響應(yīng)面優(yōu)化超聲波法提取牛血紅蛋白工藝

赫玉蘭，盧士玲，吳亞楠，王琦翔，田　盼

（石河子大學(xué)食品學(xué)院，新疆石河子832000）

響應(yīng)面優(yōu)化超聲波法提取牛血紅蛋白工藝

赫玉蘭，盧士玲*，吳亞楠，王琦翔，田盼

（石河子大學(xué)食品學(xué)院，新疆石河子832000）

以牛血為原料，研究了超聲波處理過(guò)程中水與紅細(xì)胞體積比、超聲時(shí)間、超聲時(shí)間與間歇時(shí)間比、超聲功率對(duì)血紅蛋白提取率的影響。通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)確定各因素的范圍，在此基礎(chǔ)上采用響應(yīng)面法對(duì)提取工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明：水與紅細(xì)胞體積比為4∶1，超聲時(shí)間17min，超聲時(shí)間與間歇時(shí)間比為1∶1，超聲功率250W，血紅蛋白提取率達(dá)到92.33%。

牛血，血紅蛋白，超聲波，響應(yīng)面，提取工藝

牛血液營(yíng)養(yǎng)豐富，蛋白質(zhì)含量高達(dá)17.3%，其中大部分為血紅蛋白存在于紅細(xì)胞中，占總蛋白質(zhì)的80%；血紅蛋白由血紅素和珠蛋白結(jié)合而成，每1分子血紅蛋白由4分子珠蛋白和4分子亞鐵血紅素組成，珠蛋白約占96%，血紅素占4%［1］。血紅蛋白具有較高的應(yīng)用價(jià)值，用途十分廣泛。在食品工業(yè)中，血紅蛋白既可作為肉品發(fā)色劑，又可作為食品加工助劑原料用來(lái)生產(chǎn)發(fā)泡劑和乳化劑；在醫(yī)療保健中，可將其制成補(bǔ)血營(yíng)養(yǎng)劑用于治療缺鐵性貧血引起的各種疾病，血紅蛋白的降解產(chǎn)物可制成氨基酸口服液、注射液及復(fù)合液用于補(bǔ)充強(qiáng)化各種氨基酸；在飼料工業(yè)中，還可做畜禽飼料的蛋白質(zhì)和鐵添加劑［2-3］。因此，對(duì)牛血紅蛋白提取方法的選擇及條件的優(yōu)化有很重要的意義。目前，畜禽血液中提取血紅蛋白的方法主要有超濾法［4］，膨脹床吸附層析法［5］，有機(jī)溶劑提取法等［6］，這些方法普遍存在提取速度慢，操作繁瑣，成本較高，有機(jī)溶劑不易從產(chǎn)品中除盡等問(wèn)題。本實(shí)驗(yàn)將利用超聲波細(xì)胞破碎技術(shù)提取牛血液中的血紅蛋白，并采用Design-expert軟件進(jìn)行Box-Behnken Design響應(yīng)面優(yōu)化分析，來(lái)滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)處理的要求，結(jié)果可信，并通過(guò)軟件實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)條件的尋優(yōu)［7］，為血紅蛋白的大規(guī)模利用和開(kāi)發(fā)提供一定的理論基礎(chǔ)。

1　材料與方法

1.1材料與儀器

新鮮牛血石河子沙依巴克區(qū)定點(diǎn)屠宰場(chǎng)；透析袋；紗布；牛血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)品中國(guó)食品藥品檢定研究院；檸檬酸鈉、檸檬酸分析純，天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司；無(wú)水葡萄糖分析純，天津市天達(dá)凈化材料精細(xì)化工廠；氯化鈉分析純，天津永晟精細(xì)化工有限公司；亞硫酸氫鈉分析純，中國(guó)醫(yī)藥公司北京采購(gòu)供應(yīng)站；氫氧化鈉分析純，天津市福晨化學(xué)試劑廠；聚乙二醇辛基苯基醚分析純，江蘇永華精細(xì)化學(xué)品有限公司。

