神經(jīng)再生的內(nèi)在調(diào)控機(jī)制*

周松林，趙莉莉，于彬，顧曉松（南通大學(xué)江蘇省神經(jīng)再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，神經(jīng)再生協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇226001）

·述評(píng)·

神經(jīng)再生的內(nèi)在調(diào)控機(jī)制*

周松林**，趙莉莉，于彬，顧曉松
（南通大學(xué)江蘇省神經(jīng)再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，神經(jīng)再生協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇226001）

總結(jié)目前已知與神經(jīng)元內(nèi)在再生能力調(diào)控有關(guān)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子、再生能力核心調(diào)控蛋白和轉(zhuǎn)錄后非編碼RNA在神經(jīng)再生調(diào)控中作用，以系統(tǒng)性闡述神經(jīng)再生的內(nèi)在調(diào)控機(jī)制，并就存活與再生、衰老與再生的調(diào)控進(jìn)行探討。

神經(jīng)元再生；轉(zhuǎn)錄因子；蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子；非編碼RNA；內(nèi)在調(diào)控機(jī)制

成年哺乳動(dòng)物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損后往往難以恢復(fù)，相對(duì)而言，成年后周圍神經(jīng)系統(tǒng)在受損后可以實(shí)現(xiàn)一定的再生。究其原因主要是成年后周圍神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元仍具有一定的再生能力，以及施萬細(xì)胞等提供了合適的再生微環(huán)境[1]。因此，充分理解周圍神經(jīng)成功再生的機(jī)制有助于我們解決在中樞神經(jīng)系統(tǒng)再生中遇到的問題。本文為系統(tǒng)性闡述神經(jīng)再生的內(nèi)在調(diào)控機(jī)制，總結(jié)目前已知與神經(jīng)元內(nèi)在再生能力調(diào)控有關(guān)的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子、再生能力核心調(diào)控蛋白和轉(zhuǎn)錄后非編碼RNA在神經(jīng)再生調(diào)控中作用。最后就存活與再生，衰老與再生的調(diào)控進(jìn)行探討。

1　內(nèi)在再生轉(zhuǎn)錄調(diào)控

1.1轉(zhuǎn)錄激活因子3（activating transcription factor3，ATF3）作為ATF/CREB的家族成員，ATF/ CREB蛋白可相互間形成異二聚體從而影響基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。在大多數(shù)類型的細(xì)胞中，ATF3的表達(dá)都是比較低的，但神經(jīng)損傷引起ATF3的表達(dá)上調(diào)[2]。另外，血清、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子以及毛喉萜（Forskolin）[3]等許多細(xì)胞外的信號(hào)同樣可以引起ATF3的活化。

到目前為止，在神經(jīng)元中，Hsp27是唯一被確認(rèn)的ATF3下游靶基因[4]。周圍神經(jīng)損傷能增強(qiáng)Hsp27在背根神經(jīng)節(jié)、灰質(zhì)后角和運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元中的表達(dá)[5]。在PC12細(xì)胞中，ATF3可以直接結(jié)合到Hsp27的啟動(dòng)子上來活化Hsp27從而促進(jìn)其表達(dá)[6]。在ATF3轉(zhuǎn)基因小鼠的背根神經(jīng)節(jié)中，Hsp27的表達(dá)也是上調(diào)的，顯示在體內(nèi)Hsp27也是ATF3的靶基因[7]。

1.2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）系哺乳動(dòng)物中STAT家族中的一員。未活化的STAT位于細(xì)胞質(zhì)中，被JAKs激活后可形成二聚體或四聚體并被轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞核內(nèi)。后者可以與基因的啟動(dòng)子序列結(jié)合，直接調(diào)控轉(zhuǎn)錄。在神經(jīng)系統(tǒng)中STAT3的表達(dá)廣泛，研究最為深入。在正常神經(jīng)元中STAT3的表達(dá)很低，當(dāng)神經(jīng)元受到損傷后，STAT3的磷酸化會(huì)迅速升高[8]。坐骨神經(jīng)受損后，磷酸化的STAT3從6小時(shí)開始增加一直持續(xù)1個(gè)月。如在損傷位點(diǎn)持續(xù)4周使用JAK/STAT的抑制劑不僅能減少STAT3的磷酸化水平，而且再生相關(guān)蛋白GAP-43的表達(dá)也被顯著抑制[9]。

