GC—MS法對(duì)金線蘭揮發(fā)油化學(xué)成分的分析

張海等

摘要：利用索氏提取法和超聲輔助提取法，分別通過(guò)非極性溶劑（石油醚）、極性溶劑（乙醇）來(lái)提取金線蘭[Anoectochilus raxburghii （Wall.） Lindl]揮發(fā)油，并采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定化合物組成。結(jié)果表明，石油醚索氏提取法效果最佳，共檢出34種成分，鑒定出26種化合物，占揮發(fā)油總量的86.3%，主要成分為葉綠醇32.823%，油酸28.759%，植物醇5.271%，油酸酰胺4.797%，反式角鯊烯3.484%，植酮2.787%，2-單棕櫚酸甘油1.789%。該結(jié)果將為金線蘭的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

關(guān)鍵詞：金線蘭[Anoectochilus raxburghii （Wall.） Lindl]；揮發(fā)油；索氏提取；超聲輔助提取；化學(xué)成分

中圖分類號(hào)：R282.71 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2015）-18-4581-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.18.048

金線蘭[Anoectochilus raxburghii（Wall.）Lindl]別名金蠶、石蠶、金線蓮等，是蘭科開(kāi)唇蘭屬的植物，中文學(xué)名是花葉開(kāi)唇蘭，主要分布于中國(guó)福建、廣東、廣西、浙江、江西、云南、四川、貴州、臺(tái)灣等地[1]。金線蘭是一種珍貴的稀有藥材，全株都可入藥，藥性溫和、味道甘甜，具有清熱解毒、祛風(fēng)利濕功效。近年來(lái)，金線蘭逐漸用于促進(jìn)兒童生長(zhǎng)發(fā)育[2]，預(yù)防治療高血壓、高尿酸血癥[3]、糖尿病[4]、急慢性肝炎、腎炎、癌癥[5]等，另外，金線蘭用于治療臨床上的一些疾病也取得了良好效果[6，7]。但迄今為止，對(duì)該植物的研究主要集中在人工栽培、組培、藥理等方面，其有效成分與揮發(fā)性成分報(bào)道較少。該試驗(yàn)以野生金線蘭為材料，采用索氏提取、超聲輔助提取的方法，分別以乙醇、石油醚為提取劑，通過(guò)索氏提取、超聲輔助提取揮發(fā)油，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析揮發(fā)油的化學(xué)組成，以期為金線蘭的開(kāi)發(fā)和利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

藥材為野生金線蘭，采自福建，由遵義師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院何林副教授鑒定為蘭科開(kāi)唇蘭屬植物花葉開(kāi)唇蘭Anoectochilus roxburghii （Wall.）Lindl。

試驗(yàn)所用試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 儀器

TRACE ISQ型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國(guó)熱電公司）、電子天平（梅特勒—托利多儀器上海有限公司），粉碎機(jī)、烘箱、磁力攪拌器（上海科升儀器有限公司），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠），循環(huán)式真空泵（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司），高頻數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 樣品前處理 金線蘭樣品用去離子水洗凈，于80 ℃烘箱中干燥8 h后，粉碎并過(guò)80目篩，待用。

1.3.2 索氏提取法提取 稱取10 g金線蘭粉末用濾紙包好，置于索氏提取器中，加入乙醇100 mL（V/V=1∶10），加熱回流提取5 h，收集全部提取液，繼續(xù)重復(fù)2次，直至提取液無(wú)色，合并提取液，濃縮。溶劑改為石油醚，重復(fù)上述試驗(yàn)。

1.3.3 超聲提取法提取 稱取10 g金線蘭粉末于具塞錐形瓶中，加入乙醇100 mL，超聲波（100 W，80 KHz，30 ℃）提取1 h，分別用濾紙，0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾，合并濾液，濃縮。溶劑改為石油醚，重復(fù)上述試驗(yàn)。

1.3.4 金線蘭揮發(fā)油的GC-MS分析 色譜柱TR-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm；柱溫：70 ℃（1 min），以5 ℃/min升溫至300 ℃（10 min）；氣化室溫度280 ℃；載氣為高純度He（99.99%）；流速1.0 mL/min；進(jìn)樣量1 μL；分流比為20∶1。質(zhì)譜條件：離子源為EI源；離子源為280 ℃；電子能量70 eV；傳輸線溫度280 ℃；質(zhì)量掃描范圍為50～500 amu。定性分析通過(guò)Xcalibur色譜工作站檢索標(biāo)準(zhǔn)MS圖庫(kù)，同時(shí)結(jié)合有關(guān)MS圖文獻(xiàn)解析，確認(rèn)金線蘭揮發(fā)性物質(zhì)的化學(xué)成分。同時(shí)按峰面積歸一化法計(jì)算，求出金線蘭各化學(xué)成分的峰面積相對(duì)百分含量。

2 結(jié)果與分析

石油醚索氏提取金線蘭揮發(fā)油總離子流見(jiàn)圖1。

GC-MS檢出的各化學(xué)成分及其峰面積相對(duì)百分含量，見(jiàn)表1～表4。

該試驗(yàn)分析了不同方法、不同溶劑提取的金線蘭揮發(fā)油的結(jié)果。其中乙醇的索氏提取揮發(fā)油中檢出16個(gè)成分，鑒定出11個(gè)化合物，并用氣相色譜峰面積百分比法測(cè)定了各種組分的相對(duì)百分含量，占揮發(fā)油總量的75.17%（表1）。石油醚索氏提取的揮發(fā)油中檢出34個(gè)成分，鑒定出26個(gè)化合物，占揮發(fā)油總量的86.3%（表2）。乙醇超聲輔助提取的揮發(fā)油中檢出16種成分，鑒定出8種化合物，占揮發(fā)油總量的82.66%（表3）；石油醚超聲輔助提取的揮發(fā)油中檢出26種成分，鑒定出10種化合物，占揮發(fā)油總量的47.48%（表4）。

由表1～表4中可知，野生金線蘭的揮發(fā)油中，主要成分為萜類化合物和鏈狀芳香族化合物（脂肪酸、醇類、烷烴類、醛以及酯）等。對(duì)比研究表明，4種提取工藝中石油醚索氏提取法效果最佳，共檢出34種成分，鑒定出26種化合物，其中含量最高的為葉綠醇32.823%，油酸28.759%，植物醇5.271%，油酸酰胺4.797%，反式角鯊烯3.484%，植酮2.787%，2-單棕櫚酸甘油1.789%。其中葉綠醇及其代謝產(chǎn)物不僅是機(jī)體氧化代謝的重要能量來(lái)源，而且在糖脂代謝、脂肪細(xì)胞分化聚酯調(diào)控方面具有生物學(xué)功能，能有效減少肝臟中的脂肪累積。油酸可降低血液總膽固醇和有害膽固醇，卻不降低有益膽固醇。反式角鯊烯對(duì)于治療高、低血壓，貧血，糖尿病，肝硬化，癌癥等有較好的療效。

3 小結(jié)

通過(guò)對(duì)比研究不同溶劑、不同提取方法的金線蘭揮發(fā)油化學(xué)成分，結(jié)果表明，石油醚索氏提取法效果最佳，共檢出了4種成分，鑒定出26種化合物，其結(jié)果有望為進(jìn)一步優(yōu)化金線蘭活性成分提取工藝提供理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

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