不同粒徑礦化垃圾對大麥生長發(fā)育和斑馬魚胚胎毒性效應研究

李廣科，賈午耀，庫婷婷，閆微，寧夏，張英英，姬曉彤，桑楠

山西大學環(huán)境與資源學院，太原 030006

不同粒徑礦化垃圾對大麥生長發(fā)育和斑馬魚胚胎毒性效應研究

李廣科，賈午耀，庫婷婷，閆微，寧夏，張英英，姬曉彤，桑楠*

山西大學環(huán)境與資源學院，太原 030006

將太原東山新溝垃圾填埋場礦化垃圾篩分為900～300 μm、300～150 μm、150～105 μm、105～90 μm和90～0 μm共5個不同粒徑范圍，制備浸出液。在分析不同粒徑礦化垃圾浸出液的理化指標基礎上，研究了礦化垃圾浸出液對大麥和斑馬魚胚胎生長發(fā)育的影響。結果顯示，礦化垃圾浸出液pH值隨粒徑的減小而減小，電導率、CODCr、全鹽量和總氮則隨粒徑的減小而增大。礦化垃圾浸出液對大麥的萌發(fā)、根長和芽長均表現(xiàn)出抑制作用，且抑制作用隨粒徑的減小而顯著增加，90～0 μm抑制作用最強，具體表現(xiàn)為染毒1 d、2 d 和3 d后，大麥種子處理組萌發(fā)率為對照組的39.74%、56.38%和59.81%；染毒3 d、5 d 和7 d后，根長分別為對照組的57.08%、48.33%和41.66%；芽長分別為對照組的66.60%、64.79%和61.65%。斑馬魚胚胎暴露于不同粒徑的礦化垃圾浸出液中，胚胎生長發(fā)育的毒害作用與粒徑大小呈現(xiàn)明顯負相關關系，即在最小粒徑90～0 μm處理后，卵凝結、血循環(huán)異常、孵化率、心包水腫及脊柱畸形影響作用達到最大，這5個指標值分別為40.28%、50.00%、51.39%、31.94%和29.17%。以上研究表明，礦化垃圾浸出液對大麥和斑馬魚胚胎生長發(fā)育的毒性效應與礦化垃圾粒徑分布顯著相關，小粒徑礦化垃圾(90～0 μm)的生態(tài)毒性效應最大。

礦化垃圾；大麥；斑馬魚胚胎；粒徑分布

隨著城市化進程的加快，垃圾的產(chǎn)生量日益增多，垃圾填埋造成的城市近郊填埋場容量不斷飽和、新建垃圾處理廠選址難度加大及環(huán)境污染嚴重等一系列問題已引起社會各界的廣泛關注[1]。擴大現(xiàn)有填埋場庫容，延長填埋場的使用壽命，實現(xiàn)一定程度上的可持續(xù)填埋是解決上述問題的最佳途徑[2]，而礦化垃圾資源化利用則是此方法實現(xiàn)的關鍵所在。礦化垃圾是一類可進行開采利用的垃圾，是指新鮮生活垃圾在填埋過程中經(jīng)過長期的物理、化學及生物作用而形成的一種穩(wěn)定化的類土壤物質(zhì)[3]。礦化垃圾的資源化利用能增加現(xiàn)有填埋場庫容，對實現(xiàn)垃圾填埋場的動態(tài)持續(xù)填埋具有重要意義。

