• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    超聲微波協(xié)同萃取法提取菊苣酸條件研究

    2015-10-31 03:12:43王英超王蕾金紅李秋闖楊孝麗
    食品研究與開發(fā) 2015年15期
    關(guān)鍵詞:菊苣微波乙醇

    王英超,王蕾,金紅,*,李秋闖,楊孝麗

    (1.天津農(nóng)學(xué)院基礎(chǔ)科學(xué)學(xué)院,天津300384;2.天津農(nóng)學(xué)院農(nóng)學(xué)與資源環(huán)境學(xué)院,天津300384)

    超聲微波協(xié)同萃取法提取菊苣酸條件研究

    王英超1,王蕾2,金紅2,*,李秋闖2,楊孝麗2

    (1.天津農(nóng)學(xué)院基礎(chǔ)科學(xué)學(xué)院,天津300384;2.天津農(nóng)學(xué)院農(nóng)學(xué)與資源環(huán)境學(xué)院,天津300384)

    利用超聲微波協(xié)同萃取對(duì)紫錐菊中菊苣酸最佳提取條件進(jìn)行研究。采用新鮮的紫錐菊根部,考察乙醇濃度、微波提取時(shí)間、微波提取功率、料液比等因素對(duì)紫錐菊中菊苣酸提取含量的影響,并采用正交試驗(yàn)優(yōu)化提取條件。結(jié)果表明:濃度為50%乙醇、料液比1∶25 g/mL、微波提取時(shí)間660 s、微波提取功率300 W和提取次數(shù)為1次為最佳提取條件。在最佳提取條件下進(jìn)行了3組平行驗(yàn)證試驗(yàn),得到菊苣酸平均含量為158.4 μg/g。

    紫錐菊;菊苣酸;超聲微波協(xié)同萃取

    紫錐菊(Echinacea purpurea)是原產(chǎn)于美洲的一類菊科野生花卉,也稱“松果菊”[1]。全株具有很高的藥用價(jià)值和觀賞價(jià)值[2]。我國于20世紀(jì)70年代開始引入,已在北京、南京、上海等地引種成功。盡管引種時(shí)間短,但各行業(yè)對(duì)其的研究進(jìn)展均較快[3]。菊苣酸是紫錐菊中極為重要的免疫活性成分之一,具有增強(qiáng)免疫功能和抗炎作用,并能抑制透明質(zhì)酸酶,保護(hù)膠原蛋白免受可導(dǎo)致降解的自由基的影響[4]。菊苣酸的提取方法主要有:超聲波法、聚酰胺法、相轉(zhuǎn)移萃取法、正交實(shí)驗(yàn)法[5-8]。目前還沒有利用超聲-微波協(xié)同萃取紫錐菊中菊苣酸的研究報(bào)道。本工作以天津地區(qū)栽植的一年生紫錐菊植株為研究對(duì)象,通過超聲微波協(xié)同萃取法萃取其中的有效成分—菊苣酸,并利用高效液相色譜法進(jìn)行含量測(cè)定,為菊苣酸的提取方式提供新依據(jù),也為天津地區(qū)藥企栽植利用紫錐菊提供參考。

    1材料與方法

    1.1材料

    紫錐菊:采自天津農(nóng)學(xué)院基礎(chǔ)科學(xué)學(xué)院生化實(shí)驗(yàn)室,常規(guī)肥水管理及病蟲害防治,待生長至收獲期,選取生長大小一致,無病害的紫錐菊根部作為試驗(yàn)材料。使用前對(duì)根部進(jìn)行清洗備用。

    1.2試劑

    無水乙醇(分析純):天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司;0.1%冰醋酸(分析純)、甲醇(色譜純)、乙腈(色譜純):天津市江天化工技術(shù)有限公司;菊苣酸標(biāo)準(zhǔn)品(純度>98%):北京百靈威科技有限公司。

    1.3儀器與設(shè)備

    1200 Series Agilent高效液相色譜儀:美國安捷倫科技有限公司;FA-2004電子天平:上海方瑞儀器有限公司;Milli-Q Advantage A10超純水儀:美國密理博(中國)有限公司;CW-200超聲-微波協(xié)同萃取儀:上海新拓分析儀器科技有限公司;Haier BCD-241WE/Y冰箱:青島海爾股份有限公司。

    1.4方法

    1.4.1不同乙醇濃度對(duì)菊苣酸含量的影響

    選取新鮮的紫錐菊根1 g,按料液比1∶25 g/mL的比例,分別加入20%乙醇、35%乙醇、50%乙醇、65%乙醇、80%乙醇、無水乙醇于各個(gè)萃取瓶中進(jìn)行提取。程序如下:超聲90 s,無微波功率;關(guān)掉超聲,微波300 s、功率300 W。待反應(yīng)結(jié)束后,過濾,濾液于4℃條件下12 000 r/min離心10 min。上清液過0.45 μm有機(jī)濾膜,濾出液作為高效液相色譜儀進(jìn)樣樣品使用。以菊苣酸的含量(μg/g)為評(píng)價(jià)指標(biāo),探討不同乙醇濃度對(duì)提取菊苣酸含量的影響。

