.26MPa.

1.3 實(shí)驗(yàn)步驟

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制定

①分別稱取約0.1 g（準(zhǔn)確到0.000 1 g）甲醇、乙醇、丙酮于3支20mL比色管中，各加處理過的食用油至10 g（準(zhǔn)確到0.000 1 g），分別標(biāo)為A、B、C管，超聲5min混勻。

②分別稱取①中A、B、C管的溶液0.2 g（準(zhǔn)確到0.000 1 g）于一支20 m L比色管中，加處理過的食用油至10 g（準(zhǔn)確到0.000 1 g），超聲5 min混勻。

③分別稱?、谥械娜芤?.05、0.1、0.25、0.5、1.0、2.5 g于6只20 mL頂空瓶中，加處理過的食用油至 6 g（準(zhǔn)確到0.000 1 g），超聲5 min混勻。

④分別稱?、僦蠥、B、C管的溶液0.1、0.2g（準(zhǔn)確到0.000 1 g）于2只20 mL頂空瓶中，各加處理過的食用油至6 g（準(zhǔn)確到0.000 1 g），超聲5 min混勻。

⑤把8個(gè)裝有標(biāo)準(zhǔn)液的頂空瓶超聲5 min后放入自動(dòng)頂空進(jìn)樣器中進(jìn)行加熱平衡后自動(dòng)進(jìn)入色譜分析。以質(zhì)量為縱坐標(biāo)、峰面積為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線得：甲醇y＝0.237 4x＋1.588 5，R2＝0.999 8；乙醇y＝0.246x＋1.063 5，R2＝0.999 6丙酮y＝0.254 5x＋1.533 7，R2＝0.999 7。

1.3.2 樣品的測定

準(zhǔn)確稱取約6 g樣品于20mL頂空瓶中，密封后置于自動(dòng)頂空進(jìn)樣器中平衡40 min，取液上氣測定，以保留時(shí)間定性，峰面積外標(biāo)法定量，根據(jù)甲醇、乙醇、丙酮的曲線公式計(jì)算得溶劑殘留的質(zhì)量，再用（1）式的計(jì)算公式算得最后結(jié)果。

ρ＝M1×1 000／（M2×1 000）（1）式中：ρ為樣品中殘留溶劑的含量，mg／kg；M1為樣品中殘留溶劑的質(zhì)量，μg；M2為樣品質(zhì)量，g；

2 結(jié)果與討論

2.1 平衡溫度的選擇

頂空分析中，平衡溫度越高，被測物質(zhì)的蒸汽壓越高，頂空氣體的濃度越高，分析靈敏度越高，但過高的平衡溫度容易導(dǎo)致頂空取樣時(shí)溶劑組分的冷凝，降低進(jìn)樣精度，結(jié)合各溶劑的沸點(diǎn)、頂空瓶的耐壓及氣密性等因素，實(shí)際運(yùn)用中實(shí)驗(yàn)室采用平衡溫度為80℃。

2.2 平衡時(shí)間的選擇

在溫度80℃條件下，用食用油把標(biāo)準(zhǔn)樣品配成質(zhì)量濃度為50 mg／kg，重量為6 g的溶液，在不同恒溫時(shí)間下測定，比較了時(shí)間為30、40、50、60、70min的平衡效果。結(jié)果表明，各組分響應(yīng)值隨著時(shí)間的增加而增加，當(dāng)時(shí)間超過40min后，響應(yīng)值變化較小，故最終選擇40 min作為最佳平衡時(shí)間。

2.3 氣液相比例的選擇

氣液相的體積比對(duì)檢測具有兩面性。頂空容量越大，氣體提取的越充分，平衡時(shí)間也越短，但檢測靈敏度越低。但查閱文獻(xiàn)，一般樣品占頂空瓶體積的1／3左右，結(jié)合油膏的密度，所以選擇6 g的樣品量。

