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    用脂肪酶處理輻射松磨木漿的探討

    2015-10-14 07:56:26胡志文陳建平
    福建輕紡 2015年4期
    關(guān)鍵詞:木漿紙漿脂肪酶

    胡志文, 陳建平

    (福建師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院, 福建 福州 350117)

    用脂肪酶處理輻射松磨木漿的探討

    胡志文, 陳建平

    (福建師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院, 福建 福州 350117)

    通過(guò)正交實(shí)驗(yàn),確定Burkholderia sp.ZYB002脂肪酶水解輻射松磨木漿中樹(shù)脂的最優(yōu)條件:漿濃為5%,反應(yīng)溫度為70℃,pH為6.5,酶用量為15U.g-1,反應(yīng)時(shí)間2h。應(yīng)用索式抽提的方法測(cè)得脂肪酶作用紙漿前后的紙漿抽提物的減少量。

    Burkholderia sp.ZYB002脂肪酶;輻射松;磨木漿

    多年來(lái),樹(shù)脂障礙一直是以松木為主要原料的造紙廠(chǎng)比較關(guān)注的一個(gè)問(wèn)題。造成樹(shù)脂障礙的原因是紙漿中游離的樹(shù)脂會(huì)以各種方式沉積在制漿造紙的設(shè)備的表面上,給生產(chǎn)帶來(lái)一定的麻煩。其中,甘油三酸脂(TG)又是造成樹(shù)脂障礙的主要成分[1-2]。目前,處理樹(shù)脂障礙的主要方法有生物法、化學(xué)法以及工藝控制法。由于生物法具有效果好,成本低等特點(diǎn),并且在生產(chǎn)實(shí)踐中已經(jīng)有成功的案例。由于紙漿中的樹(shù)脂會(huì)被脂肪酶水解成甘油和脂肪酸,分解出的脂肪酸可以通過(guò)NaOH滴定得出并由此得出樹(shù)脂分解量的多少。文章通過(guò)NaOH滴定法確定Burkholderia sp.ZYB002脂肪酶水解輻射松磨木漿中樹(shù)脂的最佳條件,并用索式抽提法檢驗(yàn)脂肪酶作用紙漿前后抽提物含量的減少量,以此檢測(cè)脂肪酶水解樹(shù)脂的效果。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    Burkholderia sp.ZYB002脂肪酶:由福建師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物工程研究所提供。該酶的最佳反應(yīng)溫度為70℃,最適作用pH為7.0。

    紙漿:輻射松木片磨木漿,取自福建省南平造紙廠(chǎng)的機(jī)漿車(chē)間。

    主要試劑:橄欖油、聚乙烯醇(PVA,聚合度1750±50)(均為化學(xué)純)、其他試劑均為分析純。

    儀器:XHF-D高速分散器,JJ-2組織搗碎機(jī),THZ-82恒溫振蕩器,索式抽提器,R206旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 脂肪酶酶活的測(cè)定

    采用中和滴定的方法測(cè)定脂肪酶的酶活。酶活的定義:在反應(yīng)條件下,每min催化水解甘油三酸酯產(chǎn)生lμmol游離脂肪酸的酶量定義為一個(gè)脂肪酶國(guó)際單位(u),對(duì)液體酶的酶活以每ml酶液含有的脂肪酶國(guó)際單位數(shù)(u.ml-1)表示。

    1.2.2 紙漿酶處理[3]

    在100ml的錐形瓶中加入一定量的紙漿,用酸或堿調(diào)節(jié)紙漿的pH,按實(shí)驗(yàn)要求的相應(yīng)量加入脂肪酶,通過(guò)恒溫振蕩器設(shè)定相應(yīng)的反應(yīng)溫度,反應(yīng)時(shí)間。反應(yīng)結(jié)束后真空抽濾,收集濾液用0.05mol/LNaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,記錄每次滴定的耗堿量。由于紙漿中的樹(shù)脂被脂肪酶水解成脂肪酸和甘油,通過(guò)測(cè)定脂肪酸的量來(lái)衡量紙漿中樹(shù)脂的量。因此測(cè)定酶水解紙漿前后耗堿量的不同,可知脂肪酶分解紙漿樹(shù)脂的量不同。

