腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查在診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病的臨床應(yīng)用

劉迎春 阮 劍

湖北團(tuán)風(fēng)縣人民醫(yī)院 1）檢驗科 2）骨外科 團(tuán)風(fēng) 438000

中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染是中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nervous system，CNS）的常見疾病，腦脊液（cerebrospinal fluid，CSF）檢查對疾病的診斷具有重要參考意義［1］。本文采用玻片離心沉淀法檢查腦脊液細(xì)胞學(xué)診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染，現(xiàn)分析如下。

1 資料與方法

1.1病例資料選取2010－03－2013－03間我院收治的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患者82例，男43例，女39例，年齡23～67歲，平均39歲。病毒性腦膜炎23例，結(jié)核性腦膜炎31例，細(xì)菌性腦膜炎17例，腦轉(zhuǎn)移瘤11例，均為亞急性或急性發(fā)病。頭痛13例，發(fā)熱11例，嘔吐23例，意識障礙15例，抽搐7例，精神異常8例，腦膜刺激征5例。

1.2儀器和方法

1.2.1 儀器：玻片離心沉淀儀，采用孔氏FCS兩用型離心沉淀儀。細(xì)胞涂片離心機(jī)，購自于長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司。顯微診斷儀，購自于重慶天海醫(yī)療設(shè)備有限公司。

1.2.2 CSF檢查方法：①患者行腰椎穿刺術(shù)，先進(jìn)行腦脊液常規(guī)檢查、計數(shù)和生化檢查，檢測顱內(nèi)壓。每位患者各取1 mL新鮮腦脊液標(biāo)本進(jìn)行玻片離心沉淀。采用FCS－E型玻片離心儀，將獲取的標(biāo)本注入離心機(jī)沉淀池內(nèi)，慢速離心，設(shè)置參數(shù)為500rpm／min，離心10min后取出玻片晾干。②于室溫下進(jìn)行瑞－姬染色，染色時間約為10min，之后沖洗晾干。③利用顯微診斷儀觀察腦脊液細(xì)胞形態(tài)，并進(jìn)行計數(shù)和分類，查看有無異常細(xì)胞。

2 結(jié)果

2.1腦脊液常規(guī)、生化和壓力檢測結(jié)果患者腦脊液壓力增高，其中10例患者腦脊液壓力＞300mmH2O。蛋白含量0.5～3.8g／L，8例顯著升高。葡萄糖含量1～3.5mmol／L，3例顯著降低。氯化物在118～120mmol／L范圍內(nèi)波動，變化不顯著。腦脊液中最高白細(xì)胞數(shù)量達(dá)到1 000個／mm3，最少者僅為6個／mm3。見表1。

表1 腦脊液常規(guī)生化檢查與細(xì)胞學(xué)檢查異常百分率比較表

2.2腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果（1）正常腦脊液：60%～70%為淋巴細(xì)胞，形態(tài)較小且多呈圓形，具有完整的胞膜和光滑的邊緣，胞漿量少。30%～40%為單核細(xì)胞，形態(tài)較大且多呈馬蹄形。單核細(xì)胞與小淋巴細(xì)胞的比例約為4：6或3：4，無中性粒細(xì)胞，偶見大淋巴細(xì)胞。（2）化腦：神經(jīng)外科術(shù)后感染患者，80%～90%為嗜中性粒細(xì)胞，甚者中毒顆粒出現(xiàn)在胞漿內(nèi)。（3）病腦：以淋巴細(xì)胞反應(yīng)為主，細(xì)胞分類比例為嗜中性粒細(xì)胞＜單核細(xì)胞＜淋巴細(xì)胞，具有大量激活淋巴細(xì)胞。（4）結(jié)腦：染色涂片后出現(xiàn)單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、漿細(xì)胞、激活單核細(xì)胞及激活淋巴細(xì)胞等并存，由此可見結(jié)腦以混合細(xì)胞反應(yīng)為主。（5）腦髓炎：小淋巴細(xì)胞升高為主要表現(xiàn)癥狀，同時伴有漿細(xì)胞、激活淋巴細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞。（6）腦囊蟲：嗜酸性粒細(xì)胞升高為主要表現(xiàn)癥狀。見表2。

