γ-氨基丁酸對DEHP染毒大鼠焦慮行為的干預(yù)研究

劉　輝，郭佑廷，黃少文，楊　婕，楊童旺，孫遠(yuǎn)明，*，柳春紅，*（．華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，廣東省食品質(zhì)量安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評估實(shí)驗(yàn)室，廣東廣州50642；2．廣東產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，廣東佛山528300）

γ-氨基丁酸對DEHP染毒大鼠焦慮行為的干預(yù)研究

劉輝1，2，郭佑廷1，黃少文1，楊婕1，楊童旺1，孫遠(yuǎn)明1，*，柳春紅1，*
（1．華南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，廣東省食品質(zhì)量安全重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評估實(shí)驗(yàn)室，廣東廣州510642；2．廣東產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，廣東佛山528300）

目的：研究γ-氨基丁酸（GABA）對鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）染毒大鼠焦慮行為的影響。方法：將30只雄性SD大鼠隨機(jī)分為5組：對照組（C）、DEHP組（500 mg/kg）、GABA低、中、高劑量干預(yù)組（L組：500 mg/kg DEHP+ 1 mg/kg GABA、M組：500 mg/kg DEHP+2 mg/kg GABA、H組：500 mg/kg DEHP+4 mg/kg GABA），連續(xù)干預(yù)30 d。利用高架十字迷宮（EPM）測定干預(yù)前后大鼠行為變化，隨后測定大鼠額葉皮質(zhì)五羥色胺（5-HT）、去甲腎上腺素（NE）的水平。結(jié)果：干預(yù)前各組大鼠EPM指標(biāo)無顯著性差異（p＞0.05）；干預(yù)后H組和C組總食物利用率顯著高于DEHP組（p＜0.05）；干預(yù)后各組大鼠入臂總次數(shù)無顯著性差異（p＞0.05），DEHP組大鼠開臂時(shí)間百分比、開臂次數(shù)百分比均極顯著低于對照組（p＜0.01），M組和H組開臂時(shí)間百分比及開臂次數(shù)百分比均顯著高于DEHP組（p＜0.05）；DEHP組5-HT和NE均顯著高于C組（p＜0.05），M組5-HT及NE均顯著低于DEHP組（p＜0.05），H組5-HT及NE均極顯著低于DEHP組（p＜0.01）。結(jié)論：DEHP可能通過升高額葉皮質(zhì)5-HT、NE水平造成大鼠焦慮，GABA可以通過降低額葉皮質(zhì)5-HT、NE水平起到改善焦慮的作用。

γ-氨基丁酸，鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯，焦慮，五羥色胺，去甲腎上腺素

鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）是鄰苯二甲酸酯類中最常用的一種增塑劑，每年生產(chǎn)量高達(dá)400萬噸［1］，被廣泛用于塑料、合成橡膠、涂料、黏合劑、化工合成、食品包裝盒、醫(yī)療用具等領(lǐng)域［2］。DEHP廣泛使用的同時(shí)也帶來一定的危害，研究表明DEHP具有生殖毒性、發(fā)育毒性、免疫毒性以及神經(jīng)毒性等［3-6］。目前針對DEHP毒性的干預(yù)研究較少，尤其是神經(jīng)毒性的干預(yù)研究更少。

γ-氨基丁酸（GABA）作為一種非蛋白質(zhì)天然氨基酸，廣泛分布在動(dòng)物、植物和微生物體中，作為哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）重要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，具有降血壓、改善腎功能和鎮(zhèn)靜等生理作用［7］，研究表明GABA能夠改善焦慮情緒［8-9］。五羥色胺（5-HT）和去甲腎上腺素（NE）是CNS重要的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，與情緒密切相關(guān)［10-12］，同時(shí)，由于額葉皮質(zhì)與情緒關(guān)系密切［13］，因此，本項(xiàng)目將結(jié)合大鼠額葉皮質(zhì)5-HT及NE水平的變化研究DEHP對大鼠焦慮行為的影響，并探討GABA能否改善由DEHP引起的神經(jīng)毒性，為富含GABA的食物及保健品開發(fā)提供參考。