1.3c-Jun作為異二聚體轉(zhuǎn)錄因子AP-1的組成成分，生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和損傷相關(guān)的應(yīng)急壓力許多信號(hào)通路都會(huì)導(dǎo)致c-Jun的激活[10]。在神經(jīng)受損后，c-Jun表達(dá)迅速升高，并持續(xù)到受損神經(jīng)元修復(fù)完成[11]。然而，敲除c-Jun不僅降低神經(jīng)再生的速度，引起靶肌神經(jīng)支配的減少并且延遲功能的恢復(fù)，同時(shí)可以減少受損的神經(jīng)元的死亡[11]。表明c-Jun一方面可以促進(jìn)受損神經(jīng)元的再生，另一方面也可以促進(jìn)其凋亡。c-Jun的活化受控于JNKs，它可以將c-Jun的N末端磷酸化[12]。目前認(rèn)為JNK/c-Jun轉(zhuǎn)錄通路是神經(jīng)損傷的一個(gè)感應(yīng)器[13]。JNK是c-Jun的一個(gè)磷酸激酶，它可通過磷酸化c-Jun的Ser位點(diǎn)來激活c-Jun[14]。神經(jīng)損傷增加JNK引起的c-Jun的磷酸化，而JNK的抑制劑可在不影響細(xì)胞存活條件下減少c-Jun的磷酸化、ATF3的表達(dá)及神經(jīng)生長(zhǎng)[15]。然而在浦肯野神經(jīng)元中過表達(dá)c-Jun并不能促進(jìn)其再生，這說明c-Jun促神經(jīng)再生作用是高度依賴細(xì)胞所處的環(huán)境[16]。

1.4環(huán)磷腺苷效應(yīng)元件結(jié)合蛋白（cyclic AMP response element binding protein，CREB）屬于含bZIP結(jié)構(gòu)域的ATF/CREB轉(zhuǎn)錄因子家族，是環(huán)腺苷酸（cAMP）信號(hào)通路在神經(jīng)系統(tǒng)的轉(zhuǎn)錄傳遞因子[17]。CREB的激活與細(xì)胞內(nèi)cAMP的濃度密切相關(guān)。環(huán)腺苷酸作為第二信使可直接激活PKA，而后者能進(jìn)一步磷酸化CREB并使其入核，從而促進(jìn)細(xì)胞骨架的建立，誘導(dǎo)軸突的延伸。而持續(xù)活化的CREB也可以克服髓磷脂的抑制作用，從而促進(jìn)神經(jīng)的再生[18]。CREB在軸突的生長(zhǎng)及再生過程中扮演著重要角色。敲除CREB的小鼠周圍及中樞神經(jīng)生長(zhǎng)都會(huì)受阻[19]，體外培養(yǎng)的背根神經(jīng)節(jié)和頸上交感神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的軸突生長(zhǎng)長(zhǎng)度也要短于對(duì)照組。CREB下游重要因子Arg I，可以通過促進(jìn)多胺的合成來促進(jìn)軸突的再生[20]。抑制CREB將導(dǎo)致Arg I的表達(dá)受到抑制，過表達(dá)CREB將顯著增加Arg I的表達(dá)，但CREB是否直接調(diào)控Arg I目前還不是很清楚[18]。

2　再生能力核心調(diào)控蛋白

2.1PTENPark等發(fā)現(xiàn)刪除PTEN不僅可以減少細(xì)胞的凋亡，同時(shí)也可以促進(jìn)軸突的再生[21]。PTEN被抑制后可以促進(jìn)PIP3的積累。而后者作為第二信使，可以引起下游一系列的反應(yīng)，如活化磷脂酰肌醇依賴性蛋白激酶、蛋白激酶B（AKT或PKB）糖原合成酶激酶等[22]。而mTOR的抑制劑雷帕霉素可以抑制因缺失PTEN引起的再生[21]，這就表明缺失PTEN引起的軸突再生是依賴mTOR信號(hào)通路的。然而，刪除PTEN促進(jìn)的神經(jīng)再生，不僅只依賴mTOR這一條通路，Park等學(xué)者發(fā)現(xiàn)糖原合成酶激酶3也參與其中。在軸突末梢，糖原合成酶激酶3可以通過調(diào)節(jié)微管的組裝來調(diào)控細(xì)胞骨架的重組，而這對(duì)軸突的再生非常重要[23]。另外，糖原合成酶激酶3還可通過調(diào)節(jié)許多轉(zhuǎn)錄因子活化來參與基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控，從而進(jìn)一步參與到神經(jīng)損傷與修復(fù)中[24]。但這些參與軸突再生的不依賴mTOR的通路仍需進(jìn)一步探究。

