張樹苗,梁兵寬,張林源,胡德夫,劉艷菊,白加德,陳 星,李夷平,陳 頎
(1.北京麋鹿生態(tài)實驗中心,北京100076;2.國家林業(yè)局調(diào)查規(guī)劃設計院,北京100714;3.北京林業(yè)大學自然保護區(qū)學院,北京100083)
血清白蛋白是脊椎動物血漿中含量最豐富的蛋白質(zhì),能夠結合和運輸內(nèi)源性和外源性物質(zhì),具有維持血漿膠體滲透壓、清除自由基、抑制血小板聚集和抗凝血等生理功能.白蛋白水平是表征機體營養(yǎng)狀態(tài)的可靠參數(shù)[1],有研究發(fā)現(xiàn)白蛋白在機體炎癥狀態(tài)時會降低約20%[2-3].白蛋白一定程度上能夠反映疾病導致機體營養(yǎng)的消耗程度,可作為預測人類直腸癌術后并發(fā)癥的指標.低水平的白蛋白與急性心肌梗死、冠心病等動脈粥樣硬化的發(fā)生有一定的關系[4-5],也是影響慢性心功能衰竭患者早期預防及死亡率的一個獨立危險因素[6].血清球蛋白也是一種常見的蛋白,幾乎存在于所有的動植物體內(nèi),具有免疫作用.Devos等[7]對肝病的研究發(fā)現(xiàn),球蛋白的變化與重型肝炎病情的輕重程度密切相關,可作為診斷肝纖維化的非侵害性指標之一.白蛋白與球蛋白能夠組成一對緩沖對,維持血漿膠體的滲透壓平衡,并在體內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的運輸方面發(fā)揮重要作用[8].
麋鹿(Elaphurusdavidianus)是我國特有的鹿科動物,屬于國家一級重點保護動物,世界自然保護聯(lián)盟IUCN紅皮書野外滅絕物種,是我國15個重引進成功的物種之一.麋鹿血清中含有多種不同成分的蛋白質(zhì),主要為白蛋白和球蛋白,其含量的變化與健康狀況密切相關.為了解和監(jiān)控麋鹿的營養(yǎng)和健康狀況,本研究選取不同年齡階段的麋鹿,測定其血清總蛋白、白蛋白和球蛋白的水平,分析這幾個指標隨年齡的變化規(guī)律.這對于麋鹿各年齡段相關疾病的診斷和預防具有重要參考價值.
選取北京南海子麋鹿苑飼養(yǎng)的健康麋鹿87只,其中幼年23只(雌性10,雄性13)、青年28只(雌性14,雄性 14)、成年 18 只(雌性 10,雄性 8)、老年 18 只(雌性 8,雄性 10).
通過麻醉槍隨機對87只健康麋鹿注射陸眠靈進行麻醉保定,在麋鹿完全進入麻醉狀態(tài)時,分別采集頸部靜脈血10 mL,300 r/min離心15 min.取分離后的血清加入質(zhì)量分數(shù)為0.095%的疊氮化鈉防腐劑,分裝后置于4℃冰箱中保存,用于檢測蛋白含量.
1.2.1 血清總蛋白、白蛋白和球蛋白的檢測
采用全自動生化儀(TBA 40,日本東芝)對總蛋白、白蛋白和球蛋白的含量進行測定.
1.2.2 年齡階段的劃分
參照文獻[9]并結合實際觀測,將本研究中不同年齡的麋鹿劃分為4個階段:斷奶至1.5歲為幼年期,1.5歲至3.5歲為青年期,4歲至8歲為成年期,9歲以上為老年期.
1.2.3 數(shù)據(jù)處理方法
應用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析,并進行數(shù)據(jù)描述.采用Multiple Comparisons對變量進行差異性分析;進行Pearson相關性分析.
本研究中,所有被檢測麋鹿的血清白蛋白、球蛋白和總蛋白測定值經(jīng)1-Sample Kolmogorov-Smirnov檢驗均呈正態(tài)分布,蛋白含量隨年齡的變化情況如表1所示.
表1 麋鹿血清總蛋白、白蛋白和球蛋白含量Tab.1 Content of serum total protein,album in and globulin in Père David′sdeer
由表1可以看出,麋鹿在幼年階段血清總蛋白、白蛋白和球蛋白含量最低.隨著年齡增長,至青年和成年期,白蛋白、球蛋白和總蛋白含量達到最大值,2個階段之間蛋白含量相近,之間的差異沒有統(tǒng)計學意義(p>0.05),但顯著高于幼年和老年階段,差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05).隨著年齡進一步增長,麋鹿進入老年期,蛋白含量顯著下降.白蛋白水平高低能夠反映麋鹿的營養(yǎng)狀況,表中數(shù)據(jù)說明麋鹿在幼年階段由于消化和吸收功能尚未完善,營養(yǎng)狀態(tài)較差;隨著年齡增長,進入青年和成年期后,營養(yǎng)狀態(tài)最好;而后隨著年齡的衰老,其牙齒及各消化器官功能退化,攝入營養(yǎng)的能力下降.球蛋白水平的高低反映機體的免疫能力,表中數(shù)據(jù)說明麋鹿在青年和成年期的免疫力最好,幼年麋鹿由于免疫功能尚未發(fā)育完全,免疫能力較低,而老年麋鹿的衰老也導致免疫功能下降.這種變化趨勢也與肝臟合成清蛋白的能力有關[10-11].
對健康正常麋鹿的血清白蛋白、球蛋白、總蛋白含量與年齡和性別進行相關分析,結果如表2所示.
由表2可知,年齡與總蛋白、球蛋白和白/球比的相關性具有統(tǒng)計學意義(p<0.05),性別與三者相關性較小,說明同一年齡段雌、雄個體間的蛋白含量相近.
表2 麋鹿血清總蛋白、白蛋白和球蛋白含量相關性分析Tab.2 Correlations of Père David′sdeer’sserum total protein,album in and globulin
比較各階段雄性和雌性麋鹿血清蛋白的含量,結果如表3所示.
由表3可以看出,在健康麋鹿的各個年齡階段,雄性血清總蛋白、白蛋白和球蛋白含量的平均值均高于雌性個體,但差異不具有統(tǒng)計學意義(p>0.05).一方面可能是因為雄性對蛋白質(zhì)攝入量通常多于雌性,另一方面也可能與雄激素促進蛋白質(zhì)合成的同化作用有關[12].
表3 雄性和雌性麋鹿的蛋白含量Tab.3 Content of protein of male and female Père David′s deer g/L
本研究測定了不同年齡階段健康麋鹿的血清白蛋白和球蛋白含量.麋鹿在幼年期的血清白蛋白和球蛋白含量相對較低,可能是由于此時機體發(fā)育不成熟,對營養(yǎng)的攝入和吸收能力較差,而且肝功能不完善,合成蛋白能力較低.隨著年齡增長,麋鹿進入青年期后發(fā)育成熟,血清總蛋白、白蛋白和球蛋白含量都達到最大值.麋鹿進入老年期后,由于機體各器官功能的衰老,其血清總蛋白、白蛋白和球蛋白含量逐漸下降.不同性別之間進行比較,發(fā)現(xiàn)雄性麋鹿的血清蛋白含量略高于雌性,這可能與雄性麋鹿的攝食量大和雄激素促進蛋白合成有關.
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