2.4 精密度、回收率、檢出限測定

對(duì)添加10、100、1 000μg標(biāo)樣的模擬樣品分別做6個(gè)重復(fù)，結(jié)果見表1。

表1 加標(biāo)樣品精密度、回收率測定結(jié)果Table 1 Precision，recovery measurement results of spiked samp le

續(xù)表

由表1可知，在加標(biāo)10～2000μg范圍內(nèi)，各殘留溶劑的結(jié)果分別為：甲醇最低檢測限為1.67 mg／kg，回收率為91.7～109.7%，RSD為 2.86% ～5.79%；乙醇最低檢測限為1.67mg／kg，回收率為92.7%～105.4%，RSD為2.98%～4.75%；丙酮最低檢測限為1.67 mg／kg，回收率為91.4%～105.9%，RSD為2.68% ～4.96%能滿足客戶及國標(biāo)食品添加劑辣椒紅（GB／T10783）中對(duì)溶劑殘留的要求［10］。

［1］ 殷紅妹，張信岳.腸瀉停膠囊抗炎、鎮(zhèn)痛、抗菌作用的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中國中醫(yī)藥科技，2005（5）：285-286.

［2］ 汪倪萍，魏偉.中藥活性成分的抗炎免疫和鎮(zhèn)痛作用［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，2003（4）：366-369

［3］ 李艷梅，王水泉，李春生.辣椒紅色素的性質(zhì)及其應(yīng)用［J］.農(nóng)產(chǎn)品加工，2009（2）：52-54.

［4］ 王紹霞，唐小華，周永紅，等.辣椒紅色素提取工藝的研究［J］.食品工業(yè)科技，2008，29（08）：196 -199.

［5］ 張艷紋，張莉華，馬金萍，等.頂空氣相色譜法測定葉黃素中有機(jī)溶劑殘留量［J］.中國食品添加劑，2014，（2）：243-245.

［6］ 閻朝，郭入安，閻炳宗.用氣相色譜法研究辣椒紅中6號(hào)溶劑和乙醇?xì)埩袅考袄苯芳t儲(chǔ)存過程中的氧化現(xiàn)象［J］.中國食品添加劑，2000（1）：6-8.

［7］ 方亞群，向仕學(xué)，謝碧俊，等.頂空氣相色譜法測定辣椒紅素中正己烷殘留量［J］.預(yù)防醫(yī)學(xué)情報(bào)雜志，1999，15（1）：33-34.

［8］ 李麗君，張泉，岳明新.頂空氣相色譜法測定辣椒紅色素中二氯甲烷的殘留量［J］.遼寧化工，2008，37 （9）：644-645，648.

［9］ 徐文科，劉健.頂空氣相色譜法測定辣紅素中溶劑殘留［J］.中國國境衛(wèi)生檢疫雜志，2002，25（4）：210 -211.

［10］ GB 10783-2008食品添加劑辣椒紅［S］.

Study on Determ ination M ethod of Residual Solvents of in Pap rika O leoresin

LU Rong-li，DUAN Jin，ZHANG Zai-qi，W ANG Ji-wei，ZHOU Jing

（Yunnan Rainbow Bio-tech.Co.，Ltd Kunming651701，China）

Residual solvents in paprika oleoresin were determined by headspace gas chromatography withmethanol，ethanol，acetone as standard solutions and capillary column as separation column.In a range of 0～2 000μg，three solvents have good linear relationship（R2＝0.999 6～0.999 8）.The sample detection lim itwas1.67mg／kg，the recoveries were for methanol 91.7～109.7%，ethanol 92.7% ～105.4%，acetone 91.4%～105.9%respectively.The RSDSwere formethanol2.86%～5.79%，ethanol 2.98% ～4.75%acetone 2.68%～4.96%respectively.

paprika oleoresin；residual solvents；headspace gas chromatography

O657

A

1004-275X（2015）03-0046-03

12.3969／j.issn.1004-275X.2015.03.013

收稿：2015-02-04

陸榮利（1980-），女，云南宣威人，工程師，主要從事分析檢測工作。