?；撬釋?duì)丙烯酰胺致SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用

郝瑞芳，景　浩（.山西林業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院園藝系，山西太原030009；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，北京00083）

牛磺酸對(duì)丙烯酰胺致SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用

郝瑞芳1，景浩2，*
（1.山西林業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院園藝系，山西太原030009；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院，北京100083）

用丙烯酰胺誘導(dǎo)SH-SY5Y神經(jīng)細(xì)胞損傷建立細(xì)胞損傷模型，研究牛磺酸對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞的保護(hù)作用。MTT法和LDH法測(cè)定結(jié)果顯示：用100～700 μg/mL丙烯酰胺對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞孵育8 h，細(xì)胞存活率下降至52%～81%，表明丙烯酰胺對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞有一定的損傷作用，導(dǎo)致細(xì)胞膜受損，LDH釋放到細(xì)胞膜外。經(jīng)?；撬幔?0、100、200 μg/mL）預(yù)先孵育1 h后，再用300 μg/mL丙烯酰胺對(duì)細(xì)胞孵育8 h，SH-SY5Y細(xì)胞的存活率分別升高至81.6%、92.7%、89.7%，顯著高于丙烯酰胺損傷組的細(xì)胞存活率（67.6%）；且LDH釋放程度呈現(xiàn)出下降趨勢(shì)，LDH釋放率分別為：150.7%、138.8%、113.3%，和丙烯酰胺損傷組的LDH釋放率（188.5%）相比均顯著降低。該研究結(jié)果表明牛磺酸對(duì)丙烯酰胺誘導(dǎo)的SHSY5Y細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用。

?；撬?，丙烯酰胺，SH-SY5Y細(xì)胞，損傷

丙烯酰胺（Acrylamide）對(duì)大鼠肝細(xì)胞、鼠腎上皮細(xì)胞、人角質(zhì)形成細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞均具有毒性作用，可引起細(xì)胞發(fā)生氧化應(yīng)激損傷［1-4］。丙烯酰胺能降低SH-SY5Y細(xì)胞的活力，增加乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）的釋放量，促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。LDH是細(xì)胞能量代謝中的一個(gè)重要的酶，細(xì)胞釋放LDH增加，通常反映細(xì)胞受損傷，細(xì)胞膜通透性增加。

牛磺酸（Taurine）主要存在于心肌細(xì)胞，對(duì)肝細(xì)胞、心肌細(xì)胞、紅細(xì)胞等都具有保護(hù)作用。?；撬崮軌蚓S持細(xì)胞內(nèi)外滲透壓平衡，調(diào)節(jié)細(xì)胞鈣穩(wěn)態(tài)。牛磺酸可能通過(guò)激活膜表面鈣泵使細(xì)胞漿內(nèi)Ca2+泵出細(xì)胞或進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的鈣庫(kù)，從而抑制細(xì)胞內(nèi)鈣超載［5］。牛磺酸還具有抗氧化作用，能清除氧自由基，抑制細(xì)胞膜的過(guò)氧化損傷，保護(hù)膜的穩(wěn)定性。?；撬釁⑴c細(xì)胞膜的主要成分磷脂的代謝，保護(hù)細(xì)胞膜磷脂免受降解，調(diào)節(jié)膜對(duì)離子的通透性并呈劑量依賴地抑制溶酶體內(nèi)組織蛋白酶的漏出。?；撬徇€能抑制四氯化碳引發(fā)的脂質(zhì)過(guò)氧化作用，減少丙二醛的生成、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶的釋放，有效保護(hù)肝細(xì)胞［6］。

