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    蘭州百合鱗莖貯藏腐爛病原菌的鑒定及生物學(xué)特性

    2015-11-05 05:45:41鞏慧玲孫愛(ài)潔湯國(guó)綱袁惠君馮再平李善家蘭州理工大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院甘肅蘭州730050甘肅集森片裝鮮百合有限公司甘肅蘭州730000
    食品工業(yè)科技 2015年20期
    關(guān)鍵詞:生長(zhǎng)

    鞏慧玲,孫愛(ài)潔,李 茜,湯國(guó)綱,袁惠君,馮再平,李善家(.蘭州理工大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院,甘肅蘭州730050;.甘肅集森片裝鮮百合有限公司,甘肅蘭州730000)

    蘭州百合鱗莖貯藏腐爛病原菌的鑒定及生物學(xué)特性

    鞏慧玲1,孫愛(ài)潔1,李茜1,湯國(guó)綱2,袁惠君1,馮再平1,李善家1
    (1.蘭州理工大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院,甘肅蘭州730050;2.甘肅集森片裝鮮百合有限公司,甘肅蘭州730000)

    為確定引起蘭州百合鱗莖貯藏期間腐爛的病原菌,應(yīng)用柯赫氏法則測(cè)定了從病樣中分離的純培養(yǎng)物的致病性,根據(jù)形態(tài)學(xué)特性和ITS序列分析對(duì)病原菌進(jìn)行鑒定,并對(duì)病原菌的生物學(xué)特性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,引起蘭州百合鱗莖腐爛的病原菌分別是黃曲霉和米根霉。兩種病原菌的最適生長(zhǎng)條件相同,最適宜菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的培養(yǎng)基均是百合培養(yǎng)基和百合葡萄糖培養(yǎng)基,葡萄糖和蛋白胨為菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)孢的最適碳源和氮源,最適生長(zhǎng)溫度為25℃,在pH5~9范圍內(nèi)都可生長(zhǎng),光照有利于菌絲的生長(zhǎng)和產(chǎn)孢。

    蘭州百合,腐爛病,黃曲霉,米根霉,生物學(xué)特性

    百合(Lilium spp.)是百合科百合屬多年生球根草本植物,全世界約有90多種。根據(jù)用途可分為觀賞用百合、食用百合和藥用百合[1]。我國(guó)食用百合主要有甘肅蘭州百合、湖南邵陽(yáng)百合和江蘇宜興百合,各品系不僅營(yíng)養(yǎng)成分的含量有明顯差異,品質(zhì)和風(fēng)味也各不一樣,其中蘭州百合口味香甜,瓣大肉厚,品質(zhì)極佳[2]。據(jù)產(chǎn)地調(diào)查,蘭州百合鱗莖每年僅在10月中旬至11月中旬和2月上旬至3月上旬采收,采收后的百合鱗莖在貯運(yùn)過(guò)程易腐爛變質(zhì),從而造成較大經(jīng)濟(jì)損失,已成為遏制百合生產(chǎn)的重要因素之一。

    百合鱗莖貯藏期間的病害主要有真菌性和細(xì)菌性病害,真菌性病害主要有鱗莖基腐病、鱗莖青霉腐爛病、鱗莖根霉軟腐病、鱗莖斑點(diǎn)病、鱗莖炭疽病等,細(xì)菌性病害主要有軟腐病[3-7]。據(jù)報(bào)道,引起百合鱗莖貯藏期腐爛癥狀的真菌性病原菌主要有尖鐮孢菌(Fusarimoxysporum)、三隔鐮孢菌(Fusarium tricinctum)、層生鐮刀菌(Fusarium proliferatum)、黑曲霉(Aspergillus niger)、匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)、圓孤青霉(Penicilliumcyclopium)和簇狀青霉(Penicillium corymbiferum)等[5-10]。這些病原菌多是從觀賞百合腐爛鱗莖上分離得到的,而對(duì)引起食用百合鱗莖腐爛的病原菌的研究較少。因此,本研究對(duì)食用百合-蘭州百合鱗莖貯藏期腐爛病的病原進(jìn)行分離和鑒定,并對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行研究,從而為生產(chǎn)實(shí)踐中有效控制食用百合鱗莖貯藏腐爛病的發(fā)生提供理論基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1材料與儀器