    菊苣酸的含量(μg/g)=樣品中菊苣酸的含量(μg/ mL)×提取液總體積(mL)÷取樣量(g)

    1.4.2不同的料液比對(duì)提取菊苣酸含量的影響

    選取新鮮的紫錐菊根1 g,按不同料液比1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35(g/mL)加入不同體積的50%乙醇于各個(gè)萃取瓶中進(jìn)行提取。程序如下:超聲90 s,無微波功率;關(guān)掉超聲,微波300 s、功率300 W。后續(xù)操作按照1.4.1中的方法進(jìn)行,探討不同的料液比對(duì)提取菊苣酸含量的影響。

    1.4.3不同的微波萃取時(shí)間對(duì)提取菊苣酸含量的影響

    選取新鮮的紫錐菊根1 g,按料液比1∶20 g/mL加入50%乙醇20 mL于各個(gè)萃取瓶中進(jìn)行不同微波時(shí)間提取。程序如下:(1)超聲90 s、無微波功率;關(guān)掉超聲,微波180s、功率300 W。(2)超聲90 s、無微波功率;關(guān)掉超聲,微波300 s、功率300 W。(3)超聲90 s、無微波功率;關(guān)掉超聲,微波420 s、功率300 W。(4)超聲90 s、無微波功率;關(guān)掉超聲,微波540 s、功率300 W。(5)超聲90 s、無微波功率;關(guān)掉超聲,微波660 s、功率300 W。后續(xù)操作按照1.4.1中的方法進(jìn)行,探討不同的微波提取時(shí)間對(duì)提取菊苣酸含量的影響。

    1.4.4不同的微波功率對(duì)提取菊苣酸含量的影響

    選取新鮮的紫錐菊根1 g,按料液比1∶20 g/mL加入50%乙醇20 mL于各個(gè)萃取瓶中進(jìn)行不同微波功率(200、300、400、500、600 W)的提取。程序如下:(1)超聲90 s、無微波功率;關(guān)掉超聲,微波540 s、功率200 W。(2)超聲90s、無微波功率;關(guān)掉超聲,微波540s、功率300 W。(3)超聲90 s、無微波功率;關(guān)掉超聲,微波540 s、功率400 W。(4)超聲90 s、無微波功率;關(guān)掉超聲,微波540 s、功率500 W。(5)超聲90 s、無微波功率;關(guān)掉超聲,微波540 s、功率600 W。后續(xù)操作按照1.4.1中的方法進(jìn)行,探討不同的微波功率對(duì)提取菊苣酸含量的影響。

    1.4.5不同的提取次數(shù)對(duì)提取菊苣酸含量的影響

    選取新鮮的紫錐菊根1 g,按料液比1∶20 g/mL加入50%乙醇20 mL于萃取瓶中進(jìn)行不同次數(shù)的提取。反應(yīng)程序如下:超聲90 s、無微波功率;關(guān)掉超聲,微波540 s、功率300 W。提取一次后,將濾后的紫錐菊根吸干表面液體,繼續(xù)按料液比1∶20 g/mL加入50%乙醇20 mL再次進(jìn)行提取并重復(fù)上述過程。每次提取結(jié)束后均將濾液4℃下,12 000 r/min離心10 min。后續(xù)操作按照1.4.1中的方法進(jìn)行,探討不同的提取次數(shù)對(duì)提取菊苣酸含量的影響。

    1.4.6高效液相色譜條件[9]

    分離柱:XDB-C18(4.6×50 mm,1.8 μm);流動(dòng)相:乙腈:0.1%冰醋酸=25∶75(體積比);流動(dòng)相速度:0.2 mL/min;檢測(cè)器:紫外檢測(cè)器,波長330 nm;柱溫:40℃;進(jìn)樣體積:5 μL。

    1.4.7菊苣酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

    將1 mg/mL的菊苣酸標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成不同濃度,樣品濃度為0.5、2.5、25、50、100 μg/mL。按照其上述色譜條件進(jìn)行試驗(yàn),以峰面積為縱坐標(biāo),菊苣酸的濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    1.4.8正交試驗(yàn)

    以單因素試驗(yàn)為基礎(chǔ),選擇微波功率、時(shí)間和料液比三因素,進(jìn)行三因素三水平正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)。具體設(shè)計(jì)見表1。

    表1 三因素三水平正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)Table 1The design of three factors and three levels of orthogonal test

