飼料霉菌毒素的種類及其檢測方法研究

余海芬，陶軍，殷方芝，黃忠，戰(zhàn)濤

（上海市嘉定區(qū)農(nóng)業(yè)技術推廣服務中心，上海 嘉定 201800）

飼料霉菌毒素的種類及其檢測方法研究

余海芬，陶軍，殷方芝，黃忠，戰(zhàn)濤

（上海市嘉定區(qū)農(nóng)業(yè)技術推廣服務中心，上海 嘉定 201800）

畜禽飼料受霉菌毒素污染在我國十分普遍，造成的危害巨大。加強飼料中霉菌毒素的監(jiān)測關系到整個飼料產(chǎn)業(yè)及養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。本文介紹了近年來監(jiān)測到的畜禽飼料中主要霉菌毒素的種類，并就其檢測方法進行了綜述。關鍵詞：霉菌毒素；危害；檢測方法

霉菌毒素幾乎存在于所有的飼料原料和人類食品原料中，其造成的危害是一個全球性的問題。飼料中的霉菌毒素能直接引起動物病理或生理變化，還常常容易與其他疾病產(chǎn)生混淆，被養(yǎng)殖者忽略，因此給畜禽養(yǎng)殖業(yè)及飼料工業(yè)的發(fā)展帶來嚴重危害。據(jù)估計，全球每年有25%的谷類作物會受到霉菌毒素的污染，造成的經(jīng)濟損失達到幾百億美元。

最近幾年，隨著原料價格的不斷攀升，糧食副產(chǎn)物被大量使用，使得飼料中霉菌毒素含量成倍增長。人們對霉菌毒素所帶來的危害也越來越重視，針對霉菌毒素的檢測技術也在逐步發(fā)展。本文綜述了幾種飼料中常見霉菌毒素的種類及其危害，并就各種新舊檢測方法的發(fā)展進行了討論。

1 飼料中霉菌毒素的種類及危害

1.1 飼料中常見霉菌毒素的種類

在飼料原料中殘留的霉菌毒素大約有30多種，其中最為常見的有黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素、伏馬毒素、T-2毒素等。

王金勇等在2012年、2013年連續(xù)對中國飼料和原料霉菌毒素進行監(jiān)測，共檢測來自全國各地的包括豬料、禽料、奶牛精料、水產(chǎn)料、餅粕、豆粕等飼料樣品1500余份。檢測結(jié)果顯示：豬料、禽料中最常見的霉菌毒素為嘔吐毒素、伏馬毒素和玉米赤霉烯酮，陽性檢出率超過50%，其中嘔吐毒素和伏馬毒素甚至超過80%～90%；黃曲霉毒素和赭曲霉毒素在豬禽料中陽性檢出率較低。奶牛精料中同樣嘔吐毒素、伏馬毒素和玉米赤霉烯酮的出現(xiàn)頻率較高。不同水產(chǎn)品種對霉菌毒素耐受差異很大，因此幾種毒素都應該加強防控。另外，受黃曲霉毒素污染的原料主要出現(xiàn)在棉籽、棉粕、花生粕，玉米及玉米副產(chǎn)品飼料中。

1.2 幾種霉菌毒素對動物的危害

霉菌毒素會對動物機體產(chǎn)生很強的毒副作用，即使在飼料原料中含量很低，也會引起動物出現(xiàn)生長受阻、免疫機能下降、繁殖性能降低等現(xiàn)象。飼料原料中往往多種霉菌毒素同時存在，不同霉菌毒素間還會產(chǎn)生協(xié)同作用，對動物的危害將加劇。表1列舉了幾種飼料中常見霉菌毒素對動物的危害。

2 飼料中霉菌毒素的檢測方法

2.1 酶聯(lián)免疫法

該方法特異性強、靈敏度高，操作步驟簡單、檢測時間短，無需貴重儀器設備，對樣品的純度要求不高，適用于大批量樣品集中檢測。且在操作過程中安全性高、污染少，毒素標準品的濃度可以很低，減少了對檢測人員和環(huán)境的潛在危害和污染。其中黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A、嘔吐毒素都已建立了單克隆抗體酶聯(lián)免疫檢測的國標方法，可用于快速篩選。幾種常見霉菌毒素也有相應的商品化試劑盒銷售，技術比較成熟。