    蘭州百合鱗莖腐爛病病害樣本采自蘭州市七里河區(qū)西果園鎮(zhèn)米家山百合保鮮冷庫(kù)和黃裕鄉(xiāng)百合保鮮冷庫(kù);馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基(PDA)、馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基(potato sucrose agar,PSA)、馬鈴薯麥芽糖培養(yǎng)基(potato maltose agar,PMA)、百合培養(yǎng)基(lily agar,LA)、百合葡萄糖培養(yǎng)基(lily dextrose agar,LDA)和查氏培養(yǎng)基(Czapek Dox agar,CDA)實(shí)驗(yàn)室自制;葡萄糖、蔗糖、麥芽糖均為分析純,購(gòu)自天津市大茂化學(xué)試劑廠。

    AB104-N電子分析天平梅特勒-托利多儀器上海有限公司;CJ-10超凈工作臺(tái)天津市泰斯特儀器有限公司;SHZ-82型恒溫振蕩器常州國(guó)華電器有限公司;SYQ-DSX-280B型手提式不銹鋼壓力蒸汽滅菌器上海申安醫(yī)療器械廠;RH-250-HS型珠江牌培養(yǎng)箱韶關(guān)市泰宏市醫(yī)療器械有限公司。

    1.2實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1病原菌的分離和致病性測(cè)定采集新近腐爛的百合鱗莖,采用組織分離法[11]在病健交界組織處切取4 mm×4 mm小塊,用75%酒精表面消毒30 s,再用2%次氯酸鈉消毒7 min,無(wú)菌水沖洗3次,然后置于PDA培養(yǎng)基上28℃黑暗培養(yǎng),待長(zhǎng)出菌絲后,挑取菌落邊緣進(jìn)行純化,純化后的菌落再進(jìn)行單孢分離培養(yǎng)。

    病原菌致病性測(cè)定根據(jù)柯赫氏法則[11-12],用滅菌的接種針在消毒后的鱗莖片上刺孔,將浸有菌液的濾紙片貼在孔上作為有傷接種,同時(shí)將浸有菌液的濾紙片貼在未刺孔的鱗莖片上作為無(wú)傷接種,將浸無(wú)菌水的濾紙片貼在孔上作為對(duì)照。接種處理完成后將鱗莖片置于培養(yǎng)皿中保濕培養(yǎng),5 d后觀察并記錄發(fā)病情況,確定病原菌對(duì)百合鱗莖的致病性。對(duì)接種發(fā)病的鱗莖片再次進(jìn)行病原菌的分離。

    1.2.2病原菌鑒定

    1.2.2.1病原菌形態(tài)學(xué)觀察將病原菌接種到PDA平板,28℃黑暗培養(yǎng)2~5 d,觀察菌落形態(tài),并在顯微鏡下觀察病原菌的菌絲及孢子的形態(tài)特征,測(cè)量孢子大小。

    1.2.2.2ITS序列分析將供試菌株接種于PDA培養(yǎng)基中;28℃恒溫培養(yǎng)4 d,收集菌絲體,采用CTAB法提取病原菌基因組DNA[13-14]。

    ITS通用擴(kuò)增引物為TS1(5’-TCCGTAGGTGAAC CTGCGG-3’)和TS4(5’-TCCTCCGCTTATTGATAT GC-3’)。

    擴(kuò)增體系:50 μL,基因組模板DNA 1 μL、10 μmol/L上下游引物各1 μL、2 mmol/L dNTPs 5 μL、KOD DNA聚合酶1 μL、10×KOD Buffer 5 μL,加ddH2O補(bǔ)足體積。