    1.4.9數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

    采用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

    2結(jié)果與分析

    2.1菊苣酸標(biāo)準(zhǔn)曲線及標(biāo)準(zhǔn)品高效液相色譜圖

    菊苣酸標(biāo)準(zhǔn)曲線及標(biāo)準(zhǔn)品高效液相色譜圖分別見圖1和圖2。

    圖1 菊苣酸標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1The standard curve of cichoric acid

    圖2 菊苣酸標(biāo)準(zhǔn)品高效液相色譜圖Fig.2HPLC chromatogram of cichoric acid

    菊苣酸標(biāo)準(zhǔn)曲線圖見圖1,從圖1可以看出,菊苣酸標(biāo)準(zhǔn)曲線方程:y=20.13x-28.359,R2=0.990 7,式中:y為峰面積,(mAU·s);x為菊苣酸濃度,(μg/mL),可以看出方程線性關(guān)系明顯。圖2為菊苣酸標(biāo)準(zhǔn)品的高效液相色譜圖。從圖2可以看出,菊苣酸的出峰時(shí)間在3.524 min。

    2.2不同乙醇濃度對(duì)提取菊苣酸含量的影響

    不同乙醇濃度對(duì)菊苣酸提取含量的影響結(jié)果如圖3所示。

    圖3 不同乙醇濃度對(duì)菊苣酸提取含量的影響Fig.3Effect of different concentration of ethanol on the content of cichoric acid extraction

    從圖3中可以看出,隨著乙醇濃度的增加,菊苣酸的含量逐漸增大,當(dāng)乙醇濃度為50%時(shí),菊苣酸含量達(dá)到最大值229.8 μg/g。當(dāng)乙醇濃度高于50%時(shí),菊苣酸含量逐漸遞減,最低值為12 μg/g。這可能與微波加熱的機(jī)理有關(guān),提高乙醇濃度可以增加提取劑對(duì)物料的滲透性,從而提高得率。但進(jìn)行超聲微波協(xié)同萃取時(shí),主要是物料中的極性分子尤其是水分子吸收微波能,產(chǎn)生大量熱量使物料升溫,乙醇濃度增加減小了料液中水的比例,使物料升溫減慢從而影響得率[10-12]。因此選擇50%乙醇作為提取溶劑。

    2.3不同的料液比對(duì)菊苣酸提取含量的影響

    不同料液比對(duì)菊苣酸提取含量的影響結(jié)果如圖4所示。

    圖4 不同料液比對(duì)菊苣酸提取含量的影響Fig.4Effects of different ratio of material to liquid on the content of cichoric acid extraction

    從圖4可以看出,隨著料液比的逐漸升高,提取的菊苣酸含量逐漸上升,當(dāng)料液比為1∶20 g/mL時(shí),菊苣酸含量達(dá)到最高,數(shù)值為171 μg/g。繼續(xù)升高料液比,菊苣酸含量降低。當(dāng)料液比為1∶15 g/mL時(shí),菊苣酸含量為150 μg/g。其原因可能是提取溶劑對(duì)微波能量的吸收增大,導(dǎo)致細(xì)胞對(duì)微波能量吸收減少,細(xì)胞破裂不完全[12],菊苣酸釋放量少。所以選擇1∶20 g/mL為最佳料液比。

    2.4不同的微波提取時(shí)間對(duì)菊苣酸提取含量的影響

    不同的微波提取時(shí)間對(duì)菊苣酸提取含量的影響如圖5所示。

    圖5 不同微波萃取時(shí)間對(duì)菊苣酸提取含量的影響Fig.5Effects of different extraction time on the content of cichoric acid extraction

    從圖5中可以看出隨著時(shí)間的增加,菊苣酸的含量也在逐漸增大。當(dāng)提取時(shí)間達(dá)到540 s時(shí),提取的菊苣酸含量最大,數(shù)值為115.9 μg/g。超過540 s后,菊苣酸含量呈下降趨勢(shì)??赡苁怯捎谖⒉〞r(shí)間過長,部分菊苣酸被破壞,導(dǎo)致菊苣酸含量降低。所以微波萃取的最佳時(shí)間為540 s。

    2.5不同的微波提取功率對(duì)菊苣酸提取含量的影響

    不同的微波萃取功率對(duì)菊苣酸提取含量的影響如圖6所示。

    圖6 不同微波提取功率對(duì)菊苣酸提取含量的影響Fig.6Effect of microwave power on the content of Cichoric Acid extraction

    從圖6可以看出,隨著微波功率的增加,提取的菊苣酸的含量也在逐漸增加。在300 W時(shí)提取的菊苣酸含量達(dá)到最大值143.9 μg/g。超過300 W后,菊苣酸的含量明顯下降。這是因?yàn)橥饧与妶?chǎng)作用增強(qiáng),分子熱運(yùn)動(dòng)作用增大,得到菊苣酸的提取含量較高;隨著功率繼續(xù)增大,提取的菊苣酸容易發(fā)生變質(zhì),增加能耗。綜合以上因素,所以選擇300 W作為最佳微波提取功率。