2.2 薄層色譜法

薄層色譜法（TLC）是我國測定飼料中霉菌毒素的仲裁方法之一。該方法設備簡單，易于普及，但樣品前處理比較繁瑣，分離效率低、靈敏度稍差，目前已很少使用。然而，在發(fā)現(xiàn)確證新毒素、快速監(jiān)測方法建立，毒素分析方法研究等方面，尤其是當實驗條件有限時，薄層色譜還是有一定優(yōu)越性的。

2.3 色譜法

液相色譜法（HPLC）是近幾年發(fā)展起來的檢測霉菌毒素方法，主要是用熒光檢測器檢測，該法快速準確，純化效果好，其方法適用性、分離效率和靈敏度方面是其他方法無法替代的。氣相色譜法（GC）從20世紀70年代開始用于霉菌毒素檢測，氣相色譜法近年來也被應用到高風險的飼料霉變污染的檢測中，但是它不及液相色譜法廉價與快速。

2.4 質(zhì)譜法

質(zhì)譜法是霉菌毒素檢測領域最準確可靠的檢測方法，如液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法，但此法檢測速度較慢，適用于定性檢測與實驗室研究。隨著科技的發(fā)展，后來又出現(xiàn)了一些基于質(zhì)譜技術的快速檢測方法，如基質(zhì)輔助激光解析電離-質(zhì)譜聯(lián)用法、離子遷移光譜法、常規(guī)環(huán)境電離質(zhì)譜法等。隨著讀取定量質(zhì)的手持設備已經(jīng)商業(yè)化生產(chǎn)，這種成本低廉，可進行現(xiàn)場操作的檢測方法應用前景可觀，飼料廠可用其對原料中霉菌毒素含量進行常規(guī)監(jiān)測。

3 小結(jié)

大量研究和生產(chǎn)實踐證明，霉菌毒素可以使畜禽等產(chǎn)生多種難以判斷的綜合病癥，并能通過動物肉、蛋、奶、內(nèi)臟進入人類的食品鏈中，危害人類健康。中國尤其是南方，由于自然條件等原因，霉菌毒素污染導致的問題相當嚴重。因此，重視霉菌毒素檢測是非常迫切的問題，越早進行霉菌毒素檢測就越能將危害降到最低。飼料作為霉菌毒素產(chǎn)生的源頭更應該及時通過檢測發(fā)現(xiàn)問題，盡早采取合理措施控制毒素生長，以免給養(yǎng)殖業(yè)帶來更大的危害。

表1 飼料中霉菌毒素對動物的危害

[1]Makun H A，et al.Fungi and some mycotoxins contaminating rice（Oryza sativa）in Niger State，Nigeria[J].African Journal of Biotechnology，2007，6（2）.

[2]王金勇；等.2013年中國飼料和原料霉菌毒素檢測報告[J].國外畜牧學（豬與禽），2014，34（2）：49-51．

[3]王金勇；等.2012年中國飼料和原料霉菌毒素檢測報告[J].中國畜牧雜志，2013，49（4）：29-34.

[4]王敬.霉菌毒素對豬危害及其防控的研究進展[J].養(yǎng)殖技術顧問，2014，2：232-233．

[5]馮艷忠，等.霉菌毒素的研究進展[J].飼料工業(yè)，2014，35（4）：58-61.

[6]張華，等.飼料中霉菌和霉菌毒素的檢測方法[J].貴州農(nóng)業(yè)科學，2004，32（5）：86-87．

[7]應永飛，等.液相色譜——串聯(lián)質(zhì)譜法測定飼料中14種霉菌毒素及其類似物[J].分析化學，2010，38（12）：1759-1764．

[8]Elosta S，et al.MALDI TOF mass spectrometry of selected mycotoxins in barley[J].J Appl Biomed，2007（5）:39-47.

[9]Sheibani A，et al.Determination of aflatoxins B1 and B2 using ion mobility spectrometry[J].Talanta，2008，75（1）:233-238.

[10]Cooks R G，et al.Ambient mass spectrometry[J].Science，2006，311（5767）:1566-1570.

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2015．08.018