枇杷花蕾毒理學(xué)安全性評價

潘峰　類成祥　高燕　於懷龍　李凌坤　高金典　高輝煌　李國生

摘 要 以枇杷花蕾濃縮液為受試樣品，進行昆明種小鼠急性毒性試驗和SD大鼠的亞慢性毒性試驗，分析評價枇杷花蕾濃縮液的食品安全性毒理學(xué)。結(jié)果表明：昆明種小鼠經(jīng)枇杷花蕾濃縮液60 g/kg（試劑量/體質(zhì)量）灌胃14 d后，雌、雄小鼠的活動、體征表現(xiàn)均為正常，并未出現(xiàn)急性中毒與死亡情況；SD大鼠經(jīng)過連續(xù)90 d給予枇杷花蕾濃縮液3～12 g/kg灌胃，各處理組SD大鼠表現(xiàn)情況良好，體質(zhì)量、食物利用率、臟器質(zhì)量、臟器系數(shù)均無異常改變，血常規(guī)和生化指標(biāo)正常，肝腎脾各臟器質(zhì)量和組織結(jié)構(gòu)正常，未見與樣品有關(guān)的病理改變。根據(jù)急性毒性劑量分級標(biāo)準(zhǔn)可初步判定枇杷花蕾屬無毒級物質(zhì)。

關(guān)鍵詞 枇杷；花蕾浸提液；安全性；急性毒性；亞慢性毒性

中圖分類號 S667.3 文獻標(biāo)識碼 A

Abstract Concentrated loquat bud extract was used in acute （14 days） and sub-chronic （90 days） toxicity test via intragastric administration to evaluate its safety as well as toxicity. The results showed acute oral administration of loquat flower buds extract in mice， 60 g/kg BW per day each mouse（about 600 times equivalent to the human body recommended dose）， the activities and physical signs of male and female mice were normal， acute poisoning and death did not happen； Sub-chronic toxicity test showed the measured parameters were normal， no observed adverse effect level at the highest dosage of 12 g/kg BW（about 120 times） was found. It confirmed there is no acute or sub-chronic toxicity in loquat buds extract leaching under our experimental conditions.

Key words Loquat；Bud extract；Safety；Acute toxicity；Subchronic toxicity

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2015.11.027

據(jù)《本草綱目》記載，枇杷花具有“止渴下氣、利肺、止吐逆、去焦熱、潤五臟”及“治頭風(fēng)、鼻涕清涕”等功效[1]。枇杷花不僅富含硒、鋅、鎂、鈣、鐵等礦物質(zhì)，還含有類黃酮、類胡蘿卜素、酚酸類及氨基酸等生物活性成分，因此，枇杷花具有較高的藥用及保健價值。中國枇杷花資源豐富，枇杷產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量的70%，其應(yīng)用前景廣闊[2]。近年來，隨著保健枇杷花蕾特定提取物的原料向中藥及復(fù)方藥等擴展，一些以枇杷花為功效成分的茶品也逐漸出現(xiàn)在市場上。由于枇杷花的天然組分復(fù)雜，代謝途徑多通路，某些成分在人體內(nèi)一定含量范圍內(nèi)可治療疾病、改善健康，但若某特定成分?jǐn)z入或蓄積量過大，也不排除會對人體產(chǎn)生慢性危害的可能[3]。

目前，國內(nèi)外有學(xué)者對枇杷葉和果實的藥理作用等進行了較系統(tǒng)的研究[4-7]，但關(guān)于枇杷花蕾的毒理學(xué)研究尚未見報道。因此，本研究開展枇杷花蕾的急性毒性和亞慢性毒性的毒理學(xué)研究，分析受試動物的體質(zhì)變化、血液血清學(xué)和組織病理學(xué)等指標(biāo)，為枇杷花蕾及其飲品的安全性評價提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗材料 供試材料枇杷花蕾由華福生物科技（福建?。┯邢薰咎峁?，為袋泡裝，內(nèi)容物為褐色枇杷花蕾破碎顆粒，推薦攝入量為每次2 g（每泡），每天 2～3泡，即按人體體重60 kg計，每日推薦量為 6 g；推薦飲用量為每2 g浸泡于200 mL水中（約70 mL共3次沖泡量）。昆明種小鼠和SD 大鼠均購自吳氏實驗動物中心。實驗動物試驗前在動物房內(nèi)檢疫室檢疫4 d，并正常喂養(yǎng)一周；動物房室溫22～25 ℃，相對濕度55%～70%，12 h光暗循環(huán)，受試前后動物自由飲水及飲食。