Neofuge-15R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)力康發(fā)展有限公司；VCX500超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)美國(guó)SONICS公司；BS2000S電子分析天平丹佛儀器（北京）有限公司；DK-8D數(shù)顯恒溫水浴鍋金壇市醫(yī)療儀器廠；FDU-1200冷凍干燥機(jī)上海愛(ài)朗儀器有限公司；UVmini-1240紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)島津國(guó)際貿(mào)易（上海）有限公司。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1工藝流程

1.2.2操作要點(diǎn)

1.2.2.1抗凝ACD配制（檸檬酸0.48g，檸檬酸鈉1.32g，葡萄糖1.47g，加水至100mL）?？鼓齽┡c血液的比例均為1∶6，然后用紗布過(guò)濾，過(guò)濾后放入冰柜0～4℃?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2.2離心將過(guò)濾后的血液置于離心機(jī)內(nèi)，以3000r/min的速度離心15min，棄去上清液，收集下層紅細(xì)胞。

1.2.2.3洗滌將收集到的紅細(xì)胞用0.9%的5倍體積冷生理鹽水，洗滌3次，洗去白細(xì)胞、血小板和血漿。

1.2.2.4超聲波破碎取適量紅細(xì)胞，加入0.1%～0.2% NaHSO3，加適當(dāng)體積的水，放入超聲波細(xì)胞破碎機(jī)中超聲破碎一定時(shí)間［8］。

1.2.2.5離心將破碎后的紅細(xì)胞溶液置于離心機(jī)內(nèi)于8000r/min下離心30min，棄去下層細(xì)胞碎片。

1.2.2.6透析將血紅蛋白溶液裝入透析袋中，置于流動(dòng)自來(lái)水中透析12h。

1.2.2.7巴氏殺菌將透析后的血紅蛋白溶液置于60℃恒溫水浴鍋中水浴10h［9］。

1.2.2.8冷凍干燥將殺菌后的血紅蛋白溶液倒入培養(yǎng)皿中，冷凍后，移入冷凍干燥機(jī)內(nèi)進(jìn)行干燥。

1.2.3血紅蛋白濃度測(cè)定

1.2.3.1AHD-575試劑的配制準(zhǔn)確稱(chēng)取聚乙二醇辛基苯基醚25.0g，加入0.1mol/L NaOH溶液至1L，過(guò)濾，室溫下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作將牛血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)品配制成不同濃度的溶液，分別吸取0.2mL加入到30mL AHD-575試劑中，靜置反應(yīng)1～3min，在575nm波長(zhǎng)下，以AHD-575試劑為空白，測(cè)定吸光度。以牛血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，得出血紅蛋白溶液濃度X與吸光度值Y的關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)線及回歸方程［10-11］。

1.2.3.3血紅蛋白含量計(jì)算于潔凈的燒杯中吸取處理后的血紅蛋白提取液樣品0.2mL，以AHD-575的方法測(cè)定吸光度A575，查標(biāo)準(zhǔn)曲線求得血紅蛋白含量。

1.2.4血紅蛋白提取率計(jì)算根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出相當(dāng)于樣品吸光度的血紅蛋白含量，按下式求血紅蛋白提取率：

其中：Y為血紅蛋白提取率（%）；C1為血液中血紅蛋白濃度（g/L）；V1為血液體積（L）；C2為超聲處理后血紅蛋白濃度（g/L）；V2為超聲處理后血紅蛋白體積（L）。

1.2.5單因素實(shí)驗(yàn)

1.2.5.1水與紅細(xì)胞體積比對(duì)提取率的影響分別量取20mL洗滌后紅細(xì)胞于五個(gè)小燒杯中，并分別加入1、2、3、4、5倍體積的蒸餾水，超聲時(shí)間15min，工作時(shí)間與間歇時(shí)間比1∶1，超聲功率200W，置于超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)中破碎后8000r/min下離心30min，棄去下層細(xì)胞碎片，測(cè)定濃度，計(jì)算提取率。