在礦化垃圾資源化方面，礦化垃圾可以作為填埋場覆蓋材料，也可用于處理垃圾滲濾液和畜禽廢水，同時，改良后的礦化垃圾可以替代農(nóng)田土作為草坪的培養(yǎng)土等[4-6]。礦化垃圾的資源化利用主要是基于其良好的多孔結構、巨大的比表面積、微生物相對豐富和氮磷鉀營養(yǎng)物質(zhì)含量高等優(yōu)點[7]。然而，礦化垃圾由于形成過程及機理的特殊性，不可避免的殘留部分有毒有害重金屬和有機物。在礦化垃圾再利用過程中，其表面所含的有害物質(zhì)可能會進入環(huán)境中，對環(huán)境和人體健康造成一定危害。研究報道，填埋齡在10～12年的礦化垃圾浸出液會對植物的萌發(fā)和生長產(chǎn)生抑制作用，且不同植物對浸出液毒性的敏感程度不同[8]；另外，礦化垃圾會造成植物遺傳和氧化損傷，尤其是沉積有較多污染物的小粒徑處理組引發(fā)的損傷效應最為顯著[9]。由此我們猜測，礦化垃圾有效利用過程中產(chǎn)生的毒害作用可能與其粒徑分布相關。

由于土地資源緊缺與城市垃圾產(chǎn)量迅速增加的矛盾日益突出，礦化垃圾用作土地利用是實現(xiàn)其資源化的一條有效的途徑。大麥由于具有試驗周期短、操作簡單、耐旱耐鹽等特點，而被作為模式植物應用于環(huán)境毒理學實驗，因此采用大麥來評價礦化垃圾對陸生生物的生長效應具有廣泛的現(xiàn)實意義。礦化垃圾在資源化過程中產(chǎn)生的浸出液有可能會滲漏到地下環(huán)境中，對水生生物造成危害。斑馬魚胚胎由于其胚胎發(fā)育快，孵化時間短等特點，已經(jīng)被經(jīng)濟合作與發(fā)展組織(OECD)作為測試水體環(huán)境毒性的標準方法之一[10]。本研究通過不同粒徑礦化垃圾浸出液對大麥和斑馬魚胚胎進行毒性試驗，觀察大麥萌發(fā)率、根長、芽長和斑馬魚胚胎的凝結率、孵化率、畸形率和血循環(huán)的變化，探討不同粒徑礦化垃圾的毒性效應，為礦化垃圾的資源化利用提供理論依據(jù)。

1　材料與方法(Materials and methods)

1.1試驗材料

礦化垃圾采自山西省太原市東山新溝垃圾填埋場，該填埋場于1987年投入使用，2007年封場。試驗土樣按照隨機采樣法采集。從礦化垃圾中剔除大石塊、碎玻璃、破塑料等雜物，將礦化垃圾過孔徑為900 μm的分級篩，篩下物繼續(xù)篩分為900～300 μm、300～150 μm、150～105 μm、105～90 μm和90～0 μm共5個不同粒徑范圍，風干貯存。按1:5(m/V)將上述礦化垃圾與蒸餾水混合，在30 ℃條件下振蕩3 h，抽濾，所得濾液即為礦化垃圾浸出液，于4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

大麥(Hordeum vulgare)：“瀛豐原種”從上海雜糧批發(fā)城購買。斑馬魚(Danio rerio)：從上海熱帶魚水族館購買。

1.2實驗方法1.2.1水樣分析測試方法

CODCr(重鉻酸鉀法)、總氮(堿性過硫酸鉀氧化紫外分光光度法)、電導率(電導率儀法)、pH(電極法)參照《水和廢水監(jiān)測分析方法》測定[11]。全鹽量(重量法)參照《水質(zhì)-全鹽量的測定-重量法 HJ/T51—1999》測定[12]。

1.2.2大麥萌發(fā)毒性試驗

選飽滿大麥種子，浸泡4 h后，隨機選擇50粒大小一致的種子置于鋪有兩層濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)。萌發(fā)率以種子破白計，每隔1 d檢測種子萌發(fā)數(shù)。對照組用自來水培養(yǎng)，處理組用不同粒徑礦化垃圾浸出液培養(yǎng)。進行3次獨立實驗，每組設置3個平行。

