DLC—1和cyclinD1在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義

陳曉燕

[摘要]目的探討DLC-I和cyclinDI在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)。方法整群選擇2005年1月-2013年12月該院收治的62例宮頸鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本、38例宮頸上皮內(nèi)瘤變標(biāo)本、26例正常宮頸組織標(biāo)本，以免疫組化SP法檢測(cè)3組標(biāo)本中DLC-I和cyclinDI的表達(dá)。結(jié)果DLC-1在宮頸鱗狀細(xì)胞癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變、正常宮頸組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為27.4%、76.3%、92.3%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；高、中、低病理分級(jí)DLC-1陽(yáng)性表達(dá)率分別為42.9%、27.9%、16.7%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；I-Ⅱa期DLC-I陽(yáng)性表達(dá)率為41.4%，明顯高于Ⅱb～Ⅳ期的15.2%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移DLC-1陽(yáng)性表達(dá)率為34.9%，明顯高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的10.5%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。cyclinDI在宮頸鱗狀細(xì)胞癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變、正常宮頸組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為66.1%、5.3%、0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；高、中、低病理分級(jí)cy—clinD1舊性表達(dá)率分別為42.9%、67.4%、75.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；I-Ⅱa期cyclinDI陽(yáng)性表達(dá)率為48.3%，明顯低于Ⅱb～Ⅳ期的81.8%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移cyclinDI陽(yáng)性表達(dá)率為58.l%，明顯低于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的84.2%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。DLC-I與cyclinDI在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性（r=-0.519，P<0.05）。結(jié)論DLC-1在宮頸鱗狀細(xì)胞癌的陽(yáng)性表達(dá)較低，而cyclinD1在宮頸鱗狀細(xì)胞癌的陽(yáng)性表達(dá)較高，兩者均與宮頸鱗狀細(xì)胞癌發(fā)展、侵襲、轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)。

[關(guān)鍵詞]宮頸鱗狀細(xì)胞癌；DLC-1；cyclinD1

[中圖分類號(hào)]R4

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1674-0742（2015）08（a）-0014-03

宮頸癌是婦女臨床常見性惡性腫瘤，其發(fā)病率僅低于乳腺癌，而其中又以鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)病率最高，約70%。當(dāng)前，鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)病率逐年增加，且早期臨床無(wú)明顯癥狀，常在體檢中發(fā)現(xiàn)。病理學(xué)研究顯示，宮頸癌的發(fā)病過(guò)程復(fù)雜，涉及癌基因改變和細(xì)胞生長(zhǎng)的變化。DLC-I為抑癌基因，在多數(shù)正常組織中的表達(dá)較高，在多數(shù)腫瘤中的表達(dá)較低。cyclinD1是原癌基因，高表達(dá)可促進(jìn)細(xì)胞增殖。當(dāng)前，DLC-I和cyclinD1在鱗狀細(xì)胞癌中表達(dá)的研究不多見，基于此，通過(guò)分析該院2005年1月-2013年12月間收治的62例宮頸鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本.38例宮頸上皮內(nèi)瘤變標(biāo)本、26例正常宮頸組織中DLC—l和cyclinDl的表達(dá)情況，探討了DLC-I和cyclinDl與鱗狀細(xì)胞癌發(fā)展、侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)系，并對(duì)兩者的相關(guān)性進(jìn)行了分析。以期為宮頸癌的防治提供數(shù)據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

62例宮頸鱗狀細(xì)胞癌標(biāo)本、38例宮頸上皮內(nèi)瘤變標(biāo)本、26例正常宮頸組織標(biāo)本均整群選白該院2005年1月-2013年12月病理科，且均經(jīng)病理證實(shí)。62例宮頸鱗狀細(xì)胞癌中，年齡35-76歲，平均（52.7+12.5）歲；高分化癌7例，中分化癌43例，低分化癌12例；FIGO分期：I-Ⅱa期29例，Ⅱb-Ⅳ期33例；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者43例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者19例?；颊咝g(shù)前均未進(jìn)行放療及化療的治療，且標(biāo)本經(jīng)病理醫(yī)師復(fù)檢。

1.2 方法

標(biāo)本經(jīng)10%中性福爾馬林固定，用石蠟包埋，做4μm的切片。以SP法進(jìn)行免疫組化，操作依據(jù)試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。并用乳腺癌作為陽(yáng)性對(duì)照，PBS組作為陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定

結(jié)果判定以雙評(píng)分法進(jìn)行，觀察DLC-1細(xì)胞質(zhì)和cyclinD1的細(xì)胞核，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色顆粒、且染色的強(qiáng)度大于背景著色時(shí)，判定為陽(yáng)性。細(xì)胞計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)：0分，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<5%；1分，5%-25%；2分，26%-50%；3分，51%-75%；4分，>75%。顯色強(qiáng)度評(píng)分：0分，無(wú)著色；1分，淡黃色；2分，棕黃色；3分，棕褐色。兩評(píng)分乘積≤1，表示（一）；1～3分，表示弱（+）；>3，表示（+）。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

以SPSS16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料用X^{2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。}

