高效液相色譜同時檢測麥草畏及其兩種中間體

馬 勇

（浙江新安化工集團股份有限公司，浙江 建德311600）

麥草畏（3,6-二氯-2-甲氧基苯甲酸），屬安息香酸系除草劑，具有內(nèi)吸傳導作用，對一年生和多年生闊葉雜草有顯著防除效果，是一種具有選擇性和內(nèi)吸傳導型苗后生長素類除草劑，是國家重點鼓勵和發(fā)展的高效、低毒旱地除草劑。麥草畏的制備過程是將1，2，4-三氯苯用氫氧化鈉甲醇溶液水解，生成2，5-二氯苯酚，在壓力下與二氧化碳加熱反應，生成2-羥基-3，6-二氯苯甲酸，最后用硫酸二甲酯甲基化即得[1]。市場上制備一般以2，5-二氯苯酚（DCP）或3，6-二氯水楊酸(DCS)為起點。反應式如下：

國際農(nóng)藥分析協(xié)作委員會（CIPAC）規(guī)定用紅外光譜分析法作為麥草畏制劑的標準分析方法[2]。蔣閎[3]將麥草畏重氮化衍生以后，用氣相色譜進行分析，步驟較為繁瑣。Andrew M.Fogarty[4]、Masood Arjmand[5]、馬有寧[6]等使用高效液相色譜法對麥草畏進行了分析。本研究采用磷酸鹽緩沖溶液等度高效液相色譜，對麥草畏、DCP、DCS同時分析，滿足了合成過程中的質(zhì)控要求。

1實驗部分

1.1 儀器與設備

電子天平AB265-S，Mettle Toledo公司；Agilent1260高效液相色譜儀（配有四元高壓泵和二極管陣列檢測器），安捷倫公司。

1.2 試劑與材料

甲醇，色譜級；磷酸，優(yōu)級純；磷酸二氫鉀，優(yōu)級純；麥草畏對照品（w>99.1%）；DCP對照品（w>98%）；DCS對照品（w>99%）；實驗用水為Milli-Q超純水。

1.3 溶液的制備

標準溶液的配制：準確稱取麥草畏、DCP、DCS對照品各50mg（精確至0.2mg），置于50mL容量瓶中，用甲醇定容。該貯備液在4℃以下密封冷藏可保存1個月。使用時稀釋至所需濃度。

樣品溶液的配制：準確稱取樣品20mg（精確至0.2mg），置于100mL容量瓶，用30%甲醇溶液溶解，振搖至氣泡消失后定容。

1.4 色譜條件

色譜柱：ThermoHypersilGOLD（C18），150mm×4.6mm，粒徑5μm；柱溫：室溫；流動相：V(甲醇)∶V（水）=30∶70；流速：1.0mL／min；檢測波長：215nm；進樣體積：2μL。

1.5 計算

式中w’——樣品含量，%

A’——樣品峰面積

m’——樣品質(zhì)量

f ——校正因子

w——對照品含量，%

A——對照品峰面積

m——對照品質(zhì)量

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的確立

2.1.1 檢測波長的確定

掃描麥草畏、DCP、DCS對照品的紫外吸收光譜，如圖1。從圖1可看出，3種物質(zhì)在215 nm附近吸收均較強，單位質(zhì)量吸光度相近，確定將215 nm作為檢測波長。

圖1 對照品的紫外吸收光譜

2.1.2 流動相的選擇

在甲醇+水和乙腈+水溶液中加入0.1%磷酸和4mM磷酸二氫鉀，在不同比例進行試驗，結(jié)果在甲醇/水=40/60，乙腈/水=30/70中均得到較好的結(jié)果，選擇甲醇/水=40/60作為流動相（參見圖2）。

圖2 麥草畏、DC S、DC P 出峰順序

2.2 精密度試驗

在上述條件下，對樣品進行平行測定，3種物質(zhì)的相對標準偏差分別為，麥草畏：0.13%；DCP：0.18%；DCS：0.21%。(n=11)。表1示出了樣品平行測試的相對標準偏差。

表1 樣品平行測試的相對標準偏差

2.3 準確度試驗

樣品稀釋后加入一定量麥草畏、DCP、DCS的混合標樣，按本方法進行測定，回收率分別為：98.7～99.4%、98.3～98.7%、101.7～102.5%（參見圖3）。

3 結(jié)論

本方法精確度和準確度都比較高，樣品處理簡便，20min內(nèi)即可完成一次測試。麥草畏生產(chǎn)過程中的主要成分在色譜上完美分離，在產(chǎn)品的離線控制方面得到了滿意的效果。

圖3 樣品加標色譜圖

[1]章小波,蔣永祥.安息香酸系除草劑——麥草畏的合成[J]. 農(nóng)藥, 2002,41（11）:13-14.

[2]Analysis of Technical and Formulated Pesticides[M].CIPAC handbook, 1998, Volume H: 127-134.

[3]蔣閎,王華頂.毛細管氣相色譜法重氮甲烷化分析麥草畏[J]. 安徽化工, 2003,（4）:50.

[4]Andrew M.Fogarty,Samuel J.Traina.Determination of Dicamba by Reverse-Phase HPLC [J]. Journal of Liquid Chromatography, 1994, 17（12）: 2667-2674.

[5]Masood Arjmand,Terry D.Spittler.Analysis of Dicamba from Water Using Solid-Phase Extraction and Ion-Pair High-Performance Liquid Chromatography [J]. J. Agric.Food Chem., 1988, （36）:492-494.

[6]馬有寧,陳銘學.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析蔬菜中殘留的麥草畏[J]. 農(nóng)藥學學報,2012,14（3）:349-352.