兩種方法檢測(cè)食用油脂中的多環(huán)芳烴

曹夢(mèng)思，張立實(shí)，王 君，阮麗萍，王格平，鄭 超，嚴(yán)衛(wèi)星

（1.四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院，四川成都610041；2.國(guó)家食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中心，北京100022；3.江蘇省疾病預(yù)防控制中心，江蘇南京210009；4.豐益（上海）生物技術(shù)研發(fā)中心有限公司，上海200137）

兩種方法檢測(cè)食用油脂中的多環(huán)芳烴

曹夢(mèng)思1，2，張立實(shí)1，*，王 君2，*，阮麗萍3，王格平4，鄭 超4，嚴(yán)衛(wèi)星2

（1.四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院，四川成都610041；2.國(guó)家食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中心，北京100022；3.江蘇省疾病預(yù)防控制中心，江蘇南京210009；4.豐益（上海）生物技術(shù)研發(fā)中心有限公司，上海200137）

分別建立同位素內(nèi)標(biāo)定量-QuEChERS凈化-氣相色譜-三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜法（方法一）和GPC自動(dòng)凈化-高效液相色譜-熒光檢測(cè)法（方法二）兩種方法，為檢測(cè)食用油脂中歐盟優(yōu)先控制的16種多環(huán)芳烴（EU15+1PAHs）提供了快速有效的方法。分別對(duì)104份食用油脂樣品進(jìn)行分析比較，對(duì)比兩方法檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果表明：兩方法均滿(mǎn)足國(guó)內(nèi)外對(duì)食品中PAHs檢測(cè)的要求，方法一、方法二精密度實(shí)驗(yàn)RSD值分別小于5.4%、6.81%，平均加標(biāo)回收率除個(gè)別外，分別在71.3%～111.6%、93.1%～119%范圍內(nèi)，RSD值分別小于5.0%、5.5%；標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)線(xiàn)性方程相關(guān)系數(shù)分別大于0.998、0.990，方法一定量限范圍為0.23～0.50μg/kg，方法二定量限為0.9μg/kg、檢出限為0.3μg/kg；英國(guó)食品化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證（FAPAS）盲樣測(cè)定結(jié)果均達(dá)到規(guī)定檢測(cè)結(jié)果；兩方法對(duì)104份油樣的兩組檢測(cè)結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，整體分析和分不同油種比較結(jié)果基本一致。結(jié)論：建立了針對(duì)食用油中EU15+1PAHs的分析方法，兩方法均滿(mǎn)足相應(yīng)檢測(cè)要求，且具有良好的準(zhǔn)確性和實(shí)用性。

食用油脂，歐盟優(yōu)控，多環(huán)芳烴，氣相色譜-三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜法，高效液相色譜-熒光檢測(cè)法