1　材料與方法

1.1材料與儀器

DEHP（純度≥99.5%）、GABA（純度＞99%） 美國Sigma公司；大鼠5-HT ELISA試劑盒、大鼠NE ELISA試劑盒上海江萊生物科技有限公司；考馬斯亮藍(lán)試劑盒南京建成生物工程研究所；SPF級雄性SD大鼠30只，5～6周齡，體重（150±10）g，動(dòng)物及飼料均購自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號：SCXK（粵）2008-0002，華南農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心許可證號：SYXK（粵）2014-0136。

玻璃勻漿器廣州精科化玻儀器公司；5417R冷凍高速離心機(jī)德國Eppendorf公司；Multiskan Mk3型酶標(biāo)儀美國Thermo Fisher公司；Enspire Xenon Light Module-多功能酶標(biāo)儀美國PE公司；EL204-IC電子天平瑞士METTLER TOLEDO公司；DK-600電熱恒溫水浴箱上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；EthoVision XT 8.0動(dòng)物行為軌跡跟蹤系統(tǒng)荷蘭Noldus公司；高架十字迷宮（elevated plus-maze，EPM） 上海移數(shù)信息科技有限公司。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1動(dòng)物染毒及干預(yù)大鼠單籠飼養(yǎng)，光/暗周期12 h/12 h（光照時(shí)間07：00～19：00），室內(nèi)溫度為（22± 0.5）℃，濕度為50%～60%。大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d，適應(yīng)期內(nèi)所有大鼠自由攝食和飲水。適應(yīng)期后按體重采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)分組法分為5組：對照組，染毒組，GABA低、中、高劑量干預(yù)組，每組6只。對照組：玉米油；染毒組：DEHP 500 mg/kg；低劑量干預(yù)組：DEHP 500 mg/kg+GABA 1 mg/kg；中劑量干預(yù)組：DEHP 500 mg/kg+GABA 2 mg/kg；高劑量干預(yù)組：DEHP 500 mg/kg+GABA 4 mg/kg。每天上午9∶00干預(yù)組灌胃GABA（溶于生理鹽水），對照組與染毒組灌胃等體積生理鹽水；1 h后干預(yù)組與染毒組灌胃DEHP（溶于玉米油），對照組灌胃等體積玉米油，連續(xù)灌胃30 d。每6 d同一時(shí)間稱量體重與食物消耗量，并計(jì)算食物利用率。食物利用率：一段時(shí)間內(nèi)體重增加的克數(shù)除以飼料消耗的克數(shù)乘以100（100×體重增加量/鼠糧消耗量）；總食物利用率：整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間體重增加的克數(shù)除以飼料消耗的克數(shù)乘以100（100×體重增加量/鼠糧消耗量）。行為學(xué)測試前1周所有大鼠每天接受3 min撫摸以減少無關(guān)刺激。

1.2.2高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)行為實(shí)驗(yàn)前，徹底清潔高架十字迷宮。干預(yù)前后均提前1 h將大鼠轉(zhuǎn)移至行為學(xué)實(shí)驗(yàn)室，以適應(yīng)環(huán)境。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，實(shí)驗(yàn)者雙手從籠內(nèi)輕輕取出大鼠（背對實(shí)驗(yàn)者），將大鼠面向開臂放入中央平臺(tái)，實(shí)驗(yàn)者立即離開，通過動(dòng)物行為軌跡跟蹤系統(tǒng)采集大鼠5 min內(nèi)在EPM中的活動(dòng)信息，分別測定大鼠在EPM中：進(jìn)入開臂次數(shù)（open arm entries，OE）、進(jìn)入開臂時(shí)間（open arm time，OT）、進(jìn)入閉臂次數(shù)（closed arm entries，CE）、進(jìn)入閉臂時(shí)間（closed arm time，CT）。分別計(jì)算大鼠進(jìn)入開臂次數(shù)百分比（OE%），OE%=OE（/OE+CE）×100；開臂停留時(shí)間百分比（OT%），OT%=OT（/OT+CT）×100；入臂總次數(shù)（total entries，TE），TE=OE+CE。每次信息采集完畢，將大鼠排泄物清理干凈，用75%的酒精徹底清潔高架十字迷宮并擦干，然后再進(jìn)行下一只大鼠信息的采集。