    進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)時(shí),按照實(shí)驗(yàn)要求控制好漿濃、酶用量、pH值、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間,其他方法不變。

    1.2.3 紙漿的抽提物測(cè)定[4]

    將酶處理完的紙漿進(jìn)行真空抽濾,收集濾渣烘干。將烘干的濾渣放入索式抽提器中,用丙酮抽提6h(總共回流不少于24次),抽提后,將平底燒瓶的有機(jī)溶劑用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干,蒸干后放入60℃烘箱中烘干,稱(chēng)重,計(jì)算紙漿抽提物的重量。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 單因素試驗(yàn)

    2.1.1 酶用量對(duì)脂肪酶降解樹(shù)脂量的影響

    如圖1所示,設(shè)計(jì)酶用量的范圍為5~25 U.g-1(絕干漿)。隨著酶用量的增多,消耗NaOH的量也隨著增多,即說(shuō)明酶分解樹(shù)脂生成酸的量也隨之增多。結(jié)合酶用量的實(shí)際效果和酶的生產(chǎn)成本考慮,分別選取10,15,20 U.g-1作為接下來(lái)的正交實(shí)驗(yàn)中酶用量的3個(gè)水平。

    圖1 脂肪酶用量對(duì)其降解樹(shù)脂效果的影響

    圖2 pH值對(duì)脂肪酶降解樹(shù)脂效果的影響

    圖3 溫度對(duì)脂肪酶降解樹(shù)脂效果的影響

    圖4 反應(yīng)時(shí)間對(duì)脂肪酶降解樹(shù)脂效果的影響

    圖5 漿濃對(duì)脂肪酶降解樹(shù)脂的效果影響

    2.1.2 pH對(duì)脂肪酶降解樹(shù)脂量的影響

    如圖2所示,設(shè)計(jì)pH的范圍為6,6.5,7.5,8,9,分別測(cè)定脂肪酶在這幾個(gè)pH值水平下的耗堿量。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)測(cè)定,該脂肪酶在6.5,7.5,8這3個(gè)水平的耗堿量相對(duì)較高,這也說(shuō)明該脂肪酶在pH偏高時(shí)酶活性有所下降,可能是pH值偏高導(dǎo)致脂肪酶部分失活的原因。因此將6.5,7.5,8作為正交實(shí)驗(yàn)中pH因素的3個(gè)水平。

    2.1.3 溫度對(duì)脂肪酶降解樹(shù)脂量的影響

    如圖3所示,酶在45~70℃的范圍內(nèi),耗堿量隨著溫度的升高而增多,當(dāng)溫度達(dá)到70℃的耗堿量達(dá)到最大,這也與該酶的最適溫度吻合。當(dāng)溫度達(dá)到80℃時(shí),耗堿量急劇下降,下降的原因可能是酶的活性因高溫而部分失活,從而導(dǎo)致耗堿量降低。故選取55,65,70℃ 3個(gè)水平做正交實(shí)驗(yàn)。

    2.1.4 反應(yīng)時(shí)間對(duì)脂肪酶降解樹(shù)脂量的影響

    如圖4所示,反應(yīng)時(shí)間對(duì)脂肪酶降解樹(shù)脂的影響,隨著反應(yīng)時(shí)間的增多,消耗NaOH的量先增多,然后減少,但在2h時(shí)候達(dá)到最高,故選取2h為實(shí)驗(yàn)的最佳反應(yīng)時(shí)間。

    表1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    2.1.5 漿濃對(duì)脂肪酶降解樹(shù)脂量的影響