多環(huán)芳烴（polycyclic aromatic hydrocarbons，PAHs）的性質(zhì)及危害近年來(lái)已被大量研究證實(shí)，其膳食暴露危害（某物質(zhì)通過(guò)飲食攝入途徑進(jìn)入人體對(duì)人體產(chǎn)生的危害，膳食暴露量=食品化學(xué)物質(zhì)含量×食品消費(fèi)量/人體體重）也已受到廣泛關(guān)注［1-3］。研究表明，不同類(lèi)別食品中都曾檢出PAHs［4］，而由于其具有強(qiáng)親脂性，食用油脂中往往含量較高，并成為膳食暴露的主要貢獻(xiàn)者，約占總膳食攝入PAHs的1/3［5］。目前單獨(dú)針對(duì)苯并（a）芘［B（a）P］的分析方法已較為成熟，但對(duì)于PAHs混合物的分析大多仍針對(duì)美國(guó)環(huán)境保護(hù)署（United States Environmental Protection Agency，USEPA）提出的環(huán)境中應(yīng)優(yōu)先監(jiān)測(cè)的16種PAHs［萘、菲、蒽、芘、苊、芴、苊烯、熒蒽、苯并（g，h，i）苝、苯并（a）蒽、屈、苯并（b）熒蒽、苯并（k）熒蒽、茚并（1，2，3-cd）芘、苯并（a）芘、二苯并（a，h）蒽］，而近期研究發(fā)現(xiàn)USEPA監(jiān)控的16種PAHs并不能真實(shí)反映出食品中PAHs混合物的總毒性效應(yīng)，因此食品添加劑聯(lián)合專(zhuān)家委員會(huì)（Joint Expert Comm ittee on Food Additive，JECFA）［6］依據(jù)文獻(xiàn)研究總結(jié)了13種具有明確的基因毒性和致癌性的PAHs［苯并（a）蒽、苯并（a）芘、苯并（b）熒蒽、苯并（j）熒蒽、苯并（k）熒蒽、屈、二苯并（a，h）蒽、二苯（a，e）芘、二苯（a，h）芘、二苯（a，i）芘、二（a，l）芘、茚并（1，2，3-cd）芘、5-甲基屈］且建議加強(qiáng)苯并（c）芴的檢測(cè)，歐盟食品安全管理局（European Food Safety Authority，EFSA）在此基礎(chǔ)上提出了16種應(yīng)優(yōu)先控制的PAHs［4］［下文簡(jiǎn)稱(chēng)EU15+1PAHs，比JECFA增加了1，12-苯并芘、環(huán)戊并（c，d）芘和苯并（c）芴］，因此檢測(cè)EU15+ 1PAHs更能真實(shí)反映食品中PAHs混合物的污染情況及毒性效應(yīng)。

但是目前針對(duì)EU15+1PAHs的分析測(cè)定，尚屬探究階段，國(guó)內(nèi)外對(duì)食品中EU15+1PAHs的分析均未規(guī)定具體方法和方法的性能指標(biāo)。國(guó)外采用較多的是高效液相/熒光檢測(cè)法（HPLC-FLD）和氣質(zhì)聯(lián)用法（GC-MS/-MSMS），前處理方法依情況各異，缺乏統(tǒng)一的檢測(cè)方法；國(guó)內(nèi)對(duì)此研究極少，仍處于USEPA提出的16種PAHs階段。鑒于此，本研究組織兩實(shí)驗(yàn)室分別建立萃取方法——同位素內(nèi)標(biāo)（氘代內(nèi)標(biāo)）定量-QuEChERS（Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe的縮寫(xiě)）快速凈化-氣相色譜-三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜法（下文簡(jiǎn)稱(chēng)方法一）和GPC自動(dòng)凈化-高效液相色譜-熒光檢測(cè)法（下文簡(jiǎn)稱(chēng)方法二）兩種方法，探索其對(duì)EU15+1PAHs分析的適用性，并通過(guò)對(duì)購(gòu)自市場(chǎng)的104份食用油脂樣品進(jìn)行檢測(cè)分析來(lái)比較兩方法的可行性和準(zhǔn)確性。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

食用油脂樣品 共104份油脂樣品，主要采自北京、上海、廣東等正規(guī)超市、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、糧油批發(fā)市場(chǎng)等，涉及12種常見(jiàn)油種，10種植物油（菜籽油、花生油、芝麻油、葵花籽油、橄欖油、大豆油、棕櫚油、茶油、玉米油、稻米油）和2種動(dòng)物油（豬油、牛油）；正己烷、二甲基亞砜、乙腈、環(huán)己烷∶乙酸乙酯（1∶1） 均為色譜純；水 超純水；氘代內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)品 德國(guó)o2si；QuEChERS混合填料 德國(guó)CNW公司；15種PAHs混合標(biāo)準(zhǔn)品 美國(guó)Accustandard公司；FAPAS棕櫚油樣品 編號(hào)為T(mén)0648QC，包含5種PAHs物質(zhì)，F(xiàn)APAS中國(guó)代理處。