1.2.5.2超聲時(shí)間對(duì)提取率的影響分別量取20mL洗滌后紅細(xì)胞于五個(gè)小燒杯中，分別加入3倍體積的蒸餾水，超聲時(shí)間分別為5、10、15、20、25min，工作時(shí)間與間歇時(shí)間比為1∶1，超聲功率200W，置于超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)中破碎后8000r/min下離心30min，棄去下層細(xì)胞碎片，測(cè)定濃度，計(jì)算提取率。

1.2.5.3工作時(shí)間與間歇時(shí)間比對(duì)提取率的影響分別量取20mL洗滌后紅細(xì)胞于五個(gè)小燒杯中，分別加入3倍體積的蒸餾水，超聲時(shí)間15min，工作時(shí)間與間歇時(shí)間比分別為1∶3、1∶2、1∶1、2∶1、3∶1，超聲功率200W，置于超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)中破碎后8000r/min下離心30min，棄去下層細(xì)胞碎片，測(cè)定濃度，計(jì)算提取率。

1.2.5.4超聲功率對(duì)提取率的影響分別量取20mL洗滌后紅細(xì)胞于五個(gè)小燒杯中，分別加入3倍體積的蒸餾水，超聲時(shí)間15min，工作時(shí)間與間歇時(shí)間比為1∶1，超聲功率分別為100、150、200、250、300W，置于超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)中破碎后8000r/min下離心30min，棄去下層細(xì)胞碎片，測(cè)定濃度，計(jì)算提取率。

1.2.6響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)在單因素研究的基礎(chǔ)上，選取適當(dāng)紅細(xì)胞與水體積比、超聲時(shí)間、超聲時(shí)間與間歇時(shí)間比（下文簡(jiǎn)稱(chēng)間歇時(shí)間比）、超聲功率為自變量，血紅蛋白提取率為響應(yīng)值，根據(jù)中心組合設(shè)計(jì)原理，設(shè)計(jì)響應(yīng)面分析實(shí)驗(yàn)，因素水平見(jiàn)表1。每個(gè)處理重復(fù)三次。

表1　響應(yīng)面因素水平編碼表Table 1　The factor level coding table of response surface

1.2.7數(shù)據(jù)處理采用Origin 8.5軟件繪制單因素實(shí)驗(yàn)折線圖；采用Design-Expert 8.0.6軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及響應(yīng)面分析，得到方差分析表，繪制響應(yīng)面分析圖。

2　結(jié)果與分析

2.1血紅蛋白濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線

以牛血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，得出血紅蛋白溶液濃度X與吸光度值Y的關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線及回歸方程y=0.0025x+0.0008，相關(guān)系數(shù)R2=0.9978，說(shuō)明樣品范圍合適，方程可用于血紅蛋白濃度測(cè)定的計(jì)算。

圖1　AHD-575檢測(cè)法的血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1　The standard curve of hemoglobin by method of AHD-575

2.2各因素對(duì)血紅蛋白提取率的影響

2.2.1水與紅細(xì)胞體積比對(duì)血紅蛋白提取率的影響由圖2可知水與紅細(xì)胞體積比對(duì)血紅蛋白提取率影響明顯。當(dāng)其他因素一定時(shí)，隨著水與紅細(xì)胞體積比的增大，血紅蛋白的提取率呈逐漸上升趨勢(shì)，當(dāng)水與紅細(xì)胞體積比達(dá)到4∶1后，血紅蛋白提取率增加緩慢。這是由于在正常血液中，紅細(xì)胞膜內(nèi)外兩側(cè)溶液的滲透壓相等。紅細(xì)胞分離出來(lái)并加入去離子水后，降低了細(xì)胞膜外溶液的滲透壓，紅細(xì)胞吸水而導(dǎo)致細(xì)胞膜脹裂，同時(shí)在超聲波空蝕作用下加快了細(xì)胞破裂的速度［12］。考慮到加水體積在4∶1后，提取率增加緩慢，加水過(guò)多使血紅蛋白濃度稀釋?zhuān)醪酱_定水與紅細(xì)胞體積比為4∶1。

