磺胺間甲氧嘧啶在黃羽肉雞組織中殘留消解規(guī)律

吳 波，羅厚強(qiáng)，段龍川，楊飛萍

（1.溫州市動物疫病預(yù)防控制中心，浙江溫州 325000；2.溫州科技職業(yè)學(xué)院動科系，浙江溫州 325006；3.溫州市農(nóng)產(chǎn)品檢測中心，浙江溫州 325000）

磺胺間甲氧嘧啶在黃羽肉雞組織中殘留消解規(guī)律

吳 波1，羅厚強(qiáng)2，段龍川2，楊飛萍3

（1.溫州市動物疫病預(yù)防控制中心，浙江溫州 325000；2.溫州科技職業(yè)學(xué)院動科系，浙江溫州 325006；3.溫州市農(nóng)產(chǎn)品檢測中心，浙江溫州 325000）

飼料中分別添加50，100和200 mg·kg_1磺胺間甲氧嘧啶，喂飼40日齡黃羽肉雞，連續(xù)用藥7 d，分別在停藥后0，3，10，15，20，25，28，30，32和35 d時間點對肌肉、肝和腎等組織采樣，用UPLC-MS/MS方法測定磺胺間甲氧嘧啶殘留濃度。100 mg·kg_1試驗組（臨床用藥量）動物肌肉、肝、腎在分別停藥30，15和10 d后，藥物殘留量降到0.084，0.088和0.090 mg·kg_1。結(jié)果表明，臨床用藥量磺胺間甲氧嘧啶對于黃羽肉雞的休藥期應(yīng)在30 d以上。

磺胺間甲氧嘧啶；UPLC-MS/MS；黃羽肉雞

磺胺間甲氧嘧啶（Sulfamonomethoxine，SMM）是高效的人工合成抗菌藥，其抗菌作用和預(yù)防動物細(xì)菌感染效能在磺胺類中最強(qiáng)［1_2］。常用于防治畜禽菌源性感染和球蟲?。?］，也可用作飼料添加劑，以提高畜禽的抗病力和生產(chǎn)性能。磺胺類藥物殘留期較長，容易在畜禽產(chǎn)品中造成殘留，而藥物的殘留能破壞人類的造血系統(tǒng)，引起溶血性貧血癥、粒細(xì)胞缺乏癥、血小板減少癥等疾病，同時也容易導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生［4_5］。藥物的原型及其代謝產(chǎn)物在機(jī)體內(nèi)的殘留消解是一個復(fù)雜的過程，針對不同品種動物的殘留消解規(guī)律也有所不同［6］，國內(nèi)外的科研人員曾研究了SMM在豬［1］、山羊［7］、家兔［8］、馬［9］等動物體內(nèi)的藥代動力學(xué)過程。但是，在黃羽肉雞可食組織內(nèi)藥物殘留消解規(guī)律研究尚未見報道。為了保證黃羽肉雞安全可靠，維護(hù)消費者身體健康，筆者通過磺胺間甲氧嘧啶藥物在黃羽肉雞組織內(nèi)的休藥期驗證試驗，以掌握該藥物在不同組織內(nèi)的殘留消解規(guī)律，為合理給藥提供參考。

1 材料和方法

1.1 供試材料主要藥品及儀器?；前烽g甲氧嘧啶鈉：商品名制菌磺，SMM含量45%，生產(chǎn)批號：20140121，購于廣東大華農(nóng)動物保健品有限公司。SMM對照品：含量99.23%，購于Dr.Ehrenstorfer GmbH公司，純度不低于98.0%。ACQUITY UPLC-Xevo TQ超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀，配有電噴霧離子（ESI）源；高速冷凍離心機(jī)，超聲清洗儀，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，漩渦混勻器。

試驗動物。40日齡黃羽肉雞160羽，體重（1.5±0.2）kg，雌雄各半，試驗前確保沒有使用磺胺類藥物。

1.2 方法

試驗動物分組。試驗黃羽肉雞分為試驗組和對照組，低、中、高3個梯度劑量試驗組各40羽，對照組40羽。

飼養(yǎng)及給藥方法。籠養(yǎng)，自由采食和飲水。從40日齡開始，對照組僅飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組飼料是在基礎(chǔ)日糧中分別添加50，100和200 mg· kg_1磺胺間甲氧嘧啶鈉，連續(xù)飼喂7 d后停藥，停藥后不同時間點測定試驗動物可食組織中SMM殘留量。

采樣。于停藥后0，3，10，15，20，25，28，30，32和35 d時間點從對照組和各試驗組分別抽取4只雞，稱重后立即屠宰，進(jìn)行取樣。每只雞各取胸肌和腿肌約25 g、全肝、全腎，將樣品編號后置于_20℃冷凍保存，待測。

樣品前處理。取5.00 g經(jīng)切碎勻漿的畜禽可食組織樣品，置于50 m L離心管中，加入約5 g無水硫酸鈉和20 m L乙腈，渦旋混勻2 m in，超聲5 m in，以8 000 r·min_1冷凍離心5 m in。將上層提取液轉(zhuǎn)移至100 m L棕色雞心瓶中，殘渣再加入20 m L乙腈重復(fù)上述操作1次。合并提取液，向雞心瓶中再加入10 m L異丙醇。在40℃以下水浴減壓濃縮至近干，再用氮氣吹干。準(zhǔn)確加入1.00 mL初始流動相，渦旋混勻溶解殘留物，轉(zhuǎn)移到10 mL具塞聚丙乙烯離心管中，再加入1 m L正己烷混勻，以10 000 r·min_1冷凍離心5 min，取下層液過0.2μm微孔濾膜，濾液待測定。