缺失PTEN引起的神經(jīng)再生不僅發(fā)生在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中，在皮質(zhì)脊髓束中，mTOR的活性不僅隨著皮質(zhì)神經(jīng)元的生長(zhǎng)發(fā)育而降低，而且皮質(zhì)神經(jīng)元的損傷也能降低mTOR的活性。但如果在皮質(zhì)神經(jīng)元中刪除PTEN來維持mTOR的活性，將大大促進(jìn)皮質(zhì)脊髓束的軸突再生[25]。另外，在背根神經(jīng)節(jié)中，缺失PTEN或TSC2同樣可以促進(jìn)軸突的生長(zhǎng)及再生[26]。這些都表明在軸突的再生過程中，PTEN/ mTOR發(fā)揮著重要作用，但這種作用不通過活化核糖體S6蛋白激酶途徑[27]。

2.2細(xì)胞因子信號(hào)通路抑制因子（suppressor of cytokine signaling，SOCS）3SOLS家族是由8個(gè)在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制作用的成員組成。SOCS蛋白主要通過結(jié)合到JAK或細(xì)胞激素受體的酪氨酸殘基上來抑制信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活。SOCS蛋白還參與炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)、內(nèi)分泌以及致癌反應(yīng)[28]等細(xì)胞許多生理功能的調(diào)節(jié)。其中SOCS3在神經(jīng)系統(tǒng)中廣泛表達(dá)，尤其在海馬、基底節(jié)、丘腦，以及小腦顆粒細(xì)胞層的神經(jīng)元中表達(dá)。白介素-6上調(diào)SOCS3，可以在體內(nèi)特異性地抑制周圍神經(jīng)的JAK/ STAT3的激活及抗炎癥的作用[29]。研究發(fā)現(xiàn)在RGCs中敲除SOCS3，將同時(shí)促進(jìn)視神經(jīng)損傷后的神經(jīng)元的存活以及軸突再生。在SOCS3基因敲除小鼠中再進(jìn)一步敲除gp130明顯抑制軸突的再生，這說明缺失SOCS3引起的軸突再生是通過gp130信號(hào)調(diào)節(jié)的。

另外，在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中，通過腺病毒轉(zhuǎn)染來過表達(dá)SOCS3，發(fā)現(xiàn)軸突的再生幾乎被完全抑制[30]。在玻璃體內(nèi)注射重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的作用，也會(huì)被腺病毒介導(dǎo)的SOCS3的過表達(dá)抑制，這也說明過表達(dá)SOCS3可以抑制細(xì)胞的存活途徑[31]。

3　非編碼RNA與神經(jīng)元再生能力的調(diào)控

3.1microRNAs（miRNAs）系一類大約22 nt的非編碼RNA(noncoding RNA，ncRNA)，可以在翻譯后水平調(diào)控基因的表達(dá)[32]。芯片和深度測(cè)序發(fā)現(xiàn)miRNA參與大鼠坐骨神經(jīng)再生的許多環(huán)節(jié)[33-35]，神經(jīng)元的存活是成功再生的前提條件。通過系統(tǒng)性分析坐骨神經(jīng)損傷后L4-L6背根神經(jīng)節(jié)miRNA的表達(dá)譜變化，發(fā)現(xiàn)miR-21和miR-222通過靶向TIMP3，抑制背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的凋亡。另外白介素-6刺激背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元可以上調(diào)miR-21的表達(dá)[36]。