SH-SY5Y神經(jīng)細(xì)胞株來(lái)源于人類胚胎中腦，是一種分化程度較低的神經(jīng)母細(xì)胞瘤。其細(xì)胞形態(tài)和生理功能與正常神經(jīng)元相似，被廣泛用于神經(jīng)損傷的分子機(jī)制研究。本實(shí)驗(yàn)選用SH-SY5Y細(xì)胞，用丙烯酰胺誘導(dǎo)細(xì)胞損傷，建立細(xì)胞損傷模型，探討?；撬釋?duì)丙烯酰胺致SH-SY5Y細(xì)胞的損傷是否具有保護(hù)作用。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y購(gòu)自中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)；高糖型DMEM培養(yǎng)液美國(guó)Invitrogen公司；胎牛血清（Fetal bovine serum，F(xiàn)BS）北京鼎國(guó)生物技術(shù)有限責(zé)任公司；胰蛋白酶、噻唑藍(lán)（MTT）、丙酮酸鈉、還原型NADH美國(guó)Sigma公司；丙烯酰胺標(biāo)準(zhǔn)品，純度99.5%德國(guó)Labor Dr.Ehrenstorfer-Schafers公司；?；撬釃?guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；其他藥品均為國(guó)產(chǎn)分析純。

MCO-15AC型二氧化碳培養(yǎng)箱日本SANYO（三洋）公司；XDL-2型倒置生物顯微鏡重慶光電儀器有限公司；BSC-1500ⅡA2-X型生物安全柜濟(jì)南市鑫貝西生物技術(shù)有限公司；680型酶標(biāo)儀美國(guó)Bio-Rad公司；FA1004型電子天平上海越平科學(xué)儀器有限公司；UNICO 2800型紫外分光光度計(jì)上海滬粵明科學(xué)儀器有限公司。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1試液配制

1.2.1.1丙烯酰胺（99.5%）儲(chǔ)備液配制濃度為1.0 mg/mL的丙烯酰胺溶液，作為儲(chǔ)備液。

1.2.1.2磷酸鹽（PBS）緩沖液配制稱取KH2PO40.20 g，Na2HPO4·12H2O 2.90 g，KCl 0.20 g，NaCl 8.00 g，加900 mL去離子水溶解，用18%的HCl調(diào)pH至7.4，最后定容至1 L。

1.2.1.3牛磺酸溶液和丙烯酰胺溶液用PBS緩沖液溶解?；撬岷捅０罚謩e配制成5 mg/mL的儲(chǔ)備液，在生物安全柜內(nèi)用0.22 μm濾膜過(guò)濾除菌，備用。臨用前分別用不含血清的DMEM培養(yǎng)液稀釋到所需濃度。

1.2.2細(xì)胞培養(yǎng)將SH-SY5Y細(xì)胞培養(yǎng)于含20%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)液，置于CO2培養(yǎng)箱（37℃，5%CO2）培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)至80%～90%融合時(shí)，進(jìn)行傳代。每3～4 d傳代一次。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞分組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2.3?；撬釋?duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞消化，制備成均勻的細(xì)胞懸液。取96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔加100 μL細(xì)胞懸液，細(xì)胞密度為5×105個(gè)/mL。培養(yǎng)48 h后棄培養(yǎng)液，每孔加入100 μL含不同濃度（50、100、200、400 μg/mL）的?；撬崛芤?，37℃孵育8 h；棄去牛磺酸溶液，每孔加入100 μL培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)48 h，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，并用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性。

MTT法步驟如下：不同濃度的?；撬崽幚斫M均設(shè)3個(gè)重復(fù)孔，以不加細(xì)胞懸液和?；撬岬慕M為空白組，以加PBS處理的正常細(xì)胞組為對(duì)照組；各組細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，棄去各孔中的培養(yǎng)液，加入100 μL不含血清的DMEM-MTT溶液（MTT終濃度0.5 mg/mL），在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育4 h；加入100 μL鹽酸-異丙醇溶液（含0.04 moL/L HCl）/孔，振蕩至藍(lán)紫色結(jié)晶完全溶解；用酶標(biāo)儀于570 nm處測(cè)定各孔的吸光值（Abs570），以吸光值反映細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制。