1.2.3大麥生長毒性試驗

選飽滿大麥種子，浸泡4 h后，濕紗布包裹催芽。待種子萌發(fā)后，隨機選擇30個根長為1.5 cm左右、長勢一致的大麥置于鋪有兩層濾紙的培養(yǎng)皿上，25 ℃恒溫培養(yǎng)(光照/黑暗周期為14 h:10 h)。對照組用自來水培養(yǎng)，處理組用不同粒徑礦化垃圾浸出液培養(yǎng)，每隔12 h換一次培養(yǎng)液，設3個重復。大麥生長3 d、5 d、7 d時測量根長芽長，計算各處理組的單株平均值，作為各組幼苗的芽長根長。

1.2.4斑馬魚胚胎毒性試驗

實驗前一天，挑選連續(xù)飼養(yǎng)4周以上，性成熟的成魚，按雌雄比為1:2配對放在裝有孵化盒的水族箱內(nèi)，并用隔板分開，次日清晨光照0.5～1 h后產(chǎn)卵，用虹吸管吸出受精卵，用蒸餾水沖洗魚卵以去除糞便等雜物，洗凈的魚卵在培養(yǎng)皿中孵化至24 h后用于暴露實驗。用不同粒徑礦化垃圾浸出液對發(fā)育正常的斑馬魚胚胎進行24 hfp(受精后24 h)染毒實驗，斑馬魚胚胎置于24孔板中，每孔放一個卵并加入1 mL不同粒徑礦化垃圾浸出液，對照組加入蒸餾水，實驗重復3次，每次設置3個平行。置于溫度恒定(26±1) ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(光照/黑暗周期為14 h:10 h)。觀察并記錄斑馬魚胚胎的凝結、血循環(huán)、孵化情況至96 hpf。將礦化垃圾浸出液用蒸餾水稀釋2倍按照上述步驟對斑馬魚胚胎染毒，觀察并記錄斑馬魚胚胎的心包水腫和脊柱畸形情況。斑馬魚胚胎卵凝結表現(xiàn)為胚胎不透明或后期幼魚無心臟跳動，發(fā)育停止。斑馬魚胚胎血循環(huán)障礙表示未形成正常血流循環(huán)的胚胎，具體表現(xiàn)為發(fā)育遲緩、未出現(xiàn)血流循環(huán)、出現(xiàn)血液但流速較慢、甚至出現(xiàn)局部循環(huán)。凝結率(%)=(凝結胚胎數(shù)量/總胚胎數(shù)量)×100；血循環(huán)異常率(%)=(未形成正常血循環(huán)胚胎數(shù)量/總胚胎數(shù)量)×100；孵化率(%)=(已孵化胚胎數(shù)量/總胚胎數(shù)量)×100；心包水腫率(%)=(心包水腫胚胎數(shù)量/孵化胚胎數(shù)量)×100；脊柱畸形率(%)=(脊柱畸形胚胎數(shù)量/孵化胚胎數(shù)量)×100。

1.3數(shù)據(jù)分析方法

用Origin 8.0和SPSS 17.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，圖中結果以均值±SE值表示，用One-way ANOVA檢驗處理組與對照組的顯著性差異。為確定礦化垃圾粒徑分布與理化指標的相關關系，采用Pearson’s雙變量相關分析法對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析(*P < 0.05，**P < 0.01，***P < 0.001)。

2　結果(Results)

2.1礦化垃圾浸出液理化指標

不同粒徑礦化垃圾浸出液理化性質(zhì)如表1所示，由表可知，礦化垃圾浸出液的pH值隨粒徑的減小而減小；電導率、CODCr、全鹽量和總氮等指標的濃度會隨粒徑的減小逐漸增大。表2為礦化垃圾粒徑分布與理化指標的相關性分析，由表可得，礦化垃圾浸出液pH值與粒徑分布呈顯著的正相關關系，而電導率、化學需氧量、全鹽量和總氮與粒徑分布均呈顯著的負相關。綜上所述，小粒徑的礦化垃圾更容易累積污染物。