圖2　水與紅細(xì)胞體積比對(duì)血紅蛋白提取率的影響Fig.2　Effect of water to red blood cell ratio（V/V）on extraction rate of hemoglobin

2.2.2超聲時(shí)間對(duì)血紅蛋白提取率的影響由圖3可知，超聲時(shí)間對(duì)血紅蛋白提取率影響顯著。當(dāng)其他因素一定時(shí)，隨著工作時(shí)間的延長(zhǎng)，血紅蛋白提取率呈逐漸上升趨勢(shì)，當(dāng)工作時(shí)間達(dá)到20min后，血紅蛋白提取率增加緩慢。這是因?yàn)殡S超聲時(shí)間的延長(zhǎng)，紅細(xì)胞受超聲波空蝕作用時(shí)間越長(zhǎng)，紅細(xì)胞破碎越徹底，考慮到20min后產(chǎn)率增加緩慢，生產(chǎn)周期及能量消耗問(wèn)題，初步確定超聲時(shí)間為20min。

2.2.3超聲時(shí)間與間歇時(shí)間比對(duì)血紅蛋白提取率的影響由圖4可知，超聲時(shí)間與間歇時(shí)間比對(duì)血紅蛋白提取率有一定的影響，當(dāng)其他因素一定時(shí)，隨著工作時(shí)間與間歇時(shí)間比的改變，血紅蛋白提取率呈上升趨勢(shì)。當(dāng)工作時(shí)間與間歇時(shí)間比為1∶1后，血紅蛋白的破碎度和提取率增加緩慢。這是因?yàn)楣ぷ鲿r(shí)間越長(zhǎng)，紅細(xì)胞受超聲波交替膨脹和壓縮作用的時(shí)間也越長(zhǎng)，細(xì)胞破碎越徹底，血紅蛋白釋放越完全。

圖3　超聲時(shí)間對(duì)血紅蛋白提取率的影響Fig.3　Effect of ultrasonic operation time on extraction rate of hemoglobin

圖4　超聲時(shí)間與間歇時(shí)間對(duì)血紅蛋白提取率的影響Fig.4　Effect of ultrasonic time to quiescent interval time ratio on extraction rate of hemoglobin

圖5　超聲功率對(duì)血紅蛋白提取率的影響Fig.5　Effect of ultrasonic power on extraction rate of hemoglobin

2.2.4超聲功率對(duì)血紅蛋白提取率的影響從圖5可看出，超聲功率對(duì)血紅蛋白提取率的影響明顯。當(dāng)其他因素一定時(shí)，隨著超聲功率的增大，血紅蛋白提取率呈逐漸上升趨勢(shì)，這是因?yàn)槌暡◤?qiáng)度越大，空蝕作用越劇烈，紅細(xì)胞受到交替膨脹和壓縮的力就越大，細(xì)胞膜上分子擴(kuò)散速度也越快，血紅蛋白釋放越完全［13］。當(dāng)超聲功率達(dá)到250W后，血紅蛋白提取率增加緩慢。考慮到能量消耗問(wèn)題，初步確定超聲功率為250W。

表2 響應(yīng)面結(jié)果Table 2　The results of response surface

表3　回歸方程方差分析Table 3　The Regression analysis of variance

2.3響應(yīng)面法確定超聲波提取血紅蛋白最佳工藝參數(shù)

采用Design-Expert 8.0.6進(jìn)行響應(yīng)面設(shè)計(jì)，獲得制備血紅蛋白四因素三水平實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行方差分析和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，從而優(yōu)化提取工藝［14］。

2.3.1響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果對(duì)表2進(jìn)行回歸分析得到二次回歸方程：