1.2.4細(xì)胞損傷模型的建立SH-SY5Y細(xì)胞接種于96孔板培養(yǎng)48 h后棄培養(yǎng)液，每孔加入100 μL含不同濃度的丙烯酰胺溶液（終濃度100～700 μg/mL），37℃孵育2～12 h；棄去丙烯酰胺溶液，每孔加入100 μL培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)24 h，用MTT法測(cè)定細(xì)胞存活率，確定細(xì)胞損傷模型的丙烯酰胺濃度［7］。

1.2.5牛磺酸對(duì)丙烯酰胺致細(xì)胞損傷的保護(hù)作用

1.2.5.1細(xì)胞處理根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定?；撬岷捅０返膭┝俊?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)照組（正常細(xì)胞組）、?；撬?200組、丙烯酰胺損傷組、實(shí)驗(yàn)組（高、中、低濃度的?；撬?丙烯酰胺）。SH-SY5Y細(xì)胞接種于96孔板培養(yǎng)48 h后棄去培養(yǎng)液，然后給予?；撬岷捅０诽幚?。具體步驟如下：實(shí)驗(yàn)組每孔先加入50 μL?；撬崛芤海ńK濃度為50、100、200 μg/mL），對(duì)照組、?；撬?200組和損傷組給予等體積的不含血清的DMEM培養(yǎng)液，37℃預(yù)孵育1 h后，對(duì)照組再加入50 μL不含血清的DMEM培養(yǎng)液，牛磺酸-200組再加入50 μL?；撬崛芤海ńK濃度200 μg/mL）；其余組均加入50 μL丙烯酰胺（終濃度300 μg/mL），進(jìn)行損傷處理（細(xì)胞于37℃繼續(xù)孵育8 h）。損傷處理結(jié)束后，所有組均棄去各孔中的樣品溶液，加100 μL細(xì)胞培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)24 h。用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，并進(jìn)行細(xì)胞存活率和LDH釋放率的測(cè)定。

1.2.5.2細(xì)胞形態(tài)的觀察接種于96孔培養(yǎng)板的細(xì)胞經(jīng)?；撬岷捅０诽幚斫Y(jié)束后，在倒置顯微鏡下觀察并拍照，物鏡放大倍數(shù)為10倍，目鏡放大倍數(shù)為10倍，總放大倍數(shù)為100倍。

1.2.5.3LDH釋放量的測(cè)定將SH-SY5Y細(xì)胞接種于24孔細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)24 h后棄培養(yǎng)液，每孔先加入500 μL?；撬幔ńK濃度50、100、200 μg/mL）預(yù)孵育1 h，再加入500 μL丙烯酰胺（終濃度300 μg/mL）進(jìn)行損傷處理8 h。損傷處理結(jié)束后收集各孔內(nèi)溶液至1.5 mL離心管中，500 r/min離心10 min。取100 μL離心后的上清液，加2 mL Tris-EDTA-NADH溶液，混合，37℃孵育10 min，再加入200 μL預(yù)熱（37℃）過(guò)的丙酮酸鈉溶液，快速混勻（限制在3 s內(nèi)），用紫外分光光度計(jì)在340 nm處測(cè)定吸光值，并記錄3 min反應(yīng)時(shí)吸光值的下降數(shù)值，LDH釋放率用實(shí)驗(yàn)組的吸光值下降數(shù)值與對(duì)照組的吸光值下降數(shù)值的比值表示［8］。

1.2.6統(tǒng)計(jì)分析每個(gè)實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次，每個(gè)重復(fù)測(cè)定三次，結(jié)果表示為Means±SD。采用MINITAB 13.20軟件進(jìn)行One-way ANOVA分析。鄧肯氏多重檢驗(yàn)用來(lái)確定數(shù)據(jù)間的差異，顯著水平為p＜0.05。

