對近紅外測定白芍中芍藥苷的深入研究

張 秋 李元峰 侯 超 李云霞* 仁 杰 王麗清

（頸復康藥業(yè)集團有限公司 河北 承德 067000）

對近紅外測定白芍中芍藥苷的深入研究

張 秋 李元峰 侯 超 李云霞* 仁 杰 王麗清

（頸復康藥業(yè)集團有限公司 河北 承德 067000）

目的 采用近紅外光譜法快速測定白芍中芍藥苷含量。方法 白芍粉碎過，過篩，壓片，采用Luminar AOTF-NIR光譜儀漫反射技術采集白芍的近紅外光譜，以HPLC分析值作為參照，運用多元散射校正，平滑，求導等技術隊光譜修飾，結合偏最少二乘法（PLS1）建立芍藥苷含量快速測定的方法。結果 采用近紅法光譜法能夠快速測定白芍中芍藥苷的含量，經(jīng)外部預測，預測值與真實值的相關系數(shù)達0.9936。結論 該方法準確、無損失、無污染、簡便、快速的綠色分析技術，可實現(xiàn)白芍大規(guī)模的快速檢測。

近紅外光譜法；化學計量學方法；白芍；HPLC；芍藥苷

1　儀器與試藥

1.1儀器：Luminar AOTF-NIR光譜儀（濟南金宏利實業(yè)有限公司）；Agileng1100高效液相色儀（安捷倫科技有限公司）；YP-2壓片機（上海山岳科學儀器有限公司）；梅特勒AE240電子天平（瑞士梅特勒集團有限公司）；KQ-500DE超聲波（昆山市超聲儀器有限公司）；萬能粉碎機（天津市泰斯特儀器有限公司）。

1.2試藥：乙醇（天津佳興化工玻璃儀器工貿有限公司20140304）；磷酸（天津市北聯(lián)精細化學品開發(fā)有限公司20130113），乙腈（Fisher 134145），純化水，芍藥苷（中檢所110736-201337）。

1.3樣品：不同產(chǎn)地的54批白芍經(jīng)頸復康藥業(yè)高級鑒別師商春麗鑒定為毛茛科植物芍藥Paeomia lactiflora Pall的干燥根。

2　方法與結果

2.1近紅外光譜的采集：將54批樣品粉碎過四號篩，每份2克，壓片，扣除背景，采集光譜，采集方法：采集區(qū)域1100～2300 nm，每片反正面各取5個點，掃描次數(shù)300，增益2，溫度（25±2） ℃，相對濕度（45%～50%），十張光譜再去平均光譜，為供試品光譜。

圖1

圖2

圖3

表1　模型建立完成，以54批樣品在模型的內部驗證表

2.2近紅外光譜分析：圖1是54批樣品的原始光譜，樣品比較復雜，但很相似，需進一步對光譜處理，才能建立模型，對芍藥苷進一步分析；圖2是經(jīng)多元散射校正，消除顆粒分布不均勻及顆粒大小產(chǎn)生的散射影響，轉化成吸收光譜，經(jīng)一階微分，可有效地消除基線和其他背景的干擾，分辨疊加峰，提高分辨率和靈敏度，九點平滑所得圖譜，用來消除噪音［1-7］。由圖2可看出，光譜差異性比較小，主成分變化明顯，可用于建立模型。

2.3模型的建立：光譜經(jīng)處理導入計量學軟件（The Unscrambler）進行分析。全光譜建立模型，主成分因子太多，過擬合現(xiàn)象嚴重，影響模型的準確性。對應《中國藥典》方法測定芍藥苷含量［8］，求出的真實值，運用偏最小二乘法（PLS1）多次驗證，最后確定，主成分因子數(shù)選擇為5，模型光譜區(qū)間為1620～1700 nm，建立模型效果較好，見圖3。相關系數(shù)為0.9159 驗證均方差0.3067。表1是模型建立完成，以54批樣品在模型的內部驗證。

2.4結果：由表2知，預測值與真實值有一定差距，但是可以接受的，建模數(shù)據(jù)僅有54批，數(shù)據(jù)量建模太少，隨著樣品量的增加，模型進一步修飾，效果會更好。

表2　數(shù)據(jù)驗證結果表

3　討 論

近紅外測定時，受外界物理因素影響很大，如溫度、濕度、顆粒大小、壓力等等，樣品經(jīng)四號篩過濾，用固體粉末壓片，再進行近紅外光譜儀的測定，減少樣品的消除顆粒分布不均勻及顆粒大小產(chǎn)生的散射的現(xiàn)象，同時樣品受外界影響因素較小了，樣品更加穩(wěn)定，是樣品光譜更加穩(wěn)定。實驗經(jīng)偏最小二乘法（PLS1）測得，影響芍藥苷含量的近紅外光譜區(qū)間是1620～1700 nm，使實驗的準確性大大提高。

近紅外測定白芍中芍藥苷準確、無損失、無污染、簡便、快速的綠色分析技術，可實現(xiàn)白芍大規(guī)模的快速檢測，前景有很大發(fā)展。

［1］田高友，袁洪福，褚小立，等.結合小波變換與微分法改善近紅外光譜分析精度［J］.光譜學與光譜分析，2005，25（4）：516-520.

［2］褚小立，袁洪福，陸婉珍.近紅外分析中光譜預處理及波長選擇方法進展與應用［J］.化學進展，2004，16（4）：528-541.

［3］高榮強，范世福，嚴衍祿，等.近紅外光譜的數(shù)據(jù)預處理研究［J］.光譜學與光譜分析，2004，24（12）：1563-1567.

［4］王一兵，千紅宇，翟宏菊，等.近紅外光譜分辨率對定量分析的影響［J］.分析化學，2006，34（5）：699-701.

［5］夏柏楊，任竿.近紅外光譜分析技術的一些數(shù)據(jù)處理方法的討論［J］.光譜實驗室，2005，22（3）：629-634.

［6］郝勇，陳斌，朱銳.近紅外光譜預處理中幾種小波消噪方法的分析［J］.光譜學與光譜分析，2006，26（10）：1838-1841.

［7］田高友，袁洪福，劉慧穎，陸婉珍小波變換用于近紅外光譜性質分析［J］.分析化學，2004，32（9） .1125-l130.

［8］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［M］.一部.北京：化學工業(yè)出版社，2005：96-97.

Research on Near Infrared Determination of paeoniflorin in Radix Paeoniae Alba

ZHANG Qiu，LI Yuan-feng，HOU Chao，LI Yun-xia，REN Jie，WANG Li-qing
（Jingfukang Pharmaceutical Group Co.，Ltd.，Chengde 067000，China）

Objective Using near infrared spectra method for rapid determination of paeoniflorin in radix paeoniae alba.Methods Radix paeoniae alba crushing，sieving，tabletting，adopting Luminar AOTF-diffuse NIR spectrometer technology acquisition near infrared spectrum of radix paeoniae alba，HPLC was used to analyze the value as a reference，use the multiple scattering correction，smooth，derivative spectrum modification technology team，combined with partial least squares （PLS1） to establish a method of rapid determination of paeoniflorin content.Results Using the method of near red spectrometry to rapid determination of the content of paeoniflorin in radix paeoniae alba，the external prediction，prediction and the real value of the correlation coefficient of 0.9936. Conclusion The method is accurate，no damage，no pollution，simple and rapid analysis of green technology，which can realize mass rapid detection of radix paeoniae alba.

Near infrared spectrometry；Chemometrics methods；Radix paeoniae alba.HPLC；paeoniflorin

R282.710.3

B

1671-8194（2015）27-0052-02

E-mail：cdjfk-lyx@163.com