優(yōu)良廣西莪術(shù)株系篩選及其揮發(fā)油成分比較

楊妮等

摘要：對(duì)150個(gè)廣西莪術(shù)株系單株產(chǎn)量及揮發(fā)油含量進(jìn)行考察，選取產(chǎn)量和揮發(fā)油含量較高的廣西莪術(shù)株系，并比較篩選單株揮發(fā)油化學(xué)成分。結(jié)果共篩選出的12個(gè)優(yōu)質(zhì)廣西莪術(shù)株系，總共鑒定出35種化學(xué)成分，其存在共有揮發(fā)油成分，又存在非共有揮發(fā)油成分。玉13/C106、玉14/C29、玉18/B97的株質(zhì)量和揮發(fā)油主要化學(xué)物質(zhì)含量均較高，為優(yōu)質(zhì)的廣西莪術(shù)品系。

關(guān)鍵詞：廣西莪術(shù)；種質(zhì)評(píng)價(jià)；優(yōu)良株系；揮化油成分

中圖分類號(hào)： R284.1文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2015）09-0283-02

莪術(shù)為姜科植物蓬莪術(shù)（Curcuma phaeocaulis Val.）、廣西莪術(shù)（C. kwangsiensis S.G. Lee et C.F.Liang）或溫郁金（C. wenyujin Y.H.Chen et C.Ling）的干燥根莖，主產(chǎn)于廣西、四川、浙江、江西等地。莪術(shù)性味辛、苦、溫，歸肝、脾經(jīng)，具行氣破血、消積止痛功效[1]，臨床用于治療癓瘕痞塊、瘀血經(jīng)閉、食積脹痛、早期宮頸癌等癥。莪術(shù)主要含莪術(shù)油和姜黃素[2]，現(xiàn)代藥理研究表明莪術(shù)油是抗癌的有效成分[3]。王建研究發(fā)現(xiàn)，不同種質(zhì)類型廣西莪術(shù)揮發(fā)油化學(xué)成分和組分相對(duì)含量差異較大，揮發(fā)油物質(zhì)表現(xiàn)出豐富的多樣性[4]。近年來(lái)，廣西莪術(shù)的研究多集中在藥理作用、臨床應(yīng)用、成分分析等方面，在種質(zhì)評(píng)價(jià)及品種選育方面的研究較少。本研究通過(guò)對(duì)單株產(chǎn)量和揮發(fā)油的成分進(jìn)行分析，比較單株間差異性，為選育優(yōu)質(zhì)的廣西莪術(shù)新品種提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1植物材料

試驗(yàn)材料為不同類型廣西莪術(shù)單株150株，均采自廣西省南寧市仙葫種植基地，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)王建教授鑒定均為廣西莪術(shù)。將不同種質(zhì)的廣西莪術(shù)種植在同一基地，管理?xiàng)l件一致。

1.2優(yōu)良單株的篩選

選取莪術(shù)鮮質(zhì)量和揮發(fā)油得率為主要指標(biāo)對(duì)優(yōu)良單株進(jìn)行篩選。鮮質(zhì)量測(cè)定于莪術(shù)藥材采收后，取所有莪術(shù)根莖（去除須根及塊根），清凈泥沙稍晾干，稱鮮質(zhì)量。

分別取廣西莪術(shù)當(dāng)選株系的根莖洗凈、吹干，稱取100 g切碎，放入1 000 mL圓底燒瓶加蒸餾水約500 mL，按2010年版《中國(guó)藥典》一部附錄XD揮發(fā)油測(cè)定法，水蒸氣蒸餾法回流提取5 h，靜置分層后讀取揮發(fā)油體積，并計(jì)算藥材的得油率。

1.3揮發(fā)油成分測(cè)定

取0.05 mL揮發(fā)油，樣品中加入甲醇（色譜純）溶解并稀釋至1.5 mL，再加入適量的無(wú)水硫酸鈉，除去樣品中的水分，10 000 r/min離心10 min，上層莪術(shù)揮發(fā)油即為供試品溶液。

采用GC-MS測(cè)定揮發(fā)油成分，選用HP-5MS（30 m×320 μm×0.25 μm）色譜柱。升溫程序：初始溫度為60 ℃，以10 ℃/min升溫至100 ℃，再以4 ℃/min升溫至108 ℃，保持2 min，以4 ℃/min升溫至156 ℃，保持10 min，以20 ℃/min升溫至280 ℃，保持2 min；汽化室溫度250 ℃，檢測(cè)器溫度280 ℃；載氣為高純He，載氣流量1.5 mL/min；進(jìn)樣量1 μL分流比50 ∶1；溶劑延遲3 min。

質(zhì)譜條件：電子轟擊（EI）電離源，電子能量70 eV，離子源溫度230 ℃，四級(jí)桿溫度150 ℃；掃描質(zhì)量范圍m/z 45～500，圖譜庫(kù)為NIST08.L。

