鳳仙花中槲皮素和山奈酚的薄層色譜鑒別

侯文欣 魏紅立 方新平 徐利亞 孟憲磊

摘要 [目的]建立鳳仙花藥材中槲皮素、山奈酚的提取方法，對(duì)鳳仙花藥材中槲皮素、山奈酚進(jìn)行薄層鑒別。[方法]采用羧甲基纖維素鈉硅膠G 板分離鳳仙花藥材中槲皮素、山奈酚成分。[結(jié)果]供試品色譜在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，可用于鑒別鳳仙花中的槲皮素和山奈酚。[結(jié)論]薄層色譜方法簡便、專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好，可用于鳳仙花藥材的鑒別。

關(guān)鍵詞 鳳仙花；槲皮素；山奈酚；薄層色譜；鑒別

中圖分類號(hào) S567 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼

A 文章編號(hào) 0517-6611（2015）34-146-02

鳳仙花為鳳仙花科植物鳳仙（Impatiens balsamina L.）的干燥花[1]，尚未被《中國藥典》收載，鳳仙花具有祛風(fēng)除濕、活血定痛功效，含有香豆素類、黃酮類等多種化學(xué)成分，其中槲皮素和山奈酚是其主要的黃酮化合物[2]。槲皮素有抗炎、抗氧化、抗癌和抗突變等多種功能[3]，山奈酚具有止咳祛痰和消炎等作用[4-5]，具有很高藥用價(jià)值。該試驗(yàn)考察了不同溶劑、不同提取方法提取槲皮素及山奈酚，并嘗試不同展開劑和薄層板比較，最終確定了用于鳳仙花中槲皮素及山奈酚的簡捷、快速、分離效果好的薄層色譜鑒別方案，為鳳仙花的質(zhì)量控制提供了可靠依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 鳳仙花（采于河北邢臺(tái)將軍墓）；槲皮素對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)100081-200907）；山奈酚對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)110861-200808）；電子天平（sartorius BS210S）；超聲波清洗機(jī)（昆山市超聲儀器有限公司）；硅膠G薄層色譜板（青島海洋化工廠），羧甲基纖維素鈉硅膠G（天津思利達(dá)科技有限公司），高效硅膠G（青島市基億達(dá)硅膠試劑廠）；試劑均為國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，均為分析純。

1.2 樣品制備 取鳳仙花藥材，粉碎，取粉末0.5 g，加甲醇-稀鹽酸（4∶1）20 ml，超聲處理30 min，濾過，濾液加水20 ml，用乙酸乙酯振搖提取3次，每次20 ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状? ml溶解，作為供試品溶液。

1.3 對(duì)照品溶液制備 取槲皮素和山奈酚對(duì)照品，加甲醇分別制成濃度為0.2和1 mg/ml的溶液，作為對(duì)照品溶液。

1.4 色譜方法 照薄層色譜法（中國藥典 2010年版一部附錄VI B）試驗(yàn)，分別吸取上述樣品及對(duì)照品溶液各2 μl，分別點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉硅膠G薄層板上， 以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（10∶3∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈（365 nm）下檢視。

2 結(jié)果與分析

由圖1可見，供試品色譜在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。表明該方法方便、快捷，斑點(diǎn)圓整、清晰，分離效果佳，可作為鳳仙花中槲皮素及山奈酚的鑒別方法。

注：2為槲皮素對(duì)照品；4為山奈酚對(duì)照品；1、3、5、6、7為鳳仙花樣品。

圖1 鳳仙花TLC鑒別圖譜

3 討論

3.1 提取方法的比較 該試驗(yàn)嘗試了多種提取方法：①以甲醇-稀鹽酸（4∶1）為溶劑，超聲處理30 min，濾過，濾液加水20 ml，用乙酸乙酯振搖提取3次，每次20 ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)蛹状? ml溶解；②以甲醇為溶劑超聲處理30 min，濾過，濾液濃縮；③以乙醇為溶劑超聲處理30 min，濾過，濾液濃縮；④以硼酸飽和的水溶液為溶劑，回流1 h，濾過，濾液加稀鹽酸調(diào)pH至2～3，用石油醚（60～90 ℃）振搖提取3次，每次25 ml，棄去石油液，用乙醚振搖提取3次，每次25 ml，合并乙醚液，揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解。比較上述4種提取方法（圖2）發(fā)現(xiàn)，以方法①所得色譜圖斑點(diǎn)清晰、圓整，指紋斑點(diǎn)豐富，分離效果佳。

3.3 不同薄層板的比較 試驗(yàn)考察了青島海洋化工廠硅膠G板（圖4a）、青島市基億達(dá)硅膠試劑廠硅膠G板（圖4b）、天津思利達(dá)科技有限公司羧甲基纖維素鈉硅膠G板（圖1），結(jié)果發(fā)現(xiàn)，利用羧甲基纖維素鈉硅膠G板的分離效果最好。

參考文獻(xiàn)

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