1.1.2 試驗藥品和試劑 谷草轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白、尿素氮、肌酐、血糖及總膽固醇試劑盒均購自北京中生北控生物科技股份有限公司，實驗方法按試劑盒標(biāo)準(zhǔn)程序使用。

1.1.3 主要儀器 AR224CN型電子天平、R-200型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、離心機、OLYMPUS顯微鏡、日本Hitachi7020型生化自動分析儀、GellyHY-318型血細胞自動分析儀。

1.2 方法

1.2.1 材料處理 稱取 0.3 kg枇杷花蕾樣品，加入 3 L、90 ℃蒸餾水浸泡 30 min后過濾取濾液，濾液經(jīng)低溫減壓濃縮至300 mL，即得1 g/mL濃度的樣品濃縮液，于4 ℃冰箱內(nèi)保存，使用前以蒸餾水將濃縮液配制成所需濃度，供小鼠急性經(jīng)口毒性試驗和大鼠90 d亞慢性毒理試驗用[8]。

1.2.2 枇杷花蕾濃縮液急性毒性試驗 用最大耐受量法進行小鼠急性灌胃毒性試驗，選18～22 g昆明種小鼠，雌雄各10只，以每天30 g/kg（試劑量/體質(zhì)量）灌胃給藥枇杷花蕾濃縮液2次（每次間隔5 h，灌胃前用蒸餾水定量為1 mL），即每只小鼠每天給藥總量60 g/kg（試劑量/體質(zhì)量）計算約服用本實驗中的枇杷花蕾濃縮液原液1.2 mL，按人體體重60 kg計，相當(dāng)于小鼠每天服用量是人體每天推薦服用量的600倍。在為期2周的急性毒性反應(yīng)測試中，給藥后逐日觀察并記錄小鼠的外觀行為活動、精神狀態(tài)、攝食量、大小便及其顏色、被毛、鼻、眼、口腔有無異常分泌物，并記錄小鼠中毒表現(xiàn)和死亡情況，連續(xù)觀察2周后進行病理學(xué)剖檢[9-10]。

近年來，涉及枇杷花的新藥和保健食品日益增多。閆永芳[15]和蘆艷[16]研究枇杷花的營養(yǎng)成分和加工工藝；李琪等[17]分析枇杷花的主要有效成分； 姜帆等[18]研究枇杷花茶的抗氧化作用及其食品衛(wèi)生；鄧晶晶等[19]研究枇杷花的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；馬春華等[20]開發(fā)出枇杷花薄荷飲料；施木田等[21]以枇杷花和中草藥為原料開發(fā)的枇杷花茶飲品；蔣曉東等[22]以枇杷花和綠茶進行拼配成袋泡茶；周湘池等[23-24]開發(fā)出枇杷花酒和枇杷花醋；林岳[25]開發(fā)出枇杷花蜜酒等。產(chǎn)品功效主要為治療咳嗽、多痰、頭風(fēng)、鼻流清涕等傳統(tǒng)應(yīng)用方法[26]。作為中國的傳統(tǒng)中藥材，多年的藥用史和一些藥理毒理學(xué)實踐資料均顯示枇杷花蕾作為藥品的安全性是可靠的，但作為長期飲用的枇杷花蕾，其衛(wèi)生毒理學(xué)研究資料尚不多見。本試驗結(jié)果可為以枇杷花蕾為原料的茶飲品安全性評價提供一定依據(jù)，但由于其有一定的藥理作用，且飲用史尚短，要系統(tǒng)完整的評價其安全性，還需進行亞慢性毒性中的生殖毒性試驗和代謝試驗，并對其慢性（致癌）毒性進行深入的研究。

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