犬細(xì)小病毒檢測(cè)技術(shù)在貂、狐、貉中的應(yīng)用

王凈

（河北北方學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院,河北張家口075000）

采用犬細(xì)小病毒雙抗體夾心ELISA 方法、膠體金試紙條技術(shù)和LAMP 檢測(cè)技術(shù)，篩查我省六地市貂、狐、貉細(xì)小病毒感染情況，并應(yīng)用抗細(xì)小病毒單克隆抗體加以治療。結(jié)果表明：貂、狐、貉細(xì)小病毒總的感染率為16.44%，各地市的感染率差別不大，貂、狐、貉細(xì)小病毒的平均感染率分別為16.90%、16.27%、15.78%，呈遞減的趨勢(shì)，表明貂比狐、貉更易感細(xì)小病毒；不同季節(jié)感染情況不同，7～9月感染率最高，為24.76%。經(jīng)過(guò)檢測(cè)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)患病動(dòng)物，采取積極有效的治療措施，治愈率達(dá)到65%，挽回了養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)損失，最大限度的保障了養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益。

隨著人們物質(zhì)生活水平的提高，皮草不僅作為御寒的衣物，更多的成為了身份的象征，這種需求帶動(dòng)了貂、狐、貉特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，又由于這種皮毛動(dòng)物的養(yǎng)殖投入少、見(jiàn)效快，不同規(guī)模均可養(yǎng)殖，所以在我省的養(yǎng)殖量不斷增加，貂、狐、貉細(xì)小病毒抵抗力較強(qiáng)，容易持續(xù)反復(fù)發(fā)生，藥物控制也難以達(dá)到理想效果，給我國(guó)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)造成重大損失，使得貂、狐、貉成活率降低，養(yǎng)殖數(shù)量不斷下降。

貂、狐、貉細(xì)小病毒可引起貂、狐、貉的細(xì)小病毒病，該病是一種急性、以出血性腸炎或非化膿性心肌炎為主要特征的重要傳染病。細(xì)小病毒按其宿主特異性可分為貓泛白細(xì)胞減少癥病毒（FPV）、水貂腸炎病毒（MEV）、犬細(xì)小病毒（CPV）。貓泛白細(xì)胞減少癥病毒（FPV）也能感染水貂，水貂腸炎病毒（MEV）也叫水貂細(xì)小病毒，主要感染貂，犬細(xì)小病毒（CPV）主要感染犬、狐貍、貉等犬科動(dòng)物。研究證明，CPV、MEV 和FPV 的抗原性十分相近，MEV 可能是FPV 適應(yīng)新宿主的變異株，而CPV 通常被認(rèn)為是FPV 和MEV 進(jìn)化的結(jié)果，它們?cè)谘鍖W(xué)上難以區(qū)分，基因序列一致性高達(dá)98%以上，具有緊密的親緣關(guān)系，這為我們將犬細(xì)小病毒檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用于貂、狐、貉提供了理論依據(jù)。本文通過(guò)篩查河北省六地市貂、狐、貉細(xì)小病毒，確定貂、狐、貉細(xì)小病毒病的感染率，分析該病流行的季節(jié)變化，總結(jié)該病流行特點(diǎn)，以便針對(duì)性的預(yù)防和治療，最大限度的保障養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)利益。

1 方法

1.1 樣本采集

對(duì)河北省張家口、唐山、滄州、秦皇島、保定、石家莊六個(gè)地市部分貂、狐、貉養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行采樣，收集450 份病死貂、狐、貉。

1.2 檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用

收集腸內(nèi)容物，以生理鹽水5 倍稀釋混勻，靜置，上清即為待檢抗原。采用犬細(xì)小病毒膠體金試紙條和雙抗體夾心ELISA 方法進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)于可疑病例，采用LAMP 檢測(cè)方法進(jìn)行確診。

1.3 單克隆抗體治療

特異療法：肌肉注射犬細(xì)小病毒單克隆抗體。補(bǔ)液：飲水中添加氯化鈉和葡萄糖，維持電解質(zhì)平衡。對(duì)癥治療：黃芪多糖、靈芝多糖、多種維生素拌料大群飼喂。