目前許多研究都集中在miRNA對(duì)神經(jīng)元突起生長(zhǎng)的研究上，例如miR-21在損傷后的DRG神經(jīng)元中迅速上調(diào)，通過靶向Sprouty2來促進(jìn)DRG神經(jīng)元突起的再生[37]。另外miR-431，miR-145，miR-138，miR-214和miR-132分別靶向Kremen1，Robo2，Sirtuin type 1，Slit-Robo GTPase-activating protein 3和Rasa1來調(diào)控軸突再生[38-42]。我們系統(tǒng)分析大鼠坐骨神經(jīng)損傷后L4-L6背根神經(jīng)節(jié)miRNA的表達(dá)譜變化，發(fā)現(xiàn)miR-222通過靶向PTEN促進(jìn)背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元突起的生長(zhǎng)。另外c-Jun激活上調(diào)miR-222的表達(dá)，miR-222也可通過PTEN調(diào)節(jié)CREB磷酸化，與cAMP/CREB信號(hào)通路協(xié)同促進(jìn)神經(jīng)元的再生[43]（圖1）。

圖1　miR-222調(diào)控神經(jīng)再生的原理圖

對(duì)線蟲的302個(gè)神經(jīng)元的分析，發(fā)現(xiàn)let-7-lin-41-lin-29異時(shí)信號(hào)通路控制著線蟲前腹微管（anterior ventral microtubule，AVM）神經(jīng)元的存活及軸突的再生。直接抑制let-7或增加它的交互抑制基因lin-41的表達(dá)水平，能夠完全恢復(fù)這種幼蟲神經(jīng)元軸突的再生能力[44]。在斑馬魚脊髓損傷后發(fā)現(xiàn)miR-133b上調(diào)，可靶向GTPase RhoA促進(jìn)軸突再生[45]。在小鼠的P19細(xì)胞中，過表達(dá)miR-124可促進(jìn)突起生長(zhǎng)，這與其靶向Cdc42和Rac1有關(guān)[46]。

3.2長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long noncoding RNA，lncRNA）隨著功能基因組學(xué)的迅速發(fā)展，非編碼RNA家族的重要成員lncRNA受到人們?cè)絹碓蕉嗟年P(guān)注。它是一類長(zhǎng)度大于200nt，但不具備編碼蛋白功能的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物[47]。近年研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA在轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后等水平通過影響mRNA的轉(zhuǎn)錄、拼接、轉(zhuǎn)運(yùn)和翻譯等過程，調(diào)節(jié)蛋白編碼基因的表達(dá)。lncRNA在大腦中高表達(dá)，但絕大部分作用并不清楚[48]。我們最近對(duì)坐骨神經(jīng)損傷后的DRG中的lncRNA表達(dá)譜進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)24個(gè)lncRNA在損傷下調(diào)，生物信息分析發(fā)現(xiàn)其可能的靶基因與MAPK通路有關(guān)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)干擾lncRNA BC089918可促進(jìn)DRG神經(jīng)突起的生長(zhǎng)，這些研究從一個(gè)全新的角度闡述了神經(jīng)再生的分子機(jī)制[49]。

4　再生通路調(diào)控模式

目前已知7條經(jīng)典的再生調(diào)控通路，分別是cAMP/PKA/CREB，JNK/c-JUN，ATF3，JAK/STAT3，CBP/p300/PCAF-p53，KLF4，BMP4/Smad1[50]。這些通路間又有相互聯(lián)系，例如c-Jun可能會(huì)和ATF3和STAT3等轉(zhuǎn)錄因子共同起作用，從而啟動(dòng)周圍神經(jīng)再生[16]。KLF4可與p53協(xié)作，反式激活p21Cip1/ Waf1的增強(qiáng)子[51]，并反過來影響神經(jīng)的生長(zhǎng)。KLF4還可綁定到STAT3的705酪氨酸磷酸化位點(diǎn)，從而抑制視神經(jīng)節(jié)軸突的再生[52]。先前研究表明Bcl-2可通過減少內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上Ca2+的攝入，以及增加Ca2+的外流來調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上Ca2+的濃度。在神經(jīng)元中，Bcl-2能夠提高神經(jīng)受損后細(xì)胞內(nèi)Ca2+的濃度，從而活化絲裂原活化蛋白激酶以及CREB，來促進(jìn)軸突的再生[53]。

另一方面，在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中敲除SOCS3能夠上調(diào)神經(jīng)損傷后3天和7天的mTOR水平，同時(shí)促進(jìn)RGCs對(duì)損傷誘導(dǎo)因子的反應(yīng)[54]。研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)合缺失SOCS3和PTEN能夠大大促進(jìn)軸突再生的強(qiáng)度及持續(xù)性，表明PTEN和SOCS3是通過2條獨(dú)立途徑而又協(xié)同促進(jìn)軸突的再生[55]。