1.2.35-HT及NE的測定行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)束，將大鼠斷頭取腦，在冰塊上迅速分離出額葉皮質(zhì)，立即放置于-80℃冰箱保存。測定前用預(yù)冷的PBS溶液沖洗額葉皮質(zhì)表面的血跡，濾紙吸干，在冰水浴中，用PBS溶液將額葉皮質(zhì)制成10%的額葉皮質(zhì)勻漿。按照試劑盒的方法分別測定5-HT、NE及蛋白濃度。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用Origin8.0作圖，SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用±s表示。多組間比較采用單因素方差分析。進(jìn)一步進(jìn)行組間兩兩比較，若方差齊時(shí)，采用LSD檢驗(yàn)；若方差不齊，采用Tamhane’s檢驗(yàn)，差異顯著水平為p＜0.05，極顯著水平為p＜0.01。

2　結(jié)果與分析

2.1干預(yù)前高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)

EPM是國際上公認(rèn)的評價(jià)焦慮反應(yīng)的方法，利用動(dòng)物對新異環(huán)境的探究特性和對高懸開放臂的恐懼心理，形成矛盾沖突狀態(tài)，從而反映動(dòng)物的焦慮水平［14-15］。干預(yù)前各組大鼠高架十字迷宮指標(biāo)無顯著性差異（見表1），說明各組大鼠處于同一行為學(xué)水平。

表1　干預(yù)前各組大鼠高架十字迷宮行為比較（±s，n=6）Table 1　Comparison of elevated plus-maze behavior of rats before the experimental intervention（±s，n=6）

表1　干預(yù)前各組大鼠高架十字迷宮行為比較（±s，n=6）Table 1　Comparison of elevated plus-maze behavior of rats before the experimental intervention（±s，n=6）

組別　TE　OT（%）　OE（%）對照組　21.17±6.85　19.55±6.71　28.03±6.23染毒組　23.33±9.11　25.81±14.63　35.27±9.04低劑量干預(yù)組　25.67±4.41　27.15±12.52　30.63±11.46中劑量干預(yù)組　25.00±10.12　25.72±17.71　31.35±12.96高劑量干預(yù)組　23.00±6.81　27.29±18.16　36.01±7.41

2.2體重

實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠體重隨時(shí)間逐漸升高；實(shí)驗(yàn)期末染毒組體重最??；從6 d開始干預(yù)組大鼠體重隨GABA劑量增加有升高趨勢；實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠體重?zé)o顯著性差異（見圖1）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，DEHP沒有造成大鼠體重明顯降低；胡帥爾等［16］給予SD大鼠連續(xù)灌胃4周DEHP（50.0、158.2、500.0 mg/kg），并未發(fā)現(xiàn)SD大鼠體重顯著變化；梁添等［17］給SD大鼠灌服DEHP（150、450、1350 mg/kg）連續(xù)4周同樣未發(fā)現(xiàn)體重明顯變化。

圖1　實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠體質(zhì)量的變化（±s，n=6）Fig.1　Body weight changes of rats during the experiment（±s，n=6）

2.3食物利用率

從6 d開始，各劑量組食物利用率隨時(shí)間變化呈現(xiàn)降低趨勢；但在各時(shí)間點(diǎn)，食物利用率則隨劑量增加而呈升高趨勢。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，染毒組總食物利用率顯著低于對照組（p＜0.05）；高劑量干預(yù)組總食物利用率顯著高于染毒組（p＜0.05）；中劑量和高劑量干預(yù)組與對照組相比，總食物利用率無顯著性差異（p＞0.05）（見表2）。

表2　實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠食物利用率的變化（±s，n=6）Table 2　Changes in food utilization rate of rats during the experimen（tx±s，n=6）

表2　實(shí)驗(yàn)期間各組大鼠食物利用率的變化（±s，n=6）Table 2　Changes in food utilization rate of rats during the experimen（tx±s，n=6）

