糖尿病腎病尿蛋白檢測方法的對比分析

李吟遒

（上海市浦東新區(qū)濰坊社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心 上海 200122）

糖尿病腎病為糖尿病的一種嚴(yán)重慢性并發(fā)癥，在糖尿病患者的死亡原因中占有較大比例，故早期診斷對糖尿病的防治和預(yù)后具有重要意義。近年來隨著檢驗醫(yī)學(xué)的發(fā)展，尿液干化學(xué)分析和免疫比濁定量(QuikRead儀器法)尿微量白蛋白測定已被廣泛應(yīng)用于社區(qū)糖尿病腎病的監(jiān)測中，為比較兩者測定結(jié)果的差異，本文采用兩種方法對932例2型糖尿病患者的尿液標(biāo)本同時進行檢測，報道如下。

1 材料和方法

1.1 材料

2011年10月-12月本社區(qū)門診的50歲以上糖尿病患者尿液標(biāo)本932例。其中男427例，女505例，平均年齡（67.0±6.2）歲。

1.2 方法

患者門診時隨機留取中段尿，在收到標(biāo)本的2 h內(nèi)完成檢測。

尿干化學(xué)法測定尿蛋白，采用德國寶靈曼公司的Miditron JuniorⅡ型尿10項分析儀及配套試劑(尿10項試紙條)，嚴(yán)格按說明書要求檢測。

免疫比濁定量法(QuikRead儀器)測定尿微量白蛋白，采用芬蘭QuikRead儀器及配套尿微量白蛋白定量試劑盒。測量管中加入1 ml緩沖液及20 μl尿標(biāo)本，輕輕混勻。讀取空白后按下試劑帽加入試劑，拿出測量管充分混勻，再把測量管放回檢測孔，儀器在120 s后測定出尿微量白蛋白濃度。

質(zhì)量控制：干化學(xué)法測尿蛋白使用上海市臨床檢驗中心提供的伊華尿液質(zhì)控品(批號:20115507)，并通過室內(nèi)質(zhì)控，尿微量白蛋白采用試劑公司提供的配套質(zhì)控液。

1.3 結(jié)果判定

干化學(xué)法：按試紙在在儀器上定性為陰性或陽性，陰性時尿微量白蛋白為＜300 mg/L。

免疫比濁定量法：尿微量白蛋白（u-ALB）＜20 mg/L為正常，u-ALB 20～150 mg/L為輕度微量蛋白尿，u-ALB＞150 mg/L為重度微量蛋白尿。

2 結(jié)果

干化學(xué)法測尿蛋白：陽性95例，占總數(shù)的10.19%，陰性837例，占89.81%。免疫法測定尿微量白蛋白：u-ALB＞20 mg/L者441例，占總數(shù)47.32%。干化學(xué)法測尿蛋白陰性的837例中，u-ALB＞20 mg/L者346例，占陰性人數(shù)的41.34%（表1）。

表1 兩種不同方法測定尿蛋白結(jié)果比較 n(%)

3 討論

糖尿病腎病為糖尿病患者慢性并發(fā)癥中常見的微血管并發(fā)癥，是糖尿病患者的主要致死原因之一。當(dāng)糖尿病腎病發(fā)展到臨床糖尿病腎病期時，尿蛋白定性呈持續(xù)陽性，此時腎臟的病理損害已不可逆轉(zhuǎn)，因此對糖尿病腎病的早發(fā)現(xiàn)和早治療顯得尤為重要。但是糖尿病腎病早期癥狀不多，僅表現(xiàn)為尿微量白蛋白的排量增加。尿微量白蛋白是診斷糖尿病腎功能損傷的早期重要指標(biāo)[1]。正常情況下只有極少量的白蛋白可隨尿液排出體外，尿微量白蛋白的濃度增高是腎小球早期損傷的敏感指標(biāo)[2]。已有資料表明尿微量白蛋白排出量較高者，糖尿病腎病發(fā)病率及死亡率均明顯高于尿微量白蛋白排出量較低者[3]。研究表明尿微量白蛋白水平含量是糖尿病腎病患者腎小球損傷及損害程度的重要標(biāo)志[4]，與糖尿病的預(yù)后有密切關(guān)系[5,6]，因此糖尿病微量蛋白尿的測定在早期監(jiān)測腎功能損傷中具有十分重要的意義。