表1　礦化垃圾浸出液理化指標

2.2礦化垃圾對大麥萌發(fā)的影響

不同粒徑礦化垃圾浸出液對大麥種子萌發(fā)率的影響如圖1所示，從圖中可以看出，礦化垃圾處理組對大麥種子的萌發(fā)均有抑制作用，粒徑越小，抑制作用越強。處理1 d時，90～0 μm處理組的萌發(fā)率最低，為對照組的39.74%；在處理2 d和3 d時，礦化垃圾處理組的萌發(fā)率均有所提高，縮短了與對照組之間的差異；但90～0 μm處理組萌發(fā)率依然最低，2 d時為對照組的56.38%，3 d時為對照組的59.81%，P值均小于0.001，有顯著性差異。結果表明，礦化垃圾浸出液能夠延緩大麥種子的萌發(fā)。

2.3礦化垃圾對大麥根長和芽長的影響

不同粒徑礦化垃圾對大麥根長和芽長的影響如圖2。統(tǒng)計結果表明，礦化垃圾浸出液對大麥根長和芽長的影響與處理時間及礦化垃圾粒徑大小相關。同一處理時間時，礦化垃圾粒徑越小對大麥生長的抑制作用越明顯。用浸出液對大麥染毒，3 d時90～0 μm處理組抑制作用最強，根長為對照組的57.08%，芽長為對照組的66.60%(P < 0.001)；同一粒徑礦化垃圾浸出液處理時，大麥根長和芽長受到的抑制作用隨處理時間的延長而增強；5 d時90～0 μm處理組根長為對照組的48.33%，芽長為對照組的64.79%；7 d時90～0 μm處理組根長和芽長分別為對照組的41.66%和61.65%(P < 0.001)。

圖1　不同粒徑礦化垃圾對大麥種子萌發(fā)率的影響注：* P < 0.05，** P < 0.01，*** P < 0.001，Mean ± SE，n=3。Fig. 1　Effect of the particle-size distribution of aged refuse on germination of barley seedingsNote: * P < 0.05, ** P < 0.01, ***P < 0.001, Mean ± SE, n=3.

表2　礦化垃圾理化指標與其粒徑分布的相關性分析

注：*P < 0.05，**P < 0.01。

Note: *P< 0.05, **P < 0.01.

圖2　不同粒徑礦化垃圾對大麥根長和芽長的影響注：*** P < 0.001，Mean ± SE，n=3。Fig. 2　Effect of the particle-size distribution of aged refuse on root length and shoot length of barley seedingsNote: *** P < 0.001, Mean ± SE, n=3.

2.4礦化垃圾對斑馬魚胚胎凝結率和血流循環(huán)的影響

通過顯微鏡觀察斑馬魚胚胎發(fā)育情況可知，斑馬魚受精卵呈半透明狀，如圖3所示，斑馬魚胚胎暴露于礦化垃圾浸出液中，可引起卵凝結，孵化率降低，還有發(fā)育異常，包括血流循環(huán)異常和脊柱畸形。

不同粒徑礦化垃圾浸出液對斑馬魚胚胎凝結率和血流循環(huán)的影響如圖4所示，礦化垃圾浸出液染毒組斑馬魚胚胎48 hpf凝結率均高于對照組，且礦化垃圾處理導致的胚胎凝結率與粒徑大小相關，即粒徑越小，胚胎凝結率越高。其中90～0 μm染毒組凝結率最高，凝結率為40.28%(P < 0.01)；900～300 μm毒性最低，凝結率為20.83%(P < 0.01)。

