王 卓
(大連市金州區(qū)第一人民醫(yī)院,遼寧 大連 116000)
幾種ASO、RF檢測方法的比較分析
王 卓
(大連市金州區(qū)第一人民醫(yī)院,遼寧 大連 116000)
目的 對比分析幾種ASO、RF檢測方法,探討檢測方法的原理、結(jié)果準(zhǔn)確性和線性范圍。方法 利用不同方法對已知不同濃度質(zhì)控血清實(shí)施檢測,利用統(tǒng)計(jì)學(xué)對結(jié)果實(shí)施對比分析。結(jié)果 不同檢測方法所獲結(jié)果之間所存區(qū)別比較大,在這之中,散射比濁法的準(zhǔn)確性最佳,且其線性范圍為最大。結(jié)論 在醫(yī)院檢驗(yàn)項(xiàng)目中,ASO檢測和RF檢測作為常見檢測項(xiàng)目,要想確保其檢測結(jié)果的可靠性以及準(zhǔn)確性,所選實(shí)驗(yàn)方法必須要好,從本次研究的結(jié)果來看,推薦應(yīng)用免疫比濁法,若條件允許可優(yōu)先采取散射比濁法。
散射比濁法;ASO;透射比濁法;RF;膠乳凝集法
在臨床上,風(fēng)濕熱與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎不僅是常見病,同時(shí)也是多發(fā)病[1]。在臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目中ASO和RF是兩個(gè)常規(guī)項(xiàng)目,在進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí),所選實(shí)驗(yàn)方法的好壞直接關(guān)系著該病的臨床診療以及預(yù)防。當(dāng)前在ASO、RF的檢測上,常用檢測方法有免疫比濁法、膠乳凝集法[2]。本文就上述這幾種檢測方法的檢測原理以及結(jié)果實(shí)施對比分析。
1.1一般資料:在本次研究中,所檢測的對象為我院檢驗(yàn)科所購入的五種定值質(zhì)控血清,將每一種血清劃分為25份進(jìn)行測定。所用儀器有全自動生化分析儀、西門子特種蛋白儀.
1.2方法。檢測方法主要如下:①透射比濁法:當(dāng)抗體和抗原于稀釋系統(tǒng)中發(fā)生反應(yīng)時(shí),所形成的這一免疫復(fù)合物于PEG等作用下就會形成為微粒。若抗體濃度為固定時(shí),則免疫復(fù)合物和待測樣品中所含抗原量之間為正比。借助于其一定波長透射光變化值來進(jìn)行免疫復(fù)合物量的測定,繼而獲得待測樣品抗原所含量。②散射比濁法:其監(jiān)測原理和透射比濁法相同,借助于特定散射比濁儀對免疫復(fù)合物散射光值進(jìn)行測定,散射光強(qiáng)度和免疫復(fù)合物的量為正比,即和待測樣品中所含抗原量為正比。③膠乳凝集法:該方法包被了血清中待測物質(zhì)和致敏顆??贵w反應(yīng),在肉眼下能明顯見凝集反應(yīng)。在利用上述方法進(jìn)行檢測時(shí),所用試劑需達(dá)到室溫,且輕輕將其混勻,以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
1.3方法精確性:在本次研究中,批內(nèi)變異系數(shù)在1.83%~2.20%,批間變異系數(shù)在2.12%~2.54%,其平均回收率是102.2%[3-4]。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:在本次的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)中采用的是SPSS17.0軟件來實(shí)施統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,其中組間數(shù)據(jù)資料的對比采用的是t檢驗(yàn),而計(jì)數(shù)資料對比則采用的是卡方檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1ASO檢測結(jié)果:當(dāng)標(biāo)定值為100時(shí),膠乳凝集法所測結(jié)果為2份陽性,23份陰性;透射比濁法所測結(jié)果為(99.2±6.3);散射比濁法所測結(jié)果為(1.3±2.7)。當(dāng)標(biāo)定值為200時(shí),膠乳凝集法所測結(jié)果為12份陽性,13份陰性;透射比濁法所測結(jié)果為(187.2±9.5);散射比濁法所測結(jié)果為(198.6±4.5)。當(dāng)標(biāo)定值為500時(shí),膠乳凝集法所測結(jié)果為21份陽性,4份陰性;透射比濁法所測結(jié)果為(480.9± 15.8);散射比濁法所測結(jié)果為(501.8±8.5)。當(dāng)標(biāo)定值為750時(shí),膠乳凝集法所測結(jié)果為24份陽性,1份陰性;透射比濁法所測結(jié)果為(660.3±17.0);散射比濁法所測結(jié)果為(727.7±12.6)。當(dāng)標(biāo)定值為1000時(shí),膠乳凝集法所測結(jié)果為20份陽性,5份陰性;透射比濁法所測結(jié)果為(830.3±29.9);散射比濁法所測結(jié)果為(922.4± 19.3)。ASO檢測結(jié)果見表1。