2結(jié)果與分析

2.1優(yōu)良單株的篩選

從150個(gè)株系中選取單株產(chǎn)量400 g以上，每100 g藥材（鮮品）含揮發(fā)油不少于0.5 mL的株系12個(gè)（表1）。由表1可見(jiàn)，單株藥材質(zhì)量最高的是玉10/A12，達(dá)到838.0 g，其次是玉13/C106（636.0 g），玉17/B61和玉1/C59質(zhì)量都在 600.0 g 以上。得油率最高的是玉18/B97，達(dá)1.41%，顏色為紫褐色；其次是玉14/C29（0.91%），淡紫色，其他單株在050%～0.60%之間，顏色為淺黃色到黃色。

2.2揮發(fā)油成分

將12個(gè)不同種質(zhì)類型廣西莪術(shù)揮發(fā)油按上述GC-MS條件檢測(cè)，得到總離子流各主要色譜峰的質(zhì)譜圖，選用NIST08.L標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)，匹配度SI>90進(jìn)行檢索，結(jié)合有關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行人工檢索和解析，確認(rèn)各化合物，總共鑒定了35種主要化合物（表2）。12株廣西莪術(shù)揮發(fā)油的共有成分為樟腦、β-欖香烯、莪術(shù)烯、龍腦，大多單株含有蒎烯、桉樹(shù)腦，而玉δ-杜松烯、對(duì)傘花烴、莎草烯等成分只在少數(shù)材料測(cè)得。

通過(guò)HPMSD工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)，按峰面積歸一化法計(jì)算各化合物在揮發(fā)油中的相對(duì)百分含量，結(jié)果見(jiàn)表2。從

表1不同種質(zhì)類型廣西莪術(shù)揮發(fā)油出油率及顏色

序號(hào)株系編號(hào)單株藥材質(zhì)量

（g）得油率

（%）揮發(fā)油顏色1玉18/B97416.51.41紫褐2玉14/C29426.00.91淡紫3玉1/C59600.00.60淺黃4玉17/B61609.00.58黃色5玉4/B81586.00.52淺黃6玉13/C106636.00.52黃色7廣城1415.50.51黃色8玉6/C84490.00.51淺黃9C16590.00.51黃色10C105429.00.50淺黃11玉22498.50.50淺黃12玉10/A12838.00.50淺黃

表2可以看出，單株間不同成分含量存在很大差異。單株玉18/B97的β-蒎烯峰面積比值達(dá)21.61，而其他單株比值則在0.17～0.85之間。與之相反，在單株玉18/B97中未測(cè)定到桉樹(shù)腦含量，而其他11個(gè)株系中，檢出峰面積比值高達(dá)8.13～26.87。新莪術(shù)二酮僅在玉13/C106中檢出，峰面積比值高達(dá)34.44，莪術(shù)二酮?jiǎng)t僅在玉18/B97和玉14/C29中檢出，相對(duì)峰面積也高達(dá)34.76和25.13。3結(jié)論與討論

選取的12個(gè)廣西莪術(shù)優(yōu)良株系揮發(fā)油共有成分樟腦、β-欖香烯、莪術(shù)烯、龍腦，含量差異較大，各樣品色譜圖的有效成分出峰時(shí)間基本相同，但因所含的成分各不相同，每個(gè)樣品的色譜峰均有差異。有效成分新莪術(shù)二酮僅在玉13/C106中檢出，相對(duì)含量達(dá)到34.44%。而另一有效成分莪術(shù)二酮僅在玉14/C29、玉18/B97中能檢測(cè)到，相對(duì)含量分別為2513%、34.76%。

本試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果顯示，有效成分莪術(shù)烯、莪術(shù)二酮、β-欖香烯都能檢測(cè)到，而重要有效化學(xué)成分吉馬酮， 依據(jù)匹表2不同種質(zhì)類型廣西莪術(shù)揮發(fā)油成分分析

序號(hào)分子式化合物樣品相對(duì)峰面積比值玉

配度SI>90進(jìn)行檢索，并未檢索到吉馬酮。在整個(gè)檢索工作中，吉馬酮匹配度僅在到60左右，因此試驗(yàn)中未能檢測(cè)到吉馬酮的原因極可能是此成分已揮發(fā)。揮發(fā)油是極易揮發(fā)的物質(zhì)，在揮發(fā)油提取后，用離心管保存時(shí)未能及時(shí)封口，或未能及時(shí)放入冰箱保存；提取揮發(fā)油的時(shí)間與進(jìn)行GC-MS分析的時(shí)間相差較大，揮發(fā)油在存放時(shí)間較長(zhǎng)等均會(huì)造成該物質(zhì)揮發(fā)。

根據(jù)以上結(jié)果分析，綜合單株產(chǎn)量、揮發(fā)油得油率、有效成分相對(duì)含量3個(gè)方面考慮，玉13/C106、玉14/C29、玉18/B97在所有樣品中品質(zhì)較優(yōu)，該分析結(jié)果可以為后期選育優(yōu)良種質(zhì)試驗(yàn)提供依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

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