萬(wàn)分之一電子天平；氮吹濃縮儀；渦旋振蕩器；離心機(jī)；100μL、1000μL移液器 德國(guó)Eppendorf；DB-EUPAH專(zhuān)用色譜柱 20m×0.18mm，0.14μm，安捷倫；TSQ Quantum XLS 美國(guó)，賽默飛世爾科技有限公司；液相色譜柱 Waters PAH C185μm×4.6mm× 250mm column，Waters公司；GPC自動(dòng)凈化器；液相色譜儀-熒光檢測(cè)器 HP100型。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品前處理 采樣完成后，分別取等量分裝到兩套同樣的棕色玻璃瓶中，編號(hào)、避光、常溫、密封保存，分送兩實(shí)驗(yàn)室待測(cè)。

方法一：稱(chēng)取約1g油脂樣品于50m L離心管中，加入1ng/m L的混合氘代內(nèi)標(biāo)溶液1m L，依次加入5m L正己烷和5m L二甲基亞砜，震搖、4500r/m in離心3m in，取下層至另一50m L離心管中，依次加入5m L超純水和5m L正己烷，搖勻、必要時(shí)4500r/m in離心3m in，取上層至8m L樣品瓶中，氮?dú)饩徛蹈桑尤爰s0.2g QuEChERS混合填料和1m L乙腈，渦旋震搖1min以上，5000r/m in離心5m in，取上清液上機(jī)檢測(cè)。

方法二：參考《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物油中多環(huán)芳烴的測(cè)定》（GB/T 23213-2008），稱(chēng)取約1g食用油，加入環(huán)己烷∶乙酸乙酯（1∶1）至10m L，GPC分離。收集4m L餾分，自然晾干，加0.5m L乙腈復(fù)溶，HPLC-熒光檢測(cè)。

1.2.2 檢測(cè)條件 方法一：色譜條件：程序升溫過(guò)程為45℃保持0.8min，以45℃/min升至200℃，再以2.5℃/min升至225℃，再以3℃/min升至245℃，隨后以0.5℃/m in升至247℃，再以6℃/m in升至300℃，最后以10℃/m in升至320℃，保持4.5m in；進(jìn)樣口溫度：280℃；進(jìn)樣方式：PTV不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量為5μL；載氣為氦氣，恒流模式；碰撞氣為氬氣。質(zhì)譜條件包括，電子轟擊離子源；傳輸線(xiàn)溫度為320℃；離子源溫度為260℃；接收極電流50μA；溶劑延遲時(shí)間10.0m in；碰撞氣體為氬氣［7］。

方法二：GPC條件基本同《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)植物油中多環(huán)芳烴的測(cè)定》（GB/T 23213-2008），流動(dòng)相：乙酸乙酯+環(huán)己烷（5+5），流速：5.0m L/m in，進(jìn)樣量：5m L，收集時(shí)間：30m in開(kāi)始收集，共收集22m in，收集4m L濃縮液；液相色譜條件基本同《動(dòng)植物油脂多環(huán)芳烴的測(cè)定》（GB/T 24893-2010），流動(dòng)相：乙腈/水，流速：0.4m L/m in，柱溫：30℃，進(jìn)樣量：20μL。

1.2.3 方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) 兩方法建立過(guò)程中均開(kāi)展了相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)，包括標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制、精密度實(shí)驗(yàn)、重復(fù)性實(shí)驗(yàn)、加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)。

1.2.4 樣品分析 采用上述兩方法檢測(cè)條件，兩實(shí)驗(yàn)室分別針對(duì)FAPAS棕櫚油樣品進(jìn)行盲檢，后分別檢測(cè)待測(cè)樣品；方法一以保留時(shí)間及碎片離子相對(duì)豐度定性、內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)定量，方法二依據(jù)出峰保留時(shí)間定性，峰面積、工作曲線(xiàn)外標(biāo)法定量。

1.2.5 數(shù)據(jù)處理 對(duì)比兩套數(shù)據(jù)，判斷并剔除異常值，未檢出值賦值為方法的1/2檢出限，采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，比較兩方法結(jié)果。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測(cè)條件分析