    2.6不同的提取次數(shù)對(duì)菊苣酸提取含量的影響

    不同的提取次數(shù)對(duì)菊苣酸提取含量的影響的結(jié)果如圖7所示。

    圖7 不同提取次數(shù)對(duì)菊苣酸含量的影響Fig.7Effect of extraction times on the content of Cichoric Acid extraction

    從圖7可以看出,在同一條件下,隨著提取次數(shù)的增加,菊苣酸的含量逐漸降低,提取1次時(shí),菊苣酸的含量115.9 μg/g,提取第2次時(shí),菊苣酸含量為0 μg/g。說明提取1次可以將根部中的菊苣酸提取完全。故而選擇提取1次為最佳提取次數(shù)。

    2.7正交試驗(yàn)法優(yōu)化試驗(yàn)

    通過對(duì)單一因素的篩選,我們確定了兩個(gè)因素水平:提取溶劑為50%乙醇,提取次數(shù)為一次。另外3個(gè)因素對(duì)菊苣酸含量影響較大,所以我們選擇微波提取時(shí)間、微波功率和料液比3因素做正交試驗(yàn)。由極差分析可知,對(duì)菊苣酸含量的影響因素從大到小依次為料液比、提取時(shí)間、提取功率。說明料液比對(duì)菊苣酸含量的影響最大,是主要因素,其次是時(shí)間和功率。提取條件的優(yōu)化組合為A2B3C3。由此確定最佳酶解條件為提取功率300 W、提取時(shí)間660 s和料液比1∶25 g/mL。該優(yōu)化組合在上述9組試驗(yàn)并中出現(xiàn)。在此提取條件下進(jìn)行3組平行驗(yàn)證試驗(yàn),得出平均菊苣酸含量為158.4 μg/g。

    表2 三因素三水平正交試驗(yàn)結(jié)果Table 2Results the three factors and three levels orthogonal experiment

    3結(jié)論

    菊苣酸最佳提取條件為50%乙醇、料液比1∶25 g/mL、微波提取時(shí)間660 s、微波提取功率300 W和提取次數(shù)為1次。在最佳提取條件下進(jìn)行了3組平行驗(yàn)證試驗(yàn),得到菊苣酸平均含量為158.4 μg/g。與傳統(tǒng)提取方法相比,該方法具有簡便、可靠、省時(shí)的優(yōu)點(diǎn)。

    [1]張瑩,劉珂,吳立軍.紫錐菊屬藥用植物研究進(jìn)展[J].中草藥,2001,32(9):852-855

    [2]郝團(tuán)軍.紫錐菊育苗及栽培技術(shù)[J].新疆中草藥,2001(9):61

    [3]唐雪蓮,付京城,李洪,等.國內(nèi)紫錐菊免疫調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展[J].中國動(dòng)物保健,2012,14(1):9-11

    [4]王小芬,尚靖,楊潔,等.菊苣藥理藥效研究進(jìn)展[J].新疆中醫(yī)藥,2006,24(10):590-592

    [5]謝繼國,陳波.菊苣酸化學(xué)穩(wěn)定性及其異構(gòu)體的色譜分離分析研究[J].湖南師范大學(xué),2009(8):20-22

    [6]曹蕾,郝智慧,孫娟,等.超聲波法提取紫錐菊中菊苣酸的工藝優(yōu)化研究[J].中國獸藥雜志,2010,11(3):28-30

    [7]李勝軍,陳波.相轉(zhuǎn)移萃取法高效分離紫錐菊中菊苣酸的方法研究[J].湖南師范大學(xué),2012,31(2):258-264

    [8]劉軼琛,曾建國,陳波,等.聚酰胺對(duì)紫錐菊提取物中菊苣酸的分離純化研究[J].中草藥,2007(5);140-141

    [9]鐘英杰,李亮,徐福亮.紫錐菊中菊苣酸的提取工藝和含量測(cè)定[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2010,16(4):1-3

    [10]仇燕.菜芙蓉花中總黃酮微波提取的研究[J].中藥材,2006,29(4): 387-389

    [11]陳偉,劉青梅.微波技術(shù)在杜仲黃酮提取工藝中的應(yīng)用研究[J].食品科學(xué),2006,27(10):285

    [12]付為琳,楊立剛,孫桂菊.微波萃取在菊花黃酮提取工藝中的應(yīng)用研究[J].食品研究與開發(fā),2008,29(1):2-3

    Study on Extraction Conditions of Ultrasonic Microwave Synergistic Extraction Method of Cichoric Acid

    WANG Ying-chao1,WANG Lei2,JIN Hong2,*,LI Qiu-chuang2,YANG Xiao-li2
    (1.College of Basic Science,Tianjin Agriculture University,Tianjin 300384,China;2.College of Agronomy and Resource Environment,Tianjin Agriculture University,Tianjin 300384,China)