由圖4結果還可以看出，24 hpf胚胎暴露于不同粒徑礦化垃圾浸出液中，48 hpf出現(xiàn)血流循環(huán)異常，具體表現(xiàn)為發(fā)育延緩，未出現(xiàn)血流循環(huán)或者血流循環(huán)緩慢甚至局部出現(xiàn)血流循環(huán)，其血循環(huán)異常百分率明顯高于對照組，且隨著粒徑的減小呈升高趨勢。900～300 μm最低為29.17%，90～0 μm最高為50%(P < 0.001)，均有顯著性差異，這與之前礦化垃圾對大麥種子的萌發(fā)率、根長和芽長的影響趨勢一致。

2.5礦化垃圾對斑馬魚胚胎孵化率的影響

圖5為礦化垃圾浸出液對胚胎處理后96 hpf孵化的情況。結果表明，不同粒徑礦化垃圾浸出液處理組孵化率與對照組相比均顯著降低。隨著粒徑的減小，對胚胎孵化率的抑制作用明顯增強，900～300 μm處理組孵化率最高為73.61%，P值小于0.01，有顯著性差異；90～0 μm處理組孵化率最低為51.39%，P值小于0.001，有顯著性差異。

圖3　斑馬魚胚胎各發(fā)育時期形態(tài)特征注：A，正常胚胎；B，凝結胚胎；C，正常幼魚；D，心包水腫；E，脊柱畸形。Fig. 3　Morphological characteristics of zebrafish embryos in different development stagesNote: A, normal zebrafish embryos; B, coagulative zebrafish embryos; C, normal zebrafish; D, pericardial edema; E, spinal deformation.

圖4　不同粒徑礦化垃圾對斑馬魚胚胎凝結率和血流循環(huán)的影響注：*P < 0.05，** P < 0.01，*** P < 0.001，Mean ± SE，n=3。Fig. 4　Effect of the particle-size distribution of aged refuse on coagulation percentage and blood circulation of zebrafish embryosNote: *P < 0.05, ** P < 0.01, *** P < 0.001, Mean ± SE, n=3.

圖5　不同粒徑礦化垃圾對斑馬魚胚胎孵化率的影響注：*P < 0.05，** P < 0.01，*** P < 0.001，Mean ± SE，n=3。Fig. 5　Effect of the particle-size distribution of aged refuse on hatch percentage of zebrafish embryosNote: *P < 0.05, ** P < 0.01, *** P < 0.001, Mean ± SE, n=3.

2.6礦化垃圾引起斑馬魚胚胎心包水腫和脊柱畸形

在考察斑馬魚胚胎心包水腫和脊柱畸形實驗中，均把礦化垃圾浸出液稀釋2倍進行染毒，96 hpf記錄并觀察其心包水腫和脊柱畸形。由圖6可知，礦化垃圾對斑馬魚胚胎心臟和脊柱發(fā)育毒性與粒徑大小呈負相關，即粒徑越小，引起胚胎心包水腫和脊柱畸形的百分率越大，900～300 μm處理組最低，出現(xiàn)心包水腫百分比為9.72%，出現(xiàn)脊柱畸形率為8.33%，與對照組無顯著性差異；90～0 μm處理組出現(xiàn)心包水腫和脊柱畸形的百分比分別為31.94%和29.17%，與對照組差異顯著(P < 0.001)。

2.7大麥萌發(fā)生長和斑馬魚胚胎發(fā)育與粒徑分布的相關性分析

由表2可得，大麥生長與礦化垃圾粒徑分布呈顯著的正相關關系，具體表現(xiàn)為，粒徑越小，大麥的萌發(fā)率、根長和芽長越小。由表3可知，斑馬魚胚胎的凝結率、血循環(huán)、心包水腫和脊柱畸形與礦化垃圾粒徑分布呈顯著的負相關關系，即粒徑越小，凝結率、血循環(huán)、心包水腫率和脊柱畸形率越大；而斑馬魚胚胎的孵化率與粒徑分布呈顯著的正相關關系，即粒徑越小，其孵化率越小。

3　討論(Discussion)