2 結(jié)果

2.1 三組標(biāo)本中DLC-1和cyclinD1的表達(dá)

DLC-1在宮頸鱗狀細(xì)胞癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變、正常宮頸組織中的陽(yáng)性表達(dá)逐漸增大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；cyclinD1在宮頸鱗狀細(xì)胞癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變、正常宮頸組織中的陽(yáng)性表達(dá)逐漸減小，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果見表1。

2.2 DLC-1和cyclinD1與宮頸鱗狀細(xì)胞癌的關(guān)系

DLC-1和cyclinDI在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的陽(yáng)性表達(dá)與宮頸鱗狀細(xì)胞癌的分期、分級(jí)、淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果見表2。

2.3 DLC-1與cVclinD1在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中表達(dá)的相關(guān)性

DLC-I與cyclinDI在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中表達(dá)的呈負(fù)相關(guān)性（r=-0.519）。結(jié)果見表3。

3 討論

對(duì)于DLC-1在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)，該組研究結(jié)果顯示：DLC-1在宮頸鱗狀細(xì)胞癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變、正常宮頸組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為27.4%、76.3%、92.3%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）：高、中、低病理分級(jí)DLC-1陽(yáng)性表達(dá)率分別為42.9%、27.9%、16.7%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；I-Ⅱa期DLC-I陽(yáng)性表達(dá)率為41.4%，明顯高于Ⅱb-Ⅳ期的15.2%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移DLC-1陽(yáng)性表達(dá)率為34.9%.明顯高于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的10.5%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果提示了：DLC-1在宮頸鱗狀細(xì)胞癌和宮頸上皮內(nèi)瘤變中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著低于正常宮頸組織，并與宮頸鱗狀細(xì)胞癌的分化、分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。早在1998年，張風(fēng)林等在肝癌細(xì)胞系染色體的研究中首次發(fā)現(xiàn)了DLC-1，在基因組染色體中具有低表達(dá)。病理研究顯不，DLC-1在人體腦、心、肝、肺、乳腺等組織都有表達(dá)，并可抑制肺癌、肝癌、前列腺癌等腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，發(fā)揮抑癌作用。此外，Seng等的研究發(fā)現(xiàn)宮頸癌會(huì)對(duì)DLC-1的啟動(dòng)子進(jìn)行甲基化修飾，造成DLC-1的失活，因此，DLC-I可以作為宮頸癌診治判斷的標(biāo)記物。宋明芮等的研究結(jié)果表明，DLC-1的低表達(dá)參與了宮頸鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲、及轉(zhuǎn)移，本組結(jié)果與其結(jié)果一致。

對(duì)于cyclinDI在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)，該組發(fā)現(xiàn)：cy—clinDI在宮頸鱗狀細(xì)胞癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變、正常宮頸組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為66.1%、5.3%、0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；高、中、低病理分級(jí)cyclinD1陽(yáng)性表達(dá)率分別為42.9%、67.4%、75.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；I-Ⅱa期cyclinDI陽(yáng)性表達(dá)率為48.3%，明顯低于Ⅱb～Ⅳ期的81.8%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移cyclinD1陽(yáng)性表達(dá)率為58.1%，明顯低于有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的84.2%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果提示了：CyclinDI在宮頸鱗狀細(xì)胞癌和宮頸上皮內(nèi)瘤變中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于正常宮頸組織，并與宮頸鱗狀細(xì)胞癌的分化、分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。CyclinDI是一種參與細(xì)胞周期精確調(diào)控的蛋白，維持細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育的平衡。CyclinDI基因的變化可引起細(xì)胞周期的異常調(diào)控，進(jìn)而誘發(fā)細(xì)胞轉(zhuǎn)化、甚至癌變。病理研究顯示，CyclinDl可加速GI/S期的轉(zhuǎn)換，促進(jìn)細(xì)胞周期的進(jìn)程，當(dāng)CvclinDI的過(guò)度表，會(huì)造成細(xì)胞的持續(xù)性增殖，進(jìn)而形成腫瘤。此外，Shi等的研究發(fā)現(xiàn)CyclinDI在宮頸癌組呈現(xiàn)高表達(dá)，可作為早期宮頸癌診治的標(biāo)志物。王新華等的研究顯示CyclinDI的高表達(dá)促進(jìn)了細(xì)胞周期進(jìn)程，引起細(xì)胞增殖的失控，促進(jìn)宮頸癌的發(fā)生，該組結(jié)果與其一致。

在DLC-1和cyclinDI的相關(guān)性分析中，發(fā)現(xiàn)DLC-1和cyclinD1在宮頸鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性（r=-0.519，P<0.05）。結(jié)果提示了，DLC-1的低表達(dá)和cyclinD1的高表達(dá)在宮頸鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲中起重要作用。

綜上所述.DLC-1在宮頸鱗狀細(xì)胞癌的陽(yáng)性表達(dá)較低，而cyclinDl在宮頸鱗狀細(xì)胞癌的陽(yáng)性表達(dá)較高，兩者均與宮頸鱗狀細(xì)胞癌發(fā)展、侵襲、轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)。