2 結(jié)果

2.1 臨床診斷

對(duì)收集的動(dòng)物進(jìn)行尸體剖檢可見(jiàn)，病畜均表現(xiàn)大致相同的癥狀，具體為，小腸黏膜不同程度的充血、出血，腸系膜淋巴結(jié)腫大，非化膿性心肌炎性病變，肺臟、脾臟均有出血，腎臟腫大出血，肝臟易碎、有出血點(diǎn)等癥狀。

2.2 病原檢測(cè)

采用建立的檢測(cè)方法對(duì)收集到的貂狐貉樣本進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果（見(jiàn)表1）。

結(jié)果表明，不同地市貂狐貉細(xì)小病毒的感染率不同，張家口、唐山、滄州和秦皇島地市貂、狐、貉細(xì)小病毒的感染率略低于保定和石家莊地市，六個(gè)地市貂、狐、貉細(xì)小病毒的感染率均接近平均感染率，總體看來(lái)，各地市的感染率差別不大；貂、狐、貉細(xì)小病毒的平均感染率分別為16.90%、16.27%、15.78%，呈遞減的趨勢(shì)，說(shuō)明貂比狐、貉更易感細(xì)小病毒。

表1 河北省六地市貂、狐、貉細(xì)小病毒感染率統(tǒng)計(jì)結(jié)果

不同季節(jié)貂、狐、貉感染率的統(tǒng)計(jì)（見(jiàn)表2）。

表2 不同季節(jié)貂狐貉感染率統(tǒng)計(jì)結(jié)果

由表2 可以看出，我省貂狐貉細(xì)小病毒總的感染率為16.44%，感染率隨月份變化而變化，7～9月感染率最高，為24.76%，2～3月和10～11月份感染率較低，分別為2.63%和3.38%。

2.3 治療效果

通過(guò)應(yīng)用檢測(cè)技術(shù)，做到早發(fā)現(xiàn)并早治療。應(yīng)用抗病毒單克隆抗體，加之抗病毒藥物的使用，同時(shí)飲水中添加葡萄糖和氯化鈉以補(bǔ)充電解質(zhì)，采用以上綜合治療措施，貂狐貉細(xì)小病毒病的治愈率達(dá)到65%，保障了養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益。

3 討論

本研究以建立的檢測(cè)方法應(yīng)用與貂、狐、貉細(xì)小病毒的病原檢測(cè)中，統(tǒng)計(jì)了我省六地市的貂、狐、貉細(xì)小病毒感染情況。良好的養(yǎng)殖環(huán)境決定了動(dòng)物的生長(zhǎng)狀態(tài)，由于貂、狐、貉特有的生活習(xí)性，適于在沿海和寒冷地區(qū)養(yǎng)殖，所以，在我省近海區(qū)域及北部寒冷地區(qū)養(yǎng)殖的貂、狐、貉感染率比靠近南部的內(nèi)陸地區(qū)要低。不同種類(lèi)的動(dòng)物感染細(xì)小病毒的情況也不同，分析表明，貂比狐、貉更易感。貂、狐、貉細(xì)小病毒感染率隨季節(jié)不同而不同，主要流行于夏、秋季。分析認(rèn)為，跟貂、狐、貉的養(yǎng)殖量及動(dòng)物的養(yǎng)殖階段有關(guān)。2～3月貂、狐、貉養(yǎng)殖數(shù)量較少，大多為種用動(dòng)物，所以感染率較低。4～6月為貂、狐、貉繁殖季節(jié)，幼小動(dòng)物隨之?dāng)嗳?、分窩，喂食方式的改變也極易造成應(yīng)激，加上管理不當(dāng)，動(dòng)物很容易感染細(xì)小病毒，使得感染率明顯提高，到7～9月份，各年齡段的動(dòng)物均有，幼崽體內(nèi)母源抗體水平減少，難以抵抗外界病毒的入侵，加之夏季氣候高溫多濕，動(dòng)物機(jī)體自身免疫力降低，因此，感染率繼續(xù)升高，達(dá)到最高峰。10～11月大多為成年的貂、狐、貉，因此感染率不高。

貂、狐、貉在河北省山區(qū)廣泛養(yǎng)殖，動(dòng)物發(fā)病時(shí)，養(yǎng)殖戶不進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)癥狀初步判斷并保守治療，治愈率僅為30%左右，本研究應(yīng)用最新的檢測(cè)技術(shù)對(duì)動(dòng)物進(jìn)行確診，有針對(duì)的加以單克隆抗體治療，治愈率達(dá)到65%，減少了養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)損失，最大限度的保障了養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益。

略）