礦化垃圾資源化利用始于20世紀50年代以色列特拉維夫市填埋場，之后關于垃圾填埋場開采利用的報道逐漸增多[13]。與國外相比，國內(nèi)對填埋場垃圾穩(wěn)定化的研究較晚。1992年，以上海老港垃圾填埋場為基地，趙由才等[3]展開了對礦化垃圾穩(wěn)定化及資源利用研究。研究表明，礦化垃圾比表面積較大、結構松散、水力傳導和滲透性能較好、微生物種類繁多。有學者利用礦化垃圾這種性質(zhì)，以礦化垃圾作為生物反應床填料，在處理垃圾滲濾液，畜牧廢水，生活污水及含酚類廢水等方面已取得一定成果，并引起國內(nèi)外廣泛關注[14-15]。礦化垃圾資源化日趨成熟，但其表面所含的污染物質(zhì)會進入環(huán)境進而對生物體造成一定的危害。

表3　大麥萌發(fā)與生長與粒徑分布的相關性分析

注：**P<0.01，下同。

Note:**P<0.01, the same below.

圖6　不同粒徑礦化垃圾引起斑馬魚胚胎心包水腫和脊柱畸形注：*P < 0.05，** P < 0.01，*** P < 0.001，Mean ± SE，n=3。Fig. 6　Effect of the particle-size distribution of aged refuse on pericardial edema and deformation of zebrafish embryosNote: *P < 0.05, ** P < 0.01, *** P < 0.001, Mean ± SE, n=3.

表4　斑馬魚胚胎發(fā)育與粒徑分布的相關性分析

本文首先對不同粒徑礦化垃圾的理化性質(zhì)進行了相關性分析研究，發(fā)現(xiàn)礦化垃圾粒徑越小其pH值越小，而電導率、化學需氧量、全鹽量和總氮卻隨著粒徑的減小而增大。已有研究表明小粒徑物質(zhì)更容易富集重金屬[16]，且小顆粒礦化垃圾由于比表面積較大，容易沉積更多的營養(yǎng)物質(zhì)及污染物質(zhì)[9,17]。在探討了不同粒徑礦化垃圾理化性質(zhì)的基礎上，本文以大麥為模式植物深入探討礦化垃圾對植物生長發(fā)育過程的影響。本研究結果表明礦化垃圾對大麥的生長具有抑制作用，且與染毒時間和粒徑分布相關，即隨著粒徑的減小，礦化垃圾表面富集有更多的污染物，對大麥種子萌發(fā)、幼苗根長芽長抑制作用更明顯。而本實驗中最小粒徑礦化垃圾浸出液中的CODCr值為57.83 mg·L-1，低于《生活垃圾填埋場污染控制標準GB16889—2008》中規(guī)定的100 mg·L-1[18]，可見礦化垃圾中的有機物影響較小，主要是鹽分脅迫的作用。用礦化垃圾浸出液對斑馬魚胚胎染毒結果表明，胚胎凝結率、孵化率、畸形率和血循環(huán)均與粒徑大小有關，與之前對大麥的染毒結果是一致的，即粒徑越小，礦化垃圾富含的可溶性鹽分越多，胚胎的各項指標都升高，進一步證明了斑馬魚胚胎靈敏、快速的優(yōu)點，適用于填埋場生態(tài)風險評價。

研究表明，鹽分脅迫會抑制大麥種子的萌發(fā)，造成植物葉片面積縮小，引起大麥脂質(zhì)過氧化損傷及相關抗氧化酶指標的變化[19]；而鹽分脅迫會破壞水生生物胚胎的滲透壓平衡，進而影響其代謝、生長；鹽分也可能通過影響水生生物的抗氧化酶系統(tǒng)對其生物體本身產(chǎn)生一定的毒害作用[20]。由此推斷，礦化垃圾對大麥幼苗生長和斑馬魚胚胎發(fā)育抑制作用的主要原因，一方面可能是由于污染物影響細胞的正常代謝，另一方面，可能大麥受到浸出液中可溶性鹽分的刺激，影響細胞分裂和細胞內(nèi)基因轉(zhuǎn)錄進而造成一些抗氧化酶的活性發(fā)生改變，導致細胞代謝紊亂。