2.2RF檢測結(jié)果:當(dāng)標(biāo)定值為15時(shí),膠乳凝集法所測結(jié)果為5份陽性,20份陰性;透射比濁法所測結(jié)果為(14.4±2.4);散射比濁法所測結(jié)果為(15.2±1.5)。當(dāng)標(biāo)定值為30時(shí),膠乳凝集法所測結(jié)果為11份陽性,14份陰性;透射比濁法所測結(jié)果為(28.5±4.8);散射比濁法所測結(jié)果為(28.9±2.9)。當(dāng)標(biāo)定值為60時(shí),膠乳凝集法所測結(jié)果為23份陽性,2份陰性;透射比濁法所測結(jié)果為(56.3±5.7);散射比濁法所測結(jié)果為(58.2±4.5)。當(dāng)標(biāo)定值為100時(shí),膠乳凝集法所測結(jié)果為21份陽性,4份陰性;透射比濁法所測結(jié)果為(89.5±8.4);散射比濁法所測結(jié)果為(96.4±7.2)。當(dāng)標(biāo)定值為150時(shí),膠乳凝集法所測結(jié)果為18份陽性,7份陰性;透射比濁法所測結(jié)果為(122.4±11.4);散射比濁法所測結(jié)果為(137.6±8.8)。其結(jié)果見表2。
通過上述數(shù)據(jù)的分析可知,不同檢測方法所獲結(jié)果之間所存區(qū)別比較大,在這之中,散射比濁法的準(zhǔn)確性最佳,且其線性范圍為最大。
經(jīng)大量實(shí)踐發(fā)現(xiàn),ASO、RF檢測方法在操作上比較簡單,便于檢驗(yàn)人員操作和掌握,但是容易受方面因素的干擾以及影響[5]。從本次研究的結(jié)果來看,通過上述檢測結(jié)果的分析可知,膠乳凝集法所獲結(jié)果只是半定量分析或者定性分析得到的,再加上其自身原因,很容易出現(xiàn)假陰性或者假陽性等現(xiàn)象,尤其在遇到臨界值時(shí),很難對結(jié)果進(jìn)行判斷。透射比濁法在線性檢測上比較好,于較寬范圍內(nèi)所獲結(jié)果比較準(zhǔn)確,當(dāng)ASO標(biāo)定值低于500,且RF標(biāo)定值低于60時(shí),該方法準(zhǔn)確性一般于5%范圍。但在對高值進(jìn)行檢測時(shí),其結(jié)果很容易發(fā)生偏差,此時(shí)其不準(zhǔn)確性均在10%及以上,在檢測時(shí)需對樣本進(jìn)行稀釋。散射比濁法所獲結(jié)果線性較好,不管是在低值檢測上,還是中高值檢測上,有關(guān)系數(shù)均在0.97~1.00范圍內(nèi),其截距和零相接近,于較大抗原濃度的范圍區(qū)間,基本上無超標(biāo)測定值。鑒于此,筆者建議在ASO檢測和RF檢測中盡量選用免疫比濁法,若條件允許可優(yōu)先采取散射比濁法。
表1 ASO檢測結(jié)果 IU/mL()
表1 ASO檢測結(jié)果 IU/mL()
標(biāo)定值 100 200 500 750 1000膠乳凝集法陽性 2 12 21 24 20膠乳凝集法陰性 23 13 4 1 5透射比濁法 99.2±6.3 187.2±9.5 480.9±15.8 660.3±17.0 830.3±29.9散射比濁法 1.3±2.7 198.6±4.5 501.8±8.5 727.7±12.6 922.4±19.3
表2 RF檢測結(jié)果 IU/mL()
表2 RF檢測結(jié)果 IU/mL()
標(biāo)定值 15 30 60 100 150膠乳凝集法陽性 5 11 23 21 18膠乳凝集法陰性 20 14 2 4 7透射比濁法 14.4±2.4 28.5±4.8 56.3±5.7 89.5±8.4 122.4±11.4散射比濁法 15.2±1.5 28.9±2.9 58.2±4.5 96.4±7.2 137.6±8.8
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R593.21;R593.22
B
1671-8194(2015)24-0100-02