    Studing on optimum extraction conditions of cichoric acid from Echinacea purpurea with ultrasonic microwave extraction.Using the fresh Echinacea root,exploring the concentration of ethanol,extraction time,microwave power,ratio of material to liquid and other factors on the content of cichoric acid from Echinacea purpurea,and adopting the optimization extraction conditions by orthogonal test.The results showed that the concentration of 50%ethanol,solid-liquid ratio 1∶25 g/mL,microwave power 300 W,one times extraction and extraction times of 660 s as the best extraction conditions.Three groups of parallel test under the optimum condition were conducted,the average content of cichoric acid was 158.4 μg/g.

    Echinacea purpurea;cichoric acid;ultrasonic microwave synergistic extraction

    10.3969/j.issn.1005-6521.2015.15.008

    2015-05-04

    天津市大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(201410061092)

    王英超(1981—),女(漢),實(shí)驗(yàn)師,碩士,研究方向:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)與研究工作。

    金紅(1967—),女,教授,碩士,研究方向:生物化學(xué)教學(xué)與生物技術(shù)研究。

    猜你喜歡
    菊苣微波乙醇
    微波水云間
    保健與生活(2023年6期)2023-03-17 08:39:54
    乙醇和乙酸常見考點(diǎn)例忻
    快樂環(huán)游記
    為什么
    微波冷笑話
    金色年華(2017年12期)2017-07-18 11:11:20
    楊木發(fā)酵乙醇剩余物制備緩釋肥料
    白地霉不對(duì)稱還原1-萘乙酮制備(S) -1-萘基-1-乙醇
    菊苣無公害栽培技術(shù)及利用
    紅旗農(nóng)場(chǎng)菊苣高產(chǎn)栽培
    NaBH4/(CH3)2SO4/B(OCH3)3復(fù)合還原體系合成2-(4-羥基苯)乙醇
    亚州av有码| 九草在线视频观看| 曰老女人黄片| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 成人国产av品久久久| tube8黄色片| 午夜激情福利司机影院| 国产黄片视频在线免费观看| 爱豆传媒免费全集在线观看| 免费高清在线观看视频在线观看| 最近中文字幕2019免费版| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 亚洲人与动物交配视频| 观看美女的网站| 国产成人精品婷婷| 亚洲美女黄色视频免费看| 制服丝袜香蕉在线| 内射极品少妇av片p| 久久久a久久爽久久v久久| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 久久99热这里只频精品6学生| www.色视频.com| 国产黄频视频在线观看| 22中文网久久字幕| 久久国产精品大桥未久av | 日韩大片免费观看网站| 五月伊人婷婷丁香| 91久久精品电影网| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 人妻 亚洲 视频| av在线app专区| 男人狂女人下面高潮的视频| a 毛片基地| 99九九在线精品视频 | 日韩电影二区| 国产乱人偷精品视频| 国产精品久久久久久精品古装| 色婷婷久久久亚洲欧美| 黄色怎么调成土黄色| 国产 精品1| 免费观看性生交大片5| 国产一区亚洲一区在线观看| 午夜av观看不卡| 高清黄色对白视频在线免费看 | 日韩强制内射视频| 精品一区二区免费观看| 国产精品福利在线免费观看| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲精品一二三| 在线观看人妻少妇| 丝瓜视频免费看黄片| 精品久久久精品久久久| 黄色怎么调成土黄色| 国产男女内射视频| 日韩制服骚丝袜av| 人人妻人人澡人人看| 午夜日本视频在线| 交换朋友夫妻互换小说| 亚洲精品aⅴ在线观看| 久久久久久久久久久久大奶| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 不卡视频在线观看欧美| 久久狼人影院| 99久久人妻综合| 日韩一区二区三区影片| av卡一久久| 国产免费视频播放在线视频| 丰满乱子伦码专区| 精品午夜福利在线看| 国内揄拍国产精品人妻在线| av播播在线观看一区| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 欧美+日韩+精品| 精品少妇黑人巨大在线播放| 尾随美女入室| 熟女av电影| 日韩视频在线欧美| 国产高清三级在线| 99热这里只有精品一区| 国产91av在线免费观看| 亚洲av综合色区一区| 51国产日韩欧美| 在线 av 中文字幕| 99久国产av精品国产电影| 青青草视频在线视频观看| av天堂久久9| 一级毛片电影观看| 少妇人妻久久综合中文| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 精品久久久久久电影网| 日韩伦理黄色片| 亚洲精品日韩av片在线观看| 3wmmmm亚洲av在线观看| 欧美精品一区二区免费开放| 91aial.com中文字幕在线观看| 