    PCR擴(kuò)增反應(yīng)程序?yàn)?4℃預(yù)變性3 min;94℃變性30 s;58℃復(fù)性30 s;72℃延伸3 min,35個(gè)循環(huán);72℃延伸10 min。

    擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后,由北京信諾金達(dá)生物技術(shù)有限公司測(cè)序。所得測(cè)序結(jié)果在NCBI網(wǎng)站上用BLAST軟件進(jìn)行同源性比較后,下載同源序列,用MEGA(molecular evolutionary genetics analysis,Version 6.0)軟件將病原菌ITS序列與同源序列進(jìn)行比對(duì),并采用鄰接法(Neighbor joining,NJ)構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù),自舉法(bootstrap)對(duì)系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)進(jìn)行檢驗(yàn),500次重復(fù)。

    1.2.3病原菌生物學(xué)特性將直徑5 mm的病原菌菌塊分別接種于供試培養(yǎng)基平板(直徑9 cm)中央,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),分析培養(yǎng)基種類、碳源、氮源、溫度、pH和光照時(shí)間對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響。采用PDA、PSA、PMA、LA和LDA培養(yǎng)基;培養(yǎng)溫度分別為5、15、25、35℃;pH分別為5、6、7、8和9;全光照、全黑暗和光照/黑暗各12 h;等量葡萄糖、果糖、乳糖和淀粉置換查氏基本培養(yǎng)基中的蔗糖,等量硫酸銨、硝酸銨、硝酸鉀和蛋白胨,置換查氏基本培養(yǎng)基中的硝酸鈉,并設(shè)空白對(duì)照。病原菌菌株Z1和Z2分別在以上各條件下培養(yǎng)5、2 d后(因菌株Z2生長(zhǎng)速度較快,因此縮短培養(yǎng)時(shí)間統(tǒng)計(jì)菌落生長(zhǎng)狀況),采用十字交叉法測(cè)量菌落生長(zhǎng)直徑作為菌絲生長(zhǎng)狀況指標(biāo),7 d后采用血球計(jì)數(shù)板法測(cè)量孢子產(chǎn)量[15-16]。

    1.3數(shù)據(jù)分析

    采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析,Duncan氏新復(fù)極差法檢驗(yàn)處理間差異顯著性。顯著水平p=0.05,每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。

    圖1 蘭州百合鱗莖腐爛病癥Fig.1 Sympton of Lanzhou lily rot

    2 結(jié)果與分析

    2.1百合鱗莖腐爛病癥狀及致病性

    蘭州百合鱗莖腐爛病的發(fā)生一般從鱗莖表面破損處開(kāi)始,初侵染時(shí)在破損處形成略顯褐色的侵染點(diǎn),逐漸擴(kuò)展形成近圓形或不規(guī)則形狀的褐色病斑,病斑中央呈腐爛狀,并逐漸向四周擴(kuò)大,病斑上可見(jiàn)灰綠色霉層,腐爛組織不斷增加,嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致整個(gè)鱗莖軟化腐爛。

    從蘭州百合鱗莖腐爛病斑上分離純化得到五株菌株,分別編號(hào)為Z1、Z2、Z3、Z4和Z5。致病性結(jié)果表明,僅菌株Z1、Z2單獨(dú)接種健康百合鱗莖片后,在接種部位出現(xiàn)腐爛病斑,并伴隨菌絲體大量繁殖,菌株Z2比Z1的侵染能力強(qiáng),無(wú)傷接種也可導(dǎo)致鱗莖片腐爛(圖1-b、c)。菌株Z1和Z2混合接種鱗莖片后,使鱗莖片腐爛更為嚴(yán)重(圖1-d),其病癥與百合鱗莖自然條件下的發(fā)病癥狀相同。從接種發(fā)病部位可分別重新分離到與接種菌相同的菌株,表明所分離到的菌株Z1、Z2均為蘭州百合鱗莖腐爛病病原菌。