2.1.1 前處理方法的對(duì)比 方法一采用QuEChERS凈化提取后的樣品（0.2g QuEChERS萃取一次），結(jié)果表明該凈化法相比于其他凈化法（如液-液萃取、固相萃取、濁點(diǎn)萃取法）操作簡(jiǎn)單、省時(shí)省力，且效果較好。近幾年，該法成為國(guó)外食品PAHs分析中前處理的熱門(mén)方法［8-10］，但國(guó)內(nèi)研究較少，且只是針對(duì)USEPA提出的16種PAHs［11-12］，使用該前處理方法分析EU15+ 1PAHs還是首次。

方法二采用的凝膠滲透色譜法借鑒我國(guó)國(guó)標(biāo)（GB/T 23213-2008）推薦方法，結(jié)合全自動(dòng)操作，使操作更加簡(jiǎn)便省時(shí)，且降低了人為操作誤差，提高了凈化效率和準(zhǔn)確度。兩方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，可按實(shí)際實(shí)驗(yàn)室條件選擇。

2.1.2 質(zhì)譜條件的選擇 根據(jù)氣相色譜分離和質(zhì)譜全掃描，確定15+1種多環(huán)芳烴及4種氘代內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間和母離子，選擇不同的碰撞能量對(duì)母離子進(jìn)行電子轟擊，選擇每種化合物的最佳監(jiān)測(cè)離子對(duì)和最佳碰撞能量，同時(shí)對(duì)每組化合物的質(zhì)譜掃描寬度和掃描時(shí)間進(jìn)行優(yōu)化。得到最佳的質(zhì)譜分析條件。按1.2所示條件進(jìn)樣，在SRM模式下，10.0μg/L的15+1種歐盟優(yōu)控PAHs混合標(biāo)樣的總離子流圖見(jiàn)圖1。

圖1 15+1種歐盟優(yōu)控多環(huán)芳烴混合標(biāo)樣SRM模式下總離子流圖Fig.1 Total ion chromatogram of EU15+1PAHs standard solution

2.1.3 液相色譜條件的選擇 借鑒《動(dòng)植物油脂多環(huán)芳烴的測(cè)定》（GB/T 24893-2010），由于本法環(huán)戊（c，d）芘、苯并（j）熒蒽、二苯并（a，l）芘在液相色譜熒光儀器上的檢測(cè)限為10μg/kg，不能滿(mǎn)足檢測(cè)要求，因此本法只能檢測(cè)除這3種物質(zhì)外的歐盟優(yōu)控的13種PAHs；該方法13種歐盟優(yōu)控PAHs混合標(biāo)樣的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖見(jiàn)圖2。

2.2 方法學(xué)參數(shù)

圖2 13種歐盟優(yōu)控PAHs混合標(biāo)樣的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖Fig.2 Chromatogram of 13 EUPAHs standard solution

表1 兩方法方法學(xué)參數(shù)Table 1 Methodology parameters of the twomethods

兩種方法的主要方法學(xué)參數(shù)見(jiàn)表1。

由上述兩套方法學(xué)參數(shù)的比較可看出，兩方法均達(dá)到了我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測(cè)》（GB/T 27404-2008）的要求，且滿(mǎn)足歐盟（EC）No 333/2007對(duì)于B（a）P的檢測(cè)要求（檢出限＜0.3μg/kg、定量限＜0.9μg/kg、回收率在50%～120%之間）。從檢測(cè)物質(zhì)來(lái)看，方法一比方法二檢出物質(zhì)更加全面；且由于方法二只依據(jù)出峰保留時(shí)間定性，而方法一同時(shí)參考保留時(shí)間和質(zhì)譜碎片離子相對(duì)豐度定性，因此方法一特異度優(yōu)于方法二；從上述參數(shù)來(lái)看，方法一定量限更低，在痕量分析時(shí)更具優(yōu)勢(shì)（由于兩方法在實(shí)驗(yàn)條件、設(shè)備、方法、操作人員方面完全屬于兩個(gè)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，因此該結(jié)論不確定性較大）。而方法二較于方法一雖在某些方法學(xué)性能方面略有差異，但本法參考自國(guó)標(biāo)推薦方法，具有操作簡(jiǎn)便、人工操作較少、定量準(zhǔn)確、實(shí)驗(yàn)條件易于實(shí)現(xiàn)等優(yōu)勢(shì)，其中無(wú)法檢測(cè)的3種PAHs，通過(guò)參考文獻(xiàn)及方法一的結(jié)果可知其含量水平均很低，因此對(duì)整個(gè)EU15+1PAHs檢測(cè)結(jié)果影響有限。