綜上所述，礦化垃圾粒徑不同，理化特性存在差異，其生物安全性也隨之變化。因此，在礦化垃圾資源化利用過程中，需要尋求改良礦化垃圾方案，提高其資源利用效率，減小生態(tài)風險。

通訊作者簡介：桑楠(1973-)，女，博士，教授，博士生導師，從事環(huán)境醫(yī)學與毒理學研究，發(fā)表學術論文50余篇。

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The Particle-size Dependent Effects of Aged Refuse on the Growth and Development of Barley Seedlings and Zebrafish Embryos

Li Guangke, Jia Wuyao, Ku Tingting, Yan Wei, Ning Xia, Zhang Yingying, Ji Xiaotong, Sang Nan*

College of Environment and Resource, Shanxi University, Taiyuan 030006, China

4 April 2015accepted 10 July 2015

In this study, the aged refuse, collected from Xingou municipal solid waste landfill of Taiyuan, was screened and classified into five samples with different particle-size (900～300, 300～150, 150～105, 105～90, and 90～0 μm), and then used to prepare leachate. Following this, several physical and chemical indexes were analyzed, and the effects on the growth and developmental of barley seedlings and zebrafish embryos were investigated. The results indicate that pH value decreased with the decrease of particle-size of aged refuse, conversely, electrical conductivity, CODCr, total salt and total nitrogen showed negative correlation with the particle-size. Furthermore, the germination, root length and shoot length of barley seedlings were inhibited by the aged refuse samples, and the effects were significantly negatively correlative with particle-size, especially for the smallest particle-size (90～0 μm). For the leachate of 90～0 μm aged refuse sample, the germination rate of barley seeding was 39.74%, 56.38% and 59.81% of control group after 1 d-, 2 d- and 3 d-exposure; the root length decreased to 57.08%, 48.33% and 41.66% of control and the shoot length decreased to 66.60%, 64.79% and 61.65% of control after 3 d-, 5 d- and 7 d-treatment. Similarly, the aged refuse leachate of different size of particles adversely affected embryonic growth and development, and the actions showed a significantly negative correlation with the particle size. The leachate of 90～0 μm aged refuse caused the most significant alterations on coagulation, abnormal blood circulation, hatchability, pericardial edema and spinal deformation of zebrafish embryos, and reached 40.28%, 50.00%, 51.39%, 31.94% and 29.17%, respectively. These findings imply that aged refuse could lead to the growth inhibition and developmental risk on barley seedlings and zebrafish embryos in a particle-size dependent manner, and the smallest particle-size sample (90～0 μm) showed the most serious injuries.

aged refuse; barely seedlings; zebrafish embryos; particle-size distribution

山西省科技攻關計劃(20120313009-2)；高等學校博士學科點專項科研基金項目(20121401110003)

李廣科(1971-)，男，博士，教授，研究方向為固體廢棄物處理、處置及資源化，E-mail: liguangke@sxu.edu.cn；

Corresponding author)， E-mail: sangnan@sxu.edu.cn

10.7524/AJE.1673-5897.20150404001

2015-04-04 錄用日期：2015-07-10

1673-5897(2015)6-136-08

X171.5

A

李廣科, 賈午耀, 庫婷婷, 等. 不同粒徑礦化垃圾對大麥生長發(fā)育和斑馬魚胚胎毒性效應研究[J]. 生態(tài)毒理學報，2015, 10(6): 136-143

Li G K, Jia W Y, Ku T T, et al. The particle-size-dependent effects of aged refuse on the growth and development of barley seedlings and zebrafish embryos [J]. Asian Journal of Ecotoxicology, 2015, 10(6): 136-143 (in Chinese)