時宇靜 劉月恒
隨著手機等移動通信設(shè)備的普及使用,人們活動空間中電磁場的強度在急劇增強。電磁輻射污染,已成為繼大氣污染、水污染和噪聲污染之后,威脅人類健康的第四大污染,聯(lián)合國人類環(huán)境大會已將其列入必須控制的主要污染物之一。皮膚作為人體的第一道屏障,是電磁輻射的第一個靶器官。伴隨人們對電磁輻射危害性認(rèn)識的提高,電磁輻射保護研究正在成為皮膚護理領(lǐng)域研究的熱點之一。
本研究通過觀察手機輻射后小鼠皮膚成纖維細(xì)胞株3T6生長的變化,探討手機輻射對細(xì)胞正常生長的影響;并利用該模型評價防輻射中藥組方對成纖維細(xì)胞的保護作用。
1.實驗材料
*受試品:中藥復(fù)方提取物(含麥冬等中草藥),由北京工商大學(xué)中國化妝品研究中心制備。
*細(xì)胞株:小鼠皮膚成纖維細(xì)胞株3T6,購自中國科學(xué)院細(xì)胞庫,本實驗室傳代后使用。
*試劑:FBS(批號:1428479)、0.25%Trypsin-EDTA(批號:1213981)購自GIBCO公司。改良型RPMI-1640型培養(yǎng)基(批號:NXL0745)購自HYCLONE公司。DMSO(批號:20121102)購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司。細(xì)胞增值毒性檢測—CCK-8試劑盒為日本DOJINDO同仁化學(xué)研究所產(chǎn)品。
*實驗儀器:X71型倒置顯微鏡為Olympus公司產(chǎn)品。HH CP-01W型二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱為上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠產(chǎn)品。SW-CJ-IFD型單人單面凈化工作臺為蘇州凈化設(shè)備有限公司產(chǎn)品。RT-6000型酶標(biāo)儀,深圳雷杜公司產(chǎn)品。諾基亞手機1050型,頻段為GSM900MHz。
2.實驗方法
參考Pacini等人的研究成果進行實驗設(shè)計。實驗分為空白對照組、輻射對照組、藥物不同濃度組,每組8個復(fù)孔。收集對數(shù)期細(xì)胞,計數(shù),按1×104/mL濃度接種到96孔板,每孔200uL。置37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,使細(xì)胞貼壁。用藥組加入不同濃度的中藥復(fù)方提取物提取物100uL,空白對照組和輻射對照組加入100uL無血清培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。24h后,將細(xì)胞板置于CO2培養(yǎng)箱外適應(yīng)1h,除空白對照組細(xì)胞外,將其他細(xì)胞板放置在手機上方,手機保持通話狀態(tài),空白對照組細(xì)胞板于另房間置于手機上方,手機保持關(guān)閉狀態(tài)。6h后使用CCK法檢測細(xì)胞活性,并計算增殖抑制率及增殖抑制保護率。
3.實驗結(jié)果
結(jié)果顯示,使用手機輻射6h后,皮膚成纖維細(xì)胞增殖受到抑制,輻射對照組細(xì)胞OD值較空白對照組比較有顯著性差異(P<0.01),增殖抑制率達到17.65%;中藥復(fù)方提取物劑量在250ug·mL-1以上的劑量組均對輻射后細(xì)胞增殖抑制具有明顯的保護作用,與輻射對照組比較有顯著性差異(P<0.05)(見表1)。
4.結(jié)論
手機輻射對成纖維細(xì)胞增殖造成抑制,含麥冬等中藥的復(fù)方提取物對輻射后細(xì)胞增殖抑制具有明顯的保護作用。中草藥提取物良好的輻射防護作用,可應(yīng)用于皮膚護理或保健品領(lǐng)域,為防輻射化妝品或保健食品的開發(fā)奠定科學(xué)基礎(chǔ)。