色譜條件。色譜柱：ACQUITYUPLCTMBEHC18色譜柱（100 mm×21 mm，1.7μm；Waters公司）；柱溫35℃；樣品溫度10℃；進(jìn)樣體積5μL；流動相A為乙腈，B為0.1%（體積分?jǐn)?shù)）甲酸水溶液；流速：0.25 mL·min_1。

質(zhì)譜條件。電離方式ESI+；電離電壓：3.50 kV；離子源溫度：150℃；錐孔反吹氣流量：50 L· h_1；脫溶劑氣溫度：350℃；脫溶劑氣流量：800 L·h_1；采集模式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；碰撞室氣流量：0.2 m L·min_1。

方法的回收率和精密度。用未檢測出磺胺間甲氧嘧啶鈉的肌肉、肝及腎樣品作為空白樣品，分別做加標(biāo)回收及精密度試驗，每個濃度設(shè)4個平行樣，結(jié)果如表1所示。

由表1中的數(shù)據(jù)可以看出，加標(biāo)回收率范圍100%～120%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均＜9.0%，表明SMM在0.1 mg·kg_1殘留濃度附近具有較高的準(zhǔn)確度。

表1 方法回收率及精密度實驗數(shù)據(jù)（n=4）

2 結(jié)果和分析

對照組黃羽肉雞的肌肉、肝、腎組織均未檢測SMM，試驗組黃羽肉雞各停藥時間點可食組織SMM殘留濃度如表2所示。停藥0 d時，中劑量組（臨床用藥量）黃羽肉雞肌肉、肝和腎組織殘留量分別為5.231，10.240，15.439 mg·kg_1，SMM在組織中濃度分布差別較大，3個梯度試驗組組織殘留量高低順序依次均為腎＞肝＞肌肉。SMM在停藥0～3 d時間區(qū)間內(nèi)殘留消解速度較快。其中，腎組織在0 d時殘留濃度最高，但是殘留量下降也最為迅速，中劑量試驗組10 d后，殘留量低于我國最高殘留限量標(biāo)準(zhǔn)（0.1 mg·kg_1）［10］，殘留濃度為0.090 mg·kg_1，停藥30 d后，未檢出殘留物；中劑量試驗組肝組織在停藥15 d后SMM殘留量低于最高殘留限量標(biāo)準(zhǔn)，殘留濃度為0.088 mg· kg_1，停藥35 d后，未檢出殘留物；肌肉組織SMM殘留代謝消解相對緩慢，停藥30 d后，藥物殘留量為0.084 mg·kg_1。

表2 磺胺間甲氧嘧啶在黃羽肉雞組織中的消解規(guī)律mg·kg_1

3 小結(jié)與討論

SMM在3個劑量試驗組黃羽肉雞的腎組織中代謝消解較快，其次是肝組織，在肌肉組織中SMM代謝消解較緩慢。在0 d，3個梯度劑量試驗組SMM殘留濃度差別明顯，15 d后殘留濃度及消解速度趨于一致。中劑量試驗組肌肉、肝、腎在分別停藥30 d，15 d，10 d后，組織殘留量才低于最高殘留限量標(biāo)準(zhǔn)；2005年版《中國獸藥典》規(guī)定磺胺間甲氧嘧啶在肉雞中的休藥期為28 d。黃羽肉雞品種生長周期相對較長，藥物代謝速度可能要低于其他肉雞品種，肌肉組織SMM殘留在28 d尚未達(dá)到安全標(biāo)準(zhǔn)。由此可知，針對黃羽肉雞品種，在臨床使用SMM時，28 d的休藥期可能是不安全的，應(yīng)按照30 d或者以上的休藥期執(zhí)行，確保黃羽肉雞可食組織SMM殘留低于國家規(guī)定最高限量標(biāo)準(zhǔn)。

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［10］ 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第235號.動物性食品中獸藥最高殘留限量［S］.

（責(zé)任編輯：盧福莊）

圖2 馳煤礦區(qū)土地生態(tài)安全評價圖

4 小結(jié)

采用PSR模型建立了羅平縣龍馳煤礦區(qū)土地生態(tài)安全評價指標(biāo)體系，并運用極值標(biāo)準(zhǔn)化法對指標(biāo)實際值進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，同時采用專家打分法和熵值法確定指標(biāo)權(quán)重，提高指標(biāo)權(quán)重的準(zhǔn)確度。結(jié)果表明，龍馳煤礦區(qū)的土地生態(tài)安全指數(shù)在0.60～0.80，為Ⅲ等，敏感級。評價結(jié)果比較符合龍馳煤礦區(qū)的土地生態(tài)安全實際情況，具有一定的參考價值。

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（責(zé)任編輯：高 峻）

S 859.79+6

A

0528-9017（2015）02-0267-03

10.16178/j.issn.0528-9017.20150238

2014-12-15

溫州市科技計劃項目（2013N0010）

吳 波（1981_），男，浙江溫州人，獸醫(yī)師，碩士，主要從事動物疫病綜合防控工作。E-mail：cris414727@126.com。

文獻(xiàn)著錄格式：吳波，羅厚強(qiáng)，段龍川，等.磺胺間甲氧嘧啶在黃羽肉雞組織中殘留消解規(guī)律［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，56（2）：267_269.