河南野生忍冬葉、花、果揮發(fā)性成分比較

楊俊杰，陳 瓊

(信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院信陽(yáng)市中藥資源開(kāi)發(fā)工程技術(shù)研究中心、信陽(yáng)市中藥分析檢測(cè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南 信陽(yáng) 464000)

河南野生忍冬葉、花、果揮發(fā)性成分比較

楊俊杰，陳 瓊

(信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院信陽(yáng)市中藥資源開(kāi)發(fā)工程技術(shù)研究中心、信陽(yáng)市中藥分析檢測(cè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河南 信陽(yáng) 464000)

為比較河南野生忍冬葉、銀花子(果)、金銀花(花)揮發(fā)性成分，采用揮發(fā)油提取器從河南產(chǎn)的金銀花、銀花子、忍冬葉中提取揮發(fā)性物質(zhì)，并通過(guò)GC-MS聯(lián)用技術(shù)對(duì)揮發(fā)性成分進(jìn)行分析鑒定，用色譜峰面積歸一化法計(jì)算各成分的相對(duì)含量。結(jié)果表明：銀花子、金銀花、忍冬葉揮發(fā)性成分中，酯類含量大小排序?yàn)殂y花子>忍冬葉>金銀花；醛酮醇含量大小排序?yàn)榻疸y花>忍冬葉>銀花子；芳香族類含量大小排序?yàn)槿潭~>銀花子>金銀花；烷烴類成分含量銀花子遠(yuǎn)高于金銀花、忍冬葉；三者都含有芳樟醇，并且含量都比較高。銀花子與金銀花、忍冬葉的揮發(fā)性成分有明顯差異，三者的臨床應(yīng)用應(yīng)有所不同；芳樟醇是忍冬葉、銀花子、金銀花共有功效的物質(zhì)基礎(chǔ)。建議今后加強(qiáng)銀花子活性成分及藥理作用研究。

金銀花；銀花子；忍冬葉；揮發(fā)油；GC-MS；河南省

金銀花為忍冬科植物忍冬(LonicerajaponicaThunb.)的未開(kāi)放花蕾。忍冬之名始載于《別錄》[1]，列為上品?！侗静萁?jīng)集注》[1]云：“今處處皆有，似膝生，凌冬不減，故名忍冬?！逼淙~、花、果均可入藥。中醫(yī)認(rèn)為：花(金銀花)具有清熱解毒功效，主治溫病發(fā)熱，熱毒血痢，痛腫療瘡，喉痹及多種感染性疾?。惶偃~(忍冬葉)具有清熱解毒通絡(luò)作用，主治溫病發(fā)熱，瘡癰腫毒，熱毒血痢，風(fēng)濕熱痹；果(銀花子)具有清腸化濕作用[1]，主治腸風(fēng)泄瀉，赤痢。關(guān)于金銀花不同入藥部位的功效，歷來(lái)醫(yī)家不盡相同，明代李時(shí)珍著《本草綱目》：“忍冬，莖葉及花，功用皆同”[2]?！秳e錄》稱“今人多用其花，實(shí)則花性輕揚(yáng)，力量甚薄。不如枝盛之氣味俱厚。古人只稱忍冬，下言為花。則并不用花入藥，自可于言外得之”?，F(xiàn)代研究表明不同部位提取物均有抗病原微生物、抗毒、抗炎、解熱、降血脂等多種藥理作用[1]，臨床上用途非常廣泛。然而現(xiàn)代入藥卻以花居多，藤大多作為獸藥添加；銀花子的應(yīng)用尚屬空白。為了弄清忍冬不同藥用部位作用的異同，本研究通過(guò)測(cè)定并比較忍冬不同藥用部位的揮發(fā)性成分，可為今后活性成分研究與開(kāi)發(fā)提供參考。