    2.2病原菌鑒定

    2.2.1病原菌形態(tài)從蘭州百合腐爛鱗莖上分離到的病原菌菌株Z1,在PDA培養(yǎng)基上菌絲質(zhì)地致密絲絨狀,中央部分呈絮狀,菌株形成少量菌核,同時(shí)伴有滲出液(圖2-a);菌落反面為無(wú)色至淡褐色,后期產(chǎn)生菌核時(shí),會(huì)顯現(xiàn)黑褐色斑點(diǎn)(圖2-b);分生孢子頭初為球形,后呈輻射形;分生孢子梗多生自基質(zhì),孢子梗200~800 μm×8~20 μm,壁厚,無(wú)色,粗糙;產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)為雙層;分生孢子為近球形,直徑為2.4~6.4 μm,壁略粗糙(圖2-c)。病原菌菌株Z2在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)迅速,菌絲疏松,最初呈白色,后變?yōu)榛液谏▓D2-d),菌落背面呈白色棉絮狀(圖2-e);假根發(fā)達(dá),分枝呈指狀或根狀,呈深褐色。孢子囊呈球形或近球形,初期呈白色,老后呈黑色,直徑25~200 μm,孢囊孢子呈橢圓形或近球形,淡褐色(圖2-f)。

    圖2 蘭州百合鱗莖腐爛病病原菌形態(tài)特征Fig.2 Morphologic characteristic of pathogens causing Lanzhou lily rot disease

    2.2.2ITS序列分析用ITS通用引物擴(kuò)增出病原菌的通用引物序列,長(zhǎng)度分別為594 bp(GenBank登錄號(hào):KP172534)和627 bp(Gen Bank登錄號(hào):KP172533)。經(jīng)BLAST分析,菌株Z1、菌株Z2的rDNA-ITS序列分別與黃曲霉和米根霉的同源性最高。在同源性最高的序列中各挑選10個(gè)菌株的ITS序列分別與供試菌株構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。如圖3所示,菌株Z1序列與Aspergillus flavus(JF754467.1)的序列親緣關(guān)系最近,且與A.flavus相聚于同一群。如圖4所示,菌株Z2的序列與Rhizopus oryzae(JQ683242.1)的序列親緣關(guān)系最近,且與R.oryzae相聚于同一群。菌株Z1、Z2的ITS序列在NCBI上BLAST結(jié)果與A.flavus和R.oryzae的相似性為分別為99%和99%~100%,進(jìn)而從系統(tǒng)分類學(xué)上進(jìn)一步驗(yàn)證了菌株Z1和菌株Z2;再結(jié)合病原菌的形態(tài)特征,可以確定菌株Z1為黃曲霉(A.flavus),菌株Z2為米根霉(R.oryzae)。

    圖3 基于ITS序列構(gòu)建的百合鱗莖腐爛病原菌Z1的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)Fig.3 Phylogenetie tree of pathogen Z1 based on ITS sequences

    圖4 基于ITS序列構(gòu)建的百合鱗莖腐爛病原菌Z2的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)Fig.4 Phylogenetie tree of pathogen Z2 based on ITS sequences

    2.3病原菌的生物學(xué)特性

    2.3.1培養(yǎng)基種類對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響A.flavus和R.oryzae兩種病原菌在供試的五種培養(yǎng)基上都能生長(zhǎng),兩種病原菌在百合培養(yǎng)基和百合葡萄糖培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量最大,且在這兩種培養(yǎng)基上的差異不顯著。A.flavus在LA上培養(yǎng)5 d后菌落直徑達(dá)19.0 mm,R.oryzae在LA上培養(yǎng)2 d后,菌落直徑達(dá)40.5 mm,7 d后產(chǎn)孢量分別為10.35× 106個(gè)/mL和8.06×106個(gè)/mL(圖5)。