    如圖5所示,在漿濃為2%-6%的范圍內(nèi),耗堿量是隨之增多的,5%和6%的耗堿量相同,說(shuō)明耗堿量不是隨著漿濃無(wú)限增加,原因是漿濃過(guò)高時(shí),有些脂肪酶吸附在紙漿的纖維上,不能與紙漿溶液中樹(shù)脂很好的接觸、反應(yīng)[5]。因此,選取4%,5%,6% 3個(gè)水平做正交實(shí)驗(yàn)。

    2.2 脂肪酶處理輻射松紙漿的正交試驗(yàn)

    由于各個(gè)因素之間存在交互作用,因此需要將4個(gè)因素綜合考慮,故依據(jù)上述的單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果做進(jìn)一步的正交實(shí)驗(yàn)。將影響脂肪酶降解樹(shù)脂的4個(gè)因素(酶用量、pH值、反應(yīng)溫度、漿濃)進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。根據(jù)表1的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可以找出該脂肪酶分解樹(shù)脂的最佳條件是酶用量為15 U.g-1,pH值為6.5,反應(yīng)溫度為70℃,漿濃為5%,反應(yīng)時(shí)間2h。

    2.3 脂肪酶處理紙漿前后的抽提物量的變化

    造紙纖維原料中,除了含有纖維素、半纖維素和木素這些主要化學(xué)成分外,還含有一些能溶于中性有機(jī)溶劑(如丙酮)的成分,這些成分統(tǒng)稱(chēng)為有機(jī)溶劑抽提物,一般又稱(chēng)其為植物中樹(shù)脂的代表[6]。因此文章通過(guò)紙漿抽提物來(lái)驗(yàn)證Burkholderia sp.ZYB002脂肪酶處理輻射松磨木漿中樹(shù)脂的效果。

    將經(jīng)過(guò)最佳條件酶處理的紙漿進(jìn)行過(guò)濾、抽提,將丙酮用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干,抽提物烘干后稱(chēng)重,得到酶處理的紙漿抽提物物重0.0123g,未經(jīng)過(guò)酶處理的紙漿抽提物重0.0160g,抽提物去除率為23.13%。

    3 結(jié)論

    Burkholderia sp.ZYB002脂肪酶處理輻射松磨木漿中樹(shù)脂的最佳工藝:漿濃5%、反應(yīng)溫度70℃、pH值6.5、酶用量15 U.g-1(絕干漿)、反應(yīng)時(shí)間2h。

    在上述酶水紙紙漿的最佳工藝下,Burkholderia sp.ZYB002脂肪酶處理輻射松磨木漿中的抽提物的去除率為23.13%。

    [1]Fischer K,and Messner K,Reducing troublesome pitch in pulp mills by lipolytic enzymes.Tappi J,1992;72(2);130.

    [2]Irie Y,Matsukura Met al.Enzymatic pitch control in papermaking system.TAPPI 1990 Papermakers Conference Proceeding, Atlanta.TAPPI PRESS ,1990:1.

    [3]陳建平, 黃儒珠, 吳松剛,等.堿性脂肪酶水解紙漿中的甘油三酸酯的研究[J].福建師范大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版 ,1998, 14 (3) : 72- 76.

    [4]鄭劍, 周黎敏, 李大方.紙漿中樹(shù)脂含量的測(cè)定[J].中國(guó)造紙,2009,28(9):76-78.

    [5]王冶艷.脂肪酶控制樹(shù)脂障礙的研究進(jìn)展[J].上海造紙,2009,40(3) : 41.

    [6]胡惠仁, 徐立新.造紙化學(xué)品[M].北京: 化學(xué)工業(yè)出版社, 2008,45-46.

    TS743+14

    A

    1007-550X(2015)04-0033-04

    10.3969/j.issn.1007-550X.2015.04.001

    2015-01-13

    胡志文(1989-),男,碩士,研究方向:發(fā)酵工程。

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