圖1 銀花子總離子流圖

圖2 金銀花總離子流圖

圖3 忍冬葉總離子流圖

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

所有試驗(yàn)材料均采集自信陽(yáng)山區(qū)生長(zhǎng)于海拔500 m左右丘陵地帶的野生忍冬，經(jīng)信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院周巍副教授鑒定為忍冬科植物忍冬(LonicerajaponicaThunb.)同株植物的花，果，藤。地處亞熱帶季風(fēng)氣候，光照充足，年均降水量900～1400 mm。金銀花采收時(shí)間為2013年5月20日，陰干后，置冰箱冷藏室備用；忍冬葉和銀花子采收時(shí)間為2013年11月6日，陰干，備用。所用試劑均為分析純。

1.2 揮發(fā)油提取

分別稱取試材500 g，置3000 mL圓底燒瓶中，加入重量5倍左右的純化水，安裝揮發(fā)油提取器(比重小于1)，提取8 h。從裝置中取出油水混合物，加入10 mL乙醚萃取，揮發(fā)去乙醚，加入無(wú)水硫酸鈉除去水分，得到淡黃色透明液體。

1.3 揮發(fā)油成分分析

分析設(shè)備為Agilent6850/5975 GC/MSD。檢測(cè)庫(kù)圖譜庫(kù)為NIST05譜庫(kù)。色譜條件：HP-5MS毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)，載氣為色譜純氦氣。程序升溫：設(shè)定初溫為70 ℃，保持2 min；以20 ℃·min-1升溫至230 ℃，運(yùn)行20 min；進(jìn)樣量為1.0 μL。質(zhì)譜條件：EI離子源，電子能量為70 eV，掃描范圍設(shè)定30～250 amu，離子源溫度230 ℃，設(shè)定四極桿溫度150 ℃，EM電壓為1400 V。

金銀花、忍冬葉、銀花子3種揮發(fā)油分別進(jìn)樣，采用面積歸一法測(cè)定各組分的相對(duì)含量，用NIST05質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)檢索，確定成分組成。

2 結(jié)果與分析

試驗(yàn)結(jié)果(圖1～圖3)表明，從金銀花得到48種成分，鑒定出40種成分，鑒出率占揮發(fā)油總量的92.18%；從忍冬葉得到22種成分，鑒定出16種成分，鑒出率占揮發(fā)油總量的85.07%；從銀花子得到16種成份，鑒定出12種成分，鑒出率占揮發(fā)油總量的84.7%。取含量在0.5%以上的成分進(jìn)行比較，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 忍冬葉、金銀花、銀花子揮發(fā)性成分比較

由表1可以看出：忍冬葉揮發(fā)性成分中主要含有苯甲醛、苯乙醛、芳樟醇、3-乙烯基-吡啶、(Z，E)-3，7，11-三甲基-2，6，10-十二碳三烯-1-醇等；金銀花揮發(fā)性成分主要為(Z，E)-3，7，11-三甲基-2，6，10-十二碳三烯-1-醇、[s-(E，E)]-1-甲基-5-亞甲基-8-(1-甲基乙基)-1，6-環(huán)癸二烯、芳樟醇等；銀花子揮發(fā)性成分中主要含有2，7- 二甲基-十一烷、芳樟醇、3-(1-乙氧基乙氧基)-2-甲基-丁酸乙酯等。其中酯類含量大小排序?yàn)殂y花子>忍冬葉>金銀花，醛酮醇含量大小排序?yàn)榻疸y花>忍冬葉>銀花子，芳香族類含量大小排序?yàn)槿潭~>銀花子>金銀花，烷烴類成分含量銀花子遠(yuǎn)高于忍冬葉、金銀花；三者都含有芳樟醇，并且含量都比較高。