Y=92.86+2.46A+2.67B-2.10C-1.48D+1.42AB+ 7.07AC+1.98AD-7.29BC-1.21BD+2.87CD-15.01A2-19.02B2-3.86C2-12.31D2

由表3 F值可知，影響超聲波法提取血紅蛋白提取率的因素排序?yàn)锽＞A＞C＞D，即水與紅細(xì)胞體積比＞超聲功率＞超聲時(shí)間＞工作時(shí)間與間歇時(shí)間比。這與周玲等［8］研究結(jié)果：水與紅細(xì)胞體積比＞超聲功率＞工作時(shí)間與間歇時(shí)間比＞超聲時(shí)間有所差異，可能是由于采用分析方法不同，產(chǎn)生誤差來(lái)源不同造成。模型的一次項(xiàng)A、B，二次項(xiàng)A2、B2、C2、D2，交互項(xiàng)AC、BC對(duì)血紅蛋白提取率影響極其顯著（p＜0.01），一次項(xiàng)C、D交互項(xiàng)AD和CD對(duì)血紅蛋白提取率影響顯著（p＜0.05），因此，各因素對(duì)血紅蛋白提取率的影響不是簡(jiǎn)單的線性關(guān)系。模型p＜0.0001，回歸模型極其顯著；失擬項(xiàng)p=0.1804，不顯著；相關(guān)系數(shù)R2=0.9920，響應(yīng)值的變化有99.20%與所選變量有關(guān)系，說(shuō)明模型擬合程度良好，能較準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)和分析實(shí)際情況；模型的校正系數(shù)R2Adj=0.9841，說(shuō)明不確定因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾小，實(shí)驗(yàn)誤差小，該模型與數(shù)據(jù)擬合度良好，可以用此模型分析和預(yù)測(cè)超聲波對(duì)血紅蛋白提取的工藝結(jié)果［15-16］。

2.3.2響應(yīng)面的交互作用及優(yōu)化由圖6可知，當(dāng)水與紅細(xì)胞體積比為4∶1，工作時(shí)間與間歇時(shí)間比為1∶1時(shí)，隨著功率的增大，血紅蛋白提取率呈先升高后下降趨勢(shì)；功率一定時(shí)，隨著超聲時(shí)間的延長(zhǎng)，血紅蛋白提取率變化緩慢。分析結(jié)果表明，功率的主效應(yīng)大于時(shí)間。

圖6　功率與時(shí)間的交互作用對(duì)血紅蛋白提取率影響的響應(yīng)面Fig.6　Response surface interaction power and time effects on the extraction of hemoglobin

由圖7可知，當(dāng)水與紅細(xì)胞體積比為4∶1，時(shí)間為20min，工作與間歇時(shí)間比不變時(shí)，隨著功率的增大，血紅蛋白提取率呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì)；功率一定時(shí)，隨著間歇時(shí)間比的改變，血紅蛋白提取率呈先上升后下降趨勢(shì)。分析結(jié)果表明：功率和間歇時(shí)間比的交互作用對(duì)提取率存在較大的影響。

圖7　功率與工作和間歇時(shí)間比的交互作用對(duì)血紅蛋白提取率影響的響應(yīng)面Fig.7　The response surface interaction power and ultrasonic time to quiescent interval effects on the extraction of hemoglobin

由圖8可知，當(dāng)超聲功率為250W，工作時(shí)間與間歇時(shí)間比為1∶1，時(shí)間不變時(shí)，隨著水與紅細(xì)胞體積比增大，血紅蛋白提取率呈先上升后下降趨勢(shì)；水與紅細(xì)胞體積不變時(shí)，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，血紅蛋白提取率逐漸上升，趨于平緩。分析結(jié)果表明：水與紅細(xì)胞體積比的主效應(yīng)大于時(shí)間。

由圖9可知，當(dāng)超聲功率為250W，水與紅細(xì)胞體積比為4∶1時(shí)，時(shí)間不變，隨著間歇時(shí)間比的改變，血紅蛋白提取率呈先上升后下降趨勢(shì)；工作與間歇時(shí)間比不變時(shí)，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，血紅蛋白提取率變化緩慢。分析結(jié)果表明：間歇時(shí)間比和時(shí)間的交互作用對(duì)提取率的影響較大。