2　結(jié)果與分析

2.1牛磺酸對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞生長(zhǎng)的影響

從表1可以看出，用50～200 μg/mL的?；撬釋?duì)SH-SY5Y細(xì)胞孵育4 h，?；撬岵粌H對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)抑制作用，還顯著促進(jìn)了細(xì)胞的生長(zhǎng)；當(dāng)濃度達(dá)到400 μg/mL時(shí)，?；撬釋?duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有顯著抑制作用，細(xì)胞存活率低于90%。孵育6～8 h，?；撬釣?0～200 μg/mL時(shí)，對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞的生長(zhǎng)無(wú)促進(jìn)也無(wú)抑制作用，濃度為400 μg/mL時(shí)會(huì)顯著抑制細(xì)胞的生長(zhǎng)，存活率下降至84.2%。最終確定用濃度為50、100、200 μg/mL的牛磺酸來(lái)探討對(duì)丙烯酰胺致SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。

表1　牛磺酸對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞生長(zhǎng)的影響Table 1　Effect of taurine on cell growth of SH-SY5Y

2.2丙烯酰胺對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制

從圖1可以看出，丙烯酰胺濃度介于100～400 μg/mL時(shí)，孵育4～6 h，對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞的生長(zhǎng)影響較小，細(xì)胞存活率為90%以上，和對(duì)照組相比無(wú)顯著差異；隨著丙烯酰胺濃度繼續(xù)升高，細(xì)胞存活率顯著降低，最低為70%；孵育8 h時(shí)，丙烯酰胺濃度為100 μg/mL即顯著抑制SH-SY5Y細(xì)胞的生長(zhǎng)，細(xì)胞存活率降至81%；丙烯酰胺為300 μg/mL時(shí)，細(xì)胞的存活率為70%；當(dāng)丙烯酰胺為700 μg/mL時(shí)，細(xì)胞的存活率僅為52%，該結(jié)果與文獻(xiàn)的研究結(jié)果基本一致［9-10］。因此，選用濃度為300 μg/mL的丙烯酰胺對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞孵育8 h建立細(xì)胞損傷模型。Okuno等［9］研究表明丙烯酰胺對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞具有毒性作用，細(xì)胞的存活率與丙烯酰胺的濃度和孵育時(shí)間呈依賴性。用0.5～5 mmoL/L的丙烯酰胺對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞孵育20 h，細(xì)胞存活率最低70%；用5 mmoL/L的丙烯酰胺孵育0～24 h，細(xì)胞存活率也隨時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸下降，最低約70%。用1～5 mmoL/L的丙烯酰胺對(duì)SHSY5Y細(xì)胞孵育20 h，結(jié)果表明細(xì)胞存活率隨丙烯酰胺濃度的增加而逐漸下降，最低至約30%［10］。

圖1　丙烯酰胺對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用Fig.1　Inhibitory effect of acrylamide on cell growth of SH-SY5Y

2.3牛磺酸對(duì)丙烯酰胺致SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用

2.3.1細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化如圖2所示，正常對(duì)照組的SH-SY5Y細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常，呈錐體狀并有明顯的軸突，胞體均勻分布，輪廓清晰、胞漿均勻。單獨(dú)加?；撬幔?00 μg/mL）孵育8 h，SH-SY5Y細(xì)胞同樣生長(zhǎng)良好，胞體均勻分布，與對(duì)照組無(wú)差別。單獨(dú)加丙烯酰胺孵育8 h，活細(xì)胞數(shù)量明顯減少，貼壁細(xì)胞變稀疏，細(xì)胞胞體皺縮、脫落、死亡；存活的細(xì)胞體積明顯變小，細(xì)胞長(zhǎng)得不飽滿，胞質(zhì)回縮，大小不一致。經(jīng)不同濃度的?；撬岜Ｗo(hù)后，細(xì)胞損傷程度明顯減輕，和丙烯酰胺損傷組相比，細(xì)胞形態(tài)有明顯改善，活細(xì)胞數(shù)量明顯增多，且?；撬岬臐舛仍礁?，對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用越大，中、高劑量保護(hù)組之間活細(xì)胞數(shù)量差異不明顯（圖2）。