    2.3.2碳源、氮源對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響兩種病原菌對(duì)供試碳源均可利用。A.flavus在葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度最大,培養(yǎng)5 d后菌落直徑達(dá)20.0 mm,而在果糖、乳糖和淀粉為碳源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度次之,且三者間差異不顯著。A.flavus在葡萄糖和果糖為碳源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量最高,而兩者間差異不顯著;在淀粉為碳源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量次之,在乳糖為碳源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量最低(表1)。R.oryzae在葡萄糖和果糖為碳源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量最大,且兩者間產(chǎn)孢量差異不顯著;在乳糖和淀粉為碳源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量次之,且兩者間菌落直徑差異也不顯著(表1)。

    A.flavus在蛋白胨和硝酸銨為氮源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度最大,且兩者間差異不顯著,但在蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量高于硝酸銨為氮源的培養(yǎng)基,在硫酸銨和硝酸鉀為氮源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速度和產(chǎn)孢量都較低(表1)。R.oryzae在蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基上,菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量都最大,在硫酸銨和硝酸鉀為氮源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)較好,在硝酸銨為氮源的培養(yǎng)基菌絲生長(zhǎng)較差,與無(wú)氮培養(yǎng)基差異不顯著,但在硝酸銨為氮源的培養(yǎng)基上產(chǎn)孢量高于硫酸銨和硝酸鉀為氮源的培養(yǎng)基(表1)。

    表1 碳、氮源對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響Table 1 Effect of carbon source and nitrogen source on the mycelia growth and sporulation of pathogens

    2.3.3培養(yǎng)條件對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響由表2可知,兩種病原菌的菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢的最適溫度是25℃。A.flavus和R.oryzae在pH為5~9范圍內(nèi)的PDA培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng),A.flavus在pH為5、8和9的PDA培養(yǎng)基的菌絲生長(zhǎng)速度均較快,5 d后菌落直徑差異不顯著,而在pH為6時(shí)產(chǎn)孢量最大,7 d后產(chǎn)孢量為9.85×106個(gè)/mL。R.oryzae在pH為6時(shí)菌絲生長(zhǎng)速度和產(chǎn)孢量最快,2 d后菌落直徑達(dá)35.5 mm,7 d后產(chǎn)孢量為3.75×106個(gè)/mL。光照可促進(jìn)兩種病原菌的菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢,A.flavus在全光照條件下生長(zhǎng)5 d后,其菌落直徑達(dá)23.00 mm,而R.oryzae在全光照條件下生長(zhǎng)2 d后,菌落直徑達(dá)24.00 mm,7 d后產(chǎn)孢量分別達(dá)13.03×106個(gè)/mL和6.33×106個(gè)/mL。

    3 討論

    本研究通過(guò)致病性測(cè)定、形態(tài)學(xué)特性和ITS序列分析,確定引起蘭州百合鱗莖貯藏腐爛病的病原菌是A.flavus和R.oryza,表明此腐爛病害是根霉腐爛病和曲霉腐爛病混合發(fā)生,這兩種腐爛病害在百合鱗莖腐爛的相關(guān)研究中也有報(bào)道,但與本研究中分離到的病原菌不同,其病原菌是A.niger和R.stolonifer[17]。此外,也有較多研究表明圓弧青霉菌、簇狀青霉菌也可導(dǎo)致百合鱗莖腐爛[18],在蘭州百合鱗莖貯藏病害調(diào)查時(shí)也發(fā)現(xiàn)大多腐爛嚴(yán)重的百合鱗莖表面生有青霉菌菌絲,而且在分離病原菌時(shí)也分離到兩種青霉菌,但致病性測(cè)定表明,這兩種青霉菌均不引起百合腐爛,僅可在刺破表皮的百合鱗莖表面繁殖,表明分離到兩種青霉菌僅是腐生菌,而不是病原菌。

    生物學(xué)特性研究表明,A.flavus和R.oryzae兩種病原菌的最適生長(zhǎng)條件基本相同,這可能也是兩種菌可以共生而侵染百合導(dǎo)致其發(fā)生腐爛病的原因。此外,這兩種病原菌在LA和LDA培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)速度和產(chǎn)孢量均高于PDA和PSA(在LA和LDA上的菌絲生長(zhǎng)速度和產(chǎn)孢量差異不顯著),表明百合鱗莖本身的營(yíng)養(yǎng)有利于這兩種菌的繁殖而侵染百合鱗莖導(dǎo)致發(fā)生腐爛病害。