最近一項(xiàng)研究表明，在PTEN基因敲除小鼠視神經(jīng)損傷后施加cAMP能夠使RGC的軸突生長(zhǎng)延長(zhǎng)。在損傷后10周，大部分再生軸突跨過視神經(jīng)交叉的中間部位。視神經(jīng)受損的小鼠開始對(duì)類似視動(dòng)反應(yīng)及晝夜活動(dòng)等作出反應(yīng)[56]。這表明再生的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突與目標(biāo)神經(jīng)元之間重新建立了突觸聯(lián)系。

5　乙酰化與神經(jīng)元再生能力的調(diào)控

乙?；侵笇⒁阴；D(zhuǎn)移到氨基酸側(cè)鏈基團(tuán)上的過程，乙?；揎椆δ苎芯恐饕性趯?duì)細(xì)胞染色體結(jié)構(gòu)的影響以及對(duì)核內(nèi)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的激活方面，最常見的是組蛋白乙?；?。在乙?；揎棇?duì)細(xì)胞染色體結(jié)構(gòu)的影響上，Valeria Cavalli通過研究周圍神經(jīng)系統(tǒng)DRG神經(jīng)元軸突再生，發(fā)現(xiàn)釋放組蛋白去乙酰化酶5（HDAC5）出核是周圍神經(jīng)再生連鎖反應(yīng)中重要的一步。HDAC5出核可以開啟一系列促進(jìn)軸突再生的基因的表達(dá)，同時(shí)HDAC5也可以運(yùn)動(dòng)到損傷位點(diǎn)協(xié)助微管的形成，從而促進(jìn)軸突的再生。而大腦和脊髓中的神經(jīng)細(xì)胞缺少HDAC5出核，這可以部分解釋為何中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元軸突再生非常困難[57]。

在乙酰化修飾功能及對(duì)核內(nèi)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的激活方面，p53是一個(gè)典型代表。研究發(fā)現(xiàn)p53不僅可通過其靶基因Coronin1b，Rab13來促進(jìn)軸突的生長(zhǎng)，還可通過翻譯后修飾來調(diào)節(jié)p53的活性，以增加軸突生長(zhǎng)[58]。p53可行乙?；?、磷酸化和泛素化等多種類型的翻譯后修飾[59]，這些可能會(huì)影響p53定位和功能。乙?；D(zhuǎn)移酶CBP/p300在特定賴氨酸位點(diǎn)乙酰化p53，使轉(zhuǎn)錄單元CBP/P300/AC-P53與GAP-43啟動(dòng)子結(jié)合增強(qiáng)，增加GAP-43的表達(dá)。有趣的是在皮層神經(jīng)元中，p53蛋白的C末端的乙?；粫?huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡，但在細(xì)胞系中會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡[60-63]。因此，轉(zhuǎn)錄因子的功能不僅取決于翻譯后修飾，還與細(xì)胞內(nèi)特殊的內(nèi)環(huán)境有關(guān)。

6　神經(jīng)元存活與再生的調(diào)控

神經(jīng)損傷后，神經(jīng)元存活及軸突的再生這兩者看似密不可分[64-65]，實(shí)際上，轉(zhuǎn)基因小鼠實(shí)驗(yàn)證實(shí)神經(jīng)元的存活與再生似乎是兩個(gè)獨(dú)立的過程[66]。一個(gè)很好的例子就是在體外培養(yǎng)的視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中過表達(dá)Bcl-2，這足以確保其存活。但沒有神經(jīng)營養(yǎng)因子等外來刺激，視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞并不會(huì)長(zhǎng)出突起，這說明存活的神經(jīng)元并不會(huì)自動(dòng)地長(zhǎng)突起[67]。另外也發(fā)現(xiàn)在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中敲除SOCS3將同時(shí)促進(jìn)視神經(jīng)損傷后的神經(jīng)元的存活以及軸突再生。但是途徑并不一致，在SOCS3與gp130基因雙敲除小鼠中，可明顯抑制軸突的再生，說明缺失SOCS3引起的軸突再生是很大程度是依賴gp130信號(hào)的。然而對(duì)于神經(jīng)元的存活來說，雙敲除SOCS3和gp130的存活率反而要明顯高于單缺失SOCS3或gp130，說明非依賴gp130的途徑在缺失SOCS3后神經(jīng)元的存活上發(fā)揮作用[54]。