欧美精品一区二区免费开放| 免费人妻精品一区二区三区视频| 国产极品天堂在线| 免费高清在线观看视频在线观看| 免费高清在线观看视频在线观看| 国产成人精品无人区| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产又色又爽无遮挡免| 赤兔流量卡办理| 免费黄频网站在线观看国产| 成年女人在线观看亚洲视频| 久久久a久久爽久久v久久| 免费黄频网站在线观看国产| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 99国产精品免费福利视频| 成人亚洲精品一区在线观看| 伦精品一区二区三区| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产乱人偷精品视频| 亚洲精品国产av蜜桃| 亚洲av综合色区一区| 少妇 在线观看| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲欧美清纯卡通| 国产精品女同一区二区软件| 午夜久久久在线观看| www.色视频.com| 欧美日韩精品成人综合77777| 只有这里有精品99| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 国产一区有黄有色的免费视频| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲精品一区蜜桃| 欧美成人午夜免费资源| 97在线人人人人妻| 久久久久久久国产电影| 新久久久久国产一级毛片| 啦啦啦啦在线视频资源| 另类精品久久| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 婷婷色av中文字幕| 免费看日本二区| 久久久久久久国产电影| 新久久久久国产一级毛片| 国产成人一区二区在线| 两个人的视频大全免费| 我的女老师完整版在线观看| 免费观看性生交大片5| 美女cb高潮喷水在线观看| 99九九在线精品视频 | 日本91视频免费播放| 内地一区二区视频在线| 妹子高潮喷水视频| 欧美丝袜亚洲另类| 久久精品久久久久久久性| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 乱系列少妇在线播放| 热99国产精品久久久久久7| 日韩免费高清中文字幕av| 久久 成人 亚洲| 色视频在线一区二区三区| 校园人妻丝袜中文字幕| 18禁在线播放成人免费| 综合色丁香网| 青青草视频在线视频观看| 色视频在线一区二区三区| 久久99热这里只频精品6学生| 综合色丁香网| 国精品久久久久久国模美| 一区二区三区四区激情视频| 大片免费播放器 马上看| 欧美日韩国产mv在线观看视频| av卡一久久| 亚洲成人手机| 一级毛片我不卡| 欧美 亚洲 国产 日韩一| av女优亚洲男人天堂| 久久久久国产精品人妻一区二区| 下体分泌物呈黄色| 少妇人妻精品综合一区二区| 色视频www国产| 久久久久久人妻| 国产色爽女视频免费观看| 国产av一区二区精品久久| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 九九在线视频观看精品| 午夜福利网站1000一区二区三区| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 最新中文字幕久久久久| 国产精品人妻久久久影院| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 免费大片18禁| 日韩亚洲欧美综合| 乱系列少妇在线播放| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲精品一区蜜桃| 久久久a久久爽久久v久久| 日韩欧美一区视频在线观看 | 少妇人妻久久综合中文| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 亚洲内射少妇av| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 中文字幕av电影在线播放| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 99热全是精品| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产日韩欧美亚洲二区| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 成人午夜精彩视频在线观看| 久久av网站| 黄色日韩在线| 男女免费视频国产| 一级,二级,三级黄色视频| 日韩伦理黄色片| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 在线观看美女被高潮喷水网站| 亚洲欧美清纯卡通| 国产美女午夜福利| 男人狂女人下面高潮的视频| 亚洲av成人精品一区久久| 久久毛片免费看一区二区三区| 欧美+日韩+精品| 久久久久久久久久人人人人人人| 亚洲av欧美aⅴ国产| 日本与韩国留学比较| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 欧美另类一区| 午夜福利视频精品| 精品人妻熟女av久视频| 国产精品一二三区在线看| 国产深夜福利视频在线观看| 日韩一区二区视频免费看| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲av欧美aⅴ国产| 欧美bdsm另类| 高清av免费在线| 亚洲,一卡二卡三卡| 下体分泌物呈黄色| 自线自在国产av| 国模一区二区三区四区视频| 熟女人妻精品中文字幕| 久久久久久人妻| 男人添女人高潮全过程视频| 成年女人在线观看亚洲视频| 国产精品.