歐盟曾針對(duì)15+1PAHs組織了參比實(shí)驗(yàn)室測(cè)試，第一次參比測(cè)試時(shí)發(fā)現(xiàn)其中的環(huán)戊并（c，d）芘和某些二苯并物質(zhì)［如二苯并（a，h）芘、二苯并（a，i）芘］較難分析［13］；第二次則有所改善，幾乎所有參比實(shí)驗(yàn)室都能分析出加標(biāo)橄欖油中的15+1PAHs［14］。從目前狀況看，本研究中的兩方法已達(dá)到歐盟第一次參比測(cè)試的檢測(cè)水平，因此兩方法雖均可用于食用油脂中低濃度EU15+1PAHs的檢測(cè)且滿(mǎn)足檢測(cè)需求，但仍存在一定的局限性需要進(jìn)一步完善。

2.3 FAPAS盲樣測(cè)定

兩方法針對(duì)FAPAS棕櫚油樣品的盲檢結(jié)果表明，兩方法對(duì)以下5種PAHs的測(cè)定結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果差異不大，除方法二苯并（b）熒蒽檢測(cè)值略高外，其他均符合FAPAS規(guī)定的可接受范圍，具體結(jié)果見(jiàn)表2。

另，該5種物質(zhì)中有3種物質(zhì)為PAH 4物質(zhì)［歐盟設(shè)定PAHs限量標(biāo)準(zhǔn)的指標(biāo)物質(zhì)，包括：B（a）P、屈、苯并（a）蒽、苯并（b）熒蒽］，而由于屈污染水平往往較高，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度也較高，因此該盲樣測(cè)定結(jié)果保障了后續(xù)樣品中PAH 4的準(zhǔn)確測(cè)定。

表2 兩方法檢測(cè)FAPAS棕櫚油樣品的結(jié)果（μg/kg）Table 2 Results of the FAPAS samples（μg/kg）

表3 104份樣品兩種方法檢測(cè)結(jié)果（μg/kg）Table 3 Results of the 104 samples（μg/kg）

續(xù)表

2.4 實(shí)際樣品測(cè)定

2.4.1 總體情況 對(duì)兩種方法的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行配對(duì)設(shè)計(jì)t檢驗(yàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p＞0.05）。

所檢樣品中只有3個(gè)樣品EU15+1PAHs均未檢出，均為稻米油樣品，其余樣品普遍有檢出。兩方法檢出結(jié)果的具體比較見(jiàn)表3。兩方法檢出率范圍分別為6%～95%（方法一）、0%～97%（方法二），平均污染水平范圍分別為0.26～3.65μg/kg（方法一）、ND～2.74μg/kg（方法二）；EU15+1PAHs中屈的污染最為嚴(yán)重，不論檢出率還是平均值均為最高，其次是苯并（b）熒蒽、苯并（a）蒽、B（a）P，而多數(shù)二苯并物質(zhì)污染水平則較輕，如二苯并（a，h）芘、二苯并（a，l）芘等，這與歐盟對(duì)食品開(kāi)展的研究報(bào)告［4］情況基本一致；由于二苯并類(lèi)物質(zhì)含量較低且分析難度大［4］，兩方法檢出率差別較大且測(cè)定值均極低甚至未檢出，這也提示了針對(duì)EU15+1PAHs的分析方法還需加大研究，進(jìn)一步改善缺陷。兩方法除較難檢測(cè)的物質(zhì)（如二苯并物質(zhì)）外其余物質(zhì)檢出率、平均污染水平均較為一致。

