影響肉綿羊胚胎移植的因素

隋國(guó)香

1胚胎因素

胚胎采集。采胚方法可選擇輸卵管采集法和子宮采集法。輸卵管采集法一般是在供體母羊受精后前4天使用，盡管具有很高的回收率，但術(shù)后非常容易導(dǎo)致卵巢和輸卵管傘出現(xiàn)黏連，從而使卵子以后的接收和運(yùn)行過(guò)程受到影響，如果出現(xiàn)雙側(cè)同時(shí)黏連的現(xiàn)象，甚至可能使其終生無(wú)法受孕。目前，通常采用子宮采集法收集胚胎，通常在受精后的第6天進(jìn)行，雖然這種方式的回收率比輸卵管回收略低，但收集胚胎的胚齡稍大，同時(shí)經(jīng)過(guò)子宮環(huán)境的自然選擇，即使有一些胚胎可能發(fā)生退化，但移植存活的胚胎后能夠使受體母羊具有很高的妊娠率。

胚胎形態(tài)。正常胚胎的形態(tài)是透明帶完整、外觀飽滿，卵間隙較小，卵裂球界限清晰、大小均勻，同時(shí)細(xì)胞質(zhì)也很均勻，沒(méi)有明顯的顆粒狀物。如果胚胎發(fā)育不正常，其透明帶發(fā)生變形，外觀不圓整，卵間隙較大，卵裂球界限不清楚，細(xì)胞質(zhì)比較渾濁，存在破碎的塊狀物。通常來(lái)說(shuō)，胚胎具有正常的形態(tài)和發(fā)育時(shí)期，移植后具有較大的可能性發(fā)育成活。但是并不是指形態(tài)稍差的胚胎完全不能夠用于移植胚胎，這是由于胚胎早期的調(diào)整性較大，一些小的缺陷能夠在之后發(fā)育過(guò)程中進(jìn)行彌補(bǔ)，然后再繼續(xù)發(fā)育。因此，只要胚胎具有形態(tài)基本正常的卵裂球，即使形態(tài)存在一些其他問(wèn)題，也能夠用于移植，常常也能夠使受體母羊受孕。

胚胎移植的部位。在胚胎移植過(guò)程中，移植的部位要根據(jù)胚胎的實(shí)際日齡以及采集前所在的部位來(lái)確定。通常來(lái)說(shuō)，胚胎移植部位要與采集胚胎的部位相對(duì)應(yīng)。在輸卵管內(nèi)移入胚胎時(shí)，在其深部移入具有較高的受胎率。在子宮角移入胚胎時(shí)，在子宮角項(xiàng)部也就是輸卵管一側(cè)的子宮角接合處附近移入5～6日齡的胚胎的存活率要高于移入到子宮角中部，之后隨著胚胎日齡的增長(zhǎng)，胚胎的移植部位也要相應(yīng)的朝子宮角基部移動(dòng)。一般來(lái)說(shuō)，母羊發(fā)情后的第7天卵巢靜脈內(nèi)的孕酮濃度達(dá)到最高，并且能夠相對(duì)恒定地持續(xù)到第15天，因此使母羊發(fā)情期的后段，受體與供體將有可能存在一段幅度較大的同步時(shí)間，這樣能夠保證移植成功率較大。

2受體母羊

對(duì)受體母羊進(jìn)行選擇時(shí)，以選細(xì)毛綿羊?yàn)樽詈?，這是由于細(xì)毛綿羊具有較強(qiáng)的季節(jié)性發(fā)情。胚胎移植通常選擇在9～12月份進(jìn)行，此時(shí)細(xì)毛綿羊機(jī)體正處于體質(zhì)健壯、精力旺盛的階段，能夠使移植妊娠率較高。而其他品種母羊具有較差的同期發(fā)情性，因此導(dǎo)致黃體形成不一致的成熟度。另外，受體母羊最好選擇已經(jīng)生產(chǎn)一胎以上的經(jīng)產(chǎn)母羊，年齡是2～4歲。如果受體母羊年齡較大，大部分會(huì)由于子宮內(nèi)膜發(fā)生損傷、體質(zhì)較差等原因而導(dǎo)致移植受胎率受到影響。另外，受體母羊在進(jìn)行胚胎移植的前后必須加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，這是由于受體母羊飼養(yǎng)管理的好壞直接與受胎率存在關(guān)系，也就是受體母羊胚胎移植前后的營(yíng)養(yǎng)狀況是否適宜會(huì)對(duì)整個(gè)生殖過(guò)程產(chǎn)生直接影響。如果受體母羊膘情良好，大多數(shù)胚胎著床后都能夠正常發(fā)育成活。但如果營(yíng)養(yǎng)條件較差，不利于胚胎著床和羔羊產(chǎn)出后的生長(zhǎng)，使受體胚胎移植效果明顯降低。

3移植操作

移植胚胎時(shí)可采取手術(shù)法或者非手術(shù)法。采取手術(shù)法移植胚胎能夠損傷供體母羊，導(dǎo)致卵巢、子宮以及周?chē)M織出現(xiàn)黏連，從而使優(yōu)良種母羊重復(fù)使用的次數(shù)減少，不過(guò)采取腹腔鏡技術(shù)進(jìn)行非手術(shù)移植能夠?qū)⑦@些缺點(diǎn)克服。據(jù)報(bào)道，當(dāng)供、受體母羊的非同期發(fā)情時(shí)間在8h以內(nèi)，采取腹腔鏡移植胚胎的妊娠率基本上與正規(guī)手術(shù)法移植相同。但是要在生產(chǎn)實(shí)踐中推廣非手術(shù)法胚胎移植，還需要對(duì)操作技術(shù)進(jìn)一步熟練，使用的儀器設(shè)備還要不斷改進(jìn)，如此才能使妊娠率提高效率。供體和受體母羊術(shù)后必須進(jìn)行精心護(hù)理，盡可能防止發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)。供體母羊術(shù)后發(fā)情屬于正?，F(xiàn)象，但受體母羊正好與之相反，如果術(shù)后出現(xiàn)發(fā)情，說(shuō)明沒(méi)有成功妊娠，也就是移植失敗，這可能是由于胚胎在移植過(guò)程中丟失或移植后死亡造成。

4應(yīng)激因素

在胚胎移植過(guò)程中，受體母羊如果改變飼養(yǎng)管理，或者氣候溫度發(fā)生改變，或者手術(shù)前的處于饑餓狀態(tài)等，這些應(yīng)激因素都能夠?qū)е聶C(jī)體出現(xiàn)非特異性應(yīng)答反應(yīng)，引起其體內(nèi)的黃體出現(xiàn)退化，進(jìn)而對(duì)胚胎的正常著床和發(fā)育產(chǎn)生影響。如果受體母羊處于持續(xù)的應(yīng)激情況下，機(jī)體內(nèi)的胎盤(pán)激素、褪黑素會(huì)失去活性，進(jìn)而影響黃體狀態(tài)，最終使胚胎的生存受到影響。另外，如果溫度過(guò)高，能夠使受體母羊減少分泌孕酮及促乳素，造成胚胎遲緩發(fā)育，甚至可能中止妊娠。因此，胚胎移植最好不要在7～9月份溫度過(guò)高的階段進(jìn)行。