久久久| 久久久亚洲精品成人影院| 99久久中文字幕三级久久日本| 成人影院久久| 人妻人人澡人人爽人人| 丰满饥渴人妻一区二区三| 一个人免费看片子| www.av在线官网国产| 黑丝袜美女国产一区| 这个男人来自地球电影免费观看 | 亚洲av不卡在线观看| 男女无遮挡免费网站观看| 不卡视频在线观看欧美| 大话2 男鬼变身卡| 视频区图区小说| 精品一区在线观看国产| 六月丁香七月| 色视频www国产| 国产色婷婷99| 国产一区二区三区综合在线观看 | 国内精品宾馆在线| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 日韩一区二区视频免费看| 国产探花极品一区二区| av网站免费在线观看视频| 亚洲欧洲国产日韩| 国产视频首页在线观看| 亚洲四区av| 亚洲图色成人| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产精品一区二区性色av| 国产 一区精品| 精品久久国产蜜桃| 国产在视频线精品| 国产精品久久久久久久久免| a级一级毛片免费在线观看| 高清午夜精品一区二区三区| 黄片无遮挡物在线观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 嫩草影院入口| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 久久久国产欧美日韩av| 国产又色又爽无遮挡免| 国产成人精品福利久久| 亚洲精品亚洲一区二区| 我的女老师完整版在线观看| 91在线精品国自产拍蜜月| 午夜激情福利司机影院| 日本91视频免费播放| 久久久久久久久久久免费av| av播播在线观看一区| 欧美精品国产亚洲| 久久6这里有精品| 少妇 在线观看| 午夜免费观看性视频| 一级,二级,三级黄色视频| av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 51国产日韩欧美| 精品视频人人做人人爽| 免费av不卡在线播放| 日韩精品有码人妻一区| 精品少妇久久久久久888优播| 丝袜脚勾引网站| 极品少妇高潮喷水抽搐| 免费大片黄手机在线观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 五月玫瑰六月丁香| 一区二区三区免费毛片| 亚洲av综合色区一区| 赤兔流量卡办理| 制服丝袜香蕉在线| 桃花免费在线播放| 卡戴珊不雅视频在线播放| 免费看av在线观看网站| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产免费一级a男人的天堂| 女人精品久久久久毛片| 能在线免费看毛片的网站| 老熟女久久久| 大香蕉久久网| 少妇人妻一区二区三区视频| 久久影院123| av不卡在线播放| 新久久久久国产一级毛片| 久久女婷五月综合色啪小说| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 99九九线精品视频在线观看视频| 欧美日韩av久久| 成人午夜精彩视频在线观看| 男女免费视频国产| 亚洲怡红院男人天堂| 91精品伊人久久大香线蕉| 如何舔出高潮| 99re6热这里在线精品视频| 日日啪夜夜撸| 99九九线精品视频在线观看视频| 久久精品夜色国产| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 免费播放大片免费观看视频在线观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 性色av一级| 不卡视频在线观看欧美| 在线观看免费日韩欧美大片 | 国产一区二区在线观看av| 视频中文字幕在线观看| 99热全是精品| 赤兔流量卡办理| 黄色毛片三级朝国网站 | 一级,二级,三级黄色视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 久热久热在线精品观看| 亚洲欧美精品自产自拍| 九色成人免费人妻av| 亚洲四区av| 成人午夜精彩视频在线观看| 日韩人妻高清精品专区| 97在线视频观看| 人妻系列 视频| 午夜福利,免费看| 国产真实伦视频高清在线观看| 午夜免费鲁丝| av线在线观看网站| 国产熟女欧美一区二区| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 老司机影院成人| 国产又色又爽无遮挡免| 国产一区二区在线观看日韩| 一区二区三区四区激情视频| 欧美成人午夜免费资源| 最近中文字幕2019免费版| 五月玫瑰六月丁香| 97精品久久久久久久久久精品| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 噜噜噜噜噜久久久久久91| 97在线人人人人妻| 边亲边吃奶的免费视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 美女xxoo啪啪120秒动态图| 欧美成人精品欧美一级黄| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 久久久精品94久久精品| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 日韩成人伦理影院| 在线观看免费日韩欧美大片 | 精品少妇久久久久久888优播| 国产深夜福利视频在线观看| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 爱豆传媒免费全集在线观看| 久久久久精品性色| 免费看不卡的av| 精华霜和精华液先用哪个| 久久午夜福利片| 久久久a久久爽久久v久久| 伊人亚洲综合成人网| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 如何舔出高潮| 人体艺术视频欧美日本| xxx大片免费视频| 国产精品99久久99久久久不卡 | 国产男人的电影天堂91| 熟女人妻精品中文字幕| 尾随美女入室| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 成人无遮挡网站| 男女无遮挡免费网站观看| 成人国产麻豆网| a 毛片基地| 伦精品一区二区三区| 精品久久久久久电影网| 日本欧美国产在线视频| 午夜视频国产福利| 五月伊人婷婷丁香| 曰老女人黄片| 不卡视频在线观看欧美| 在线观看三级黄色| 51国产日韩欧美| 国产探花极品一区二区| 黑人高潮一二区| 久久精品夜色国产| 欧美+日韩+精品| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 精品一区二区三区视频在线| 99国产精品免费福利视频| 亚洲国产av新网站| 亚洲综合精品二区| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 国产一区二区三区av在线| 国产精品久久久久久av不卡| 两个人免费观看高清视频 | 五月天丁香电影| 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲美女视频黄频| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 这个男人来自地球电影免费观看 | av天堂中文字幕网| 91久久精品国产一区二区三区| 99热这里只有精品一区| 天天操日日干夜夜撸| 午夜免费鲁丝| 午夜精品国产一区二区电影| 日本免费在线观看一区| 91久久精品国产一区二区三区| 国产爽快片一区二区三区| 国产精品一区二区在线观看99| 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲精品456在线播放app| 久久女婷五月综合色啪小说| 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产成人精品无人区| 国产成人免费无遮挡视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 最近的中文字幕免费完整| av天堂中文字幕网| 日韩av免费高清视频| 秋霞在线观看毛片| 国产高清不卡午夜福利| 久久久精品94久久精品| 极品少妇高潮喷水抽搐| a级毛片在线看网站| 99精国产麻豆久久婷婷| 欧美日韩在线观看h| 校园人妻丝袜中文字幕| 乱码一卡2卡4卡精品| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 美女内射精品一级片tv| a级片在线免费高清观看视频| 国产欧美日韩综合在线一区二区 | 特大巨黑吊av在线直播| 国产成人精品无人区| 在线观看免费高清a一片| 久热这里只有精品99| 精品久久久久久电影网| 久久精品国产亚洲网站| 日韩欧美 国产精品| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 久久亚洲国产成人精品v| 女人精品久久久久毛片| 如何舔出高潮| 22中文网久久字幕| 精品久久久精品久久久| 免费看光身美女| a级毛片免费高清观看在线播放| 亚洲不卡免费看| 免费人妻精品一区二区三区视频| 大香蕉97超碰在线| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 国产色爽女视频免费观看| 国产熟女午夜一区二区三区 | 国产老妇伦熟女老妇高清| www.av在线官网国产| √禁漫天堂资源中文www| 久久久久久久亚洲中文字幕| 欧美bdsm另类| 妹子高潮喷水视频| 成人毛片60女人毛片免费| 久久 成人 亚洲| kizo精华| 精品久久久久久久久av| 国产一区有黄有色的免费视频| 桃花免费在线播放| 少妇精品久久久久久久| 日韩三级伦理在线观看| 国产在线一区二区三区精| 伊人亚洲综合成人网| 91精品伊人久久大香线蕉| 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲精品色激情综合| 午夜精品国产一区二区电影| 国产精品福利在线免费观看| 国产老妇伦熟女老妇高清| 女性生殖器流出的白浆| 亚洲内射少妇av| 亚洲精品国产av蜜桃| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 男男h啪啪无遮挡| 日韩成人伦理影院| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 高清毛片免费看| 久久99蜜桃精品久久| 亚洲国产色片| av福利片在线观看| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 欧美精品高潮呻吟av久久| 日本av免费视频播放| 麻豆成人午夜福利视频| 色网站视频免费| 久久久久久久精品精品| 午夜免费观看性视频| 免费观看a级毛片全部| 下体分泌物呈黄色| 日本免费在线观看一区| 国产免费视频播放在线视频| 国产成人一区二区在线| 一级毛片电影观看| 国产高清三级在线| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 一级黄片播放器| 国产av精品麻豆| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 国产精品人妻久久久影院| 亚洲精品一区蜜桃| 国产真实伦视频高清在线观看| 免费黄色在线免费观看| 亚洲第一区二区三区不卡| 我要看日韩黄色一级片| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 中文字幕免费在线视频6| 国产一区二区在线观看av| 欧美 日韩 精品 国产| 3wmmmm亚洲av在线观看| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 久久久久久久久久久久大奶| 热99国产精品久久久久久7| 欧美日韩综合久久久久久| 91精品国产国语对白视频| 久久鲁丝午夜福利片| 国产综合精华液| 熟女av电影| 亚洲精品国产色婷婷电影| h视频一区二区三区| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 丝袜喷水一区| 亚洲综合色惰| av线在线观看网站| 亚洲美女视频黄频| 久久久久久人妻| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 韩国av在线不卡| 亚洲精品视频女| 少妇人妻精品综合一区二区| 久久久亚洲精品成人影院| 国产淫片久久久久久久久| 国产精品一区二区性色av| 国产精品熟女久久久久浪| 中文字幕人妻丝袜制服| av国产久精品久网站免费入址| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲高清免费不卡视频| 久久女婷五月综合色啪小说| 毛片一级片免费看久久久久| 久久久国产精品麻豆| 在线观看免费高清a一片| 大香蕉久久网| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 另类亚洲欧美激情| 少妇的逼好多水| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产精品免费大片| 人妻 亚洲 视频| 成人影院久久| 久久av网站| 久久久久久久精品精品| 久久久久国产网址| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲中文av在线| 精品卡一卡二卡四卡免费| 波野结衣二区三区在线| 99九九在线精品视频 | 最近中文字幕高清免费大全6| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 国产av国产精品国产| 成人免费观看视频高清| 亚洲成人手机| 熟女电影av网|