2.3.3驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)由模型預(yù)測(cè)，當(dāng)提取率達(dá)到最大值時(shí)，水與紅細(xì)胞體積比為4.17∶1，超聲時(shí)間為17.38min，工作時(shí)間與間歇時(shí)間比為1.15∶1，超聲功率為247.88W，提取率可達(dá)到93.69%。為了檢驗(yàn)響應(yīng)面模型的有效性和可靠性，根據(jù)優(yōu)化所得到超聲波法最佳條件，均結(jié)合實(shí)際情況對(duì)其進(jìn)行適當(dāng)修正［17］。

在水與紅細(xì)胞體積比為4∶1，超聲時(shí)間17min，超聲時(shí)間與間歇時(shí)間比為1∶1，超聲功率為250W的實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，血紅蛋白提取率為92.33%，與丁楠等［11］的研究結(jié)果相比，提高了11.53%，該實(shí)驗(yàn)值與模型預(yù)測(cè)值（93.69%）的差值僅占預(yù)測(cè)值的1.5%。由此可以認(rèn)為該實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ瓦x擇合理。

圖8　時(shí)間與水與紅細(xì)胞體積比的交互作用對(duì)血紅蛋白提取率影響的響應(yīng)面Fig.8　The response surface interaction operation time and ratio of water to red blood cell effects on the extraction of hemoglobin

圖9　工作與間歇時(shí)間比與時(shí)間的交互作用對(duì)血紅蛋白提取率影響的響應(yīng)面Fig.9　The response surface interaction ultrasonic time to quiescent interval and operation time effects on the extraction of hemoglobin

3　結(jié)論

在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化了超聲波法提取血紅蛋白工藝，利用Design-Expert 8.0.6軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析擬合，得出了超聲波法提取血紅蛋白工藝的數(shù)學(xué)模型，結(jié)果表明水與紅細(xì)胞體積比、超聲時(shí)間、超聲時(shí)間與間歇時(shí)間比、工作時(shí)間的二次項(xiàng)對(duì)血紅蛋白的提取率影響顯著，說(shuō)明各因素對(duì)血紅蛋白提取率的影響不是簡(jiǎn)單地線性關(guān)系。超聲波法提取血紅蛋白的最佳工藝條件為：水與紅細(xì)胞體積比為4∶1，超聲時(shí)間17min，超聲時(shí)間與間歇時(shí)間比為1∶1，超聲功率250W，血紅蛋白提取率達(dá)到92.33%。因此，利用響應(yīng)面分析對(duì)超聲波法提取牛血紅蛋工藝進(jìn)行優(yōu)化，可獲得最優(yōu)的工藝參數(shù)，從而為牛血液的開(kāi)發(fā)和利用提供了理論基礎(chǔ)。

［1］黃群，馬美湖，楊撫林，等.畜禽血液血紅蛋白的開(kāi)發(fā)利用［J］.肉類(lèi)工業(yè)，2003（10）：19-20.

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Optimization of ultrasonic extraction of bovine hemoglobin by response surface methodology

HE Yu-lan，LU Shi-ling*，WU Ya-nan，WANG Qi-xiang，TIAN Pan
（Food College，Shihezi University，Shihezi 832000，China）

The bovine blood was used as raw material to extract hemoglobin by means of ultrasonic.Effect of ratio（V/V）of water to red blood cell，operation time，ratio of ultrasonic time to quiescent interval and ultrasonic power on the extraction ration of hemoglobin were investigated.Through single factor test，their scopes were initially determined，and then the extraction technology parameters were optimized through response surface methodology.The results showed that:when the ratio（V/V）of water to red blood cell was 4∶1，the operation time was 17min，the ratio of ultrasonic time to quiescent interval was 1∶1，and the ultrasonic power was 250W，the extraction rate of hemoglobin was 92.33%.

bovine blood；hemoglobin；ultrasonic；response surface；process parameters

TS251.2

B

1002-0306（2015）10-0259-06

10.13386/j.issn1002-0306.2015.10.046

2014－08－18

赫玉蘭（1990-），女，在讀碩士研究生，主要從事畜產(chǎn)品加工方面的工作。

盧士玲（1976-），女，博士，副教授，研究方向：畜產(chǎn)品加工和質(zhì)量安全。

新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)科技型中小企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新基金項(xiàng)目（2014BD002）。