    表2 溫度、pH和光照條件對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢量的影響Table 2 Effect of temperature,pH and light treatment on the mycelia growth and sporulation of pathogens

    目前,國(guó)內(nèi)外食用百合的種植面積遠(yuǎn)低于觀賞用百合,因此對(duì)百合鱗莖腐爛病的研究大多關(guān)注觀賞用百合鱗莖種球在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中的腐爛對(duì)出苗率和花卉品質(zhì)的影響[19-20],而尖鐮孢菌是引起觀賞用百合鱗莖種球腐爛的主要病原菌[9,21],這與導(dǎo)致蘭州百合鱗莖貯藏期間腐爛的病原菌不同,因此,防治花卉百合種球腐爛病的方法對(duì)食用百合也無(wú)借鑒作用。而作為食用的蘭州百合鱗莖在原產(chǎn)地的貯藏方式,目前多采用低溫冷庫(kù)在零下4℃條件下貯藏,通常不采用其他防腐措施,導(dǎo)致貯藏期間腐爛病的發(fā)生較為嚴(yán)重,本研究通過(guò)對(duì)其病原菌的分離和生物學(xué)特性的研究,為下一步開(kāi)展采用安全的方法消毒百合貯藏冷庫(kù)以及預(yù)處理百合鱗莖來(lái)防治腐爛病害的發(fā)生奠定了必要的基礎(chǔ)。

    4 結(jié)論

    從蘭州百合腐爛鱗莖上分離鑒定得到黃曲霉和米根霉兩種病原菌。對(duì)這兩種病原菌的生物學(xué)特性研究表明,它們的最適生長(zhǎng)條件相同,百合培養(yǎng)基和百合葡萄糖培養(yǎng)基最適宜菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢,葡萄糖和蛋白胨為菌絲生長(zhǎng)及產(chǎn)孢的最適碳源和氮源,最適生長(zhǎng)溫度為25℃,在pH5~9范圍內(nèi)都可生長(zhǎng),光照有利于菌絲生長(zhǎng)和產(chǎn)孢。

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    IdentificationofthepathogenfromstoredLanzhoulilybulbrotdiseaseand biological characteristics

    GONG Hui-ling1,SUN Ai-jie1,LI Xi1,TANG Guo-gang2,YUAN Hui-jun1,F(xiàn)ENG Zai-ping1,LI Shan-jia1
    (1.College of Life Science and Engineering,Lanzhou University of Technology,Lanzhou 730050,China;2.Gansu Unionsum Sliced Fresh Lily Bulb Co.,Ltd.,Lanzhou 730000,China)

    In order to confirm the pathogen of stored Lanzhou lily bulb rot disease,the pathogenicity of pure culture isolated from the samples of disease tissue was tested according to Koch’s law,the pathogens were identified according to morphological characteristics and ITS sequence analysis,and biological characteristics were determined.The results showed that Lanzhou lily rot disease was caused by Aspergillus flavus and Rhizopus oryzae.The optimal growth condition of the two pathogens was not different.For the mycelia growth and sporulation of A.flavus and R.oryzae,the optimum medium were lily agar and lily dextrose agar,the optimum carbon source and nitrogen source were glucose and peptone separately,the optimum temperature was 25℃ and they could grow on the medium from pH5 to pH9.Light could improve mycelia growth and sporulation of A.flavus and R.oryzae.

    Lanzhou lily;rot disease;Aspergillus flavus;Rhizopus oryzae;biological characteristics

    TS255.1

    A

    1002-0306(2015)20-0097-06

    10.13386/j.issn1002-0306.2015.20.011

    2015-01-20

    鞏慧玲(1973-),女,博士,副教授,主要從事果蔬采后生理與保鮮方面的研究,E-mail:gonghl@lut.cn。

    蘭州市科技局項(xiàng)目(2012-2-138)。

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