圖2　?；撬釋?duì)丙烯酰胺致SH-SY5Y細(xì)胞形態(tài)改變的保護(hù)作用Fig.2　Protective effect of taurine on morphological change induced by acrylamide in SH-SY5Y cell

2.3.2細(xì)胞存活率和LDH釋放率本實(shí)驗(yàn)以MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率，對(duì)照組對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞孵育8 h，細(xì)胞生長(zhǎng)良好，存活率為99.4%；單獨(dú)加入丙烯酰胺作用8 h，SH-SY5Y細(xì)胞的生長(zhǎng)明顯受到抑制，細(xì)胞存活率僅為67.6%；經(jīng)不同濃度的牛磺酸保護(hù)后，?；撬釣?0、100和200 μg/mL時(shí)，SH-SY5Y細(xì)胞的存活率分別為81.6%、92.7%、89.7%，細(xì)胞存活率顯著增強(qiáng)。高、中劑量的?；撬釋?duì)細(xì)胞的保護(hù)作用顯著高于低劑量組（表2）。

表2還顯示了不同組中LDH的釋放量情況。與對(duì)照組相比，丙烯酰胺單獨(dú)作用SH-SY5Y細(xì)胞8 h后，細(xì)胞LDH的釋放率顯著升高，達(dá)到188.5%，說(shuō)明丙烯酰胺對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞具有毒性作用，細(xì)胞膜受損，導(dǎo)致LDH釋放到膜外的量增加。經(jīng)不同濃度的?；撬岜Ｗo(hù)后，LDH釋放程度呈現(xiàn)出下降趨勢(shì)，和丙烯酰胺損傷組相比均有顯著降低，且添加物濃度越高，對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用越強(qiáng)。和正常對(duì)照組比較，高、中、低濃度的?；撬岜Ｗo(hù)組中LDH釋放率分別為：113.3%、138.8%、150.7%，高劑量組對(duì)細(xì)胞的保護(hù)作用明顯高于中、低劑量組。

MTT和LDH的結(jié)果顯示，?；撬釋?duì)丙烯酰胺導(dǎo)致的SH-SY5Y細(xì)胞損傷具有顯著的保護(hù)作用，保護(hù)作用與?；撬岬奶砑訚舛扔嘘P(guān)。

表2　?；撬釋?duì)丙烯酰胺致SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)作用Table 2　Protective effect of taurine on acrylamide-induced cytotoxicity in SH-SY5Y cell

3　討論

已有大量文獻(xiàn)報(bào)道丙烯酰胺具有一定的細(xì)胞毒性作用。用10～100 μmol/L的丙烯酰胺對(duì)小鼠腎上皮細(xì)胞孵育7 d，丙烯酰胺可明顯抑制細(xì)胞分化，表現(xiàn)為細(xì)胞集落數(shù)目減少，出現(xiàn)細(xì)胞脫落、漂浮、細(xì)胞碎片等現(xiàn)象，蛋白質(zhì)含量下降，說(shuō)明該濃度范圍的丙烯酰胺對(duì)新生小鼠腎上皮細(xì)胞有明顯的毒作用［4］。Sumizawa等［10-11］研究表明丙烯酰胺（1～3 mmoL/L）能降低SH-SY5Y細(xì)胞的存活率，增加LDH的釋放量；丙烯酰胺還誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞在sub G1周期中的數(shù)量顯著增加，激活細(xì)胞內(nèi)的caspase-3活性，從而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。