注：*：與對照組相比，p＜0.05；**：與對照組相比，p＜0.01；#：與染毒組相比，p＜0.05；##：與染毒組相比，p＜0.01；表3、圖2同。

組別　6 d　12 d　18 d　24 d　30 d　總食物利用率對照組　31.98±2.70　31.38±1.93　26.37±0.55　23.77±1.67　20.03±1.06　26.63±0.62染毒組　30.51±3.12　29.45±2.08　24.12±1.72　20.76±3.57　10.47±6.24　23.31±1.74*低劑量干預(yù)組　30.58±2.57　30.48±1.37　24.29±1.87　21.00±1.91　14.14±4.58　23.99±1.06**中劑量干預(yù)組　30.13±0.35　30.63±2.82　25.11±3.65　21.32±3.06　19.17±2.81　25.21±1.82高劑量干預(yù)組　32.42±3.40　31.74±1.00　25.75±0.54　23.18±1.61　21.63±2.60　26.98±0.47#

DEHP雖然沒有引起大鼠體重顯著變化，但顯著地下調(diào)大鼠總食物利用率，而中劑量和高劑量GABA能夠改善這一趨勢。食物利用率可能受多種因素影響，如藥物作用、糧食適口性、能量消耗變化等［18］。本研究中各組大鼠所處環(huán)境相同，飼養(yǎng)條件一致，染毒組大鼠總食物利用率下降，說明DEHP干擾了大鼠對食物的吸收利用。梁添等［17］給SD大鼠灌服DEHP（150、450、1350 mg/kg）連續(xù)4周發(fā)現(xiàn)DEHP 1350 mg/kg組從第3周開始食物利用率顯著下調(diào)，且總食物利用率也明顯降低；DEHP 450 mg/kg組在第4周時(shí)大鼠食物利用率顯著降低，總食物利用率雖然也降低，但變化并不顯著，這一點(diǎn)與本實(shí)驗(yàn)不同，可能是因?yàn)楸狙芯緿EHP劑量高于450 mg/kg。歐陽俊彥等［9］利用GABA（0.5、1、2 mg/kg）干預(yù)情緒應(yīng)激大鼠的焦慮癥狀，發(fā)現(xiàn)焦慮模型組大鼠總食物利用率顯著降低，這一點(diǎn)與本研究一致；但GABA干預(yù)未能改善總食物利用率，這與本實(shí)驗(yàn)的中高劑量能夠改善食物利用率的效應(yīng)則不一樣，推測可能是由于歐陽俊彥等采用的是物理方法使大鼠產(chǎn)生情緒應(yīng)激，而本研究是生化應(yīng)激，致焦慮的原理不同，也有可能是GABA劑量不同造成的。

2.4干預(yù)后高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)期末各組大鼠TE無顯著性差異（p＞0.05）；染毒組大鼠OT（%）、OE（%）均極顯著低于對照組（p＜0.01）。隨著GABA劑量的增加干預(yù)組OT（%）呈升高趨勢；經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，中劑量干預(yù)組和高劑量干預(yù)組OT（%）顯著高于染毒組（p＜0.05），中劑量干預(yù)組和高劑量干預(yù)組OE%顯著高于染毒組（p＜0.05）（見表3）。

分析干預(yù)后大鼠行為學(xué)指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，在EPM行為學(xué)實(shí)驗(yàn)中，各組大鼠TE無顯著性差異，染毒組大鼠OT（%）、OE（%）均極顯著低于對照組，說明DEHP染毒使大鼠產(chǎn)生焦慮癥狀，Carbone S等［19］通過研究出生后1～45 d暴露于30 mg/kg DEHP的青春期雄性大鼠發(fā)現(xiàn)大鼠產(chǎn)生焦慮癥狀，具體表現(xiàn)為EPM實(shí)驗(yàn)中OT（%）和OE（%）顯著降低；徐曉虹等［20］通過給母鼠從妊娠第7 d至產(chǎn)后21 d灌服DEHP，發(fā)現(xiàn)10 mg/kg DEHP會(huì)導(dǎo)致6周齡仔鼠在EPM中OT和OE顯著降低，表現(xiàn)出焦慮水平增高。本研究中劑量干預(yù)組和高劑量干預(yù)組OT（%）及OE（%）兩指標(biāo)均顯著高于染毒組，證明2 mg/kg GABA和4 mg/kg GABA均可以改善染毒大鼠焦慮水平，并且4 mg/kg GABA改善效果更顯著。歐陽俊彥等［21］在研究GABA對情緒應(yīng)激大鼠血脂的影響時(shí)，發(fā)現(xiàn)焦慮組大鼠在EPM實(shí)驗(yàn)中OT（%）和OE（%）均顯著降低，而2 mg/kg GABA組大鼠OT（%）和OE（%）恢復(fù)到正常水平，表現(xiàn)出改善大鼠焦慮的作用，這一效果與本研究一致。