3 討論

中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染是由不同病原體引起的一類炎性疾病，是由于生物性病原體侵入中樞神經(jīng)系統(tǒng)后引起的慢性或急性疾病，屬于我國常見疾病，包括腦炎、腦膜腦炎和腦膜炎等，且臨床漏診或誤診現(xiàn)象極其嚴(yán)重。腦室系統(tǒng)內(nèi)的脈絡(luò)從可產(chǎn)生腦脊液，正常腦脊液中單核細(xì)胞與淋巴細(xì)胞的比例約為70∶30～60∶40，當(dāng)致病菌侵襲中樞神經(jīng)系統(tǒng)時，其抗原性引起特征性細(xì)胞免疫反應(yīng)和相應(yīng)的腦脊液白細(xì)胞計數(shù)，同時還可出現(xiàn)激活淋巴細(xì)胞、大淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、激活單核細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞等異常細(xì)胞，為定性診斷提供依據(jù)［2－3］。其中，細(xì)菌性腦膜炎以嗜中性粒細(xì)胞反應(yīng)為主，結(jié)核性腦膜炎以嗜中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、激活淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞的混合反應(yīng)為主，病毒性腦膜炎以淋巴細(xì)胞的細(xì)胞學(xué)反應(yīng)為主。腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查是一門逐漸發(fā)展的新興學(xué)科，主要研究正常狀態(tài)和病理狀態(tài)下的腦脊液細(xì)胞成分分類及其臨床引用，通過特殊裝置收集細(xì)胞成分后進(jìn)行染色觀察［4］。常規(guī)腦脊液檢查其陽性率遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查，不同類型的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染表現(xiàn)出不同的腦脊液細(xì)胞學(xué)特性，腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查可準(zhǔn)確的動態(tài)觀察細(xì)胞形態(tài)，提供快速、簡便、準(zhǔn)確的輔助診斷。腦脊液細(xì)胞學(xué)臨床表現(xiàn)大致可分為如下幾類：（1）淋巴細(xì)胞型，如感染后脫髓鞘腦炎或病毒性腦膜炎等慢性或免疫性炎癥。（2）單核－吞噬細(xì)胞型，常見于變性疾病或慢性刺激性疾病。（3）多形核粒細(xì)胞型，常見于出血或急性細(xì)菌性炎癥。（4）混合細(xì)胞型，常見于隱球菌性腦膜炎和結(jié)核性腦膜炎等亞急性炎癥。

有學(xué)者采用玻片離心沉淀法分別收集結(jié)核性腦膜炎和病毒性腦膜炎患者的腦脊液細(xì)胞，進(jìn)行巴氏染色后發(fā)現(xiàn)結(jié)核性腦膜炎患者在病初12d內(nèi)多呈嗜中性粒細(xì)胞反應(yīng)，直至病情第4周末，單核細(xì)胞與嗜中性粒細(xì)胞所占比例一致［5］。隨著病程的逐漸延長，淋巴細(xì)胞逐步代替腦脊液病理細(xì)胞，而在整個病程中始終出現(xiàn)漿細(xì)胞和激活單核細(xì)胞，由此提示腦脊液細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)、量差別及動態(tài)變化對結(jié)核性腦膜炎的早期診斷具有重大意義。

腦脊液內(nèi)的細(xì)胞在離體環(huán)境下極易被破壞，因而腦脊液細(xì)胞檢查的關(guān)鍵是盡可能多的收集完整細(xì)胞，沉淀池法收集細(xì)胞形態(tài)清晰完整，僅需少量標(biāo)本0.5～1.0mL。綜上所述，通過玻片離心沉淀法檢查腦脊液細(xì)胞學(xué)可動態(tài)監(jiān)測其變化，從而極大提高中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染診斷的陽性率，對臨床療效的評估具有重要意義。

表2 腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果

［1］粟秀初，趙鋼，楊毅寧，等 .玻片離心沉淀法腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查在中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病診斷中的應(yīng)用價值［J］.中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志，2013，2：008.

［2］Spudich S，Gisslen M，Hagberg L，et al.Central nervous system immune activation characterizes primary human immunodeficiency virus 1infection even in participants with minimal cerebrospinal fluid viral burden［J］.Journal of Infectious Diseases，2011，204（5）：753－760.

［3］Nau R，Srgel F，Eiffert H.Penetration of drugs through the blood－cerebrospinal fluid／blood－brain barrier for treatment of central nervous system infections［J］.Clinical microbiology reviews，2010，23（4）：858－883.

［4］戰(zhàn)玉喜，李建新 .顱內(nèi)感染者腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查的臨床意義［J］.山東醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校學(xué)報，2013，35（5）：364－366.

［5］粟秀初 .影響玻片離心沉淀法腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查進(jìn)一步推廣的若干因素［J］.中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志，2011，11（5）：486－488.