表4 典型油種中EU15+1PAHs的平均含量（μg/kg）Table 4 Results of the typical oil samples（μg/kg）

將本研究結(jié)果與國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)研究結(jié)果進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)各PAHs的平均污染水平及趨勢(shì)相當(dāng)。如2012年張志瑋等針對(duì)江蘇市售植物油的分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)PAH 4和B（a）P的平均含量分別為20.50和1.95μg/kg［15］，與本研究結(jié)果相當(dāng)［∑PAH4在方法一和方法二中的結(jié)果分別為10.00、8.99μg/kg；B（a）P在方法一和方法二中的結(jié)果分別為1.89、1.47μg/kg］；M.C.Rojo Camargo等［16］檢測(cè)了巴西市售11個(gè)不同品牌的大豆油中JECFA提出的15種PAHs的含量，B（a）P檢測(cè)結(jié)果在0.5～15.8μg/kg、平均值為3.0μg/kg，其他物質(zhì)結(jié)果也與本文兩方法結(jié)果接近。Lucie Drabova等［17］2013年對(duì)市售食用植物油（包括大豆油、芝麻油、葵花籽油、橄欖油）中EU15+1PAHs進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果與本研究中檢測(cè)結(jié)果情況基本一致，屈的含量均為最高，且二苯并芘類(lèi)物質(zhì)含量較低，其中二苯并（a，h）芘、二苯并（a，i）芘均為未檢出。

2.4.2 重點(diǎn)油種檢測(cè)結(jié)果 根據(jù)《中國(guó)居民營(yíng)養(yǎng)與健康狀況調(diào)查（2002年版）》我國(guó)居民消費(fèi)量前3位的食用油種分別為大豆油、菜籽油、花生油［18］，茶籽油是在PAHs研究中較為關(guān)注的油種，對(duì)這4種油中EU15+1PAHs檢測(cè)結(jié)果平均水平的比較見(jiàn)表4，采用配對(duì)t檢驗(yàn)比較兩方法結(jié)果，4種油兩種方法均值比較的t值均＞0.05，因此兩組結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

3 結(jié)論與討論

本研究中的兩方法均滿(mǎn)足國(guó)內(nèi)外對(duì)食品中PAHs檢測(cè)的要求。從檢測(cè)物質(zhì)來(lái)看，方法一比方法二檢出物質(zhì)更加全面；且由于方法二只依據(jù)出峰保留時(shí)間定性而方法一同時(shí)參考保留時(shí)間和質(zhì)譜碎片離子相對(duì)豐度定性，因此方法一特異度優(yōu)于方法二；方法學(xué)性能方面，方法一定量限更低，在痕量分析時(shí)更具優(yōu)勢(shì)；而方法二具有操作簡(jiǎn)便、人工操作較少、定量準(zhǔn)確等優(yōu)勢(shì)，建議如不需要對(duì)EU15+1PAHs的16種物質(zhì)全面分析［如只需分析B（a）P、PAH 4或PAH 8］可采用方法二。兩方法均達(dá)到了我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測(cè)》（GB/T 27404-2008）的要求，且滿(mǎn)足歐盟（EC）No 333/2007對(duì)于B（a）P的檢測(cè)要求（檢出限＜0.3μg/kg、定量限＜0.9μg/kg、回收率在50%～120%之間）。目前我國(guó)國(guó)標(biāo)規(guī)定B（a）P的最大限量值為10μg/kg，歐盟規(guī)定B（a）P為2μg/kg，PAH4為10μg/kg，上述兩方法也均可滿(mǎn)足低于這些指標(biāo)值的PAHs含量的檢測(cè)。

