慢性汽油中毒對小鼠腎臟損害的影響研究

馮志鵬等

【中圖分類號】R135 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B【文章編號】1004-4949（2015）02-0699-02

①資助來源：長沙醫(yī)學(xué)院2014年大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)和創(chuàng)新性實驗計劃項目長醫(yī)教[2014]10號—41

汽油作為一種燃料，被廣泛的應(yīng)用于生產(chǎn)和生活中。汽油具有很強(qiáng)的揮發(fā)性，對于直接或者間接接觸者都會產(chǎn)生影響。長期接觸汽油可引起植物神經(jīng)功能紊亂、貧血和皮膚損害[1]。探討慢性汽油中毒對腎臟的影響，可以為更好的防治因長期直接接觸汽油導(dǎo)致的腎臟損害提供防治依據(jù)。也可以為在法醫(yī)學(xué)鑒定過程中，了解汽油對腎臟的損害程度，為臨床醫(yī)學(xué)救治、中毒原因的判斷和民事賠償?shù)忍峁┛茖W(xué)的依據(jù)[2]。本研究制作了小鼠吸入汽油揮發(fā)性氣體的模型，探討了效應(yīng)-劑量的關(guān)系，觀察腎臟的形態(tài)學(xué)變化及損傷的特征，為臨床診斷汽油對腎臟損害提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組

中南大學(xué)實驗動物學(xué)部提供的昆明小鼠18只，雌雄不拘，按隨機(jī)分配的原則，分成正常對照組、1h/d汽油實驗組、2h/d汽油實驗組，每組6只。

1.2方法

1.2.1動物模型制作

用三個頂端有孔的容器。分別標(biāo)為正常對照組、1h/d汽油實驗組、2h/d汽油實驗組。分別放入一定量的等量的汽油，讓其自然揮發(fā)。

正常對照組：給予正常的條件飼養(yǎng)90天。

1h/d汽油實驗組：放入一定量的等量汽油，讓其自然揮發(fā)。每天放入容器中1h。

1h/d汽油實驗組：放入一定量的等量汽油，讓其自然揮發(fā)。每天放入容器中2h。

1.2.2組織形態(tài)學(xué)觀察

對所取的腎臟組織進(jìn)行常規(guī)石蠟包埋、切片、HE染色，用光學(xué)顯微鏡在10×40下進(jìn)行觀察。

2 結(jié)果

2.1腎小球形態(tài)學(xué)變化

汽油實驗組的小鼠50﹪以上的腎小球體積明顯增大、腫脹。腎小囊有明顯蛋白質(zhì)滲出，囊腔變窄甚至閉塞。毛細(xì)血管球細(xì)胞增生，細(xì)胞核數(shù)量增多，毛細(xì)血管管壁增厚，管腔狹窄甚至閉塞，系膜區(qū)域增寬。血管球內(nèi)有少量的中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤。2h/d汽油實驗組與1h/d汽油實驗組比較，腎小球病變更加明顯、更加嚴(yán)重。

2.2腎小管的形態(tài)學(xué)變化

汽油實驗組大部分腎小管上皮細(xì)胞腫脹，有不同程度水樣變性，HE染色下細(xì)胞胞漿顏色變淡，胞漿疏松。個別的腎小管上皮細(xì)胞壞死，細(xì)胞核固縮或溶解消失。損傷嚴(yán)重的腎小管還出現(xiàn)了腎小管上皮的破損，部分腎小管管腔內(nèi)可見紅染的蛋白質(zhì)。腎間質(zhì)中血管擴(kuò)張充血、水腫，有大量炎癥細(xì)胞的浸潤。

3 討論

汽油中的有害物質(zhì)在肝臟內(nèi)經(jīng)氧化后與葡萄糖醛酸結(jié)合，隨尿排出而解毒，故對腎臟嚴(yán)重的損害作用，導(dǎo)致腎臟組織結(jié)構(gòu)出現(xiàn)明顯異常[3]。血液在流經(jīng)腎臟時，先經(jīng)過腎小球的毛細(xì)血管網(wǎng)過濾形成原尿。腎臟的出球小動脈在腎小管周圍纏繞，產(chǎn)生重吸收的作用。通過“逆流倍增”，經(jīng)腎小球濾過和腎小管分泌至原尿中的物質(zhì)，若不能很好地被吸收，腎小管中的濃度可達(dá)血液中濃度的數(shù)倍，直接損傷腎小管上皮細(xì)胞[4]。此外，部分有機(jī)溶劑進(jìn)入機(jī)體后，在腎小管的上皮細(xì)胞中轉(zhuǎn)化為有毒性的代謝產(chǎn)物。這些因素綜合的結(jié)果，使得腎臟成為了有機(jī)溶劑損害的靶器官[5-7]。

Murty[8]等報道給大鼠吸入無鉛汽油可迅速導(dǎo)致腎損害，表現(xiàn)為腎小管內(nèi)出現(xiàn)較多的蛋白。Beirne[9]給大鼠吸入無鉛汽油18-22周，復(fù)制出嚴(yán)重的腎小球基底膜上有IgG線條狀沉著。Gagnoli[10]報告1例59歲男性因長期接觸汽油導(dǎo)致膜性腎小球腎炎，表現(xiàn)為蛋白尿、低蛋白血癥和浮腫等。周金蘭等[11]報道了在空氣中平均汽油質(zhì)量濃度110mg/m3左右環(huán)境下工作，接觸者的腎小管功能可以受到一定的損害。

本研究模型制作通過控制不同時間，來觀察慢性汽油中毒對腎臟損傷的形態(tài)學(xué)影響。我們得出時間越長，腎臟損害的程度越嚴(yán)重，存在著一定的效應(yīng)-劑量關(guān)系。顯著的特點(diǎn)為腎小球的增生，隨著時間的延長，可能會導(dǎo)致腎小球腎炎。腎小球疾病可使腎小球濾過率下降，代謝產(chǎn)物排出減少，血肌酐和尿素氮水平升高，形成氮質(zhì)血癥。隨著腎小球腎炎的持續(xù)發(fā)展，代謝廢物在體內(nèi)大量堆積，可導(dǎo)致尿毒癥。隨著腎小球腎炎的持續(xù)進(jìn)一步發(fā)展可導(dǎo)致急性或者慢性的腎衰竭。急性腎衰竭表現(xiàn)為少尿和無尿，并出現(xiàn)氮質(zhì)血癥。慢性腎衰竭時持續(xù)出現(xiàn)尿毒癥的癥狀和體征。慢性汽油中毒可導(dǎo)致腎小球出現(xiàn)形態(tài)學(xué)變化，所以相關(guān)企業(yè)在汽油生產(chǎn)加工的過程中，應(yīng)該制定嚴(yán)格的規(guī)章制度，防止接觸者長時間與汽油接觸，導(dǎo)致機(jī)體的不利影響[12]。

參考文獻(xiàn)

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[9]Beirne JG.Brennan JT.Glomerulonephritis associated with hydrocarbon solvents.Mediated by antiglomerular basement membrane antibody.Arch Environ Health.1972：25：365-369.

[10]Gagnoli L，ea al.Relation between hydrocarbon exposure and the nephrotic syndrome.Brit Med J.1980：280：1068.

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[12]馮志鵬，張艷平，王中文等.慢性汽油中毒對機(jī)體影響的研究進(jìn)展[J].商品與質(zhì)量.2014.9：39.