干化學(xué)法測定尿蛋白采用的是pH指示劑蛋白質(zhì)誤差原理，尿液中的蛋白質(zhì)與試帶上的試劑塊發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生顏色的變化，顏色的深淺與尿液中蛋白質(zhì)的濃度成正比?？焖倌蛭⒘堪椎鞍讬z測原理是一種以微粒子包被的抗人白蛋白血清為基礎(chǔ)的微粒子增強速率免疫比濁試驗，存在于樣本中的白蛋白和微粒子進行速率反應(yīng)，溶液中濁度的最終變化通過QuikRead儀器被測定。

干化學(xué)法測定尿蛋白僅為定性方法，當(dāng)尿中蛋白＞300 mg/L才能被檢測出陽性，一般適用于大批量篩查病人。而微量蛋白尿的檢測為定量方法，最小可測定出尿中5 mg/L的微量蛋白。由此可見干化學(xué)法的敏感性遠(yuǎn)遠(yuǎn)差于尿微量法。

本研究表明：在干化法檢測尿蛋白陰性的837例糖尿病患者中，有346例出現(xiàn)微量蛋白尿，如果不進一步檢測尿微量白蛋白，即有41.30%的患者漏診。同時分析發(fā)現(xiàn)干化學(xué)法尿蛋白陽性而尿微量蛋白20~150 mg/L有22例，正常情況下干化學(xué)法尿蛋白＞300 mg/L時才出現(xiàn)陽性反應(yīng)，可見尿微量白蛋白檢測也可能存在一定的假陰性。造成這種現(xiàn)象的原因，可能是尿中微量白蛋白濃度大于包被的抗人白蛋白濃度，此時形成的免疫復(fù)合物反而減少，即所謂的“后帶現(xiàn)象”，當(dāng)抗原過剩而產(chǎn)生假陰性結(jié)果[7]。

綜上所述，糖尿病患者在檢測尿常規(guī)的同時，必須定期測定尿微量蛋白，以便早期腎損傷的篩查和診斷。但同時也不能忽略尿干化學(xué)法測尿蛋白的意義，本實驗中有2.36%的糖尿病患者，實際已達到蛋白尿陽性水平，由于后帶現(xiàn)象，尿微量白蛋白檢測僅顯示為輕度微量蛋白尿，造成貽誤診斷糖尿病腎病。所以尿干化學(xué)法測尿蛋白和尿微量白蛋白測定，兩者必須相輔相成，缺一不可，才能更好地早期發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病。

[1] 陳燕, 趙敏, 張家紅, 等. 尿微量蛋白檢查對糖尿病早期腎損傷的診斷價值[J]. 中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志, 2003, 26(9):562-563.

[2] 程蘇琴, 朱美財. 尿微量清蛋白在糖尿病腎損傷早期診斷中的價值[J]. 中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志, 2005, 28(7): 740-741.

[3] 謝祥鰲. 幾種檢測腎小管功能的方法及評價[J]. 中國實用兒科雜志, 2003,1 8(8): 451-454.

[4] 沈秀芬, 李江, 梁先念. 糖化血紅蛋白與尿微量蛋白檢測早期診斷糖尿病腎病的意義[J]. 檢驗醫(yī)學(xué)與臨床, 2009,6(5): 352-354.

[5] Salem MA, El-Habashy SA, Saeid OM, et al. Urinary excretion of nacetyl beta D glucosaminidase and retinol binding protein as alternative indicators of nephropathy in patients with type 1 diabetes mellitus[J]. Pediatr Diabetes,2002, 3(1): 37-41.

[6] Lane JT. Microalbuminuria as a marker of cardiovascular and renal risk in type 2 diabetes mellitus: a temporal perspective[J]. Am J Physiol Renal Physiol, 2004, 286(2):442-450.

[7] 呂世靜. 免疫學(xué)檢驗[M]. 2版. 北京: 人民衛(wèi)生出版社,2003: 76.