FAPAS盲樣測(cè)定結(jié)果均在規(guī)定濃度范圍內(nèi)，進(jìn)一步驗(yàn)證了本研究?jī)煞椒ǖ目尚行院蜏?zhǔn)確性。針對(duì)104份實(shí)際油樣的分析，兩方法結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且不論是總樣本整體比較還是分不同油種比較，兩方法檢測(cè)結(jié)果基本一致，同時(shí)也得到了國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究的驗(yàn)證，證實(shí)了本研究針對(duì)EU15+1PAHs探索的兩方法在實(shí)際分析工作中具有良好的準(zhǔn)確性和實(shí)用性。本研究是國(guó)內(nèi)首次針對(duì)EU15+1PAHs分析技術(shù)進(jìn)行的探討，為我國(guó)分析油脂中EU15+1PAHs提供了基礎(chǔ)。由于是初步探索，因此相比于國(guó)外，仍存在一定的局限性（如一些含量低的二苯并類(lèi)物質(zhì)難度較大），還需進(jìn)一步研究加以完善。

［1］Ramesh A，Walker SA，Hood D B，et al.Bioavailability and risk assessment of orally ingested polycyclic aromatic hydrocarbons［J］.International Journal of Toxicology，2004，23（5）：301-333.

［2］岳敏，谷學(xué)新.多環(huán)芳烴的危害與防治［J］.首都師范大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2003，24（3）：40-44.

［3］ATSDR（U.S.Department of Health and Human Services，Public Health Service，Agency for Toxic Substances and Disease Registry）.Toxicological profile for polycyclic aromatic hydrocarbons［R］.1995.

［4］EFSA.Polycyclic Aromatic hydrocarbons in food scientific opinion of the panel on contaminants in the food chain［R］.The EFSA Journal，2008，724：1-2.

［5］IBANEZR，AGUDO A，BERENGUER A，etal．Dietary intake of polycyclic aromatic Hydrocarbons in a Spanish population［J］．Food Pmt，2005，68（10）：2190-2195．

［6］JECFA.Safety evaluation of certain contaminants in food： polycyclic aromatic hydrocarbons［R］.WHO FOOD ADDITIVES SERIES：55，2006：563-744.

［7］喬晚芳，李燕艷，姜元榮，等.QuEChERS快速凈化-同位素稀釋內(nèi)標(biāo)定量GC-MS/MS法測(cè)定食用油中15+1種歐盟優(yōu)控的痕量多環(huán)芳烴［C］．第二十三屆學(xué)術(shù)年會(huì)暨產(chǎn)品展示會(huì)中國(guó)糧油學(xué)會(huì)油脂分會(huì)，2014：228-234.

［8］Surma M，Sadowska-Rociek A，Cies＇lik E.The application of d-SPE in the QuEChERS method for the determination of PAHs in food of animal origin with GC-MS detection［J］.European Food Research and Technology，2014，238（6）：1029-1036.

［9］Forsberg N D，Wilson G R，Anderson K A.Determination of Parent and Substituted Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in High-Fat Salmon Using a Modified QuEChERS Extraction，Dispersive SPE and GC-MS［J］.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2011（15）：8108-8116.

［10］Madureira T V，Velhote S，Santos C，et al.A step forward using QuEChERS（Quick，Easy，Cheap，Effective，Rugged，and Safe）based extraction and gas chromatography-tandem mass spectrometry—levels of priority polycyclic aromatic hydrocarbons in wild and commercial mussels［J］.Environmental Science and Pollution Research，2014，21（9）：6089-6098.

［11］王丹紅，吳文晞，李捷，等.QuEChERS/高效液相色譜測(cè)定食品中15種多環(huán)芳烴［J］.福建分析測(cè)試，2013，22（6）：17-20.

［12］張萌萌，陳劍偉，于天祥，等.基質(zhì)固相分散技術(shù)-氣質(zhì)聯(lián)用法快速測(cè)定大米中的多環(huán)芳烴［J］.食品科技，2014，39（1）：327-330.