?；撬峋哂锌寡趸饔茫芮宄踝杂苫?，抑制細(xì)胞膜的過(guò)氧化損傷。胡錦東等［12］研究發(fā)現(xiàn)?；撬峥赊卓广U引起的大鼠肝脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，使染鉛大鼠體內(nèi)的丙二醛含量下降，并明顯恢復(fù)超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活力，使其恢復(fù)到正常對(duì)照組水平，體現(xiàn)了?；撬岬谋Ｗo(hù)作用。莊園等［13］研究了?；撬釋?duì)高溫處理后神經(jīng)上皮細(xì)胞存活和分化的影響。結(jié)果顯示：?；撬釋?duì)高溫處理后神經(jīng)管上皮細(xì)胞的存活具有保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，?；撬釋?duì)丙烯酰胺致SH-SY5Y細(xì)胞損傷有顯著的保護(hù)作用，說(shuō)明?；撬釋?duì)細(xì)胞具有很好的保護(hù)作用，能夠抑制丙烯酰胺的細(xì)胞損傷作用，推測(cè)?；撬釋?duì)丙烯酰胺致細(xì)胞損傷的抑制作用通過(guò)兩種途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)：a.?；撬崤c丙烯酰胺結(jié)合形成加合物，降低了細(xì)胞孵育液中丙烯酰胺的濃度，從而減弱其對(duì)細(xì)胞的損傷作用。作者已證實(shí)在化學(xué)反應(yīng)體系中?；撬峥膳c丙烯酰胺結(jié)合形成加合物［14］。b.牛磺酸具有抗氧化作用，能清除氧自由基，穩(wěn)定細(xì)胞膜，減弱了丙烯酰胺對(duì)細(xì)胞造成的損傷作用。

4　結(jié)論

用濃度為50～200 μg/mL的?；撬釋?duì)SH-SY5Y細(xì)胞孵育8 h，對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)無(wú)任何影響。用丙烯酰胺（300 μg/mL）對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞孵育8 h，細(xì)胞存活率顯著下降；而經(jīng)?；撬幔?0、100、200 μg/mL）保護(hù)后，細(xì)胞存活率顯著提高，LDH釋放量顯著降低。這表明?；撬嵩跐舛葹?0～200 μg/mL時(shí)對(duì)丙烯酰胺誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用，保護(hù)作用強(qiáng)弱依次為：中劑量組＞高劑量組＞低劑量組。

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Protective effects of taurine on SH-SY5Y cells injury induced by acrylamide

HAO Rui-fang1，JING Hao2，*
（1.Department of horticulture，Shanxi Forestry Vocational Institute，Taiyuan 030009，China；2.College of Food Science and Nutritional Engineering，China Agricultural University，Beijing 100083，China）

The preventive effects of taurine on acrylamide-induced cell injuries of human neuroblastoma cells（SH-SY5Y）were investigated by using cellular morphology，MTT assay and LDH assay.The results showed that the cell viabilities were decreased to 52%～81%when SH-SY5Y cells were incuvated 8 h with acrylamide of 100～700 μg/mL，which showed that acrylamide induced the cell membrane damage and LDH release outside cell membrane.The cell viability was decreased to 67.6%and LDH release rate was increased to 188.5%when SH-SY5Y cells were only incubated 8 h with acrylamide of 300 μg/mL in acrylamide injury group. However，when SH-SY5Y cells were pre-protected 1 h with taurine of 50，100 and 200 μg/mL before incubation 8 h with acrylamide of 300 μg/mL，taurine resulted in significant increases of SH-SY5Y cell viability to 81.6%，92.7%and 89.7%，and decreases of LDH release to 150.7%，138.8%and 113.3%as compared with that in acrylamide injury group.These demonstrated that taurine could protect SH-SY5Y cells from acrylamideinduced injury.

taurine；acrylamide；SH-SY5Y cells；injury

TS201.2

A

1002-0306（2015）20-0364-04

10.13386/j.issn1002-0306.2015.20.066

2015－01－30

郝瑞芳（1978-），女，博士，講師，研究方向：食品安全與質(zhì)量控制，E-mail：471518969@qq.com。

景浩（1957-），男，博士，教授，研究方向：生物活性物質(zhì)與功能性食品，E-mail：106263189@qq.com

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（31171676）。