表3　干預(yù)后各組大鼠高架十字迷宮行為比較（±s，n=6）Table 3　Comparison of open-field test behavior of rats after theexperimental intervention（±s，n=6）

表3　干預(yù)后各組大鼠高架十字迷宮行為比較（±s，n=6）Table 3　Comparison of open-field test behavior of rats after theexperimental intervention（±s，n=6）

組別　TE　OT（%）　OE（%）對照組　20.00±4.90　41.70±13.77　50.19±11.39染毒組　18.50±4.28　8.34±10.94**　15.30±15.55**低劑量干預(yù)組　18.33±7.31　24.06±18.53　30.91±20.68中劑量干預(yù)組　18.67±2.16　35.54±26.12#　43.30±24.27#高劑量干預(yù)組　20.50±5.65　39.66±26.43#　42.65±19.97#

2.5額葉皮質(zhì)5-HT、NE水平

染毒組5-HT和NE均顯著高于對照組（p＜0.05）；隨著GABA干預(yù)劑量的增加5-HT及NE呈現(xiàn)下降趨勢，中劑量干預(yù)組5-HT和NE顯著低于染毒組（p＜0.05），高劑量干預(yù)組5-HT和NE極顯著低于染毒組（p＜0.01）（見圖2）。

圖2　各組大鼠額葉皮質(zhì)5-HT、NE水平的變化（±s，n=6）Fig.2　Changes in the frontal cortex of rats 5-HT、NE levels（±s，n=6）

額葉病變不僅能改變認(rèn)知功能、行為和決策能力，也能影響情感和情緒。情緒的中樞環(huán)路有額葉皮質(zhì)、前扣帶回、海馬、島葉和杏仁核等結(jié)構(gòu)，每一結(jié)構(gòu)對不同的情緒成分發(fā)揮獨(dú)特的作用，而額葉皮質(zhì)和海馬是調(diào)控正性和負(fù)性情緒的關(guān)鍵部位，焦慮癥患者的額葉皮質(zhì)功能有變化。研究各組大鼠額葉皮質(zhì)指標(biāo)發(fā)現(xiàn)，染毒組5-HT、NE均顯著高于對照組，證明DEHP對額葉皮質(zhì)造成損傷，王明霞等［22］通過給小鼠連續(xù)灌服540 mg/kg DEHP 15 d發(fā)現(xiàn)小鼠腦組織5-HT顯著增高，NE未發(fā)生顯著變化，可能由于染毒動(dòng)物的種類和時(shí)長與本研究不同，故NE未發(fā)生顯著變化。而本研究中2 mg/kg GABA和4 mg/kg GABA干預(yù)都能夠顯著降低5-HT、NE水平，證明GABA能夠一定程度的改善這種損傷作用，并且4 mg/kg GABA改善效果更顯著。

GABA、5-HT及NE之間的失平衡與焦慮情緒密切相關(guān)［11，23］，大量的研究表明焦慮通常伴隨5-HT及NE的顯著上升［24-26］，用藥物損害GABA可導(dǎo)致興奮和抑制失衡，引起過度興奮以及焦慮等異常情緒產(chǎn)生；增強(qiáng)GABA能的活動(dòng)可有效地治療焦慮癥［28］，且GABA能通路在中腦經(jīng)邊緣結(jié)構(gòu)至皮質(zhì)的所有水平均可抑制5-HT、NE等興奮性傳導(dǎo)通路［27-29］。因此，外源性GABA的攝入可能通過抑制額葉皮質(zhì)5-HT及NE的水平而改善了由DEHP染毒引起的大鼠焦慮癥狀。