［13］EC-DG-JRC-IRMM/CRL（European Commission，Directorate General，Joint Research Centre，Institute for Reference Materials and Measurements/Community Reference Laboratory for polycyclic aromatic hydrocarbons）.Report on the first inter-laboratory comparison testorganised by the Community Reference Laboratory for Polycyclic Aromatic Hydrocarbons，15+1 EU priority PAHs in acetonitrile.EUR 22696 EN，European Communities［R］.2007.

［14］EC-DG-JRC-IRMM/CRL（European Commission，Directorate General，Joint Research Centre，Institute for Reference Materials and Measurements/Community Reference Laboratory for polycyclic aromatic hydrocarbons）.Report on the second inter-laboratory comparison testorganised by the Community Reference Laboratory for Polycyclic Aromatic Hydrocarbons，15+1 EU priority PAHs in edibleoil and acetonitrile.EUR 23251 EN，European Communities［R］.2008.

［15］張志瑋，馬永建，劉華良，等.江蘇省市售食用植物油中多環(huán)芳烴污染狀況分析［J］.江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué)，2012，23（5）：57-58.

［16］Rojo CamargoM C，AntoniolliPR，Vicente E，etal.Polycyclic aromatic hydrocarbons in Brazilian commercial soybean oils and dietary exposure［J］.Food Additives and Contaminants：Part B，2011，4（2）：152-159.

［17］Drabova L，Tomaniova M，Kalachova K，et al.Application of solid phase extraction and two-dimensional gas chromatography coupled with time-of-flightmass spectrometry for fastanalysis of polycyclic aromatic hydrocarbons in vegetable oils［J］.Food Control，2013，33（2）：489-497.

［18］翟鳳英，楊曉光.中國(guó)居民營(yíng)養(yǎng)與健康狀況調(diào)查報(bào)告之二·2002膳食與營(yíng)養(yǎng)素?cái)z入狀況［R］.2002.

The determination of polycyclic aromatic hydrocarbons in edible fats and oils with two methods

CAO Meng-si1，2，ZHANG Li-shi1，*，WANG Jun2，*，RUAN Li-ping3，WANG Ge-ping4，ZHENG Chao4，YANWei-xing2
（1.West China Public Health School of Sichuan University，Chengdu 610041，China；2.China National Center for Food Safety Risk Assessment，Beijing 100022，China；3.Jiangsu Provincial Center for Disease Prevention and Control，Nanjing 210009，China；4.Fengyi Biological Technology Research Center Co.，Ltd.，Shanghai200137，China）

The purpose was to detect EU 15+1PAHs in edible fats and oils by establishing two motheds that were the isotope internal standard quantified-QuEChERS-gas chromatog raphy-tandem mass spectrometry and the GPC-high performance liquid chromatography-fluorescence detection.104 edible oils and fats samples was detected.Then the results of the two motheds were com pared.Results:both methods met the detection requirements.The RSD of precision were less than 5.4%（Method One）and 6.81%（Method Two）and the average recoveries of spiked samples were in the range of 71.3%～111.6%（Method One）and 93.1%～119%（Method Two）.The correlation coefficiency of standard curves were over 0.998（Method One）and 0.990（Method One）.The quantitation limit of the two motheds were 0.23～0.50μg/kg and 0.9μg/kg respectively.The blind determination results for the samples from the Food Analysis Performance Assessment Scheme（FAPAS）were satisfactory.The results of two methods for 104 samples had no differences by statistical evaluation.Conclusion: both methods meet the testing requirements for the determination of EU 15+1PAHs in edible fats and oils.

edible fats and oils；European Union priority；PAHs；gas chromatography-tandem mass spectrometry；high performance liquid chromatography-fluorescence detection

TS201.1

A

1002-0306（2015）08-0082-06

10.13386/j.issn1002-0306.2015.08.008

2014－10－08

曹夢(mèng)思（1991-），女，碩士研究生，研究方向：食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和標(biāo)準(zhǔn)。

*通訊作者：張立實(shí)（1956-），男，教授，研究方向：食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。王君（1973-），女，博士，研究員，研究方向：食品安全。