3 討論

忍冬作為一種重要的林業(yè)類中藥資源，由于其藥用價(jià)值高，用途廣泛，得到普遍重視，活性成分研究較多，其中對(duì)揮發(fā)性成分研究多集中在花和藤。王書(shū)妍等[3]、楊迺嘉等[4]測(cè)定忍冬藤的揮發(fā)油含有烷烴、酯類、酮醇苯類化合物，和本研究結(jié)果基本一致。王金梅等[5]研究認(rèn)為金銀花開(kāi)花過(guò)程中烴類化合物、醇酮類化合物的含量逐漸增加，酸類化合物的含量大幅度降低，酯類化合物的含量明顯降低，萜類化合物在銀花和金花中的含量比花蕾中高許多；并認(rèn)為應(yīng)該根據(jù)不同的治療目的，選擇花蕾或花。本次試驗(yàn)結(jié)果也表明忍冬葉、銀花子、金銀花的揮發(fā)性成分組分差異明顯，所以三者的臨床應(yīng)用應(yīng)有所不同；芳樟醇具有殺蟲(chóng)、抑菌、抗齲齒等生物活性，而三者中間都含有較高的芳樟醇，故可以認(rèn)為芳樟醇是忍冬葉、銀花子、金銀花共有功效的物質(zhì)基礎(chǔ)。特別是銀花子的活性成分研究尚屬空白，建議今后加強(qiáng)銀花子活性成分及藥理作用研究。

[1]國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草(7)[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999：524-525.

[2]李時(shí)珍.本草綱目：上卷[M].沈陽(yáng)：遼寧人民出版社，1999：858-859.

[3]王書(shū)妍，翁慧，張力，等.忍冬藤揮發(fā)油化學(xué)成分GC/MS分析[J].內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2011，26(1)：18-20.

[4]楊迺嘉，劉文煒，霍昕，等.忍冬藤揮發(fā)性成分研究[J].生物技術(shù)，2008，18(3)：53-55.

[5]王金梅，姬志強(qiáng)，康文藝.金銀花不同部位揮發(fā)油成分研究[J].精細(xì)化工，2008，25(11)：1075-1078.

Compared Study on Volatile Components in the Leaf，the Flower and the Fruit of the Wild Honeysuckle in Henan Province

YANG Jun-jie，CHEN Qiong

(XinyangEngineeringResearchCenterfortheexploitationofChineseMedicineResources，XinyangKeyLaboratoryofDetectionandanalysisofChineseMedicine，XinyangCollegeofAgricultureandForestry，Xinyang464000，Henan，China)

To compare with volatile components of the wild Honeysuckle fruit，the wild Honeysuckle and the wild Honeysuckle leaf.Steam distillation was used to extract the volatile substances from the wild Honeysuckle fruit，the wild Honeysuckle and the wild Honeysuckle leaf，GC-MS was used to analyze and identify the chemical components of the volatile substances，and area normalization was used to quantify the relative contents of the chemical constituents in the volatile substances.The results show that in the volatile components of the wild Honeysuckle fruit，the wild Honeysuckle and the wild Honeysuckle leaf，the order of the esters content is the wild Honeysuckle fruit>the Honeysuckle leaf>the wild Honeysuckle；the order of the content of aldehyde，ketenes and alcohol is the wild Honeysuckle>the wild Honeysuckle fruit>the wild Honeysuckle Leaf；the order of the aromatic content is the wild Honeysuckle Leaf>the wild Honeysuckle fruit>the wild Honeysuckle；the alkenes content in the wild Honeysuckle fruit is more than others；all three contain Linalool，and the content is relatively high.There are obvious differences between the volatile components of the wild Honeysuckle fruit，the wild Honeysuckle and the wild Honeysuckle leaf，three clinical applications should be different；linalool is the material base of the common effect of them. Suggestion is given that future research should focus on the research on the active ingredients and pharmacological effects of the Honeysuckle fruit.

Honeysuckle；the Honeysuckle fruit；the Honeysuckle leaf；GC-MS；Henan Province

10.13428/j.cnki.fjlk.2015.02.002

2014-04-21；

2014-05-15

河南省教育廳自然科學(xué)研究項(xiàng)目(2010C360005)；河南省高等學(xué)?？茖W(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(15B360010)

楊俊杰(1979—)，男，河南南陽(yáng)人，信陽(yáng)農(nóng)林學(xué)院副教授，碩士，從事中藥材產(chǎn)地加工及活性成分開(kāi)發(fā)研究。E-mail： nanyangjj@163.com。

S567.1+9；R284

A

1002-7351(2015)02-0005-04