3　結(jié)論

本研究通過EPM實(shí)驗(yàn)證實(shí)DEHP具有致焦慮的作用；DEHP可能通過升高大鼠額葉皮質(zhì)5-HT及NE的水平而導(dǎo)致大鼠產(chǎn)生焦慮情緒；通過外源性GABA的攝入降低了染毒大鼠額葉皮質(zhì)5-HT及NE的水平從而改善了大鼠的焦慮水平。本研究為GABA以及富含GABA食物的深加工提供了一定的借鑒，同時(shí)也為DEHP毒性干預(yù)研究提供了思路。

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Intervention effect of Gamma aminobutyric acid on anxiety behavior induced by di（2-ethylhexyl）phthalate in rats

LIU Hui1，2，GUO You-ting1，HUANG Shao-wen1，YANG Jie1，YANG Tong-wang1，SUN Yuan-ming1，*，LIU Chun-hong1，*
（1.College of Food Science，South China Agriculture University，Guangdong Provincial Key Laboratory of Food Quality and Safety，Laboratory of Quality and Safety Risk Assessment in Agricultural Products Preservation Ministry of Agriculture，Guangzhou 510642，China；2.Guangdong Testing Institute of Product Quality Supervision，F(xiàn)oshan 528300，China）

Objective：To investigate the effect of γ-aminobutyric acid（GABA）on the neurobehavior of rats induced by di（2-ethylhexyl）phthalate（DEHP）.Methods：30 male Sprague-Dawley rats were divided into 5 groups randomly：control group，DEHP group（500 mg/kg DEHP），low GABA group（L：500 mg/kg DEHP and 1 mg/kg GABA），medium GABA group（M：500 mg/kg DEHP and 2 mg/kg GABA），and high GABA group（H：500 mg/kg DEHP and 4 mg/kg GABA）.The interventions for DEHP exposure continued for 30 consecutive days.Behavioral changes of rats before and after interventions were assessed in the elevated plus maze test（EPM），and the levels of serotonin（5-HT）and norepinephrine（NE）in prefrontal cortex of rats were measured. Results：No significant differences were found in the EPM among the five groups（p＞0.05）before interventions. DEHP and GABA treatment had no significant effects on the body weight of rats.The total food utilization rate of H group and C group were higher than DEHP group（p＜0.05）.The total entrance was not significantly different among different groups（p＞0.05）after interventions.DEHP group had decreased percentage of time spent in open arms and entrance frequency to open arms than C group in the EPM test（p＜0.01）.The percentage of time spent in open arms and entrance frequency to open arms of M and H group were higher than DEHPgroup（p＜0.05）.The levels of 5-HT and NE of DEHP group were higher than C group（p＜0.05）.The levels of 5-HT and NE of M group were lower than DEHP group（p＜0.05）.The levels of 5-HT and NE of H group were lower than DEHP group（p＜0.01）.Conclusion：DEHP elevated 5-HT and NE levels in prefrontal cortex of rats and induces anxiety of rats.However，these effects induced by DEHP could be alleviated under GABA intervention through reducing 5-HT and NE in prefrontal cortex of rats.

γ-aminobutyric acid；di（2-ethylhexyl）phthalate；anxiety；serotonin；norepinephrine

TS201.4

A

1002-0306（2015）20-0354-05

10.13386/j.issn1002-0306.2015.20.064

2015－03－19

劉輝（1980-），男，博士，工程師，研究方向：食品技術(shù)檢測及食品安全風(fēng)險(xiǎn)評估，E-mail：lh403@163.com。

孫遠(yuǎn)明（1956-），男，博士，教授，研究方向：食品質(zhì)量與安全，E-mail：ymsun@scau.edu.cn。柳春紅（1968-），女，博士，教授，研究方向：營養(yǎng)及食品安全，E-mail：liuch@scau.edu.cn。

廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目（2012B090600005）；農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評估專項(xiàng)（GJFP2014011）。