7　神經(jīng)元衰老與再生的調(diào)控

軸突的再生能力隨著年齡的增長(zhǎng)逐漸下降。一種可能假設(shè)是再生能力的丟失是機(jī)體衰老的必然結(jié)果。然而最近Byrne的一項(xiàng)研究中發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)元再生能力和衰老是兩個(gè)獨(dú)立的，可以解偶聯(lián)的過程[68-69]。線蟲是一個(gè)很好的研究再生與衰老的模式動(dòng)物，其中sir-2.1、eat-2和daf-2三種突變可以延長(zhǎng)線蟲的壽命。但只發(fā)現(xiàn)daf-2（胰島素/類胰島素生長(zhǎng)因子受體）突變后，可以提高年老動(dòng)物的再生能力。daf-2突變后促再生和延長(zhǎng)壽命的作用，是通過daf-16/ FOXO轉(zhuǎn)錄因子介導(dǎo)的。然而daf-16調(diào)控再生能力和延長(zhǎng)壽命是2條獨(dú)立的途徑，也說明神經(jīng)元的衰老是受內(nèi)在基因調(diào)控的特定過程。另一個(gè)證據(jù)是當(dāng)在線蟲中突變daf-18/PTEN后，雖然能促進(jìn)TOR通路的激活，但其壽命是降低的。以前在哺乳動(dòng)物中也證實(shí)PTEN敲除可以促進(jìn)神經(jīng)的再生，這些結(jié)果表明無論是年輕還是年老動(dòng)物，激活TOR都可促進(jìn)再。也說明daf-2和daf-18都可促進(jìn)神經(jīng)再生，但其對(duì)線蟲的壽命卻有相反的作用。雖然兩者似乎是相互連接的，但實(shí)際上daf-2/胰島素受體—daf-16/ FOXO和daf-18/PTEN—mTOR通路似乎是獨(dú)立地調(diào)控這些過程的。

8　展望

綜上所述，神經(jīng)元內(nèi)在再生能力的激活，一方面受控于一系列復(fù)雜的細(xì)胞外信號(hào)，另一方面與神經(jīng)元本身存在的再生能力相關(guān)。主要涉及神經(jīng)內(nèi)在再生轉(zhuǎn)錄調(diào)控，再生能力核心調(diào)控蛋白，轉(zhuǎn)錄后非編碼RNA調(diào)控以及再生通路調(diào)控模式等。神經(jīng)內(nèi)在再生能力研究的難點(diǎn)，在于體外培養(yǎng)的神經(jīng)元再生突起長(zhǎng)度的比較。而近年來微流體培養(yǎng)[70]和“spot”培養(yǎng)[57]方法的建立和完善較好的解決這些問題；其次由于血腦屏障的存在，藥物很難作用于達(dá)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元。近年來開發(fā)的鞘內(nèi)注射siRNA[71]以及外周神經(jīng)再生小室內(nèi)注射siRNA[72]和miRNA[73-74]都取得了良好的效果。這些方法的建立大大拓寬了神經(jīng)內(nèi)在再生能力研究的途徑，有助于加深對(duì)神經(jīng)再生內(nèi)在調(diào)控機(jī)制的理解。深入闡明神經(jīng)再生的內(nèi)在調(diào)控機(jī)制將為神經(jīng)系統(tǒng)疾病，包括神經(jīng)退行性病變，中樞及周圍神經(jīng)損傷等提供新的思路和策略，為臨床應(yīng)用提供有益的科學(xué)指導(dǎo)。

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Q421

B

1006-2440（2015）02-0107-07

國家973計(jì)劃項(xiàng)目（2014CB542202）；國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（31200799）。

**[作者簡(jiǎn)介]周松林，男，漢族，湖北黃石人，生于1980年9月，博士。研究方向：神經(jīng)再生的細(xì)胞與分子機(jī)制。通信作者：顧曉松，E-mail：nervegu@ntu.edu.cn

2015-03-13